旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠肺泡灌洗液中总IgE、IL-4及IL-5的影响

目的:通过观察小鼠感染旋毛虫并诱发过敏性哮喘后,肺泡灌洗液中总IgE、IL-4及IL-5的变化,探讨旋毛虫感染对小鼠过敏性哮喘的影响.方法:将15只8周龄、BALB/c雌性小鼠,随机分为3组,每组各5只,Ⅰ组为空白对照组,Ⅱ组为单纯过敏性哮喘组,Ⅲ组为感染旋毛虫并发哮喘组.Ⅲ组小鼠经口感染200～300条旋毛虫囊包幼虫,建立旋毛虫感染动物模型模型.28 d后,以卵清白蛋白致敏(Ovalbumin,OVA)激发Ⅱ组和Ⅲ组小鼠,建立过敏性哮喘小鼠模型;56 d后,取小鼠肺泡灌洗液,以ELISA双抗体夹心法法检测总IgE、IL-4及IL-5水平.结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3组小鼠总IgE水平分别为(43.70±29.49)、(387.49±148.32)、(102.50±49.55) ng/mL; IL-4水平分别为(169.16±10.00)L、(232.91±17.95)、(172.35±19.19)pg/L;IL-5水平分别为(12.86±1.78)、(23.85±5.51)、(15.76±4.54) ng/L,与Ⅱ组相比较,Ⅲ组肺泡灌洗液中总IgE、IL-4及IL-5水平降低(P＜0.05).结论:旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠肺泡灌洗液中总IgE、IL-4及IL-5的表达有抑制作用.     

旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠血清及肺泡灌洗液总IgE的影响

【目的】通过研究旋毛虫感染小鼠在过敏性哮喘发病时血清及肺泡灌洗液中总IgE水平变化,探讨旋毛虫感染对过敏性哮喘的影响。【方法】取雌性、8周龄BALB/c小鼠,随机分为3组,A组为空白对照组,B组为单纯过敏性哮喘组,C组为感染旋毛虫后哮喘组。C组经灌胃感染旋毛虫囊包幼虫200～300条;4周后,以卵清白蛋白（ovalbumin,OVA）分别对B组和C组小鼠进行致敏激发,建立过敏性哮喘模型;8周后,取小鼠血清、肺泡灌洗液,检测总IgE水平。【结果】ELISA法检测血清中A、B、C组小鼠总IgE水平分别为（61.79±25.79）、（437.08±75.68）、（251.64±107.27）ng/ml。与B组相比较,C组小鼠总IgE水平降低（P〈0.05）;肺泡灌洗液中A、B、C三组小鼠总IgE水平分别为（43.70±29.49）、（387.49±148.32）、（102.50±49.55）ng/ml。与B组相比较,C组小鼠总IgE水平降低（P〈0.05）。【结论】旋毛虫感染具有降低过敏性哮喘小鼠总IgE水平的作用。     

旋毛虫感染对过敏性哮喘模型小鼠干扰素-γ、白细胞介素4及白细胞介素5水平的影响

目的通过观察感染旋毛虫小鼠并发过敏性哮喘后血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素5(IL-5)水平的变化,探讨旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠的影响。方法随机将15只雌性BALA/c小鼠分为空白对照组(A组)、单纯过敏性哮喘组(B组)及感染旋毛虫后并发哮喘组(C组)各5只,建立单纯过敏性哮喘模型和感染旋毛虫后过敏性哮喘模型,取小鼠血清和BALF,采用酶联免疫吸附法进行检测,比较3组之间IFN-γ、IL-4及IL-5的差异。结果与A组比较,B组血清及BALF中的IFN-γ水平差异无统计学意义(P>0.05),IL-4、IL-5水平显著升高(P<0.05);而C组血清及BALF中的IFN-γ水平较A组显著升高(P<0.05),IL-4、IL-5水平差异无统计学意义(P>0.05)。C组与B组比较,血清及BALF中IFN-γ水平差异无统计学意义(P>0.05),而IL-4、IL-5水平显著降低(P<0.05)。结论旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠血清及BALF中IL-4、IL-5的表达有抑制作用,对IFN-γ无影响。     

