早期稽留流产患者免疫机制的研究

目的:探讨T细胞表型及Th1/Th2功能亚群在早期稽留流产发病中的免疫机制。方法:选取14例早期稽留流产患者(妊娠8～10周),采用血液自动分析仪检测其外周血中淋巴细胞和粒细胞百分率,采用流式细胞仪检测其外周血中T淋巴细胞及其亚群的百分率,用酶联免疫吸附法测定其血清中细胞因子干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)和白介素-4(Inter-leukin-4,IL-4)的浓度。同时选取18例正常妊娠早期妇女(妊娠8～10周)检测上述各项指标作为对照。结果:①早期稽留流产患者外周血中淋巴细胞比率29.77±4.37,明显高于对照组的23.4±5.96(P<0.05);粒细胞比率为60.09±4.58,明显低于对照组的67.76±7.31(P<0.05)。②早期稽留流产患者外周血中CD3+细胞和CD4+细胞的百分率以及CD4+/CD8+的比值分别为66.76±8.76、41.01±8.47、1.83±0.50,均显著高于正常妊娠早期妇女的56.72±10.86、31.22±7.70、1.20±0.42(P均<0.05);CD8+细胞的百分率为25.05±5.87,与对照组的27.35±6.28比较,无显著差异。③早期稽留流产患者血清中IFN-γ浓度为28.96±10.76ng/L,明显高于对照组18.11±7.08ng/L(P<0.01);IL-4为13.16±8.37ng/L,显著低于对照组的25.91±15.96ng/L(P<0.05)。结论:稽留流产的发生可能与CD4+/CD8+T细胞比例失调,以及Th1/Th2功能亚群向Th1偏移有关。     

声门上型喉癌手术治疗与Th1/Th2监测的临床意义

目的探讨声门上型喉癌患者手术前是否存在Th1／Th2免疫失衡及根治性切除肿瘤后能否使Th1／Th2恢复平衡。方法用流式细胞仪检测48例根治切除的声门上型喉癌患者术前、术后不同时期外周血淋巴细胞亚群中各种细胞因子表达。结果能代表Th1功能的IL-2、IL-12和IFN-γ术后的表达水平较术前明显升高（P〈0．01）；能代表Th2功能的IL-4和IL-10术前的表达水平远高于术后，差别均具有显著意义（P〈0．01）。如IL-4和IL-10术后的表达水平与术前无差异，提示癌瘤复发或转移的可能性大。结论声门上型喉癌患者手术前即存在Th1／Th2免疫失衡，行根治性肿瘤切除可解除免疫抑制，改善患者细胞免疫功能而促使TH1/TH2免疫恢复平衡。     

砷暴露对小鼠脾脏炎症反应及Th1/Th2的影响

目的探讨慢性饮水砷暴露对小鼠脾脏的炎症反应及Th1/Th2细胞因子和转录因子表达的影响。方法将30只健康SPF级雌性昆明小鼠根据体重按照随机数字表分为对照组和25、50 mg/L NaAsO_2染毒组,每组10只。采用自由饮水方式染毒,染毒6个月后,测定小鼠脾脏组织中炎症因子IL-12和IL-6的mRNA水平。采用Real-time PCR方法分别检测脾脏Th1和Th2的转录因子T-bet、Gata3和细胞因子Ifn-γ、IL-4的mRNA表达水平。同时用Western blot法观察Nrf2、NQO1和GSTO1/2的蛋白表达水平。结果与对照组比较,随着染毒剂量的上升,各染毒组小鼠脾脏炎症因子IL-12和IL-6的mRNA水平均上升,除IL-12的25 mg/L剂量组外,差异均具有统计学意义(P0.05);各染毒组小鼠脾脏细胞因子Ifn-γ和IL-4的转录水平呈上升趋势;Nrf2及其调控的下游蛋白NQO1和GSTO1/2的表达水平明显增加。结论慢性砷暴露小鼠免疫器官脾脏的炎症相关因子IL-12和IL-6明显增加,同时上调Th1和Th2特异性细胞因子的表达水平,调节CD4~+T淋巴细胞亚群的分化,从而发挥对小鼠脾脏的免疫调节效应。     

