金属蛋白酶抑制基因RECK在食管鳞癌中的表达及生物学意义

目的: 研究RECK基因在食管鳞癌组织中的表达情况及其与食管鳞癌发生、发展的关系.方法:?2006-02-26/2006-03-16河南省安阳市肿瘤医院食管癌手术切除标本62例, 所有病例术前均无化疗、放疗及免疫治疗史. 全部病理组织学证实均为鳞状细胞癌. 全部样本分别在癌灶、癌旁3 cm以内及远端正常黏膜组织分别取材62、31和62例. 采用免疫组化SP法和原位杂交方法进行RECK蛋白及mRNA的检测.结果: 食管鳞癌组织中RECK蛋白及mRNA表达均与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关; 在食管鳞癌癌变过程中RECK蛋白及mRNA表达在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次增高, 组间比较有明显差异(RECK蛋白: χ2=10.331, P<0.01; RECK mRNA: χ2 = 19.186, P<0.01); RECK蛋白与mRNA的表达呈正相关关系(r = 0.416, P<0.01).结论:RECK低表达与食管鳞癌的发生、发展有关, RECK可作为食管鳞癌早期诊断的辅助指标.     

TWEAK及其受体Fn14蛋白在食管鳞癌中的表达及临床病理意义

目的:探讨肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TNF-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)及其受体早期反应蛋白14(fibroblast growth factor-inducible 14,Fn14)表达与食管鳞状细胞癌发生、发展及浸润、转移的关系.方法:应用免疫组化法分别检测手术切除的45例食管鳞癌组织、22例癌旁不典型增生组织及22例正常食管黏膜组织中TWEAK及Fn14蛋白表达,并且对二者在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况进行相关性分析.结果:食管鳞癌组织中TWEAK蛋白表达与癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均密切相关(χ2分别为6.455,11.645及4.185,P均<0.05);在食管鳞癌癌变过程中TWEAK蛋白表达在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次增高,分别为27.3%(6/22)、40.9%(9/22)、64.4%(29/45),组间比较差异具有统计学意义(χ2=9.018,P<0.05);Fn14蛋白表达也与癌的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均密切相关(χ2分别为10.873、12.513、9.244及13.137;均P...     

RhoC基因mRNA在食管鳞癌中的表达及其意义

目的:探讨RhoC基因在食管鳞癌组织中的表达情况及其与食管鳞癌发生、发展的关系.方法:采用半定量RT-PCR和原位杂交方法检测62例食管鳞癌、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中RhoC mRNA的相对表达量及细胞定位.结果:食管鳞癌组织中RhoC mRNA表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P <0.05); 在食管鳞癌癌变过程中,RT-PCR检测RhoC mRNA在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达量依次降低, 分别为0.902±0.119、0.731±0.065、0.653±0.069, 组间比较有明显差异(H= 99.629, P <0.01); 原位杂交检测RhoC转录本主要位于细胞质中, 其在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次降低, 分别为80.6%(50/62)、32.3%(10/31)、21.0%(13/62), 组间比较有明显差异(χ2 =47.735, P <0.01), 两种方法检测的RhoC mRNA表达具有一致性.结论:RhoC mRNA在食管鳞癌组织中显著增加, 并与食管鳞癌生物学行为关系密切, 提示RhoC mRNA过表达与食管鳞癌的发生、发展有关, RhoC mRNA可作为食管鳞癌早期诊断和判断预后的辅助指标.     

基质金属蛋白酶-2和-9在食管鳞状细胞癌中的过表达

目的 探讨人食管鳞癌组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、-9的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学法,检测57例食管鳞癌及10例食管正常黏膜石蜡标本中MMP-2、-9蛋白的表达情况.结果 食管鳞癌组织中MMP-2及MMP-9阳性表达率(40.3%,61.4%)显著高于正常组织(0.0%,10.0%)(P＜0.05).食管鳞癌组织中MMP-2及MMP-9阳性表达与淋巴结转移和癌组织浸润深度有显著相关性(P＜0.05),而与患者的性别、年龄和组织分化程度无显著相关性(P＞0.05).结论 MMP-2和MMP-9在食管癌中显著高表达,与食管癌的转移及侵袭有关,其异常表达可能共同参与食管癌的发生、发展过程,检测MMP-2、-9可作为食管癌病理学特点的参考指标.     

