维生素甲酸诱导人早幼粒细胞白血病细胞分化的研究

应用光镜、电镜、冰冻蚀刻复型、细胞化学、NOR银染等方法,分析了经维生素甲酸(RA)诱导后的人早幼粒细胞白血病细胞系(HL-60)及急性早幼粒细胞白血病(APL)患者骨髓粒细胞的结构及功能变化。结果表明,RA可以诱导HL-60细胞按粒系途径成熟分化,并证明RA对APL患者体内治疗的有效性。     

维甲酸及三尖杉酯碱对人白血病细胞株诱导分化的超微结构

实验证明,维甲酸类药物可以阻断某些理化致癌因子的诱癌作用,三尖杉酯碱可诱导某些白血病细胞分化。本文用维甲酸(RA)及三尖杉酯碱(H)作用于体外培养的人早幼粒白血病细胞(HL-60),从显微及亚显微结构水平研究癌细胞的表型特征,以期深入了解RA及H的抗癌机理,并为治疗白血病开辟新途径提供理论依据.     

维甲酸与1,25(OH)_2D_3对白血病细胞的联合促分化效应

本文报道了13-顺式维甲酸(RA)和[1,25-二羟维生素 D_3 1,25(OH)_2D_3]合用对两种白血病细胞系的体外实验结果。在10~(-7)mol/L 浓度下,应用 ~3H-TdR 掺入、NBT 还原试验、流式细胞分析等技术,测得:RA 和1,25(OH)_2D_3合用后可进一步抑制细胞的增殖;在诱导分化作用方面,二者对人原始巨核白血病细胞株(HIMeg)有相加作用,而对人早幼粒细胞白血病细胞系(HL-60)则有一定协同作用。上述结果提示可将 RA 联合1,25(OH)_2D_3试用于治疗白血病;推测二者在体内巨核系和粒单系造血细胞分化中发挥着相加或协同的促进效应。     

醋酸棉酚对白血病HL-60细胞凋亡及分化的影响

目的:通过醋酸棉酚(GAA)对经典白血病细胞系HL-60的研究,探索GAA治疗白血病的可能性. 方法: 用细胞培养、四唑盐比色试验(MTT)、细胞形态学、DNA电泳及NBT还原试验等方法观察不同浓度GAA促进HL-60细胞凋亡及诱导分化的作用. 结果: GAA在浓度》6 μmol/L时可显著抑制HL-60细胞的增殖,促进其凋亡,并表现出剂量效应;在诱导分化浓度下(1, 4 μmol/L),GAA可促进HL-60细胞向成熟粒细胞分化(P《0.05). 结论: GAA对白血病细胞HL-60的选择性促凋亡作用表明其可能是一种理想的高效低毒抗白血病药物.     

珠子参对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖抑制和诱导分化的研究

目的观察珠子参对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖抑制和诱导分化作用.方法采用HL-60细胞株体外培养,MTT法观察不同作用时间的直接细胞毒作用;细胞涂片观察细胞形态学改变;试剂盒检测酸性磷酸酶(ACP)含量.结果珠子参血清和珠子参煎液均有明显的细胞毒作用,72 h时抑制率分别为31.27%、34.23%,与5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用后,达72.9%、75.22%.作用72 h后ACP活性高于对照组,分别为13.6107、16.0122(U/gprot.min)(P＜0.01),细胞形态学观察以中幼粒及晚幼粒为主,分别占36.8%、75.8%,向成熟细胞方向分化.结论珠子参在体外对HL-60细胞株有细胞毒作用,且能提高5-FU的敏感性而与化疗药物起协同作用;珠子参有诱导HL-60细胞分化的功能.     

