绿茶等对r射线和雌性激素诱发小鼠肿瘤的抑制作用

观察了龙井茶、儿茶素、多种维生素和苏乐康对ｒ射线和复方已酸孕酮注射液联合诱发小鼠肿瘤的抑制作用。复方已酸孕酮注射液的剂量相当于人剂量的１０倍，ｒ射线剂量为３Ｇｙ。结果表明：ＥＰ加ｒ射线组动物肿瘤发生率为６０．０％；龙井茶加ＥＰ加ｒ射线组动物肿瘤发生率明显降低，３４．０％，Ｐ〈０．０１。多维素、儿茶素、苏乐康加ＥＰ加ｒ射线组动物肿发生率未见明显降低。     

绿茶等对γ射线和雌性激素诱发小鼠肿瘤的抑制作用

观察了龙井茶、儿茶素、多种维生素和苏乐康对γ射线和复方己酸孕酮注射液联合诱发小鼠肿瘤的抑制作用。复方己酸孕酮注射液的剂量相当于人剂量的１０倍，γ射线剂量为３Ｇｙ。结果表明：ＥＰ加γ射线组动物肿瘤发生率为６０．Ｏ％；龙井茶加ＥＰ加γ射线组动物肿瘤发生率明显降低，３４．ｏ％，Ｐ＜０．０１。多维素、儿茶素、苏乐康加ＥＰ加γ射线组动物肿瘤发生率未见明显降低。     

食用油油烟颗粒提取物诱导大鼠肺细胞氧化应激作用的研究

食用油油烟（COF）是我国室内空气的主要污染物之一。HPLC分析表明，加热至250℃以上时，食用油油烟气中至少含有220多种产物，其中包括具有致癌性的杂环胺类和以B（a)P为代表的多环芳烃类化合物。流行病学调查结果表明肺癌的发生与接触食用油油烟有关。毒理学研究也从多个遗传终点揭示了油烟具有遗传毒作用和潜在致癌性。通过对非靶细胞体系的研究，推测食用抽油烟的上述毒性作用可能与氧化应激有关。鉴于氧化应激在肿瘤的发生和发展中具有重要作用，为进一步了解食用油油烟对肺细胞的氧化性损伤作用，我们以大鼠肺Ⅱ型细胞为实验对象，从细胞毒性，DNA交联，DNA单链断裂，过氧化产物丙二醛（MDA）生成量以及谷胱甘肽（GSH）含量测定等多方面观察与评价COF对肺细胞的毒性作用及其与氧化应激作用的关系，研究结果表明，食用油油烟闰提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞具有细胞毒性和致DNA交联与断裂作用。食用油油烟颗粒提取物可引起大鼠肺Ⅱ型细胞MDA含量增高，提示食用油油烟颗粒提取物能诱发大鼠肺Ⅱ型细胞膜脂质过氧化反应，从而有可能造成细胞膜结构和功能完整性的破坏，导致细胞正常生长和调控机制的紊乱。同时，油烟颗粒提取物可引起大鼠肺Ⅱ型细胞GSH含量降低，该作用随染毒时间的延长而增强。提示油烟颗粒提取物自身或经细胞代谢后可产生自由基，进而影响机体抗氧化和过氧化过程的平衡。抗氧化剂N－乙酰半胱氨酸可以降低油烟颗粒提取物对大鼠肺细胞的细胞毒性与DNA毒性。从而提示食用油油烟对肺细胞的毒性作用与其氧化应激作用有关，氧化性损伤可能是其对肺细胞功能和遗传物质造成损害的重要方式之一。综上所述，油烟颗粒提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞具有氧化应激作用，自由基的产生是导致氧化损伤的主要原因，引起膜脂质过氧化与GSH抗氧化防御系统能力下降可能是其两个重要环节。     

