糖尿病视网膜前膜中ICAM-1及Mac-1的免疫组织化学研究

目的 观察增生型糖尿病视网膜病变（ＰＤＲ）的纤维增生视网膜前膜（ＥＲＭ）中粘附分子（ＩＣＡＭ－１,Ｍａｃ－１）的表达。方法 用免疫组织化学方法对９例ＰＤＲ患者行玻璃体切割术时剥离的视网膜前膜进行观察。其中糖尿病视网膜病变Ⅳ期４例,Ⅴ期５例。结果 ＩＣＡＭ－１和Ｍａｃ－１在８例视网膜前膜中表达,表达率８９％,ＩＣＡＭ－１和Ｍａｃ－１阳性表达在糖尿病分型及分期中无明显差别。结论 ＩＣＡＭ－１和Ｍａｃ－１在增生型糖尿病视网膜中表达,糖尿病视网膜病变的发病中有粘附分子参与。     

玻璃体内注射色素上皮源性因子对大鼠早期糖尿病视网膜病变的保护作用

目的　观察玻璃体内注射色素上皮源性因子（ｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ-ｄｅｒｉｖｅｄｆａｃｔｏｒ,ＰＥＤＦ）对ＳＤ糖尿病大鼠视网膜ＰＥＤＦ、血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）、炎性相关因子细胞间黏附分子-１（ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅ-ｃｕｌｅ-１,ＩＣＡＭ-１）和单核细胞趋化蛋白-１（ｍｏｎｏｃｙｔｅｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ-１,ＭＣＰ-１）以及细胞通透性相关因子紧密连接蛋白-１（ｚｏｎｕ-ｌａｏｃｃｌｕｄｅｎｓ-１,ＺＯ-１）和蛋白激酶Ｂ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＢ,ＰＫＢ,又称Ａｋｔ）表达的影响,探讨ＰＥＤＦ对早期糖尿病视网膜病变的保护作用。方法　选取６～８周龄ＳＤ大鼠６０只,随机分为４组:正常对照组（ＣＯＮ组）、糖尿病组（ＤＭ组）、糖尿病生理盐水注射组（ＤＭ＋ＮＳ组）和糖尿病ＰＥＤＦ注射组（ＤＭ＋ＰＥＤＦ组）。链脲佐菌素诱导建立糖尿病模型后第１周、２周、３周时,ＤＭ＋ＰＥＤＦ组大鼠玻璃体内注射ＰＥＤＦ,而ＤＭ＋ＮＳ组注射同样体积的生理盐水。第４周时处死大鼠,摘出眼球,进行视网膜组织病理学及电镜观察。并采用免疫组织化学方法检测视网膜ＰＥＤＦ、ＶＥＧＦ、ＩＣＡＭ-１、ＭＣＰ-１以及ＺＯ-１、Ａｋｔ的表达情况。结果　糖尿病大鼠均造模成功。４周糖尿病病程尚不能导致明显的视网膜新生血管形成。在透射电镜下,ＤＭ组大鼠视网膜可见神经节细胞水肿,线粒体肿胀变大,基质肿胀明显,可见大部分或全部的嵴消失,部分双侧膜融合,粗面内质网扩张,而玻璃体内ＰＥＤＦ注射可以明显地改善这一病理改变。ＤＭ组大鼠ＰＥＤＦ主要表达于视网膜神经纤维层、神经节细胞层以及内丛状层、光感受器基质以及色素上皮层、脉络膜等部位;ＶＥＧＦ主要表达于神经节细胞层,ＩＣＡＭ-１主要表达在光感受器层,ＭＣＰ-１主要表达在视网膜内层细胞,包括节细胞层和内核层,ＺＯ-１蛋白主要表达于内核层的细胞以及神经节细胞,Ａｋｔ主要表达于内丛状层以及脉络膜的细胞浆中。同ＣＯＮ组相比,ＤＭ组、ＤＭ＋ＮＳ组视网膜中ＰＥＤＦ、ＶＥＧＦ表达差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）,而ＩＣＡＭ-１、ＭＣＰ-１表达增加,ＺＯ-１、Ａｋｔ表达减少,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。ＤＭ＋ＰＥＤＦ组大鼠视网膜中ＰＥＤＦ、ＶＥＧＦ的表达较ＤＭ组和ＤＭ＋ＮＳ组差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）,但ＩＣＡＭ-１、ＭＣＰ-１表达减少,ＺＯ-１、Ａｋｔ表达增多,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　ＰＥＤＦ可以明显地改善糖尿病视网膜病变早期视网膜神经节细胞的损害,通过减少炎性因子和增加细胞连接蛋白而减轻血-视网膜屏障的破坏,从而对早期糖尿病视网膜病变起一定的防治作用。     

