华蟾素联合丝裂霉素诱导人宫颈癌细胞株Hela细胞发生凋亡的实验研究

目的 探讨抗癌药物华蟾素与丝裂霉素的联合作用诱导Hela细胞发生凋亡的机制.方法 体外培养人宫颈癌Hela细胞,以不同浓度的华蟾素与丝裂霉素刺激Hela细胞,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞的增殖,凝胶电泳检测细胞DNA片段化,FITC-Annexin V检测细胞凋亡的发生,RT-PCR检测TNF-α的表达.结果 经药物作用后的细胞在倒置显微镜下观察,6 h后开始出现明显的凋亡现象;电泳结果呈200 bp大小的典型梯状带;FITC-Annexin V检测到凋亡早期细胞膜呈强绿色荧光,12 h后胞核逐渐被碘化丙啶染成红色,24 h后大部分细胞被染成红色;RT-PCR产物大小为299 bp.结论 华蟾素和丝裂霉素能使细胞生长受到明显的抑制,能诱导Hela细胞发生凋亡,能诱导DNA片段化和TNF-α的表达.     

盐酸小檗碱及其联合应用顺铂诱导宫颈癌细胞株凋亡研究

目的:研究不同浓度盐酸小檗碱(Ber)单用及联合应用顺铂(DDP)对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响,并探讨其抗癌机制。方法:将不同浓度的盐酸Ber、DDP分别或联合作用于宫颈癌Hela细胞,采用MTT比色法检测细胞体外增殖的抑制作用;原位末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡率;免疫组化SABC法检测Hela细胞中NF-κBp65的表达。结果:MTT比色法表明盐酸Ber能抑制宫颈癌Hela细胞的体外增殖,并具有剂量、时间的依赖性(P<0.05);TUNEL法可检测到凋亡细胞,其凋亡率显示盐酸Ber诱导宫颈癌Hela细胞凋亡表现出剂量和时间的依赖性(P<0.05);免疫组化SABC法结果显示,盐酸Ber能引起细胞内NF-κBp65表达下调,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);盐酸Ber与DDP联合用药表现出明显的协同作用,且高剂量的盐酸Ber可增加DDP的疗效。结论:盐酸Ber对宫颈癌Hela细胞体外增殖具有明显的抑制作用,且能增强DDP对宫颈癌Hela细胞的抑制作用,并增加其诱导宫颈癌Hela细胞的凋亡,其作用机制可能与降低NF-κBp65的表达有关。     

CD47在维生素E琥珀酸酯诱导人宫颈癌细胞凋亡过程中的作用

目的 探讨CD47在维生素E琥珀酸酯诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡过程中的作用.方法 实验采用的细胞系是人宫颈癌Hela细胞,分为空白对照、VES处理(10μg/ml VES作用24h)、CD47抑制剂处理细胞和VES处理、CD47过表达转染细胞和VES处理、空载体转染细胞和VES处理共5组.流式细胞术检测各处理组细胞的...     

地塞米松诱导裸鼠宫颈癌移植瘤凋亡的实验研究

目的:探讨地塞米松对宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤生长及凋亡的作用。方法:BALB/C裸鼠皮下接种宫颈癌Hela细胞,腹腔内注射不同剂量地塞米松15~250mg/kg,测量肿瘤体积观察肿瘤生长情况,用透射电镜及原位细胞凋亡检测(TUNEL)的方法对肿瘤细胞的凋亡进行检测。结果:不同剂量地塞米松体内注射均可抑制宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的生长,并能诱导肿瘤细胞凋亡,与对照组相比肿瘤生长速度减慢,体积明显缩小(P<0·001),凋亡小体明显增多;不同剂量地塞米松对肿瘤生长的影响有差异,当剂量<62·5mg/kg时,疗效随剂量增加而增加,凋亡小体逐渐增多,肿瘤生长更加缓慢,各组间有明显差异(P<0·001);剂量为62·5~125mg/kg时,肿瘤生长及凋亡发生与剂量无明显的关系;当剂量>125mg/kg时,疗效随剂量增加而降低,凋亡小体逐渐减少,肿瘤生长速度加快,各组间有明显差异(P<0·001)。结论:地塞米松体内能诱导裸鼠宫颈癌移植瘤凋亡发生,显著抑制肿瘤生长,并存在一定程度的剂量依赖效应。     