食管鳞癌组织中HIF-1 α和IGF-1蛋白的表达及其意义

目的 探讨缺氧诱导因子1-α（HIF-1α）及胰岛素样生长因子-1（IGF-1）蛋白表达与食管鳞癌发生、发展及浸润、转移的关系。方法 应用免疫组化S-P法检测49例食管鳞癌组织、12例原位癌、19例癌旁不典型增生组织及39例正常食管黏膜组织中HIF-1α及IGF-1蛋白的表达。结果 食管鳞癌组织中HIF-1α蛋白表达与肿瘤浸润深度及淋巴结转移密切相关（P均〈0.05）,而与分化程度无关（P〉0.05）;IGF-1蛋白表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移均密切相关（P均〈0.05）;HIF-1α蛋白及IGF-1在癌组织、原位癌、不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次降低;病变黏膜与正常黏膜比较均有显著差异（P均〈0.05）。HIF-1α与IGF-1蛋白表达呈正相关。结论 HIF-1α和IGF-1在食管鳞癌的浸润、转移及黏膜上皮癌变过程中起重要作用,二者联合检测可作为判定食管鳞癌侵袭转移能力的客观指标,对食管鳞癌的预后判断具有重要意义。     

MMP-1、MMP-13在食管鳞癌中的表达及与浸润转移的关系

目的研究食管鳞癌组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-13蛋白的表达情况及其与浸润转移之间的关系。方法应用免疫组织化学Elivision法检测90例食管鳞癌组织、16例重度不典型增生组织及28例正常食管黏膜组织中MMP-1、MMP-13蛋白的蛋白表达情况。结果在食管鳞癌、不典型增生及正常食管黏膜组织中MMP-1蛋白的阳性表达率分别为81.11%(73/90)、81.25%(3/16)和17.86%(5/28),MMP-13蛋白的阳性表达率分别为82.2%(74/90)、25%(4/16)、21.43%(6/28),三者差异有统计学意义(P0.05)。MMP-1、MMP-13蛋白表达与临床分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P0.05)。MMP-1和MMP-13在食管鳞癌中表达呈正相关(r=0.537,P0.05)。结论 MMP-1和MMP-13在食管鳞癌的发生、发展、浸润、转移过程中可能发挥重要作用,可能作为食管癌判断预后的重要标记。     

食管鳞癌组织中S100A4和MMP2蛋白表达与临床病理学特征的关系

目的:探讨食管鳞癌组织和癌旁正常黏膜组织中S100A4和MMP2的表达及其与食管鳞癌临床病理因素之间的关系.方法:应用SP免疫组织化学技术检测100例食管鳞癌及其癌旁正常黏膜组织中S100A4和MMP2蛋白的表达.结果:食管鳞癌组织中S100A4和MMP2蛋白阳性率分别为52.00%和67.00%,明显高于癌旁正常黏膜组织26.00%和3 1.00%(P<0.01).二者在食管鳞癌中的表达呈正相关,且与癌组织的分化程度、浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<0.05).结论:S100A4可能通过对MMP-2蛋白的调控在食管鳞癌的发生、发展及食管鳞癌的早期侵袭转移中起关键作用,有望成为评估食管癌预后的一个新的标志物.     