白细胞介素-1β诱导大鼠视网膜单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达的研究

目的 探讨白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）对大鼠视网膜单核细胞趋化蛋白（ＭＣＰ）－１ｍＲＮＡ表达的诱导作用。方法 ２４只ＳＤ大鼠，右眼为实验眼，左眼为对照眼。实验眼玻璃体内注入ＩＬ－１β ２５０ Ｕ／５μｌ，对照眼注入等量生理盐水（ＰＳＳ）。注射后４，２４ｈ取视网膜组织，提取总ＲＮＡ应用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测视网膜ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达。结果 眼内ＩＬ－１β注射后４ｈ实验眼视网膜ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达水平较对照眼明显增加；２４ｈ实验眼视网膜ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ水平与对照眼相近。结论 视网膜ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ可被眼内ＩＬ－１β诱导表达，ＭＣＰ－１可能在ＩＬ－１β诱发的眼内炎症反应中发挥作用。     

实验性兔眼球钝挫伤的视网膜脉络膜ir—ET测定

目的探讨钝挫伤性视网膜、脉络膜循环障碍及复方樟柳碱（ｃｏｍｐｏｕｎｄａｎｉｓｏｄｉｎｅ，ＣＡ）治疗机理。方法用自由落体打击，损伤能量３．３Ｊ，造成兔轻度眼球钝挫伤模型。在不同时间点，用放射免疫法测定伤眼及对侧眼视网膜、脉络膜免疫活性内皮素（ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｅ－ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ｉｒ－ＥＴ）水平。结果生理盐水及托拉苏林组伤后３ｄ视网膜ｉｒ－ＥＴ降低（Ｐ＜０．０５）。伤后１ｄ脉络膜ｉｒ－ＥＴ下降，３ｄ降至最低水平（Ｐ＜０．０５～０．０１），７ｄ各组均趋于正常。ＣＡ组视网膜、脉络膜ｉｒ－ＥＴ水平基本波动在正常范围（Ｐ＞０．０５）。从而避免和减轻挫伤性视网膜、脉络膜缺血。对侧眼变化与伤眼基本平行（Ｐ＞０．０５）。结论眼球钝挫伤使伤后早期视网膜、脉络膜ｉｒ－ＥＴ水平降低，可能是造成钝挫伤性视网膜、脉络膜循环障碍的因素之一。ＣＡ早期应用可稳定ｉｒ－ＥＴ水平，托拉苏林无此治疗作用。对侧眼ｉｒ－ＥＴ变化是眼的同感反应所致。     

组织激肽释放酶在糖尿病视网膜病变患者血清中的变化及其调节血管新生机制

目的　检测组织激肽释放酶（ｔｉｓｓｕｅｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ,ＴＫＬＫ）、血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）和可溶性细胞间黏附分子-１（ｓｏｌｕｂｌｅｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒａｄｈｅｎｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌ-１,ｓＩＣＡＭ-１）在糖尿病视网膜病变（ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＤＲ）患者血清中的变化,观察ＴＫＬＫ在低氧条件下对人视网膜微血管内皮细胞（ｈｕｍａｎｒｅｔｉｎａｌｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＨＲＭＥＣｓ）中ＶＥＧＦ和ＩＣＡＭ-１表达的影响。方法　收集２型糖尿病患者６０例,按照ＤＲ分期标准将患者分为糖尿病无ＤＲ组（ＤＭ组）、非增生性ＤＲ组（ＮＰＤＲ组）和增生性ＤＲ组（ＰＤＲ组）,收集同期在本院体检的志愿者作为对照组,每组２０例。ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＴＫＬＫ、ＶＥＧＦ和ｓＩＣＡＭ-１的水平。体外ＨＲＭＥＣｓ分别进行常氧和低氧培养,不同浓度重组ＴＫＬＫ处理后,检测细胞增殖、凋亡以及ＶＥＧＦ和ＩＣＡＭ-１的表达。结果　ＤＭ、ＮＰＤＲ和ＰＤＲ组患者血清中ＴＫＬＫ、ＶＥＧＦ和ｓＩＣＡＭ-１水平明显高于对照组,４组总体差异有统计学意义（Ｆ＝２８．８０５,Ｐ＝０．００２;Ｆ＝３２．０４１,Ｐ＝０．００２;Ｆ＝２６．１６９,Ｐ＝０．００１）;ＰＤＲ患者血清中ＴＫＬＫ、ＶＥＧＦ和ｓＩＣＡＭ-１水平显著高于ＤＭ和ＮＰＤＲ组（均为Ｐ＜０．００１）。ＴＫＬＫ与ＶＥＧＦ（ｒ＝０．６２３,Ｐ＜０．０１）和ｓＩＣＡＭ-１水平（ｒ＝０．５９８,Ｐ＜０．０１）均呈正相关。１０μｇ?ｍＬ－１ｒｈＴＫＬＫ可显著抑制低氧诱导的ＨＲＭＥＣｓ增殖以及ＶＥＧＦ和ＩＣＡＭ-１的表达,并可促进细胞凋亡（Ｐ＜０．０５）。结论　ＴＫＬＫ通过与ＶＥＧＦ和ＩＣＡＭ-１相互作用而影响ＤＲ的进展。     