Caspase-3在硫化砷诱导宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用

目的探讨硫化砷(As4S4)诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的分子机制。方法以不同剂量(7.5、15、30、60mg/L)的As4S4,12、24、36、48、60 h处理Hela细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;采用流式细胞术测定细胞凋亡情况;Western blot法检测不同剂量As4S4处理Hela细胞后凋亡相关蛋白bcl-2、caspase-3表达的变化;并以流式细胞术检测半胱氨酸酶3(caspase-3)酶活性的变化。结果不同剂量As4S4处理的Hela细胞,细胞增殖受到抑制,作用呈明显的时效和量效关系。24 h时IC50为30 mg/L,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞术显示不同浓度As4S4作用Hela细胞24 h后,出现明显的凋亡峰,其凋亡率分别为(8.13±1.13)%、(29.58±2.51)%、(46.24±3.92)%、(62.36±4.42)%,对照组没有出现凋亡峰,差异有统计学意义(P<0.01);经As4S4处理后凋亡相关蛋白bcl-2表达下降,caspase-3表达增加;随着As4S4剂量的增加,表达活性caspase-3的细胞百分率逐渐增加,分别为(2.67±0.22)%、(9.53±0.15)%、(21.28±0.43)%、(39.63±0.80)%、(63.40±0.69)%(P<0.01)。结论As4S4体外对Hela细胞具有增殖抑制和促进凋亡作用,其作用机制可能通过下调bcl-2蛋白表达,活化caspase-3的活性来起作用。     

本犀草素对宫颈癌HeIa细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用的实验研究

目的探讨木犀草素对宫颈癌Hela细胞的增殖及诱导凋亡的影响。方法将宫颈癌细胞株传代培养至对数生长期,分组加入不同浓度的本犀草素,并设置空白对照组。用MTT比色法观察木犀草素对体外培养的宫颈癌细胞生长的抑制作用,在光学显微镜下观察不同浓度的本犀草素对宫颈癌细胞的凋亡作用并计算凋亡率。结果MTT比色法测定显示,本犀草素作用于宫颈癌Hela细胞后可以抑制其增殖及诱导凋亡,且呈剂量依赖性。结论木犀草素能抑制体外培养的宫颈癌Hela细胞的增殖并诱导其凋亡。     

光动力疗法对宫颈癌细胞株Hela细胞增殖凋亡及表达情况研究

目的探究光动力疗法对宫颈癌细胞株Hela增殖凋亡及其表达情况。方法采用噻唑蓝法分别检测光动力治疗宫颈腺癌Hela敏感细胞株和紫杉醇耐药株的杀伤效果,培养人宫颈腺癌Hela细胞株和Hela耐药细胞株,采用RT-PCR技术检测细胞株中耐药基因的表达情况并进行组间对比,免疫组化和WesternBlot技术检测人宫颈腺癌Hela细胞株和Hela耐药细胞株表达情况,采用光动力疗法杀伤两种宫颈癌细胞株,比较治疗效果。结果5-ALA的浓度为0mmol/L时,对细胞株Hela的增值情况无显影响(P=0.106);当不加激光照射且5-ALA的浓度<3mmol/L时,对细胞株Hela的浓度无影响(P=0.562);5-ALA浓度>3mmol/L对Hela细胞株的抑制率与药物的浓度成正相关关系,与对照组相比,差异有统计学意义(P=0.013)。对于同一激光能量组而言,当5-氨基-4-酮戊酸盐酸盐浓度在0.1~3mmol/L时,对细胞株增殖的抑制率随着药物浓度的增加而增加,且各浓度组之间的差异有统计学意义(P=0.035),当5-氨基-4-酮戊酸盐酸盐浓度在3~6mmol/L时,差异无统计学意义(P=0.148)。当5-氨基-4-酮戊酸盐酸盐浓度相同时,随着激光能量在1.0~15.0J/cm之间的增加,抑制率也逐渐提高,且两者差异有统计学意义(P=0.027)。但在15.0~25.0J/cm时,抑制率的上升程度不明显,差异无统计学意义(P=0.501),与对照组相比,Hela细胞株只进行激光照射或者只进行5-ALA得到的细胞早期凋亡率、晚期凋亡率、继发坏死率与总凋亡率差异均无统计学意义(P=0.631)。在5-ALA浓度升高的同时,Hela细胞总凋亡率、晚期凋亡率与继发性坏死率均明显升高且差异有统计学意义(P=0.009)。结论光动力疗法可以显著抑制宫颈癌细胞株Hela细胞的增殖,且可以加速该细胞株的凋亡。     