哮喘大鼠模型血清IL-12及IL-18的变化及相关性研究

目的：探讨哮喘大鼠模型血清中自细胞介素-12（IL-12）与白细胞介素-18（IL-18）之间的关系及其在气道炎症发生中的机制．方法：48只Wistar大鼠随机分为3组,分别为正常对照组、哮喘组、地塞米松干预组,用卵白蛋白（OVA）腹腔注射致敏,雾化吸入OVA激发制备大鼠哮喘模型,对照组用生理盐水代替OVA,地塞米松干预组每次雾化前经腹腔注射地塞米松．雾化激发后24h取各组肺泡灌洗液进行嗜酸性细胞计数,并用ELISA方法测定血清IL-12,IL-18的水平,分析二者相关性．结果：哮喘组、地塞米松组和对照组血清IL-12水平分别为（53．1±9．6）ng／L,（82．4±8．1）ng／L和（140．1±13．4）ng／L,与哮喘组比较,地塞米松组血清IL-12水平显著升高,但低于对照组（P〈0．01）．三组血清IL-18水平分别为（353．5±11．9）ng／L,（250．6±8．4）ng／L和（100．5±12．7）ng／L,哮喘组与地塞米松组显著高于对照组（P〈0．01）．肺泡灌洗液中嗜酸性细胞数（49．3±4．0）×10^5／L,（31．9±3．6）×10^5／L和（14．8±4．1）×10^5／L,哮喘组与地塞米松组显著高于对照组．哮喘组血清IL-12,IL-18水平分别与肺泡灌洗液中EOS数量进行两两相关分析,显示IL—12与肺泡灌洗液EOS呈负相关（r=-0．746,P〈0．01）,而IL—18与肺泡灌洗液EOS呈正相关（r=0．682,P〈0．01）．结论：IL-12与IL-18可能共同参与哮喘气道炎症发病过程,并且两者的作用相互拮抗．     

哮喘小鼠模型中小鼠外周血IL-18水平与肺中嗜酸性粒细胞测定

目的测定哮喘小鼠外周血IL-18水平与哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数量。方法24只BALB／C鼠随机分为两组，B组小鼠腹膜注射OVA抗原3次后给予雾化OVA抗原激发哮喘。末次激发后24h处死小鼠。ELISA法测定哮喘小鼠外向血IL-18水平，获取哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液，细胞计数板法与组织染色法测定支气管肺泡灌洗液中白细胞总数与嗜酸性粒细胞数量。结果哮喘小鼠外周血IL-18升高，且与生理盐水对照组差异有显著性（P〈0．01）。哮喘组小鼠肺支气管肺泡灌洗液（BALF）白细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比与生理盐水对照组相比差异均有显著性（P〈0．01）。结论IL-18可能参与哮喘的病理反应。     

IL-27对哮喘小鼠血清IgE的影响

目的研究IL-27对卵白蛋白（OVA）激发哮喘小鼠血清IgE的影响。方法 24 只雌性BALB/c小鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及IL-27组,每组8只。应用OVA建立哮喘模型,IL-27组小鼠应用1 μg IL-27（溶于 50 μl PBS中）滴鼻给药,ELISA法测定小鼠血清IL-4和 IFN-γ 浓度,荧光酶标法测定小鼠血清总IgE和OVA特异性IgE浓度;计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸粒细胞数量。结果 IL-27 组小鼠血清IL-4浓度为（45.6±10.1）μg/L,明显低于哮喘组的（79.3±14.8）μg/L（P 〈 0.05）;IL-27 组小鼠血清IFN-γ浓度为（63.8±11.5）μg/L,明显高于哮喘组的（25.7±8.2）μg/L（P 〈 0.05）;IL-27组小鼠血清总IgE和OVA特异性IgE浓度分别为（2.77±0.51）KU/L、（0.48±0.09）KU/L,均明显低于哮喘组的（5.88±0.86）KU/L、（1.89±0.15）KU/L（P均〈0.05）;IL-27组小鼠 BALF中嗜酸粒细胞数量为（2.21±0.33）×107/L,明显低于哮喘组的（12.82 ± 2.17）×107/L（P 〈 0.01）。结论 IL-27可能通过促进IFN-γ合成、抑制IL-4合成,降低哮喘小鼠血清总IgE和OVA特异性IgE浓度,降低BALF中嗜酸粒细胞数量。     

