不同性别大鼠创伤失血性休克后多形核白细胞反应的差异及胃复安干预的实验研究

本研究在以下几个方面具有创新：（1）将腺苷引入心肺复苏治疗中，观察腺苷与肾上腺素合用对心跳停搏后A主循环恢复率和复苏成功率的影响，结果表明合用腺苷可明显提高自主循环恢复率和复苏成功率；（2）观察腺苷在心肺复苏中对兔心、脑组织病理结构和超微结构的影响，结果表明腺苷可以明显减轻心脑组织的损害；（3）观察腺苷窒息大鼠心脏和肠系膜微循环的影响，并观察到肾上腺素对微循环无明显改善作用，联合应用腺苷可以改善微循环；（4）将激光多普勒血流量图象仪引入心肺复苏中，动态观察窒息大鼠肠壁组织血液灌流量变化，并观察到腺苷可以增加肠壁组织血流灌注量。[编者按]     

性别对大鼠创伤失血性休克后循环血多形核白细胞反应的影响

目的观察性别对大鼠创伤失血性休克后循环血多形核白细胞（PMN）活化和凋亡的影响。方法实验动物为发情前期的雌性和成年雄性SD大鼠，共30只，分为雄性，雌性和对照3组。麻醉后先在腹部正中做5cm切口造成软组织损伤，分层缝合后通过放血的方法将平均动脉压降至（35±5）mmHg，并维持60min，然后在60min内用4倍于最大失血量的乳酸林格液进行复苏。对照纽不进行休克及液体复苏。复苏或假手术后2h和24h分别测定循环血PMN释放过氧化物阴离子和弹性蛋白酶的水平，并用流式细胞仪测定PMN的Fas表达率。结果（1）使用十四烷酰佛波醇乙酰（PMA）刺激后，雄性组和雌性组大鼠复苏后2h、24h时循环血PMN所产生的过氧化物阴离子量与雄性和雌性对照组大鼠相比差异均无显著性意义（P〉0．05）。（2）复苏后2h、24h时，雄性组大鼠与雌性组大鼠用N-甲酰-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸（fMLP）刺激所产生的过氧化物阴离子和用脂多糖（LPS）刺激所产生的弹性蛋白酶水平间差异均有显著性意义（P〈0．05）。（3）复苏后2h、24h时，雄性组大鼠PMN的Fas表达率与对照组相比差异均有显著性意义（P〈0．01）；虽然雌性组Fas表达率也较对照组降低（P〈0．05），却明显高于雄性组（P〈0．05）．绪论创伤受血性侏弃．后雄性大鼠PMN的活化明显高干雌性：雄性大鼠PMN的凋亡较雌性出现延迟。     

人周围血多形核白细胞的制备

<正> 制备人周围血多形核白细胞,是目前在生物化学、生理学、免疫学、病理学等多学科中应用范围较广的一项技术。本文作者现在瑞典卡罗林斯卡医学院生理化学部进修,正使用这项技术。它具有操作简便,纯度较高,可较大量制备,不需要特殊设备和装置等优点,特在这里作一介绍。     

多形核白细胞血栓素B2的测定

血栓素A_2(TXA_2)主要由血小板膜磷脂的花生四烯酸代谢产生释放,能强烈地致血小板聚集和血管收缩,其稳定代谢产物是血栓素B_2,测定TXB_2的含量可以了解TXA_2量的变化,已发现白细胞亦是产生TXA_2的场所之一。多形核白细胞(PMNL)TXB_2的测定需要解决以下问题:(1)PMNL的分离;(2)PMNL之TXA_2诱导释放;(3)PMNL之TXB_2的测定。作者对此进行了一     

多形核白细胞对血管内皮细胞的毒性作用

本文利用体外培养血管内皮细胞的方法,观察了酵母多糖活化的多形核白细胞(PMN)对内皮细胞的影响。本研究发现:将活化的PMN与内皮细胞孵育,10h内皮细胞出现核固缩等变化,培养液中LDH升高;24h内皮细胞变化更为明显,细胞变性坏死,培养液中LDH和6-酮-PGF_1α含量均明显升高。予先向培养液中分别加入超氧化物歧化酶(SOD)或过氧化氢酶(CAT),内皮细胞仍有损害,将SOD和CAT予先联合加入,可保护内皮细胞免受PMN的损害。据此认为:活化PMN引起的内皮细胞损伤可能主要系羟自由基(OH·)所致。     