妊娠期肝内胆汁淤积症细胞免疫与辅助T细胞亚群功能的研究

目的:通过观察妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者血清新喋呤、可溶性白介素2受体(sIL-2R)、辅助T细胞1型(白介素2)与2型细胞因子(白介素10)的变化,探讨细胞免疫功能与辅助T细胞亚群功能变化与ICP的关系。方法:采用酶联免疫吸附分析法和放射免疫分析法测定30例ICP患者和30例正常孕妇血清新喋呤、可溶性白介素2受体(sIL-2R)、白介素2(IL-2)与IL-10浓度,比较二组间差异。结果:与对照组比较,ICP患者血清新喋呤和sIL-2R水平显著增高(P<0·001,P<0·05),IL-2、IL-10与IL-2/IL-10比值均无显著性差异(P>0·5,P>0·2,P>0·05)。结论:ICP患者血清新喋呤和sIL-2R水平显著增高,提示细胞免疫活性增强,但辅助T细胞亚群功能无显著漂移。     

microRNAs及炎症反应在肿瘤研究中的进展

microRNAs (miRNAs)是一类长约22个核苷酸(nucleotide,nt)的非编码小分子RNAs,通过与靶基因的特异序列完全或不完全互补结合,来调控靶基因表达,参与生物体生长、发育、疾病发生(诸如炎症、肿瘤)等几乎所有的生理病理过程.炎症是机体对损伤因子所发生的复杂的防御反应,可以改变癌基因和抑癌基因(包括蛋白编码基因和非编码小分子RNA基因)的表达和转化,促进细胞的恶性转变.深入理解microRNAs及炎症反应在肿瘤发生发展过程中的单独作用及作用交集,将为肿瘤的早期预防和治疗提供新的突破点.     

垂体肿瘤转化基因1对结肠癌SW480细胞增殖的影响及其机制研究

目的 研究垂体肿瘤转化基因 1(Pituitary Tumor Tansforming Gene1,PTTG1)过表达对人结肠癌细胞SW480增殖和周期的影响及其可能机制。方法 采用脂质体转染法将pcDNA3.1(+)-PTTG1及空载pcDNA3.1(+)质粒转染人结肠癌SW480细胞,G418法筛选阳性克隆。Western blot法检测PTTG1和cyclin D、cyclin E、p21的表达。MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期。结果 （1）成功获得PTTG1高表达的SW480细胞pcDNA3.1(+)-PTTG1及对照pcDNA3.1(+)细胞,Western blot结果显示pcDNA3.1(+)-PTTG1细胞PTTG1表达量分别为pcDNA3.1(+)细胞和SW480细胞的3.58倍和3.42倍;（2）过表达PTTG1基因后,SW480细胞周期改变,G0/G1期细胞减少而S期和G2/M期细胞增加;细胞周期调控蛋白cyclin D和cyclin E表达升高,p21表达降低;SW480细胞增殖显著性加快。（3） 过表达PTTG1基因后,SW480细胞中PI3K/AKT信号活化增强,使用PI3K/AKT信号抑制剂LY29400干预后,细胞增殖减弱,周期蛋白cyclin D和cyclin E表达降低,p21表达升高。结论 PTTG1基因过表达可能通过活化PI3K/AKT信号加速SW480细胞从G1期向S期的转化促进细胞增殖,提示PTTG1蛋白可能成为结肠癌治疗的一个潜在靶点。     