IL-27在博来霉素诱导肺纤维化模型中的保护作用

［摘要］目的　探讨IL-27在博来霉素诱导肺纤维化模型中的作用．方法　将80只C57BL/6小鼠随机分为正常组（A组）、BLM模型组（B组）、BLM＋IL-27组（C组）、BLM＋抗IL-27组（D组）,每组各20只．观察A、B组小鼠肺组织IL-27、IL-27R mRNA表达．各组分别于7 d、28 d各处死小鼠5只,获取肺组织,病理学方法观察各组小鼠肺组织肺泡炎症和肺纤维化程度,测定肺组织羟脯氨酸含量,观察各组小鼠生存情况．结果（1）IL-27、IL-27R mRNA在肺纤维化形成中明显升高（P＜0.05）;（2）病理结果提示:7 d D组肺泡炎和肺纤维化程度最重,C组最轻（P＜0.05）;28 d D组肺纤维化程度较B组加重, C组最轻（P＜0.05）;（3）羟脯氨酸含量变化:7 d,28 dD组肺组织羟脯氨酸含量最高,C组含量最少（P＜0.05）;（4）各组小鼠在28 d时A组无小鼠死亡,C组死亡率低于B组,D组死亡率高于B组（P＜0.05）．结论　IL-27抑制博来霉素诱导肺纤维化的形成,提高了小鼠的生存率．     

哮喘小鼠模型肺组织、肺泡灌洗液中TNF-α及 IL-12水平比较

目的：观察支气管哮喘小鼠模型肺泡灌洗液（ BALF）中TNF-α,IL-12水平,了解两者的水平及诊断价值。方法40只雌性Balb/C小鼠,随机分成2组：A正常对照组、B支气管哮喘模型组,每组各20只。采用卵蛋白（ OVA）等致敏支气管哮喘模型组;第21天后,哮喘模型组1％卵蛋白溶液雾化吸入,雾化时间共5周,对照组用生理盐水雾化吸入。分别观察两组哮喘发作症状、ELISA检测肺泡灌洗液中TNF-α,IL-12的水平。结果支气管哮喘模型组肺泡灌洗液中TNF-α显著升高,IL-12降低,且IL-12与TNF-α呈密切负相关（ r＝-0．964,P＜0．01）。结论哮喘的发生发展不仅与炎症介质TNF-α的异常释放增多有关,还与内源性的抗炎介质IL-12的释放不足有关,而且IL-12能够抑制TNF-α的合成。     

儿童哮喘肺泡灌洗液IL-25变化及布地奈德对其的调节作用

目的 观察儿童哮喘肺泡灌洗液IL-25变化及布地奈德对其的调节作用.方法 选择哮喘急性发作患儿90例,随机分为A、B、C组,每组30例,对照组30例为同期行支气管镜检查的健康儿童.A组给予常规治疗,并予生理盐水雾化治疗4周,B、C组在常规治疗基础上予布地奈德1 mg雾化吸入每日2次,疗程分别为4周、8周.比较治疗前后肺泡灌洗液IL-25变化及与FEV1和EOS相关性.结果 治疗前A、B、C组IL-25水平分别为（9.13＆#177;1.33）pg/ml、（9.63 ＆#177;2.91） pg/ml、（8.80＆#177;2.17） pg/ml,差别无统计学意义（P＞0.05）,与对照组（1.21＆#177;0.63） pg/ml比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;治疗后A、B、C组IL-25水平分别为（7.40＆#177;1.83） pg/ml、（5.97＆#177;1.85） pg/ml、（3.53＆#177;1.57） pg/ml,差别有统计学意义（P＜0.01）.支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-25浓度与FEV1和EOS呈明显相关（r=0.832,0.878;P＜0.01）.结论 治疗前后肺泡灌洗液IL-25水平变化显著,布地奈德能降低哮喘儿童BALF中IL-25水平.     