糖尿病多形核白细胞吞噬功能的改变

目的 研究正常人及糖尿病患者多形核白细胞（polymorphonuclear leukocytes,PMNLs)吞噬功能的改变及钙通道阻滞剂对其的影响。方法 应用过氧化氢释放法测定白细胞吞噬功能,同时研究PMNLs细胞外不同浓度糖环境及钙通道阻滞剂对细胞吞噬功能的影响。结果 糖尿病患者的PMNLs吞噬功能较正常人低下。体外培养基葡萄糖浓度增高,吞噬功能越差,硝苯啶可明显改善糖尿病患者PMNLs的吞噬功能。结论 推测葡萄糖可能是通过激活L型钙通道引起细胞内游离钙浓度升高,从而影响吞噬功能,而硝苯啶可阻断该通道,恢复吞噬功能。     

高压氧对缺血再灌注损伤后多形核白细胞的影响

缺血再灌注损伤在很多外伤和疾病的组织损伤病理生理过程中起重要作用[1],如心肌梗死、中风、挤压损伤等.高压氧已经在多种缺血再灌注损伤模型上进行了治疗性实验研究.如心肌、骨骼肌、小肠、肝脏并获得有益的治疗结果.值得注意的是,高压氧用于缺血再灌注损伤治疗中,直觉中会假设在再灌注过程中由氧产生的氧自由基会对细胞的脂质成分、蛋白质、核酸产生损伤作用.而在体实验则观察到再灌注前使用高压氧可在缺血部位产生积极的治疗效果.目前高压氧对缺血再灌注损伤的基本治疗机制逐渐为人们所了解[2].高压氧从多个方面对缺血再灌注损伤产生治疗作用,包括:中性粒细胞、内皮细胞、炎性介质、脂质过氧化、细胞能量代谢、微循环等.     

多形核白细胞释放溶酶体酶的实验研究

以糖原腹腔注入由其中渗出液提取PMNs进行体外白细胞功能-释放功能研究是较理想的。实验观察到,内毒素即使浓度高达8mg/ml也不能直接作用于PMNs,使之释放β-g;但经内毒素或Zymosan激活补体可明显增加β-g释放;乙酰胆碱本身对PMNs释放β-g无明显作用,但乙酰胆碱可加强Zymosan所致β-g释放;654-2对补体引起的β-g释放无明显影响,但可明显抑制乙酰胆碱加强Zymosan引起的β-g释放;组胺可明显抑制Zymosan所引起的β-g释放;这种抑制作用是由组胺Ⅱ型受体介导的。可以认为,休克和炎症时调节PMNs释放溶酶体酶的机制是多方面的。     

创伤失血性休克后机体反应的性别二态性

大量的临床及实验数据证明，在正常及病理条件下，机体在很多方面的反应都存在着性别二态性，但国内在这一领域的研究很少。本文着重将近年来国外有关雄性和雌性在创伤失血性休克后免疫功能、器官功能以及多形核白细胞（PMN）启动和活化等方面不同的研究作一综述。并以此为根据介绍了一些可以应用于临床的治疗失血性休克的新方法。     

低温对创伤失血性休克后早期炎症反应影响的研究

目的通过观察全身降温和局部降温对创伤失血性休克家兔血清IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α水平的影响,研究探讨全身降温和局部降温是否能抑制创伤后早期炎症反应,从而防治创伤后多器官功能衰竭综合征的发生.方法30只新西兰大白兔,随机分为正常对照组、常温组(Ⅰ组)、全身浅低温组(Ⅱ组)、全身中低温组(Ⅲ组,)、创伤局部降温组(Ⅳ组),采用ELISA法测定血清IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α含量.结果Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组血清IL-1β、IL-6、TNF-α的含量低于相应相点Ⅰ组血清IL-1β、IL-6、TNF-α的含量(除T4时相点Ⅲ、Ⅳ组血清IL-6含量高于Ⅰ组血清IL-6含量外);而血清IL-10的含量高于相应时相点Ⅰ组血清IL-10的含量.结论系统低温和创伤局部降温能抑制创伤后早期炎症因子的表达,增加抗炎因子的表达,从而抑制创伤后早期炎症反应.     