恶性肿瘤组织DNA倍体分类与细胞动力学的关系

目的：探讨恶性肿瘤患者肿瘤组织细胞DNA倍体分类与细胞动力学的关系。方法：采用流式细胞术对2504例恶性肿瘤组织DNA含量进行了检测，对DNA倍体进行了分类，并分析了DNA倍体类型与细胞凋亡（Apo)检出率及S期细胞比率（SPF）的关系。结果：恶性肿瘤组织DNA倍体分型：二倍体（D，473例）、近二倍体（ND，49例）、四倍体（T，307例）、非整倍体（AN，1040例）和多异倍体（M，635例）。后4种统称为DNA异倍体（H）共2031例。恶性肿瘤组织Apo检出率显著低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），而SPF比率却显著高于正常对照组（P＜0．01）。二倍体肿瘤组织Apo检出率显著高于异倍体肿瘤组织（P＜0．01），SPF比率显著低于异倍体组织（P＜0．01）。在恶性肿瘤组织中，含有不同数量异倍体克隆者，不同DNA倍体异质性质的Apo检出率和SPF比率均有显著性差异（P＜0．01）。不同DI值的肿瘤组织其Apo检出率和SPF比率有明显不同。结论：恶性肿瘤能导致肿瘤组织Apo水平显著降低，细胞增殖活性显著增加。而且这些变化与肿瘤组织倍体类型、DI值、DNA异倍体克隆数以及DNA倍体异质性等均有十分密切的关系。     

纳米氧化石墨烯诱导人类支气管上皮细胞DNA氧化与甲基化的实验研究

目的：通过分析体外培养的人类支气管上皮细胞（16HBE）在纳米氧化石墨烯（NGO）染毒后细胞DNA中8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷（8-OHdG）和5-甲基胞嘧啶（5-mC）比例的变化规律,探讨DNA氧化与DNA甲基化的关联性。方法：分别以1.25、2.5、5、10 μg/mL的NGO溶液染毒16HBE细胞24 h,采用高效液相色谱串联电化学检测技术分析细胞DNA中8-OHdG比例,高效毛细管电泳（HPCE）法检测细胞全基因组DNA甲基化水平。结果：在2.5、5、10 μg/mL的NGO溶液染毒后,细胞DNA中8-OHdG比例显著高于对照组（P < 0.05或P < 0.01）,以10 μg/mL浓度时为最高。NGO可引起16HBE细胞甲基化程度降低,与对照组细胞相比,2.5、5和10 μg/mL NGO组分别降低37.1%、49.7%和46.3%,与对照组间的差异均有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01）。DNA氧化水平与DNA甲基化水平间呈负相关（r=-0.69,P < 0.01）。结论：本研究提示,在体外NGO可导致人支气管上皮细胞16HBE的DNA氧化水平升高,DNA甲基化水平降低,我们推测细胞DNA氧化程度可能影响DNA甲基化过程。     

巨噬细胞中诱导型一氧化氮合酶来源的NO对共培养HL60 细胞凋亡的影响

 目的 研究巨噬细胞中诱导型一氧化氮合酶（iN—OS）来源的一氧化氮（NO）对共培养HL60细胞凋亡的影响。方法 以脂多糖（LPS）和γ素（INF-γ）诱导RAW264．7巨噬细胞iNOS基因的表达产生过量NO为实验模型，通过噻唑蓝（MTT）试验、蛋白质印迹分析、荧光分析、流式细胞术（FCM）、透射电镜和DNA琼脂糖凝胶电泳等分析技术，观察No对共培养的HL60细胞存活率、bcl-2和bax蛋白表达、Caspase-3活性和细胞凋亡的影响。结果 RAW264．7巨噬细胞中iNOS来源的No对共培养HL60细胞能造成氧化损伤，降低细胞的存活率；bcl-2表达明显下降，而bax表达增加；激活Caspase-3和促进DNA的降解。结论 巨噬细胞中iNoS来源的No在诱导细胞凋亡中发挥重要的作用。     

人胃癌总基因DNA与c—myc,c—Ha—ras基因甲基化的改变

DNA甲基化（DNAmethylation）在调节基因表达及维持细胞正常分化中起重要作用[1]。各种恶性肿瘤的形成过程中或多或少地有DNA甲基化的改变，包括总基因组DNA甲基化水平降低和各种癌基因特定位点的DNA甲基化模式的改变[2，3]。国外有较多的动物实验和细胞培养的报道，国内有过胃癌c－Ha－ras基因甲基化变化的分析[4]．但都未有较系统的人胃癌细胞总基因组DNA与特定位点DNA甲基化改变的对比研究．我们将胃癌（Gastriccancer，C）区、癌旁（Paracancer，P）区、外周正常（Normal，N）区粘膜组织细胞DNA标本分为两份，同时作甲基化…     