细胞间粘附分子-1的表达在胎儿生长受限发病中的作用

目的:探讨细胞间粘附分子-1 (ICAM-1 ) 与胎儿生长受限(FGR) 发病的关系。方法: 对2001年1月~2003年12月间38例胎儿生长受限孕妇(FGR组) 和40例正常妊娠孕妇(对照组) 分娩后的胎盘和脐带组织进行分析, 采用免疫组织化学法(免疫组化) 测定两组孕妇分娩后的胎盘和脐带组织细胞间粘附分子-1 (ICAM-1 ) 的表达强度。结果: ①FGR组胎盘绒毛血管内皮细胞中ICAM-1的表达强度为73 68% (28例), 与正常组30% (12例) 比较显著增高, 差异有显著性意义(χ2 =14 .88, P<0 .01); FGR组脐带的脐血管内皮细胞中ICAM-1阳性表达为68. 42% (26例) 与正常组27 .5% (11例) 比较差异有显著性意义(χ2 =13 09, P<0 .01)。②FGR组胎盘重量(464g±57g) 较正常对照组(570g±72g)显著下降(P<0 .01)。③FGR组新生儿体重(2 212 .50g±188 .37g) 较对照组(3 309. 38g±400 .69g) 显著下降(P<0 .01)。结论: 细胞间粘附分子-1 (ICAM-1) 表达的增强在FGR发病中可能具有重要意义。ICAM-1与胎盘的免疫病理损伤有关, 可能是FGR发病机制中的一个重要环节。     

siRNA沉默FOXF2基因对宫颈癌Hela细胞迁移与增殖的影响研究

目的 探究siRNA沉默FOXF2基因对宫颈癌Hela细胞迁移与增殖的影响研究。方法 在该院于2018年1月-2018年12月检测siRNA沉默FOXF2,选择Western Blot、Real Time-PCR法,之后Hela细胞中蛋白表达、FOXF2基因mRNA的变化。siRNA沉默FOXF2后细胞增殖,选择CCK8检测;siRNA沉默FOXF2后细胞迁移选择划痕试验检测。结果 多重对比各组,选择Dunnett T3,结果显示:3条siRNA链沉默FOXF2后,相较于Hela细胞SNC组合Hela细胞,siRNA-FOXF2 mRNA显著降低(65%~85%),对比差异有统计学意义(P<0.05);相较于Hela细胞SNC组及Hela细胞组,Hela细胞FOXF2蛋白表达水平出现显著降低;在siRNA沉默FOXF2基因后,经细胞划痕试验显示,相较于Hela细胞SNC组及Hela细胞组,Hela细胞的迁移能力显著较高;较Hela细胞SNC组及Hela细胞组,siRNA-FOXF21415组增殖率显著较高,对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 宫颈癌患者针对其Hela细胞的迁移与增殖能力,选择SiRNA沉默FOXF2基因有极大的促进作用,具有临床应用价值。     

内皮素与血管内皮细胞生长因子在非小细胞肺癌中的表达及相关性

目的研究内皮素(endothelin-1,ET-1)与血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在非小细胞肺癌中的表达及两者的相关性。方法应用免疫组化SABC染色法,检测101例非小细胞肺癌标本中ET-1、VEGF的阳性表达,分别评价ET-1和VEGF与非小细胞肺癌临床病理特征间的关系,并分析ET-1和VEGF表达的相关性。结果 ET-1表达与肿瘤组织学分级、病理分期有关(P0.05),与病理分型无关联;VEGF表达与肿瘤病理分期有关(P0.05),与组织分级、病理分型无关联。ET-1高表达的区域VEGF也呈高表达,两者的表达呈正相关(P0.05)。结论 ET-1和VEGF的表达与非小细胞肺癌的发生发展密切相关,可以作为该病恶性生长的检测指标。ET-1与VEGF可能具有协同作用,促进血管生成。     

