儿科痰培养肺炎链球菌耐药分析

目的 探讨儿科患者下呼吸道感染肺炎链球菌ermB、mefE基因介导的红霉素耐药和克林霉素诱导耐药状况.方法 对1012份儿科送检筛选后的合格痰进行针对性细菌培养,对耐红霉素肺炎链球菌用克林霉素纸片法检测ermB和mefE基因,肺炎链球菌的药敏用ATB STREP.结果 检出肺炎链球菌252株,有33株肺炎链球菌对红霉素耐药,其中ermB基因介导的红霉素耐药菌株21株,占63.6%,mefE基因介导的红霉素耐药菌株12株,占36.4%.结论 对红霉素耐药的肺炎链球菌,其耐药机制以ermB基因介导为主,ermB基因介导的耐药水平高于merE基因介导的耐药水平.     

肺炎链球菌介导大环内酯类及四环素双重耐药性相关元件的研究

目的研究介导肺炎链球菌临床分离株耐大环内酯和四环素药物的基因元件特点。方法 48株耐红霉素肺炎链球菌以PCR检测大环内酯类耐药基因ermB、ermTR、mef与四环素耐药基因tetM及转座子家族Tn916整合酶int,聚合酶链式反应-限制片段长度多态性(RFLP)鉴定mefA和mefE。结果全部菌株均未发现ermTR和mefA基因,48株耐红霉素肺炎链球菌中,仅1株(2.1%)未检出ermB和mefE基因,其余47株均检出ermB和(或)mefE基因,其中ermB 50.0%,ermB+mefE为45.8%及mefE 2.1%;ermB和mefE基因在耐药株中的阳性率分别是95.8%和47.9%;48株肺炎链球菌均检出tetM,int在46株肺炎链球菌中检出占95.8%;45株(93.7%)肺炎链球菌同时存在int、四环素抗性基因和红霉素抗性基因,其中int+tetM+ermB为47.9%,int+tetM+ermB+mefE为45.8%。结论 ermB编码23S rRN(A)甲基化酶致靶位改变是肺炎链球菌对大环内酯药物耐药的主要机制,其次是mefE基因表达主动外排系统导致对大环内酯药物耐药,接合性转座子家族Tn916可能是介导肺炎链球菌对大环内酯类药物、四环素等药物耐药的重要机制之一,并在选择压力下导致耐药菌的广泛传播。     

儿童肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的耐药性及相关基因研究

目的:研究介导肺炎链球菌临床分离株耐大环内酯类药物的相关基因。方法:选自儿童感染的32株耐红霉素肺炎链球菌,以PCR检测大环内酯类耐药基因ermB、mefA、mefE。结果:32株肺炎链球菌耐药基因ermB占93.7%,mefE占6.3%,未检出mefA。结论:ermB编码23SrRNA甲基化酶致靶位改变是肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药的主要机制,大环内酯类抗生素已不是治疗肺炎链球菌的有效药物。     

围产期孕妇感染B族链球菌耐药性及相关耐药基因检测

目的:调查孕晚期妇女感染B族链球菌(GBS)耐药性以及相关大环内酯类耐药基因的表达情况。方法:K-B纸片扩散法检测GBS对红霉素和克林霉素的耐药性,再以D试验检测克林霉素诱导耐药表型。红霉素和克林霉素耐药基因用PCR方法检测。结果:未发现万古霉素、头孢哌酮/舒巴坦、头孢克肟耐药菌株,红霉素、克林霉素、四环素、氯霉素的耐药率依次为74.19%、58.06%、77.2%、35.48%。青霉素有1例中介、1例耐药。ermB基因为主要的红霉素耐药基因,占51.61%。两种erm基因同时阳性占16.13%,有1株含ermB基因,但对红霉素敏感。所有的红霉素耐药菌株中未检出ermA、ermC基因。结论:青霉素仍可作为预防和治疗GBS感染的首选药物,红霉素和克林霉素作为替代药物表现出较高的耐药性和交叉耐药。ermB编码的核糖体修饰是导致大环内酯类耐药的主要机制。因此临床医生针对青霉素过敏,大环内酯类耐药的患者应及时根据药敏合理选择抗生素,避免重复选择大环内酯-林可霉素-链阳霉素B(MLSB)类抗菌药物,减少耐药菌株的产生。     