119. 活性氧对细胞增殖、凋亡及损伤作用的剂量-效应关系研究

大量研究表明，自由基（FR）、活性氧（ROS）可对细胞具有调控作用。正常机体内自由基的产生和清除处于动态平衡中，外界环境中也存在多种形式的自由基和活性氧，其性质活泼，易与体内多种物质发生化学反应，并同内源性自由基一起影响细胞的生长，分化及死亡过程。大量报告：活性氧使细胞内酶活性改变，cAMP、cGMP浓度升高影响细胞增殖分化；活性氧可直接作用于DNA；活性氧可影响离子通道和生物信息传导；活性氧的生物效应有剂量依赖性。为进一步研究ROS对细胞作用是否存在剂量效应关系及作用机制，以H2O2为外源性活性氧，人类HL-60细胞作为研究对象，通过不同浓度H2O2作用于HL-60细胞，观察对生长状况影响和形态学改变。本研究取对数生长期细胞，通过细胞低温同步化处理后，使细胞同时进入G1期，分别施加不同浓度的H2O2溶液，浓度范围0.5 μmol*L-1至4.0×103 mmol*L-1，共分7组（终浓度为0、0.1、2.0、5.0、20.0、100.0、400.0 μmol*L-1)。37℃温育取处理后不同时间点（3 h，12 h，24 h，36 h，56 h，72 h，6 d)终止培养，4 g*L-1台盼蓝溶液染色，计数活细胞和细胞总数；同时进行噻唑盐(MTT）     

UCN-01增加鼻咽癌细胞放射敏感性的相关机制

目的 在前期研究基础上，进一步探讨UCN-01增加鼻咽癌细胞放射敏感性的相关机制。方法 应用流式细胞仪和凋亡试剂盒测定不同条件下CNE-1细胞的凋亡比例。应用彗星分析法测定不同实验组肿瘤细胞在照射后不同时间的DNA损伤程度，用以观察UCN-01对CNE-1细胞修复DNA损伤能力的影响。结果 照射＋UCN-01组与单纯照射组相比，细胞总凋亡比例仅有轻微增加（14．9％：13．6％），其中主要表现为早期凋亡比例轻度增加（5．0％：3．9％），两组细胞晚期凋亡比例相仿（9．9％：9．7％），细胞凋亡不是UCN-01对CNE-1细胞放射增敏的主要机制。照射后加入UCN-01组细胞的尾力矩下降速度较单纯照射组明显降低，即DNA的修复速度降低，两组的半修复时间分别为3．1、0．4h，说明UCN-01使CNE-1细胞修复放射性DNA损伤的能力下降。结论 UCN-01未明显增加放射后CNE-1细胞的凋亡比例；UCN-01使细胞修复放射性DNA损伤的能力降低可能是该药放射增敏的重要机制之一。     

HPLC检测胃癌DNA甲基化的初步研究

DNA甲基化与基因功能密切相关。在肿瘤和转化细胞中，总基因组DNA和某些看家基因的甲基化水平下降。我们以前曾以甲基化酶温育、3H－S-腺苦甲硫氨酸（3HAM）掺入法研究过人胃癌总基因组DNA甲基化情况，现在我们又以高效液相色谱法（HPLC）检测其总基因组DNA中5一甲基胞嚼陡（'"C）的含量，以与前种方法的结果比较，进一步明确人胃癌DNA甲基化水平的降低情况。1材料与方法1．1对象1994年3月～7月间本院进展期胃癌手术标本中已行'H－SAM掺入法检测DNA甲基化者的癌（C）区、癌旁（P）区和外周远端对照组织（N）区粘膜标本21例。1…     

重组反义c-myc腺病毒抑制K562细胞生长、诱导凋亡的作用

目的：研究重组反义cmyc腺病毒（Ad—AS-c-myc）对人慢性粒细胞K562细胞系抑制生长，诱导凋亡作用及分子机制，探讨Ad-As-c—myc用于慢性粒细胞白血病基因治疗的可能性。方法：采用重组腺病毒Lac—Z（Ad—LacZ）及Ad—AS-c—myc联合多聚季胺转染K562细胞，Xgal染色判断转染效率。采用形态学、MTT试验、RT—PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞仪及免疫细胞化学等方法进行研究。结果：多聚阳离子可提高腺病毒载体对K562细胞的转染，Ad—LacZ＋多聚季胺转染率达86％。AdAS—c—myc能抑制K562细胞c—myc基因在转录水平的表达，K562细胞生长受抑（抑制率38％）；Ad—AS-c—myc可使K562细胞G2、G2期阻滞，增殖相关基因PCNA表达降低，Apo2．7蛋白阳性细胞率增高，DNA电泳出现DNA梯形条带。结论：Ad—AS-c-myc对K562细胞具有抑制生长及诱导凋亡作用，其生物学作用与K562细胞c-myc及PCNA的表达降低有关。Ad-AS-c-myc在慢性粒细胞白血病基因治疗中具有潜在的临床价值。     