龙胆泻肝汤对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎的治疗作用

目的　探讨龙胆泻肝汤对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎（ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｔｏ-ｉｍｍｕｎｅｕｖｅｉｔｉｓ,ＥＡＵ）的治疗作用。方法　Ｌｅｗｉｓ大鼠随机分为对照组６只、ＥＡＵ组１８只和ＬＸＴ组１８只,光感受器间维生素Ａ结合蛋白免疫ＥＡＵ组和ＬＸＴ组大鼠。观察大鼠生理特征及眼部炎症变化,出现葡萄膜炎症时给予ＬＸＴ组大鼠龙胆泻肝汤灌胃;免疫后１２ｄ比较各组大鼠眼组织病理学差异;免疫后每隔４ｄ检测房水蛋白及血清中白蛋白、球蛋白变化。结果　成功制备了ＥＡＵ大鼠模型;免疫后５ｄ大鼠开始出现葡萄膜炎症状,１２ｄ炎症最重。ＥＡＵ大鼠肛温在１ｄ、７ｄ、１０ｄ和１２ｄ高于对照组（Ｐ＝０．０２０、０．０００、０.０１５、０．００１）;免疫后１２ｄ,ＥＡＵ组房水蛋白浓度为（３６．０３±３．２３）ｇ?Ｌ－１,ＬＸＴ组为（２４．６７±２．６０）ｇ?Ｌ－１,差异有显著统计学意义（Ｐ＝０．０００）;组织病理学显示ＥＡＵ组视网膜结构破坏程度明显高于ＬＸＴ组（Ｐ＝０．０００）。ＥＡＵ组免疫后４ｄ、８ｄ及１２ｄ白蛋白均低于对照组（Ｐ＝０．０４５、０．０００、０.０３３）,ＬＸＴ组４ｄ和８ｄ白蛋白低于正常（Ｐ＝０.０４５、０．００５）,但１２ｄ时恢复至正常;１２ｄ时ＥＡＵ组球蛋白明显高于正常（Ｐ＝０．０４７）,ＬＸＴ组未见明显异常。结论　龙胆泻肝汤能有效减轻ＥＡＵ大鼠前房炎症,减少炎症细胞浸润,保护眼部组织结构,增强机体抗氧化能力,调节免疫状态,对ＥＡＵ发挥治疗作用。     