儿童感染肺炎链球菌耐药性及其耐药基因分型

目的探讨儿童感染肺炎链球菌(streptococcus pneumoniae,SPN)对常用抗菌药物的耐药性及其耐药基因分布。方法选择2013年1月—2015年12月收治的206例感染SPN患儿,进行抗生素药敏试验并应用聚合酶链反应技术检测SPN耐药基因。计数资料比较均采用Z检验,P0.05为差异有统计学意义。结果 SPN对红霉素的耐药率最高,耐药率为95.6%;对四环素和克林霉素的耐药率分别为84.5%、87.4%;所有菌株对万古霉素和利奈唑胺敏感。197株红霉素耐药株中,耐药基因以携带ermB基因84.8%为主,携带mefE基因和mefA基因分别为44.7%、6.1%,其中22.8%携带ermB基因和mefE基因,5.1%携带ermB基因和mefA基因。结论儿童感染的SPN对大环内酯类抗生素耐药率较高;耐药基因以ermB基因介导的靶位改变为最常见,ermB基因、mefE基因和mefA基因三者单独或共同表达均可致SPN红霉素耐药。     

95株小儿呼吸道感染肺炎链球菌的耐药性研究

目的:分析本院儿科患者下呼吸道感染肺炎链球菌的耐药情况,指导临床合理用药。方法:对本院2007年9月～2009年12月从儿科分离的95株肺炎链球菌用K-B纸片法检测其对青霉素等5种抗生素的敏感度,对耐苯唑西林的菌株用E-test法检测青霉素和头孢曲松的MIC值。结果:95株肺炎链球菌对红霉素、克林霉素高度耐药,耐药率分别为97.9%,96.8%,对左氧氟沙星几乎敏感,未检出耐万古霉素菌株。75株耐苯唑西林菌株用E-test法测试青霉素不敏感率为58.9%(56株),头孢曲松敏感率为98.7%(74株)。ermB基因介导的红霉素耐药菌株92株,占98.9%,mefE基因介导的红霉素耐药仅1株(1.1%)。结论:我院分离的肺炎链球菌耐药严重,PNSP检出率较高(58.9%),对红霉素、克林霉素高度耐药,临床应尽量减少此类药物的经验性用药,依据药敏结果选择抗菌药物进行治疗。     

深圳地区B族链球菌耐药基因流行研究

目的了解深圳地区B族链球菌(GBS)的耐药性及耐药基因流行情况,为临床合理用药提供依据。方法选取2012-2015年医院门诊及住院患者3 523例标本分离获得的B族链球菌339株,采用K-B法进行药敏试验,用PCR检测菌株耐药基因ermA、ermB、ermC、ermM、ermTR、mefA、mefE、PbpX;采用WHONET5.6软件进行抗菌药物敏感性分析,采用SPSS17.0软件进行统计学比较分析。结果 GBS在临床标本分离率为9.62%,339株GBS对红霉素、克林霉素、左氧氟沙星和氯霉素的耐药率分别为69.71%、64.86%、40.10%和22.84%,且2012-2015年耐药率逐年上升;对青霉素G、氨苄西林、头孢吡肟、头孢曲松耐药率较低,近2年出现耐药菌株,未见头孢噻肟、利奈唑胺和万古霉素耐药菌株;检出耐药基因主要为ermB,其次是mefE、mefA和ermTR,少数菌株检出ermA、ermM、ermC、PbpX;ermA、ermTR、mefA的阳性率逐年上升。结论青霉素类和头孢菌素类抗菌药物是治疗GBS首选,近2年出现少量耐药菌株;大环内酯类抗菌药物耐药率逐年上升,同时检出的耐药基因增多,应引起医师高度重视。     

肺炎链球菌对大环内酯类的耐药机制研究

目的 探讨台州医院肺炎链球菌临床分离株的耐药性及对红霉素的耐药机制,为临床用药提供依据.方法 收集临床分离的肺炎链球菌31株,运用K-B纸片法及VITEK细菌鉴定仪检测其对抗菌药物的药敏谱;通过纸片法筛选对大环内酯类抗菌药物(红霉素)的耐药表型,PCR扩增红霉素耐药基因:ermB、mefA,并送测序鉴定.结果 K-B法纸片药敏结果显示,肺炎链球菌临床分离株主要对红霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶和四环素耐药,耐药率分别为:100.0％、64.5％、32.2％;未发现有对青霉素、万古霉素及替考拉宁耐药的菌株;31株肺炎链球菌临床分离株耐药表型均为组成型耐药;31株红霉素耐药菌株的基因均为ermB(+)/mefA(+),测序结果正确.结论 台州医院肺炎链球菌临床分离株对红霉素耐药率高,erm基因介导的靶修饰作用和mef基因介导的外排泵机制的共同作用,是主要的耐药机制.     