抑癌基因p53与原发性肝癌发生的分子病理研究

第四军医大学病理学教研室胡敏、王文亮（西安710032）报道，他们采用免疫组织化学（包括双重显色）方法、DNA及mRNA原位杂交、Southern印迹、PCR－RFLP和DNA序列测定等方法在细胞定位、蛋白表达、至DNA分子水平的不同层次上，研究了300例原发性肝癌（PHC）标本中，抑癌基因P53     

恶性肿瘤组织DNA倍体分类与CD8+／CD28+表达的关系

目的：探讨组织DNA倍体分类与CD8^ /CD28^ 表达细胞之间的关系。方法：用流式细胞术对190例恶性肿瘤组织DNA倍体做了分类，并对其CD8^ /CD28^ 细胞检出率进行了检测。同时分析了不同DNA倍体组织中CD8^ /CD28^ 细胞表达率。结果：恶性肿瘤组织CD8^ /CD28^ 表达细胞检出率显著低于正常对照组织（P＜0．01）。恶性肿瘤组织DNA倍体分为二倍体（D）、近二倍体（ND）、四倍体（T）、非整倍体（AN）和多异倍体（M），后4种DNA倍体类型统称为DNA异倍体（H）。DNA异倍体肿瘤组织的CD8^ /CD28^ 细胞检出率显著低于二倍体肿瘤（P＜0．01）；在不同DNA异倍体组织中，从ND→T→AN到M，其CD8^ /CD28^ 细胞检出率逐渐减低，但各组间差异均无显著性（P＞0．05）。结论：恶性肿瘤能抑制肿瘤局部组织的免疫功能，不同DNA倍体类型组织的免疫状态是不同的。由此可见，肿瘤局部组织CD8^ /CD28^ 细胞表达水平与其DNA倍体类型的关系是十分密切的。     

西安地区原发性肝癌与HBV、癌基因关系的研究

0第四军医大学病理学教研室胡敏、王文亮（西安710023）报道，他们采用免疫组织化学方法、DNA及mRNA原位杂交、Southern印迹等方法在细胞定位、蛋白表达、至DNA分子水平的不同层次上，研究了西安地区200例原发性肝癌（PHC）标本中，乙型肝炎病毒（HBV）与癌基因在PHC及其相应癌     

超氧化物歧化酶与癌

 细胞在进行需氧代谢的过程中，分子氧能被许多生化反应还原成超氧阴离子自由基O（?），它又可进一步生成H₂O₂，羟自由基·OH等活性氧，它们对细胞有毒性。而超氧化物歧化酶SOD能够催化下列反应，把O（?）清除掉。     

PCB153对原代培养大鼠睾丸支持细胞SOD活性、DNA损伤及凋亡的影响

目的：探讨2,2′,4,4′,5-五氯联苯（2,2′,4,4′,5-hexachlorobiphenyl,PCB153）暴露对原代培养大鼠睾丸支持细胞（Sertoli cells,SC）超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、DNA损伤、细胞凋亡的影响以及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine,NAC）的干预作用。方法：原代培养出生18～20d雄性SD大鼠的睾丸支持细胞,设PCB153不同浓度的染毒组（加入10、20、30μmol/L PCB153）,NAC组（以300μmol/L NAC预处理1h后加入30μmol/L PCB153）,和对照组（加入与PCB153最大染毒量等体积的DMSO）,各组细胞经上述处理后继续培养24h,用SOD试剂盒测定各组细胞SOD活性,彗星实验测定DNA损伤程度,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞荧光标记观察凋亡形态。结果：染毒24h后,大鼠睾丸支持细胞SOD活性随着PCB153染毒剂量的升高而降低,20、30μmol/L染毒组显著低于对照组（P〈0.05）,NAC预处理可提升SOD活性（P〈0.05）。各PCB153处理组及NAC预处理组与对照组相比,DNA损伤间的差异均无统计学意义（P〉0.05）,细胞凋亡率则均显著增加（P〈0.05）,NAC预处理可降低PCB153所致的凋亡率（P〈0.05）。结论：10～30μmol/L PCB153染毒24h可诱导的原代培养大鼠SCSOD活性降低,细胞凋亡增加,但并未引起DNA损伤,NAC预处理具有保护作用。     