当归多糖对人粒单系祖细胞和粒系白血病细胞株增殖分化的实验研究

目的：研究当归多糖(APS)对人粒单系造血祖细胞(CFU—GM)和急性早幼粒白血病细胞株(HL-60)增殖分化的影响。方法：采用造血细胞体外培养，形态学观察，流式细胞术和免疫细胞化学等实验血液学技术。结果：APS对正常CFU-GM的体外增殖有显著刺激作用；而对HL-60细胞的增殖却有明显的抑制作用；APS可能通过阻止HL-60细胞从静止期进入增殖周期，抑制DNA的合成等途径来抑制细胞增殖；APS可能诱导HL-60细胞发生凋亡。结论：APS有可能成为既能促进正常造血，又能抑制白血病等肿瘤细胞增殖，并诱导其凋亡或分化的天然诱导剂。     

HL-60细胞诱分化及细胞膜恶性标志逆转的实验研究

本文采用荧光偏振技术和受体荧光定量测定法,动态观察DMSO(二甲亚砜)体外诱导人急性早幼粒白血病细胞系(HL-60细胞)沿粒系统成熟分化过程中细胞膜流动性及膜ConA受体结合量的改变,还测定Molt4和Raji淋巴瘤细胞膜的相应变化.结果表明,随分化细胞百分率增加膜流动性和ConA受体结合量降低,呈现有意义的逆转改变(P<0.01).二株淋巴瘤细胞膜的流动性和ConA受体结合量均明显高于正常淋巴细胞。实验结果证实了膜流动性增高及ConA受体结合量增加是HL-60细胞的膜表型特征,并能随恶性细胞的诱导分化而逆转。     

维甲酸诱导分化治疗急性早幼粒细胞白血病完全缓解三例报告

随着对白血病细胞生物学特性研究的深入,现已知道急性白血病细胞并不像过去那样被认为是完全丧失了分化、成熟能力的恶性细胞。Breitman等报道应用维甲酸(Retinoic Acid,RA),诱导分化人类早幼粒细胞白血病细胞株(HL-60),经含有1     

新维甲类化合物—R—81001对HL—60细胞的分化诱导作用

应用软琼脂集落形成法选出单克隆HL-60细胞系,系统地研究新维甲类化合物R81001的分化诱导作用。证明该药可使人早幼粒白血病细胞的NBT还原能力明显增强,呈浓度依赖性。形态学观察表明,在药物作用下细胞的核浆比例降低,核仁减少或消失.胞浆中嗜天青颗粒减少,出现特异性颗粒。多数细胞处于中或晚幼粒细胞阶段。非特异酯酶染色试验证明,R81001诱导HL-60细胞沿粒系统定向分化。     

中药安迪对HL-60细胞分化的诱导作用

目的　探讨安迪粉针剂 (Andi)对 HL- 60细胞分化的诱导作用 .方法　采用人早幼粒白血病细胞株 (HL - 60 )为靶细胞 ,分为不加任何药物的对照组 (C组 )、安迪粉针剂 (Andi)组、阳性对照药维甲酸 (RA)组和苦参 (KS)组 ,进行体外培养和诱导分化 ,观测细胞生长曲线、细胞形态、硝基蓝四氮唑(NBT)还原和吞噬能力等指标 .结果　 2 mg· L-1 Andi可显著地抑制 HL - 60细胞增殖 ,使原始细胞分化为中幼以下的成熟细胞 ,分化后的细胞具有 NBT还原能力和吞噬功能 ;Andi为 68.0 % ,RA为 61 .5% ,KS为 59.0 % ,C组还原能力仅6.0 % (P<0 .0 1 vs C) .其形态的改变和吞噬能力与阳性对照药维甲酸 (RA)和苦参 (KS)相似 ,分别为 52 .0 % ,45.5%和56.5% (P>0 .0 5) ;均明显高于空白对照组 .C组吞噬功能仅7.5% (P <0 .0 1 vs C)其 NBT还原能力与 KS相当 (P >0 .0 5) .结论　 Andi对 HL - 60细胞具有显著的诱导分化作用     

水溶性壳寡糖对人白血病细胞诱导分化的影响

目的:研究水溶性壳寡糖(WSC)抑制人白血病细胞(HL-60)增殖活性的作用。方法:将WSC与HL-60细胞共培养,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测WSC对HL-60细胞增殖的抑制作用;氮蓝四唑(NBT)法检测WSC对HL-60细胞分化促进作用;流式细胞仪定量检测细胞凋亡。结果:250～1000mg/L的WSC能抑制HL-60细胞增殖,并促进HL-60细胞分化,WSC作用48h后流式细胞仪分析图上出现凋亡峰。结论:WSC对诱导人白血病HL-60细胞凋亡及促进分化有一定作用     