肺炎链球菌Tn1545及Tn917对大环内酯耐药性研究

目的 探讨儿童临床标本中分离的肺炎链球菌耐药特性及ermB基因与转座子Tn1545和Tn917的相互关系.方法 采用E-test法对临床分离的102株肺炎链球菌进行8种抗菌药物的敏感性试验,用PCR扩增检测肺炎链球菌耐药基因ermB和Tn1545、Tn917基因.结果 102株临床分离的肺炎链球菌对红霉素的耐药率为80.3％,中介率为13.7％; ermB基因总检出率为95.1％,84株ermB基因阳性菌株中Tn1545的检出率为86.9％,Tn917的检出率为16.9％;其中,9.5％的ermB基因型菌株检出于Tn1545和Tn917,77.4％的ermB基因型菌株检出Tn1545,7.1％的ermB基因型菌株检出Tn917.结论 肺炎链球菌主要通过ermB基因介导对大环内酯类抗菌药物的耐药性,而ermB基因则主要通过接合转座子Tn1545携带,因此,Tn1545可能在肺炎链球菌耐药基因的播散中起重要作用.     

诱导克林霉素耐药的肺炎链球菌临床分离情况调查

目的调查临床分离的肺炎链球菌对红霉素和克林霉素敏感性及诱导性克林霉素耐药(D-试验阳性)的发生率,以指导临床合理使用抗菌药物。方法选择2016年4月-2017年5月医院住院患者的临床标本中分离的70株肺炎链球菌,肺炎链球菌的鉴定以OP纸片筛查,并采用VITEK-2Compact全自动细菌鉴定仪进行鉴定,D-试验采用美国临床实验室标准化委员会(Clinical and Laboratory standards Institute,CLSI)(2016版)推荐的纸片扩散法,按照其标准进行结果解释。结果 70株肺炎链球菌中红霉素耐药66株占94.3%,克林霉素耐药58株占82.9%;红霉素和克林霉素均耐药58株占82.9%;红霉素耐药而克林霉素敏感8株占11.4%;D-试验阳性占所检测肺炎链球菌的8.6%(6/70),占红霉素耐药而克林霉素敏感肺炎链球菌的75.0%(6/8)。结论分离的肺炎链球菌对红霉素和克林霉素产生了较高耐药率;同时诱导型耐药(iMLS)在临床分离株中较为常见,临床实验室应加强对肺炎链球菌D-试验的检测以指导临床正确使用克林霉素。     

新生儿肺炎链球菌分离株对红霉素耐药性与耐药相关基因研究

目的了解新生儿肺炎链球菌(SPN)临床分离株对红霉素耐药状况和红霉素耐药基因. 方法对2003年12月～2004年5月从常州市妇幼保健院新生儿病房呼吸道感染患者中分离到的20株SPN,用K-B法进行了红霉素药物敏感试验,用PCR检测了与红霉素耐药相关的红霉素核糖体甲基化酶基因(erm)、主动外排转运基因(mefA). 结果 20株SPN红霉素药敏试验17株耐药(85%),3株敏感;erm基因PCR检出20株阳性(100%)、mefA 基因PCR检出17株阳性(85.0%). 结论本地区SPN中因存在红霉素核糖体甲基化酶基因,红霉素主动外排转运体而致红霉素耐药;本研究20株肺炎链球菌erm 或(和)mefA基因阳性率高达100%,红霉素药敏试验与耐药基因检测均提示红霉素已不是治疗新生儿SPN感染的有效药物.     

肺炎链球菌耐药性监测分析

目的研究肺炎链球菌的药敏性,为肺炎链球菌感染的治疗提供依据。方法对本院2004年4月至2005年10月临床标本分离的肺炎链球菌进行药敏试验分析。结果共检出肺炎链球菌104株,药敏结果显示,对不同抗菌药物的耐药性从7.7%到94.2%不等。结论近年来本地区肺炎链球菌的耐药率呈上升趋势,应引起重视。     

123株肺炎链球菌血清分型及耐药性研究

目的了解成都地区123株肺炎链球菌(Streptococcus Pneumoniae,S.p)对常用抗菌药物的耐药性及血清分型。方法用Kirby-Bauer纸片扩散法测定S.p对6种抗菌药物的敏感性,用荚膜肿胀试验进行血清分型。结果123株S.p中,耐阿奇霉素发生率为100%;对米诺环素、复方新诺明、氯霉素、利福平、氧氟沙星的耐药率分别为65.04%、78.05%、19.51%、0.81%、0;血清分型共涉及11个血清型/群,主要集中在19、6、14、15、23血清群,5株S.p未能分型,多重耐药菌株分布在6、19血清群。结论S.p耐药严重,且大多数菌株呈多重耐药趋势;血清分型居前6位的是19F、6、14、15B/C、23F、19A,尤其是多重耐药株以6、19血清群为主。     