DAPK mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的:探讨河南省食管癌高发区居民食管鳞癌组织中DAPK mRNA和蛋白的表达特征及意义.方法:应用原位杂交和免疫组织化学法检测50例食管鳞癌组织、17例癌旁不典型增生组织及20例正常食管黏膜组织中DAPK mRNA和蛋白的表达,并分析DAPK表达与临床病理特征的关系.结果:在食管鳞癌癌变过程中DAPK在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中mRNA及蛋白的表达组间比较有明显差异(X2 =14.655,7.998,均P<0.05);不同TNM分级及有无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间DAPKmRNA及蛋白表达差异均有统计学意义(均P<0.05).DAPK mRNA及蛋白食管鳞癌组织中的表达呈正相关关系(γ=0.743,P=0.000).结论:食管鳞癌组织中DAPK mRNA与蛋白表达均降低,其表达降低或者缺失可能与食管鳞癌发生发展有关;检测DAPK mRNA及蛋白的表达有望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.     

神经型钙黏附蛋白的表达对食管鳞癌侵袭和转移的影响

目的:探讨神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)在食管鳞癌组织中的表达及其临床病理意义.以及RNA干扰(RNAi)沉默N-cadherin基因表达对人食管癌细胞系EC9706体外侵袭能力的影响.方法:采用免疫组织化学PV法和RT-PCR检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中N-cadherin蛋白和mRNA的表达.将N-cadherin基因的RNA干扰载体稳定转染至EC9706.通过RT-PCR和Western blotting检测RNAi的效果:运用Transwell体外侵袭实验检测RNAi后细胞侵袭能力的改变.结果:正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中N-cadherin的阳性表达率依次升高,分别为29.0％(18/62)、61.3％(19/31)、75.8％(47/62),组间比较差异有统计学意义(P<0.05);N-cadherin蛋白的阳性表达率与食管鳞癌的浸润深度、分化程度及淋巴结转移密切相关(x2=6.916,6.924,4.486,P<0.05).食管鳞状细胞癌组织中N-cadherinmRNA的相对含量高于癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织(0.6631±0.0162 vs0.4613±0.0239,0.1538±0.0192),组间比较差异有统计学意义(x2=819.242,P<0.01).RNAi后EC9706中N-cadherin的表达显著下降;Transwell小室体外侵袭实验显示,EC9706的体外侵袭能力也降低.结论:食管鳞癌组织中N-cadherin的高表达与食管鳞癌的浸润、恶化有密切的关系.RNAi沉默N-cadherin基因表达能够使EC9706体外侵袭能力降低.     

食管鳞癌组织中STAT3蛋白的表达及临床意义

目的 探讨食管鳞癌组织和癌旁正常黏膜组织中信号转导子和转录激活子3（STAT3）的表达及与食管鳞癌发生发展的关系.方法 应用免疫组化SP法检测122例食管鳞癌及其癌旁正常黏膜组织中STAT3蛋白的表达.结果 食管鳞癌组织中STAT3蛋白表达阳性率为89.3%,明显高于癌旁正常黏膜组织的77%（P＜0.05）.Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级食管鳞癌组织中STAT3蛋白的阳性率分别为73.7%、89.5%和100%,Ⅲ级中STAT3蛋白的阳性率显著高于Ⅰ级（P＜0.05）.浸润至深层（深肌层和外膜）的食管鳞癌组织中STAT3蛋白阳性表达率为92.8%,明显高于浸润至浅层（黏膜和浅肌层）食管鳞癌组织的76%（P＜0.05）.STAT3的表达与淋巴结转移无关（P＞0.05）.结论 STAT3蛋白过度表达与食管鳞癌的发生发展及恶性演进有关,STAT3有望成为评估食管癌预后的一个新标志物.     