苦参碱对急性白血病早幼粒细胞 HL-60的抑制细胞增殖与诱导凋亡作用

目的：探讨苦参碱对急性白血病早幼粒细胞 HL-60的抑制细胞增殖与诱导凋亡作用。方法：以早幼粒急性白血病细胞系（HL-60细胞）为实验对象,采用体外培养技术,试验检测不同浓度苦参碱对HL-60细胞活力、细胞周期以及细胞凋亡的作用。结果：随着苦参碱浓度（12.5~50μg/ ml）的增加,苦参碱对 HL-60细胞增殖的作用不断增强;苦参碱处理72 h 后的 HL-60细胞与空白对照组比较,G0/ G1期细胞明显增多,S 期细胞明显减少,但比较差异无统计学意义（P〉0.05）;细胞凋亡率均明显高于空白对照组（P〈0.01）。结论：苦参碱对于急性白血病早幼粒细胞 HL-60的增殖具有明显的抑制作用,并能促进其凋亡。     

G-CSF和维甲酸对HL-60细胞超微结构的影响

本研究将重组人粒系集落刺激因子(rhG-CSF)和维甲酸(RA)作用于HL-60细胞后,观察HL-60细胞的超微结构改变,并作光镜检查加以对照,结果显示,rhG-CSF处理的细胞,电镜下细胞核形态,核内染色质,细胞质内核糖核蛋白颗粒及线粒体等细胞器与对照细胞比较均未显示有分化迹象。但rhG-CSF和RA联合作用较RA单独使用能显著提高HL-60细胞的分化比例。电镜观察结果与光镜检查表现相似,由此提示rhG-CSF具有诱导白血病细胞分化的潜能。     

戴氏虫草多糖诱导肿瘤细胞分化的研究

目的：观察戴氏虫草多糖（ CDP）对人红白血病K562细胞和人早幼粒白血病HL-60细胞分化的影响。方法：用1、10、100及1000 mg/L浓度的CDP分别处理K562细胞和HL-60细胞2 d,台盘蓝染色计数两种细胞的死活细胞数,同时检测CDP处理后K562细胞的血红蛋白的含量,观察200个HL-60细胞的分化情况。结果：在CDP作用下,K562细胞存活率增高,K562细胞内血红蛋白含量增加;HL60细胞形态向中幼,晚幼阶段方向分化,且其阳性细胞数与CDP的浓度有明显的量—效关系。结论：CDP可诱导K562细胞与HL60细胞分别向红细胞系和粒细胞系方向分化。     

诱导分化治疗中端粒酶活性的改变及其意义

目的研究诱导分化治疗中端粒酶活性的变化规律。方法对白血病细胞株、正常骨髓和急性白血病的骨髓单个核细胞的端粒酶活性进行了检测,观察了全反式维甲酸(ATRA)在体外和体内分化诱导过程中端粒酶活性的改变。结果发现端粒酶表达下调是诱导分化的早期效应之一。诱导分化治疗可使急性白血病M3早幼粒细胞端粒酶活性水平降至正常。结论在体内和体外实验中,ATRA诱导分化过程中伴随着端粒酶活性下调。     

重组反义c-myc腺病毒诱导HL-60 细胞分化的作用

目的研究重组反义c-myc腺病毒(Ad-AS-c-myc)对人急性早幼粒HL-60细胞系的诱导分化作用及分子机制,探讨Ad-AS-c-myc用于急性早幼粒白血病基因治疗的可能性.方法采用重组腺病毒Lac-Z(Ad-LacZ)及Ad-AS-c-myc联合多聚阳离子转染HL-60细胞,X-gal染色判断转染效率.采用形态学、MTT试验、RT-PCR、流式细胞仪及免疫细胞化学等方法进行研究.结果多聚阳离子可提高腺病毒对HL-60细胞的转染,Ad-LacZ protamine sulfate转染率达79.8%.Ad-AS-c-myc能抑制HL-60细胞c-myc基因在转录及蛋白水平的表达.Ad-AS-c-myc抑制HL-60细胞生长及活力(抑制率51%),降低其核浆比例,增加其过氧化酶活性,引起其G0/G1阻滞及分化相关基因c-fos基因表达增强.结论Ad-AS-c-myc对HL-60细胞具有抑制生长及诱导分化作用.其生物学作用与HL-60细胞过氧化酶活性及c-fos的表达有关.Ad-AS-c-myc在急性早幼粒白血病基因治疗中具有潜在的临床价值.     