VEGF-C诱导宫颈癌Hela细胞Bcl-2、cyclinD1的表达

目的研究VEGF-C对体外培养的宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的分子机制。方法应用重组人VEGF-C蛋白体外刺激宫颈癌Hela细胞,MTT法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞周期和凋亡、Western Blotting检测增殖凋亡相关基因Bcl-2、cyclin D1蛋白水平的变化。结果 10、20、50 ng/μl VEGF-C处理后,细胞增殖指数分别为(1.00±0.03)、(1.25±0.05)、(1.55±0.08)、(2.13±0.08),呈剂量依赖性升高(P0.05)。细胞周期S期比率呈剂量依赖性升高(P0.05),分别为(30.91±0.09)%、(37.95±0.27)%、(45.05±0.40)%、(64.26±0.20)%;细胞凋亡率呈剂量依赖性降低(P0.05),分别为(12.4±0.3)、(11.4±0.2)、(9.6±0.15)、(5.5±0.25)。Bcl-2、cyclin D1蛋白表达呈剂量依赖性升高。结论外源性VEGF-C通过细胞内信号的传递,诱导cyclin D1的表达,使肿瘤细胞S期加快,促进细胞周期的进程,来促进Hela细胞增殖;诱导Bcl-2的表达,抑制凋亡。     

The role of chance in cancer causation

In the last years, the discussion about the role of chance in the causation of cancer has generated a large scientific and public debate. The concept that chance, or “bad luck”, as responsible for a majority of the variation of cancer incidence, may be misleading, possibly causing an underestimation of the role played by known risk factors. In this commentary we discuss how host and external factors interact with chance in cancer causation in different ways, and provide examples of situations where chance appears to play only a minor role on cancer onset.     

正常妊娠及妊高征患者外周血中IL-12、IL-18的检测意义

目的:检测非孕妇女、正常妊娠及妊娠高血压综合征(妊高征,PIH)患者外周血中IL-12和IL-18水平,探讨Th1/Th2细胞因子在妊高征发病中的作用。方法:孕20周后的子痫前期患者34例(轻度子痫前期15例,重度子痫前期19例),正常妊娠组32例,非妊娠对照组16例。取外周血进行流式细胞仪检测,选取CD28表达量最高者的淋巴细胞作为实验对象。采用ELISA法测定IL-12、IL-18,流式细胞仪测定Th1/Th2细胞比。结果:正常妊娠组、非孕组及妊高征组IL-12比较均存在显著性差异(P<0.001)。轻度子痫前期组、重度子痫前期组与正常妊娠组IL-18比较均不存在显著性差异(P>0.05)。各组IL-18/IL-12浓度比比较,正常妊娠组与妊高征组比较存在显著性差异(P<0.0001)。IL-18/IL-12浓度比与Th1/Th2细胞比的相关性比较,呈明显负相关(P<0.01)。结论:正常妊娠的IL-18/IL-12浓度比明显高于妊高征组与Th1/Th2细胞比呈相反变化。     

The Association between Allergy and Rheumatoid Arthritis in the Canadian Population

Background: Antagonism between Th1 and Th2 lymphocyte mediated responses has been proposed to explain the observed 20th Century population increase in Th2 mediated allergic disease and reciprocal decrease in infectious disease, which stimulates a Th1 mediated response.Objective: To determine if Th1/Th2 antagonism would be consistent with associations between non-infectious diseases, we tested the hypothesis that the population prevalence of Th2 mediated allergies is inversely related to the prevalence of Th1 mediated rheumatoid arthritis.Methods: The analysis was based on data from the Canadian Community Health Survey conducted by Statistics Canada in 2000–2001 of those at least 12 years of age from 125,129 households. Each subject was asked if he or she had certain chronic health conditions that had been diagnosed by a health professional. Logistic regression models were used to evaluate the association between rheumatoid arthritis and allergies with consideration of other important variables.Results: Allergy history was positively related to the prevalence of rheumatoid arthritis both in women (adjusted odds ratio (OR): 1.57, 95% CI: 1.43, 1.73) and in men (adjusted OR: 1.55, 95% CI: 1.36, 1.77).Conclusions: The reported population prevalences of allergies and rheumatoid arthritis were positively associated and not explained by Th1/Th2 anatagonism suggesting that this mechanism may only be applicable to the association between an infectious and an immunologic disease. Mechanisms accounting for positive associations between immunologic diseases deserve further study.     