Correlation of matrix metalloproteinase suppressor genes RECK, VEGF, and CD105 with angiogenesis and biological behavior in esophageal squamous cell carcinoma

AIM： To explore the expression of reversion inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs （RECK）, vascular endothelial growth factor （VEGF） and endoglin （CD105） protein and its correlation with occurrence, development, invasion and metastasis in esophageal squamous cell carcinoma （ESCC）. METHODS： Streptavidin-peroxidase （SP） immunohistochemistry was used to detect expression of RECK and VEGF in 62 cases of ESCC, 31 cases of adjacent atypical hyperplastic epithelium and 62 cases of normal esophageal epithelium. CD105 Mb was used to assess microvessel density （MVD）. RESULTS： The expression of RECK was closely correlated with histological grade, infiltrative depth and lymphatic metastasis in ESCC （P 〈 0.05）. The expression of RECK decreased during cancer development： normal esophageal epithelium （85.5%, 53/62）, adjacent atypical hyperplastic epithelium （71.0%, 22/31）, and carcinoma （59.7%, 37/62）. There was a significant difference among the groups （P 〈 0.05）. The expression of VEGF protein was closely correlated with infiltrative depth and lymphatic metastasis in ESCC （P 〈 0.05）. The expression of VEGF protein increased during cancer development： normal esophageal epithelium （29.0%, 18/62）, adjacent atypical hyperplastic epithelium （54.8%, 17/31）, and carcinoma （67.7%, 42/62）. There was a significant difference among the groups （P 〈 0.05）. MVDCD105 increased in accordance with histological grade, butthere was no significant difference （grade Ⅰ, 36.92 ± 10.85; grade Ⅱ, 37.65 ± 9.50; and grade Ⅲ, 38.06 ± 12.19）. The MVDCD105 was closely correlated with infiltration and lymphatic metastasis in ESCC （P 〈 0.05）. The expression of RECK was inversely correlated with the expression of VEGF and CD105.CONCLUSION： RECK, VEGF and CD105 play important roles in the infiltration, metastasis and carcinogenesis in esophageal carcinoma. Angiogenesis in ESCC may be promoted by over-expression of CD105.     

RECK和MMP-2在大肠癌中的表达及其相互关系

目的研究RECK和MMP-2在大肠癌及正常大肠组织中的表达,探讨其在大肠癌的发生、发展和浸润转移中的作用。方法应用免疫组织化学法（SABC）检测50例大肠癌组织和20例正常大肠黏膜组织中RECK和MMP-2的表达。结果RECK在大肠癌组织中的阳性表达率为64％,明显低于在正常大肠黏膜组织中的表达（100％）（P〈0．05）,并随肿瘤病理分化程度的降低、临床Dukes分期的提高、淋巴转移的产生而降低（P〈0．05）。MMP一2在大肠癌组织中的阳性表达率为72％,明显高于在正常大肠黏膜组织中的表达（15％）（P〈0．05）,并随临床Dukes分期的提高、淋巴转移的产生而增高（P〈0．05）。大肠癌组织中RECK与MMP-2的表达呈负相关（r=-0．642,P〈0．05）。结论大肠癌组织中RECK低表达,MMP-2高表达。RECK可能在大肠癌的发生和浸润转移过程中起重要作用,有望成为预测大肠癌转移与预后的重要参考指标。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制剂与食管癌浸润转移的关系

目的:研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其相应的组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在食管癌组织上的表达及其在细胞浸润转移过程中所起的重要作用。方法:采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测的50例食管癌组织中MMP-9及TIMP-1的表达。结果:MMP-9在食管癌组织的阳性表达率为76％,其表达与淋巴结转移呈正相关(Pearson列联系数0.343,P<0.05)。TIMP-1在食管癌组织表达的阳性率为30％,其表达与淋巴转移呈负棚关(Pearson列联系数为O.333,P<0.05)。结论:MMP-9阳性表达与食管癌浸润转移呈正相关,TIMP-1阳性表达与食管癌浸润转移呈负相关,二者在食管癌浸润转移中的关系表现为MMP-9促进肿瘤转移,TIMP-1对食管癌有独立的抑制作用。通过检测食管癌组织中的MMP-9及TIMP-1的表达,对预后的评价有一定价值。     