368例支气管镜刷检液基细胞学与细胞DNA定量分析的研究

目的:对比支气管镜刷检细胞DNA定量分析与液基细胞学诊断结果，探讨细胞DNA定量分析在支气管镜刷检中的应用价值。方法: 选取同时进行细胞DNA定量分析与液基细胞学诊断的368例患者细胞标本和细胞片，将其检测结果与病理活检进行对比。结果: 细胞DNA定量分析在支气管镜刷检诊断中的灵敏度、特异度分别为90.8%(177/195)和79.8%(138/173)，液基细胞学在支气管镜刷检诊断中的灵敏度、特异度分别为68.1%(124/182)和63.4%(118/186)。细胞DNA定量检测的灵敏度、特异度均高于液基细胞学，二者比较差异显著（P<0.01）。细胞DNA定量分析与病理活检阳性诊断符合率为83.5%。结论:细胞DNA定量分析在支气管镜刷检中有很好的应用价值，同时联合液基细胞学检查能提高恶性肿瘤的检出率，降低漏诊的风险。     

101. 食用油油烟颗粒提取物诱导大鼠肺细胞氧化应激作用的研究

食用油油烟（COF）是我国室内空气的主要污染物之一。HPLC分析表明,加热至250℃以上时,食用油油烟气中至少含有220多种产物,其中包括具有致癌性的杂环胺类和以B（a）P为代表的多环芳烃类化合物。流行病学调查结果表明肺癌的发生与接触食用油油烟有关。毒理学研究也从多个遗传终点揭示了油烟具有遗传毒作用和潜在致癌性。通过对非靶细胞体系的研究,推测食用油油烟的上述毒性作用可能与氧化应激有关。鉴于氧化应激在肿瘤的发生和发展中具有重要作用,为进一步了解食用油油烟对肺细胞的氧化性损伤作用,我们以大鼠肺Ⅱ型细胞为实验对象,从细胞毒性,DNA交联,DNA单链断裂,过氧化产物丙二醛（MDA）生成量以及谷胱甘肽（GSH）含量测定等多方面观察与评价COF对肺细胞的毒性作用及其与氧化应激作用的关系。研究结果表明,食用油油烟颗粒提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞具有细胞毒性和致DNA交联与断裂作用。食用油油烟颗粒提取物可引起大鼠肺Ⅱ型细胞MDA含量增高,提示食用油油烟颗粒提取物能诱发大鼠肺Ⅱ型细胞膜脂质过氧化反应,从而有可能造成细胞膜结构和功能完整性的破坏,导致细胞正常生长和调控机制的紊乱。同时,油烟颗粒提取物可引起大鼠肺Ⅱ型细胞GSH含量降低,该作用随染毒时间的延长而增强。提示油烟颗粒提取物自身或经细胞代谢后可产生自由基,进而影响机体抗氧化和过氧化过程的平衡。抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸可以降低油烟颗粒提取物对大鼠肺细胞的细胞毒性与DNA毒性。从而提示食用油油烟对肺细胞的毒性作用与其氧化应激作用有关,氧化性损伤可能是其对肺细胞功能和遗传物质造成损害的重要方式之一。综上所述,油烟颗粒提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞具有氧化应激作用,自由基的产生是导致氧化损伤的主要原因,引起膜脂质过氧化与GSH抗氧化防御系统能力下降可能是其两个重要环节。     

自由基所致DNA损伤及其致突致癌的研究进展

自由基所致DNA损伤研究是在更微观的水平上探讨外界理化因素造成DNA结构改变,乃至基因突变与细胞癌变机理的重要课题。本文内容涉及生物体内自由基的来源与种类、DNA损伤的类型与检测方法,以及致突致癌的实验研究等方面,以期提供对该领域研究进展的较为全面的了解。     

DNA修复蛋白RAD52在同源重组中的作用及其在肿瘤中的研究进展

DNA损伤修复在维持细胞基因组稳定性和机体存活中发挥重要作用。DNA双链断裂（Double strandbreaks,DSBs）是DNA损伤最严重的形式。同源重组修复（homologous recombination repair，HRR）是体内参与DSBs损伤修复的重要机制之一，其中DNA修复蛋白RAD52是体内参与同源重组DNA修复的关键因子。RAD52的表达水平异常与非小细胞肺癌、胃癌、鼻咽癌、乳腺癌等肿瘤的发生、发展相关。本文对DNA修复蛋白RAD52在肿瘤研究中的应用这一热点问题进行综述。