老年人肺炎克雷伯菌耐药性和β-内酰胺酶基因分析

目的分析老年人肺炎克雷伯菌的耐药谱及其携带的β-内酰胺酶基因。方法抗菌药物敏感试验采用微量肉汤稀释法测定临床分离的肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药性，采用PCR法检测pβ-内酰胺酶耐药基因型。结果20株肺炎克雷伯菌对阿莫西林、替卡西林、哌拉西林、头孢噻吩、头孢他啶、头孢吡肟的耐药率均为100％，复方阿莫西林60％、头孢西丁40％、复方哌拉西林30％。PCR扩增后有19株均发现有产酶基因，阳性率为95％，最多的一株有4种基因。基因型主要是TEM型，20株中有19株为TEM型，少数为CTX—M型。结论肺炎克雷伯菌株大多携带β-内酰胺酶耐药基因，其对β-内酰胺类的高耐药率与TEM型基因有关。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因分型及药敏试验结果分析

目的 了解本地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。方法 用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌64株，用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)，分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应(PCR)，并对结果进行分析。结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高(100％)；其次为头孢吡肟(84．4％)，哌拉西林／他唑巴坦和环丙沙星的敏感率则分别为71．9％和70．3％。PCR扩增结果显示SHV、CTX-M和TEM基因的阳性率分别为81．3％、65．6％和18．8％；53．1％的菌株同时携带多个基因。结论 该院医院感染产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高；最常见的基因型是SHV，其次为CTX-M。     

新生儿脐炎病原菌分布与耐药性分析

目的了解新生儿脐炎病原菌和耐药情况,以利于临床选用抗菌药物。方法采用ATB Expression系统鉴定病原菌及药敏试验。结果153份脐分泌物标本,分离出病原菌136株,阳性率88.9%,依次为金黄色葡萄球菌(26.5%)、表皮葡萄球菌(16.2%)、溶血葡萄球菌(13.2%)、肺炎克雷伯菌(13.2%)、大肠埃希菌(9.6%);哌拉西林/他唑巴坦、万古霉素、美罗培南和亚胺培南平均耐药率<2.0%,耐苯唑西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占13.9%,耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)占73.2%,超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为21.4%、44.4%。结论新生儿脐炎的病原菌主要为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等,临床医生在用药时需结合药敏结果,加强新生儿护理知识的宣传,有效降低新生儿脐炎。     

头孢地尼等5种抗菌药物对肺炎链球菌的体外抗菌活性研究

目的评价头孢地尼等5种抗菌药物对95株肺炎链球菌的体外抗菌活性. 方法根据NCCLs标准,应用微量肉汤稀释法测定5种抗菌药物对95株肺炎链球菌的最低抑菌浓度(MIC). 结果对青霉素敏感的肺炎链球菌对头孢地尼敏感性最高,为100.00%,其次为加替沙星、左氧沙星,对环丙沙星敏感率仅为70.32%;对青霉素不敏感的肺炎链球菌(包括PISP和PSSP)对加替沙星敏感性最高,>90%,其次为左氧氟沙星,对头孢克洛和环丙沙星敏感率较低,分别为61.55%、46.38%. 结论头孢地尼是一对肺炎链球菌抗菌作用较强的第三代头孢菌素,对肺炎链球菌引起的感染具有较高的临床应用价值,新喹诺酮类药物对于肺炎链球菌(包括PSSP、PISP和PRSP)均显示了很高的敏感性,也可作为治疗肺炎链球菌感染的首选药物.     

医院感染肺炎克雷伯菌连续6年耐药性监测研究

目的 观察和监测医院感染肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药变化及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的发生率。方法 连续检测1999-2004年医院感染肺炎克雷伯菌的耐药状况,药敏试验采用K-B纸片法,结果判定依据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）标准。结果 肺炎克雷伯菌对亚胺培南全部敏感,头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦对肺炎克雷伯菌亦有很好的抗菌活性,对其他抗菌药物耐药率有逐年升高趋势,ESBLs总阳性率为20.2%。结论 及时总结医院感染肺炎克雷伯菌的耐药菌变迁规律,具有十分重要的临床意义。     

临床细菌耐药分析及耐药酶的检测

目的监测本地区2000-2006年临床细菌的构成分布及耐药性,并检测其是否产耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRS)、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。方法MicroSCANAUTOSCAN4半自动鉴定药敏仪对送检标本进行菌种鉴定和药敏试验,琼脂筛选法检测MRS、MRCNS,K-B纸片扩散法检测ESBLs,比较产酶株与非产酶株对抗菌药物的活性。结果8448份临床标本检出各种细菌2436株,检出率为28.84%,种类以革兰阴性杆菌为主,占45.26%,最常检出的细菌依次为大肠埃希菌、CNS(-)葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、肠球菌属、金黄色葡萄球菌,MRS、MRCNS、ESBLs检出率高,耐药性强,耐药谱广。结论临床分离菌以条件致病菌为主,耐药株分离高,建议临床医生根据药敏试验合理用药,以减少耐药菌株产生。