妊娠期高血压疾病孕妇血液流变学变化及对胎儿发育的影响

目的:研究妊娠期高血压疾病(HDCP)患者血液流变学指标的变化,并分析其对胎儿发育的影响。方法:对159例正常妊娠和183例HDCP患者进行血液流变学检测,比较其血液流变学指标及对胎儿宫内发育的影响。结果:①妊娠高血压组与正常妊娠组相比,各指标之间无统计学差别;子痫前期组全血黏度、全血高切相对指数、全血低切相对指数、红细胞聚集指数、红细胞压积、白细胞、红细胞、纤维蛋白原均显著高于正常妊娠组(P<0.01或P<0.05);血小板明显低于正常妊娠组(P<0.01);血浆黏度、血红蛋白在两组间无统计学差异(P>0.05)。②合并FGR的子痫前期患者全血黏度、全血高切相对指数、全血低切相对指数较无FGR的子痫前期患者显著增高(P<0.05或P<0.01),其余血液流变学参数在两组间无统计学差别(P>0.05)。结论:子痫前期患者全血黏度增高,血液浓缩,红细胞聚集性增加,可能影响胎儿新陈代谢的正常进行和生长发育。     

长链非编码RNA SFTA1P在非小细胞肺癌组织中的表达和细胞功能研究

  目的   研究长链非编码RNA SFTA1P在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达情况, 以及对NSCLC细胞系生物学功能的影响。   方法   运用定量即时聚合酶链锁反应(quantitative real time polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测SFTA1P在18对非小细胞肺癌组织及癌旁组织中的表达情况; 用qRT-PCR检测5株NSCLC细胞系(A549、SPCA1、H1975、H460和H1299)和1株肺正常上皮细胞系(human bronchial epithelial, HBE)中SFTA1P的表达情况; 构建SFTA1P的过表达载体, 通过转染构建过表达细胞模型; 运用CCK-8、Transwell等实验方法检测SFTA1P过表达对NSCLC细胞增殖、侵袭、迁移的影响。   结果   SFTA1P在非小细胞肺癌组织中的表达低于癌旁组织(t=2.158, P=0.043);与HBE细胞相比较, SFTA1P在A549和H460细胞系中相对低表达(t=5.769, P=0.004; t=5.772, P=0.004), 在H1299和H1975细胞系中相对高表达(t=22.248, P < 0.001; t=11.814, P < 0.001);SFTA1P过表达质粒转染A549和H460细胞系后, 与空质粒的对照组比较, SFTA1P的表达均升高, 且有统计学差异(均有P < 0.05);过表达SFTA1P可以抑制非小细胞肺癌细胞H460、A549的增殖、侵袭、迁移, 差异有统计学意义(均有P < 0.05)。   结论   SFTA1P基因能够抑制NSCLC细胞的增殖、迁移、侵袭等生物学功能, SFTA1P在肿瘤发生和发展中可能起着抑癌基因的作用。     

妊娠早期阴道微环境变化及与阴道炎症的关系分析

目的分析妊娠早期阴道微环境变化及与阴道炎症的关系。方法回顾性分析2017年3月-2018年12月韶关市曲江区妇幼保健计划生育服务中心104例妊娠早期孕产妇临床资料。记录其非妊娠期及妊娠早期阴道微环境变化情况,包括酸碱度(pH)、菌群密集度、菌群多样性、阴道微生物功能正常率、乳杆菌阳性率、阴道微生态正常率,并比较妊娠早期阴道炎症发生情况及其阴道微环境。结果孕产妇非妊娠期pH、阴道微生物功能正常率、乳杆菌阳性率及阴道微生态正常率明显高于妊娠早期,菌群密集度、菌群多样性则低于妊娠早期,差异均有统计学意义(P<0.05)。孕产妇妊娠早期阴道炎症组pH、菌群密集度、菌群多样性明显高于无阴道炎症组,阴道微生物功能正常率及乳杆菌阳性率则低于无阴道炎症组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论妊娠早期阴道微环境出现一系列变化,造成阴道炎症发生率升高,对此临床应给予重视。     