枸杞多糖对人宫颈癌细胞生长及细胞凋亡影响

目的观察枸杞多糖对体外培养的人宫颈癌Hela细胞生长及其细胞凋亡的影响。方法不同剂量的枸杞多糖作用于体外培养的宫颈癌Hela细胞，用苔盼蓝染色、四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法及流式细胞仪检测人宫颈癌Hela细胞存活率、抑制率及细胞凋亡等指标。结果枸杞多糖可明显抑制人宫颈癌Hela细胞的生长，抑制率司达96．85％，并呈剂量效应关系，细胞凋亡率可达36．8％。结论枸杞多糖对人宫颈癌Hela细胞生长具有抑制作用，其抑制机制可能是通过影响人宫颈癌细胞的生长周期和诱导其凋亡而实现。     

阿司匹林对宫颈癌细胞凋亡诱导作用的研究

目的研究阿司匹林(aspirin)对宫颈癌Siha细胞凋亡和增殖的影响。方法培养人宫颈癌Siha细胞,加入不同浓度阿司匹林(1.0 mmol/L、5.0 mmol/L、10.0 mmol/L)干预培养,HE染色观察Transwell小室穿梭能力;划痕愈合实验观察迁移能力;应用流式细胞技术检测Siha细胞凋亡和细胞周期的变化;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;用RT-PCR检测细胞凋亡相关基因bcl-2及bax转录水平的改变;蛋白质印迹法检测阿司匹林对宫颈癌Siha细胞bcl-2及bax蛋白表达的影响。结果阿司匹林表现出明显地抑制人宫颈癌Siha细胞的迁移、增殖以及促进凋亡(P0.05),且伴随浓度的递增和时间的延长,抑制作用更明显。结论阿司匹林具有较强的抗入宫颈癌作用,其机制可能与阿司匹林诱导宫颈癌细胞凋亡,并抑制其增殖有关。     

越橘提取物花色苷对宫颈癌HeLa细胞的作用

目的:研究越橘提取物花色苷对宫颈癌Hela细胞的影响作用。方法:以不同浓度的越橘提取物花色苷作用于宫颈癌Hela细胞48h,采用MTT法观察越橘花色苷对Hela细胞的生长抑制作用,荧光染色观察细胞形态学改变,以流式细胞术观察DNA含量和细胞凋亡的变化情况,同时检测细胞培养上清液中IL-10、IFN-γ、TNF-α的变化。结果:Hela细胞用10、20、30、40mg/ml的越橘提取物花色苷处理48h后,随越橘花色苷浓度加大,细胞抑制率显著升高;荧光染色可见,浓染致密的颗粒状荧光,并呈现凋亡核固缩形态;流式细胞仪检测,细胞周期改变明显;IFN-γ和IL-10高于对照组,但IFN-γ与对照组有显著差别(P0.05);各组之间TNF-α变化不明显(P0.05)。结论:越橘提取物花色苷在体外对宫颈癌Hela细胞的生长有明显地抑制作用,可能与其改变细胞DNA周期、促进调亡有关。     

5-ALA光动力对人子宫颈癌Hela细胞的杀伤作用及剂量研究

目的研究不同剂量氨基酮戊酸(5-ALA)光动力对人宫颈癌Hela细胞的杀伤作用,为宫颈癌的治疗提供有价值的参考。方法对人宫颈癌细胞株Hela培养、传代后分为两组,观察组给予不同剂量5-ALA光动力,对照组不给予5-ALA光动力,比较两组细胞增殖抑制率、Her-2/neu表达、凋亡率情况。结果观察组早期凋亡率、晚期凋亡率、总凋亡率均高于对照组(P0.05)。随着5-ALA光敏剂浓度增加,早期凋亡率、晚期凋亡率、总凋亡率也随之增加(P0.05)。观察组Her-2/neu阳性表达率为12.5%,明显低于对照组(P0.05)。光动力能量密度5、10、20 J/cm2细胞增殖抑制率明显大于1 J/cm2;10、20 J/cm2细胞增殖抑制率明显大于5 J/cm2;光敏剂浓度1、4 mmol/L细胞增殖抑制率明显大于0.1 mmol/L(P0.05)。光动力能量密度10、20 J/cm2细胞增殖抑制率比较,差异无统计学意义(P0.05);光敏剂浓度1、4 mmol/L细胞增殖抑制率比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 5-ALA光动力对人宫颈癌Hela细胞具有明显的抑制作用,还可诱导细胞凋亡,5-ALA浓度为1 mmol/L,光动力能量密度10 J/cm2是最佳杀伤剂量。     