急性前葡萄膜炎黄斑中心凹下脉络膜厚度的改变

目的　分析急性前葡萄膜炎患者双眼黄斑中心凹下脉络膜厚度的变化。方法　选取单眼首次发作的急性前葡萄膜炎患者１６例（１６眼）,同时选取与之年龄、性别、屈光状态相匹配的无眼病及全身性疾病的正常人１６例（１６眼）作为对照组。利用海德堡ＨＲＡ-Ｓｐｅｃｔｒａｌｉｓ频域光学相干断层深度增强成像（ｅｎｈａｎｃｅｄｄｅｐｔｈｉｍａｇｉｎｇ-ｓｐｅｃｔｒａｌｄｏｍａｉｎｏｐｔｉｃａｌｃｏｈｅｒｅｎｃｅｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ,ＥＤＩ-ＯＣＴ）测量急性前葡萄膜炎发作眼和对侧眼,以及正常对照眼的黄斑中心凹下脉络膜厚度。采用配对ｔ检验检测结果的可靠性。结果　急性前葡萄膜炎发作眼、对侧眼及正常对照眼的黄斑中心凹下的脉络膜厚度分别为（３１８．９３±１０１．２５）μｍ、（２６５．８７±６５．１７）μｍ及（２４４．７３±５８．７２）μｍ。发作眼和对侧眼之间的黄斑中心凹下脉络膜厚度差异有统计学意义（Ｐ＝０．０００）,发作眼和对照眼之间差异也有统计学意义（Ｐ＝０．０００）,而对侧眼和对照眼之间的黄斑中心凹下脉络膜厚度差异无统计学意义（Ｐ＝０．２９０）。结论　ＥＤＩ-ＯＣＴ测量黄斑中心凹下脉络膜厚度为进一步加深对急性前葡萄膜炎的认识提供了有利的检测手段。     

频域OCT测量正常学龄期儿童黄斑区视网膜厚度

目的　应用频域ＯＣＴ测量正常学龄期儿童的黄斑区视网膜厚度。方法　选取６～１２岁儿童１０８人,以最佳矫正远视力≥１．０、最佳矫正近视力Ｊｒ１、球镜屈光度范围（－１．００～＋１．００Ｄ）、柱镜屈光度范围（－１．００～＋１．００Ｄ）为纳入标准,最终选取２１３眼。应用ＣｉｒｒｕｓＨＤ-ＯＣＴ的２００×２００扫描模式和５１２×２１８扫描模式对受试者双眼黄斑区视网膜进行检查,测量黄斑中心视网膜厚度（ｃｅｎｔｒａｌｓｕｂｆｉｅｌｄｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＣＳＴ）、黄斑区视网膜容积（ｍａｃｕｌａｒｖｏｌｕｍｅ,ＭＶ）、黄斑区平均视网膜厚度（ａｖｅｒａｇｅｍａｃｕｌａｒｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＡＭＴ）及九分区模式视网膜厚度。结果　两种扫描模式下黄斑区视网膜厚度值差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。左右眼差异无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。男童ＣＳＴ（２４０．６８±１６．５７）μｍ厚于女童（２３４．５１±１８．６５）μｍ（Ｐ＝０．０４０）,且男童内环各分区视网膜厚度均厚于女童（均为Ｐ＜０．０５）。结论　本研究应用ＨＤ-ＯＣＴ测量正常儿童ＡＭＴ,为确定国人学龄期儿童ＡＭＴ正常值及疾病诊断提供参考,提示临床注意性别差异。     

非增殖期糖尿病视网膜病变黄斑水肿对脉络膜横断面面积的影响

目的　通过光学相干断层成像（ｏｐｔｉｃａｌｃｏｈｅｒｅｎｃｅｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ,ＯＣＴ）分析非增殖期糖尿病视网膜病变黄斑水肿对脉络膜横断面面积的影响。方法　收集２０１２年３月至２０１４年２月于我院眼科门诊就诊的非增殖期糖尿病视网膜病变患者４７例（５７眼）,分为非增殖期糖尿病视网膜病变不伴临床显著性黄斑水肿组（ＮＰＤＲＣＳＭＥ－组）和伴临床显著性黄斑水肿组（ＮＰＤＲＣＳＭＥ＋组）。采用Ｔｏｐｃｏｎ３ＤＯＣＴ１０００脉络膜模式扫描黄斑区,比较２组之间脉络膜横断面面积差异,分析２组脉络膜横断面面积与黄斑中心凹厚度（ｃｅｎｔｒａｌｍａｃｕｌａｒｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＣＭＴ）、最佳矫正视力的相关性。结果　ＮＰＤＲＣＳＭＥ－组与ＮＰＤＲＣＳＭＥ＋组性别、年龄和屈光度差异均无统计学意义（Ｐ＝０．５５０、０．７９０、０．０７０）。ＮＰＤＲＣＳＭＥ＋组脉络膜横断面面积（１１４１７５４．４７±３３７７６２．０５）μｍ２较ＮＰＤＲＣＳＭＥ－组（１３７８１２８．４５±３９５７２８．６６）μｍ２变小（Ｐ＝０．０１９）。ＮＰＤＲＣＳＭＥ－组脉络膜横断面面积与ＣＭＴ（中位数２２６．５０μｍ）之间无相关性（ｒ＝－０．１３０,Ｐ＝０．４９４）;ＮＰＤＲＣＳＭＥ＋组脉络膜横断面面积与ＣＭＴ（中位数３１７．００μｍ）之间也无相关性（ｒ＝－０．２１８,Ｐ＝０．２７４）。ＮＰＤＲＣＳＭＥ－组脉络膜横断面面积与最佳矫正最小分辨角对数视力（ＢＣｌｏｇＭＡＲ）（中位数０．０９７）之间无相关性（ｒ＝０．３２１,Ｐ＝０．０８０）;ＮＰＤＲＣＳＭＥ＋组脉络膜横断面面积与ＢＣｌｏｇＭＡＲ（中位数０．６９９）之间亦无相关性（ｒ＝－０．０７０,Ｐ＝０．７００）。结论　非增殖期糖尿病视网膜病变患者发生黄斑水肿者较未发生黄斑水肿者脉络膜横断面面积变小。脉络膜横断面面积与ＣＭＴ、最佳矫正视力均不相关。     