MMP-2和MMP-9蛋白在结肠癌中的表达

目的:分析基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9蛋白与结肠癌病理因素的关系,探讨MMP蛋白在结肠癌发生中的临床意义.方法:用SP免疫组化法检测31例结肠癌中MMP-2和MMP-9蛋白表达情况,并用SPSS10.0forWindows软件统计分析MMP蛋白与临床病理因素的关系.以20例溃疡性结肠炎、21例结肠腺瘤和10例正常结肠黏膜作为对照组.结果:MMP-2除结肠癌组和正常结肠黏膜组间相比具有显著性差异(10.0%vs54.8%,P<0.05)外,其余各组间比较差异无统计学意义,MMP-9各组间比较差异无统计学意义,从溃疡性结肠炎、结肠腺瘤到结肠癌中MMP-2和MMP-9蛋白表达阳性率不同且具有递增趋势.MMP-2和MMP-9蛋白表达与结肠癌的Duke’s分期及有无淋巴结转移显著相关(A B期:38.9%和27.8%;C D期:76.9%和84.6%;无淋巴结转移:38.9%和27.8%;有淋巴结转移:76.9%和84.6%,P<0.05).结论:MMP-2和MMP-9蛋白过度表达对结肠癌的诊断、Duke's分期及有无淋巴结转移判断具有重要的临床意义.     

胰腺癌中RECK和MMP-9蛋白的表达及临床病理意义

目的 观察RECK和MMP-9在胰腺癌组织中的表达,探讨其与胰腺癌临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化PV6000法检测28例胰腺癌及10例正常胰腺组织中RECK、MMP-9的表达,应用SPSS13.0软件对RECK、MMP-9的表达与肿瘤临床病理特征的关系进行统计学分析.结果 RECK在胰腺癌组织中的阳性表达率为46.4%(13/28),显著低于它在正常胰腺组织中90.0%(9/10)的阳性表达率.胰腺癌临床分期为Ⅰ+Ⅱ期组的RECK阳性表达率(75.0%,9/12)明显高于Ⅲ+Ⅳ期组(25.0%,4/16,P＜0.05),无远处转移组的RECK阳性表达率(60.0%,12/20)明显高于有远处转移组(12.5%,1/8,P＜0.05).MMP-9在胰腺癌组织中的阳性表达率为75.0%(21/28),显著高于正常胰腺组织中的20.0%(2/10)阳性表达率(P＜0.01).胰腺癌临床分期为Ⅰ+Ⅱ期组的MMP-9阳性表达率(50.0%,6/12)明显低于Ⅲ+Ⅳ期组(93.8%,15/16,P＜0.05),肿瘤高分化组的MMP-9阳性表达率(33.3%,1/3)明显低于低分化组(100%,12/12,P＜0.01).胰腺癌组织中RECK与MMP-9的表达呈负相关(r=-0.536,P＜0.01).结论 胰腺癌组织中RECK呈低表达,MMP-9呈高表达,RECK、MMP-9联合检测可以作为胰腺癌临床分期评估的指标.     

食管鳞癌中基质金属蛋白酶-7的表达及意义

目的:研究基质金属蛋白酶-7(MMP-7)在食管鳞癌中的表达情况及其与肿瘤浸润和淋巴结转移的关系。方法:用免疫组织化学法检测75例食管鳞癌组织及其相应正常粘膜中MMP-7的表达。结果:食管鳞癌组织MMP-7基因表达(59/75,78.7％)高于正常组织(P<0.01)。浸润到外膜层食管鳞癌(37/45,82.2％)与浸润至粘膜下层鳞癌(5/10,50.0％)之间MMP-7的高表达有显著性差异(P<0.05),淋巴结转移组MMP-7高表达(27/29,93.1％)高于淋巴结未转移组(P<0.05)。结论:MMP-7的高表达与食管鳞癌浸润深度和淋巴结转移有关,可能成为食管鳞癌恶性生物学行为的指标。     