哮喘缓解期儿童Th1／Th2细胞的水平及意义

目的探讨哮喘缓解期儿童外周血Th1／Th2细胞的水平及意义。方法设正常对照组（n=38）及哮喘（缓解期）组（n=55），采用荧光单细胞内染色法检测外周血Th1／Th2细胞活性，检测结果进行统计学分析。结果哮喘组Th1细胞活性及Th1／Th2明显低于对照组，Th2细胞活性明显高于对照组（P均〈0．01）。结论哮喘缓解期儿童仍存在Th1／Th2细胞偏移，Th1细胞功能抑制，Th2细胞功能亢进。     

高血尿酸水平对高血压患者炎症反应和内皮素-1水平的影响

目的 探讨高血尿酸水平(HUA)对高血压患者炎症反应和内皮素-1(ET-1)水平的影响以及苯溴马隆治疗的效果.方法 选取本院门诊和住院初诊高血压患者90例,其中合并HUA患者60例,正常血尿酸组患者30例.所有高血压合并HUA患者均给予基础降压药物,并选择30例患者同时给予苯溴马隆片50 mg,每晨空腹顿服.比较高血压合并HUA患者和正常血尿酸组患者以及高血压合并HUA患者基础降压加苯溴马隆治疗与单纯基础降压治疗8周后各项炎症指标和ET-1含量变化.结果 高血压合并HUA患者血ET-1、白细胞介素-1(IL-1)以及超敏C反应蛋白(hsCRP)浓度显著高于血尿酸正常组,并与血尿酸浓度成正相关[(86.6±4.8)pg/ml vs (82.4±6.9)pg/ml;(47.6 ±6.2)mg/L vs (19.1±4.1)mg/L; (3.4±0.8)mg/L vs (2.9±1.1) mg/L,r=0.81、0.74、0.83,P均＜0.05].而苯溴马隆可有效降低高血压合并HUA患者血ET-1、IL-1和hsCRP[(49.8±5.0) pg/ml vs (87.5±5.9)pg/ml;(17.6±8.8) mg/L vs (48.2±7.0)mg/L;(1.7±0.7)mg/L vs (3.5±0.9) mg/L,P均＜0.05].结论 HUA可增加高血压患者炎症反应和ET-1水平,而苯溴马隆治疗有效减轻患者炎症反应和降低血ET-1水平,降低高血压合并HUA患者血尿酸水平可能具有延缓高血压患者动脉粥样硬化进程的作用.     

应用RNA干扰沉默NOB1基因对卵巢癌HEY细胞增殖和周期的影响

目的:应用RNA干扰技术抑制NOB1基因的表达,并在卵巢癌HEY细胞上观察NOB1下调对细胞增殖能力和细胞周期的影响。方法:NOB1特异性siRNA构建于慢病毒载体,感染卵巢癌HEY细胞后,Real-time PCR和Western验证NOB1的抑制效率,MTT、Brdu实验观察NOB1基因沉默对HEY细胞增殖的作用,PI染色流式细胞仪检测细胞周期变化。结果:shRNA慢病毒感染HEY细胞能够将NOB1基因mRNA表达抑制82.2%,蛋白表达也显著降低,MTT和Brdu实验显示细胞增殖水平显著变弱,流式细胞仪检测证实细胞出现G1期阻滞。结论:应用RNA干扰技术能在HEY细胞上有效沉默NOB1基因,并降低卵巢癌细胞的增殖能力,使细胞阻滞在G1期。