应用EDI-SDOCT观察全视网膜光凝对糖尿病视网膜病变黄斑区脉络膜厚度的影响

目的　应用深层成像谱域光学相干断层扫描（ｅｎｈａｎｃｅｄｄｅｐｔｈｉｍａｇｉｎｇｓｐｅｃｔｒａｌ-ｄｏｍａｉｎｏｐｔｉｃａｌｃｏｈｅｒｅｎｃｅｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ,ＥＤＩ-ＳＤＯＣＴ）观察全视网膜光凝（ｐａｎｒｅｔｉｎａｌｐｈｏｔｏｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ,ＰＲＰ）对非增生性糖尿病视网膜病变（ｎｏｎ-ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａ-ｔｈｙ,ＮＰＤＲ）患眼黄斑区脉络膜厚度的影响。方法　对３５例（５９眼）ＮＰＤＲ患者行ＰＲＰ术,以４２例（５９眼）正常眼作为对照组。应用ＥＤＩ-ＳＤＯＣＴ分别在ＰＲＰ术前和术后１周测量对照组和光凝组黄斑区各点位脉络膜厚度,比较术后１周较术前的变化,各点标记为:中心凹下脉络膜厚度（ｓｕｂｆｏｖｅａｌｃｈｏｒｏｉｄａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＳＦＣＴ）,各扫描线上距离中心凹７５０μｍ、１５００μｍ处的鼻侧脉络膜厚度（ｎａｓａｌｃｈｏｒｏｉｄａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＮＣＴ）、颞侧脉络膜厚度（ｔｅｍｐｏｒａｌｃｈｏｒｏｉｄａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＴＣＴ）、上方脉络膜厚度（ｓｕｐｅｒｉｏｒｃｈｏｒｏｉｄａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＳＣＴ）、下方脉络膜厚度（ｉｎｆｅｒｉｏｒｃｈｏｒｏｉｄａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＩＣＴ）、平均黄斑区脉络膜厚度（ａｖｅｒａｇｅｍａｃｕｌａｒｃｈｏｒｏｉｄａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＡＭＣＴ）。结果　光凝组术前、术后１周的ＳＦＣＴ、ＮＣＴ７５０、ＴＣＴ７５０、ＳＣＴ７５０、ＩＣＴ７５０、ＮＣＴ１５００、ＴＣＴ１５００、ＳＣＴ１５００、ＩＣＴ１５００、ＡＭＣＴ均明显低于对照组（均为Ｐ＜０．０５）;术后１周ＳＦＣＴ和ＡＭＣＴ明显高于术前（均为Ｐ＜０．０５）;除ＴＣＴ７５０和ＴＣＴ１５００术后与术前无明显差异外（均为Ｐ＞０．０５）,余各点位术后均明显高于术前（均为Ｐ＜０．０５）。其中１０眼术后各值低于术前,２眼可观察到术后脉络膜血管孔径较术前增加。结论　ＮＰＤＲ会导致黄斑区脉络膜变薄,ＰＲＰ术短期内能够明显增加黄斑区脉络膜厚度,同时一定程度上增加脉络膜的血管孔径。ＥＤＩ-ＳＤＯＣＴ是用于评价ＮＰＤＲ患者疗效和预后的有效无创检测手段。