血管内皮生长因子表达与食管鳞癌临床病理的关系

目的 了解食管鳞癌组织中血管内皮生长因子（VEGF）的变化及其与临床病理的关系。方法 采用ABC方法测定食管鳞癌高发区74例食管鳞癌组织中VEGF蛋白的表达。结果 74例食管鳞癌组织中VEGF阳性表达为60.8%（45/74例）,VEGF阳性表达与食管鳞癌组织中肿瘤细胞增殖、浸润和淋巴结转移有相关性。VEGF在食管鳞癌中的表达存在有异质性。结论 VEGF蛋白在食管鳞癌的增殖、浸润和转移过程中起重要作用。     

MS CT在食管癌诊断中的价值及其征象与MMP-2表达的相关性分析

目的探讨多层螺旋CT（MSCT）在食管癌诊断中的价值及其征象与食管癌组织MMP-2表达的关系。方法对59例经胃镜活检证实的食管癌患者于放疗前行MSCT检查,同时应用免疫组化SP法检测59例食管癌组织和41例癌旁组织中MMP-2表达情况,分析食管癌MSCT征象与MMP-2表达的关系。结果MSCT扫描诊断食管癌57例,与病理诊断结果符合率为96．6％;癌组织和癌旁组织中MMP-2表达阳性率分别为59．32％、31．71％（P=0．007）;食管癌组织MMP-2表达与MSCT所示浸润深度、气管／支气管受侵、主动脉受侵、椎前三角受侵、颈部淋巴结转移、纵隔淋巴结转移均有明显相关性。结论MSCT对食管癌及其淋巴结、远处脏器转移诊断准确率高,且其征象与MMP-2表达密切相关,对明确食管癌治疗方案起重要作用。     

塞来昔布对胃癌MGC-803细胞RECK、MMP-2、MMP-9基因表达的影响

目的:研究非甾体类抗炎药(NSAID)塞来昔布对胃癌细胞MGC-803的抑制作用和对RECK、MMP-2、MMP-9基因表达的影响,以探讨塞来昔布的抗肿瘤机制.方法:培养胃癌MGC-803细胞,实验用不同浓度的塞来昔布(25、50、100μg/L)分别处理MGC-803细胞不同时间(12、24 h、48 h),无血清培养基饥饿24 h达同步化后,MTT(噻唑蓝比色法)观察MGC-803细胞增殖;RT-PCR法检测细胞周期调控因子MMP-9、MMP-2、RECK mRNA的表达;Western blot法检测MMP-9、MMP-2、RECK mRNA蛋白的表达.结果:M T T法显示塞来昔布能抑制胃癌MGC-803细胞增殖,作用12 h时,随着塞来昔布处理浓度的增高,其抑制作用不明显,组间比较差异不显著(P>0.05),在作用24、48 h时呈浓度依赖性(25-100μg/L),在25、50、100μg/L作用浓度呈时间依赖性(24-48 h).塞来昔布在100μg/L浓度作用细胞48 h时抑制.RT-PCR法检测结果显示,在12 h的作用时间点,随着塞来昔布处理浓度的增高,RECK基因及MMP-2、MMP-9 mRNA变化不是很明显,组间比较无显著差异(P>0.05),在12 h后,塞来昔布能增加胃癌细胞RECK mRNA和蛋白表达,作用呈浓度(25-100μg/L)和时间依赖性(24-48h),MMP-2、MMP-9表达则下降.Western blot法检测结果显示,作用12 h时,随着塞来昔布处理浓度的增高,其RECK蛋白及MMP-2,MMP-9蛋白改变不明显,组间比较差异不显著(P>0.05),在12 h以后,塞来昔布能增加RECKmRNA和蛋白表达并减少MMP-2、MMP-9表达,且作用呈浓度依赖性和时间依赖.结论:塞来昔布可抑制人胃癌MGC-803细胞增殖与转移;其可能是通过上调RECK基因,进而下调MMP-2、MMP-9来抑制胃癌细胞MGC-803的增殖与转移.