全反式维甲酸诱导HL-60细胞粒系分化中miRNA-26的表达变化

目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)对HL-60细胞诱导分化的miRNA-26表达变化.方法 采用全反式维甲酸(1μM)影响下不同时间的HL-60细胞为检测对象,显微镜下观察细胞形态学改变;流式细胞仪检测细胞表面分化标志CD15;Real-time PCR检测不同时段miRNA的表达变化.结果 ①随着药物诱导时间的延长,被诱导的HL-60细胞向粒系分化,并出现细胞核型的改变;②与对照组相比,ATRA作用3、4、5和6 d后,流式细胞仪检测HL-60细胞的分化率分别为(52.39±3.56)%,(77.65±0.24)%,(83.90±1.30)%及(68.13±1.67)%,(P＜0.001);③Real-time PCR检测miR-26A、miR-26B的表达水平显示,5 d时miRNA表达水平显著上升,miR-26A、miR-26B的表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-26A、miR-26B在ATRA诱导HL-60细胞粒系分化中表达显著升高,提示miR-26可能参与急性髓系白血病粒系分化调控的过程.     

土贝母提取物——结晶E对HL-60细胞的诱导分化作用

作者以短期液体培养方法,通过细胞活力测定、形态分类、酵母多糖吞噬试验、NBT还原试验及非特异性酯酶染色等指标,观察了土贝母提取物——结晶E(ST-E)对人早幼粒白血病细胞(HL-60)的诱导分化作用.结果发现ST-E能诱导HL-60细胞向类似成熟中性粒细胞方向分化,细胞形态变化显著,核浆比例变小,核呈肾形或杆状,核染色质浓缩增粗,核仁消失,胞浆嗜天青颗粒消失,还原NBT和吞噬酵母多糖能力显著增强,非特异性酯酶染色阴性,提示ST-E可能是一种新的抗白血病有效药物.     

盐酸小檗碱对HL-60细胞的诱导分化及其作用机制

目的：研究盐酸小檗碱对人早幼粒白血病HL-60细胞诱导分化的作用履其分子机制。方法：HL-60细胞经盐酸小檗碱处理后，观察细胞形态学变化，以及细胞NBT还原能力的改变，用流式细胞仪测定细胞增殖周期、CD11b、C-myc、C-fos表达。结果：盐酸小檗碱作用于HL-60细胞后，形态学观察显示分化细胞的特征；NBT还原能力增强；CD11b表达升高；细胞被阻滞于G0／G1期，S期细胞数明显减少；C-myc基因表达减弱，C-fos基因表达增强。结论：盐酸小檗碱可诱导HL-60细胞分化戍熟，其机制可能是通过调控与HL-60细胞增殖、分化相关基因表达，抑制DNA合成，从而抑制细胞增殖，诱导细胞分化。     

TPA诱导人原代白血病细胞分化的临床意义

在非生理性诱导剂中,12-0-十四酰佛波醇13-乙酯(12-o-tetradecanoyl phorbol 13-acetate,TPA)是诱导分化作用最强的化学物质,能够诱导白血病细胞发生多种反应。在体外,TPA 抑制白血病细胞的增殖,诱导HL-60等白血病细胞株和某些类型原代白血病细胞向单核巨噬细胞方向分化。TPA对正常造血细胞的影响较为复杂。在缺乏外源性 CSF 时,TPA 可刺激巨噬细胞集落的生长,在存在外源性 CSF 时抑制粒系集落的形成;TPA 直接刺激 T 淋巴细胞的增殖并