不同亚型哮喘患儿的IL-5、IL-17水平变化

目的探讨白细胞介素-5（IL-5）、IL-17在不同亚型中重度儿童哮喘发病中的作用。方法以酶联免疫吸附法（ELISA）检测45例不同亚型中重度哮喘患儿及20例正常儿童外周血单个核细胞（PBMC）在CD3单克隆抗体（0．2mg／L）及CD28单克隆抗体（1mg/L）刺激下分泌的IL-5、IL-17水平,了解IL-5、IL—17与儿童哮喘病情及气道炎症的关系。结果嗜酸细胞型哮喘（EA）组患儿PBMC表达IL－5水平（79．75±13．49）pg／ml显著高于非嗜酸细胞型哮喘（NEA）组（69．73±9．17）pg／ml及正常对照组（51．30±14．33）pg／ml（P〈0．01）,NEA组患儿PBMC表达IL-17水平（5684．1±884．74）pg／ml显著高于EA组（4938．1±465．58）pg／ml及正常对照组（2685．0±1081．03）pg／ml（P〈0．01）,慢性持续组IL-5、IL-17水平显著高于临床缓解组（P均〈0．05）。结论中重度哮喘患儿外周血单个核细胞IL-5、IL－17表达水平升高,并与临床分期相关,IL-5在EA中的作用较NEA更为突出,IL-17在NEA中的作用较EA更为突出。     

哮喘患儿血清IL-18水平测定的临床意义

目的探讨IL-18水平在婴幼儿哮喘中的变化和意义。方法采用双抗体夹心ELISA法检测30例哮喘患儿和20例健康对照组患儿血清中IL-18、IL-4和INF-γ的含量,并对检验结果进行统计学处理。结果与对照组相比,哮喘患儿血清中IL-18和INF-γ的含量明显增高（IL-18：202.61±72.30与154.49±48.50 ng/L,P〈0.01;INF-γ：64.36±25.72与43.29±22.24 ng/L,P〈0.01）,IL-4的含量降低（206.20±88.66与228.38±81.79 ng/L）,但差异无显著性（P〉0.05）。结论婴幼儿中哮喘患儿血清IL-18表达增高,可能参与了哮喘的病理过程。     

姜黄素对哮喘大鼠IL-5、Eotaxin 水平及NF-κB表达的影响

目的 探讨姜黄素对支气管哮喘（简称哮喘）大鼠血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-5 及肺组织中 Eotaxin、NF-κB表达的影响.方法 将36只大鼠随机分为正常对照组、哮喘组、姜黄素组,用卵白蛋白（OVA）制备哮喘大鼠模型,正常对照组用0.9%氯化钠溶液代替OVA进行致敏和激发.以ELISA法检测各组大鼠血清及BALF中IL-5的浓度以及计数BALF中嗜酸细胞（EOS）的绝对值及百分比,同时以免疫组化方法检测Eotaxin、NF-κB等在肺组织中的表达.结果 血清及BALF中IL-5浓度的改变与NF-κBp65、Eotaxin蛋白表达的改变：哮喘组及姜黄素组均显著高于正常对照组（P＜0.01）,姜黄素组显著低于哮喘组（P＜0.01）.肺组织细胞NF-κB p65的表达与EOS绝对计数、IL-5的表达及Eotaxin的表达均呈显著正相关（r=0.928、0.905、0.850,均P＜0.01）.结论 姜黄素能抑制NF-κB的活性,通过抑制NF-κB向核内转移与DNA的结合而减少IL-5及Eotaxin的合成,从而发挥抗哮喘作用.     

变应性鼻炎和哮喘患者血清IL-33及IL-5水平的研究

目的探讨IL-33和IL-5在变应性鼻炎（AR）、支气管哮喘（BA）以及AR合并BA中的作用。方法采用双抗体夹心ELISA法测定43例AR患者（AR组）、41例BA患者（BA组）、39例AR合并BA患者（合并组）及40例正常健康体检者（对照组）血清中的IL-33和IL-5水平。结果与对照组比较,其他各组患者血清IL-33和IL-5水平均明显升高（均P〈0．05）;与BAN比较,AR组及合并组血清IL-33和IL-5水平明显升高（均P〈0．05）;与AR组比较,合并组血清IL-33和IL-5水平明显升高（均P〈0．05）。血清中IL-33水平与IL-5水平呈直线性正相关（P〈0．05）。结论IL-33和IL-5参与了AR和BA的发病过程。     

五虎汤对哮喘婴幼儿DC刺激T淋巴细胞分泌IL-4、IL-5的影响

目的观察五虎汤对哮喘婴幼儿DC刺激T淋巴细胞分泌IL-4、IL-5的影响。方法将60例哮喘婴幼儿随机分为五虎汤治疗组和西药对照组（分别简称治疗组,对照组）各30例。另选健康婴幼儿10例。以Thomas法分离、培养并诱导治疗组及对照组哮喘婴幼儿和健康婴幼儿外周血DC细胞,并与健康儿童的T淋巴细胞共同培养后,采用酶联免疫双抗体夹心法（ELISA）检测各组患儿血清中104、IL-5浓度。结果婴幼儿哮喘患儿DC刺激T淋巴细胞分泌IL4、IL-5较健康组显著升高,差异具有统计学意义（p〈0．01）;五虎汤治疗后IL-4、IL-5均较治疗前显著降低,差异具有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）,且治疗组下降幅度均较对照组显著,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论五虎汤具有抑制哮喘患儿Th2类细胞因子IL-4、IL-5的产生,从而调节Th1/Th2的失衡。     