家蝇幼虫血淋巴纯化蛋白对Hela肿瘤细胞抑制作用的形态学观察

目的 研究家蝇幼虫血淋巴纯化蛋白(anticancer protein from Musca domestica larva hemolymph,MAC-1)对体外培养的人官颈癌Hela细胞抑制作用引起的形态学改变.方法 应用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法、光学显微镜、HE和吖啶橙(AO)染色、透射电镜(SEM)的方法检测MAC-1对体外培养的人宫颈癌Hela细胞的抑制作用及形态学改变.结果 MAC-1对人宫颈癌Hela细胞株的增殖抑制作用呈剂量依赖性,同时呈时间依赖性.MAC-1 12.5 μg/ml作用12h后在倒置显微镜、HE及AO染色和透射电镜均观察到典型细胞凋亡形态变化.结论 MAC-1对人宫颈癌Hela细胞株具有抑制增殖及诱导凋亡作用.     

大蒜素对子宫颈癌Hela细胞增殖的影响

目的:探讨大蒜素对宫颈癌Hela细胞增殖的影响。方法:不同浓度的大蒜素作用于体外培养的Hela细胞,倒置显微镜下观察Hela细胞的形态学变化;采用MTT法检测大蒜素对Hela细胞增殖抑制能力,采用流式细胞术分析大蒜素对Hela细胞凋亡的影响。结果:MTT显示大蒜素能抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性;流式细胞术测定结果显示50μg/ml浓度的大蒜素可明显诱导Hela细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G2/M期。结论:大蒜素对人宫颈癌Hela细胞的生长有抑制作用,其抑制作用与诱导Hela细胞凋亡和阻抑细胞周期有关。     

甲基硒酸对乳腺癌细胞体外凋亡和细胞周期的影响

目的:观察甲基硒酸(MSA)对乳腺癌细胞系MCF-7凋亡和细胞周期的影响。方法:以不同浓度的MSA作用乳腺癌细胞系MCF-7,在不同时间内,观察不同浓度MSA对乳腺癌细胞凋亡率和细胞周期的影响。流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果:①MSA可诱导乳腺癌细胞体外凋亡,随着药物浓度及作用时间的增加,乳腺癌细胞凋亡率逐渐增加。②MSA可改变乳腺癌的细胞周期,将乳腺癌细胞周期阻断在G1期,并且减少S期细胞的比例。结论:MSA可诱导乳腺癌细胞体外凋亡、调控乳腺癌细胞周期。MSA有望成为预防和治疗乳腺癌的一种新方法。     

RA对宫颈癌Hela细胞增殖的影响

目的研究RA对宫颈癌Hela细胞中Cx26和Cx43表达的影响,探讨RA对Hela细胞增殖的影响及其机制。方法培养Hela细胞,用计数法和MTT比色法观察并比较不同浓度RA对细胞增殖的影响情况,用免疫细胞化学方法检测Hela细胞中Cx26和Cx43蛋白的表达。结果①RA抑制Hela细胞增殖,抑制率与RA浓度相关。②Cx26和Cx43蛋白定位于Hela细胞的胞膜和胞质,RA组Cx26和Cx43蛋白的表达明显高于对照组(P<0.05)。结论 RA可抑制Hela细胞增殖,其机制可能与Cx26和Cx43的表达上调有关。     

Caveolin-1过表达抑制宫颈鳞癌Hela细胞的体外生长研究

Objective To investigate the effects of caveolin-1 overexpressing on the growth of cervical squamous cell cancer Hela cell line. Methods Eukaryotic expression vector of human caveolin-1 gene was introduced into Hela cells by Lipofectamine. The clones stably overexpressed caveolin-1 were identiffed by RT-PCR, immunofluorescence cell staining techniques and Westernblotting. Cells proliferation viabihty was tested by MTT assay, and flow cytometry was used to assay the cell cycle and apoptosis, and the relative phosphorylation level of extracellular regulated protein kinases (Erk1/2) were detected by Westernblotting. Results The clones stably overexpressed caveolin-1 were obtained. Compared with the parental Hela cells, the tranfected cells exhibited a slower rate of growth. FAGS analysis results revealed that overexpression of caveolin-1 resulted in the cell cycle arrest in the G0/G1 [ ( 68. 04 ± 2. 57 ) % vs ( 53.41 ±1.01)%] phase and increased the apoptotic cell fraction[ (19. 18 ±2.20)% vs (5.63 ±0.55)%, P <0. 05 ]. Western blotting results showed that overexpression of caveolin-1 reduced the phosphorylation of Erk1/2(0.28 ±0.05 vs 0.81 ±0.07, P <0.05). Conclusions Overexpression of caveolin-1 suppressed the growth of Hela cells and induced apoptosis, down-regulation of Erk1/2 phosphorylation might be involved in its mechanism.