重症肺炎患者血清和支气管肺泡灌洗液中IL-6和IL—10检测及其临床意义

目的探讨促炎因子IL-6和抑炎因子IL-10在重症肺炎的临床意义。方法用放免法检测重症肺炎组和无感染患者组（对照组）血清和支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）中IL-6和IL-10水平。结果重症肺炎患者血清和BALF中IL-6均高于对照组（t=3.410，t=4．754，P值均〈0.05），并且IL-6在BALF中显著高于血清中水平（t=2.051，P〈0.05）。单侧重症肺炎患者感染侧BALF中的IL-6和IL-10显著高于非感染侧（t=2.427，t=3.055，P值均〈0.05）。血清IL-6和IL-10都各自与BALF中IL-6和IL-10有明显相关性（相关系数为r=0.554和r=0.378）。结论IL-6和IL-10均参与了重症肺炎患者局部和系统中的炎症反应。     

黄芪对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及IL-4IFN-γIL-10的影响

目的探讨黄芪对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及IL-4、IFN-γI、L-10的影响。方法将BALB/c小鼠30只随机分为对照组、哮喘组和黄芪组。以卵蛋白（OVA）致敏激发法制备小鼠哮喘模型。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ、IL-10及血清中IL-10的含量;流式细胞术（FCM）、反转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测小鼠脾脏中CD4＋CD25＋调节性T细胞数量及FoxP3 mRNA表达情况。结果哮喘组小鼠BALF中IL-4含量明显高于对照组（P〈0.01）而低于黄芪组（P〈0.01）。与对照组相比,哮喘组小鼠BALF中IFN-γI、L-10、血清中IL-10含量及脾脏中CD4＋CD25＋调节性T细胞数量、FoxP3 mRNA表达水平明显降低（P〈0.01）;而黄芪组的上述改变较哮喘组显著增加（P〈0.05）。结论 CD4^＋CD25^＋调节性T细胞参与了支气管哮喘的发病过程,黄芪可通过上调CD4^＋CD25^＋调节性T细胞、FoxP3 mRNA的表达及增加IL-10含量减轻哮喘炎症。     

旋毛虫感染小鼠IL-4、IL-5的表达及嗜酸性粒细胞体外杀伤旋毛虫肌幼虫的实验观察

【目的】探讨感染旋毛虫小鼠嗜酸性粒细胞（Eosinophil,Eos）在体外对旋毛虫肌幼虫的杀伤作用及脾细胞中IL-4和IL-5的表达。【方法】制作旋毛虫感染小鼠模型,采用体外培养法,按分组设计在96孔细胞培养板的板孔中加入感染旋毛虫小鼠外周血提取的Eos、旋毛虫肌幼虫、血清（对照血清或经不同条件处理的血清）及含有10%灭活小牛血清的PRMI1640培养液,连续培养2d。显微镜下,在12、24、48h等时相观察小鼠Eos对旋毛虫肌幼虫的影响;用RT-PCR方法检测感染旋毛虫小鼠脾脏中IL-4、IL-5的mRNA含量,观察这两种细胞因子的表达情况。【结果】在体外培养的条件下,单纯Eos对旋毛虫肌幼虫无杀伤作用,在免疫血清参与下,Eos对幼虫的杀伤作用明显增强,在灭活IgE前后,Eos的杀伤作用明显改变,在灭活补体和IgE后Eos的杀伤作用明显减弱,与单纯Eos的情况无差别。感染组小鼠脾脏中IL-4和IL-5mRNA的含量均明显高于对照组。【结论】Eos对旋毛虫肌幼虫杀伤的过程需要免疫血清的参与,且IgE是Eos发挥ADCC效应所依赖的重要免疫球蛋白,IgG可能在Eos发挥ADCC效应的过程中并没有明显作用。感染旋毛虫小鼠脾脏细胞IL-4和IL-5表达量明显升高。