大鼠创伤-失血性休克后腹腔巨噬细胞功能受损与百日咳毒素敏感的G蛋白的关系

目的　探讨创伤 失血性休克后巨噬细胞功能受损的机制。方法　以大鼠创伤 (右后肢骨折 ) 失血性休克 [(35± 5 )mmHg(4.6 7± 0 .6 6 7kPa) ,维持 6 0min]为模型 ,分别在创伤 失血性休克后 1、3d收集腹腔巨噬细胞 ,用不同浓度 (10ng/ml,10 0ng/ml)的百日咳毒素 (Pertussistoxin ,PTX)或霍乱毒素 (Choleratoxin ,CTX)预处理后 ,测定巨噬细胞的MHC Ⅱ类抗原表达能力及TNF α的释放水平。结果　创伤 失血性休克后巨噬细胞MHC Ⅱ类抗原表达降低 ,TNF α的释放减少 ;PTX预处理后 ,巨噬细胞的MHC Ⅱ类抗原表达及TNF α释放均增加 ;CTX预处理对巨噬细胞的功能无明显影响。结论　PTX敏感的G蛋白可能参与了对创伤 失血性休克后巨噬细胞抗原提呈能力及TNF α释放的抑制作用     

粒细胞弹性蛋白酶表达与肾癌预后的关系

目的: 探讨肾癌多型核粒细胞弹性蛋白酶的表达与肾癌预后的关系.方法: 应用酶联免疫吸附实验研究肾癌组织中多型核粒细胞弹性蛋白酶的表达;病理切片CD34染色,检测肾癌细胞对微血管的侵袭;检测肾癌多型核粒细胞弹性蛋白酶(polymorphonuclear leukocyte elastase ,PMNE)启动子基因重复序列突变,应用pGL-3 Basic载体分别构建突变型及野生型PMNE荧光素酶真核表达载体(pGL/PMNE), 分别测定荧光素酶活性,探讨多型核粒细胞弹性蛋白酶启动子重复序列突变的意义.结果: 59例肾癌组织中多型核粒细胞弹性蛋白酶的表达明显高于22例正常肾组织(P<0.01);肾癌组织中多型核粒细胞弹性蛋白酶的表达与肿瘤Fuhrmans分期密切相关(P<0.01);肾癌组织中癌细胞对微血管的侵袭与多型核粒细胞弹性蛋白酶的表达关系密切(P<0.01);59例肾癌组织中发现1例多型核粒细胞弹性蛋白酶启动子重复序列突变:-879/-716TCCA,荧光素酶活性试验显示该突变对其下游基因表达有明显增强作用.结论: 多型核粒细胞弹性蛋白酶的表达与肾癌的临床病理学表现关系密切,多型核粒细胞弹性蛋白酶启动子重复序列-879/-716TCCA突变可能与肾癌PMNE的表达及侵袭能力有关.多型核粒细胞弹性蛋白酶在肾癌的发展过程中具有重要的作用.     

高原创伤失血性休克316例治疗分析

目的探讨高原世居人群（海拔〉2 800 m）和急进高原人群创伤失血性休克患者的救治特点及经验。方法回顾性分析1995年12月—2008年12月有完整病历资料的高原创伤失血性休克患者316例的治疗措施,其中高原世居人群（A组）179例,急进高原人群（B组,进入高原〈3个月）137例,比较两组临床救治疗效及特点。结果 A组康复170例（94.97%）,B组康复115例（83.94%）,两组康复率比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 B组患者较A组患者临床情况复杂,救治困难,疗效差,应该积极采取综合治疗措施。     

创伤-失血性休克对机体免疫功能的影响

目的：探讨创伤－失血性休克对机体免疫功能的影响。方法：以大才合性骨折合并失血性休克为模型,于创伤－失血性休克及其复苏后２ｈ、１、３、７ｄ处死动物,分离并纯化脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,检测脾淋巴细胞增殖能力、ＩＬ－２释放、ＩＬ－２Ｒα表达和腹腔巨噬细胞的吞噬能力、ＭＨＣⅡ抗原表达及ＴＮＦ－α的和。结果：①创伤－失血性休克后脾淋巴细胞增殖能力降低,ＩＬ－２释放和ＩＬ－２Ｒ表达减少;②腹腔巨噬细胞的吞噬     

腹部创伤致失血性休克患者围手术期容量治疗观察

目的探讨腹部创伤致失血性休克患者围手术期容量治疗的效果。方法选择50例急症ASAⅡ~Ⅳ级腹部创伤致失血性休克患者,视不同出血量,给予乳酸林格氏液、琥珀酰明胶进行扩容;严重失血红细胞压积<24%者,加用输血、纠酸、强心、利尿综合治疗。观察记录术中输液量、输液种类、输血量及患者生命体征变化,并计算休克指数。结果手术时间为(204±69)m in,患者入手术室至拔除气管导管时间为(257±92)m in;术中输入晶体液乳酸林格氏液(1 100±220)mL,琥珀酰明胶(900±145)mL;50例均平稳渡过围手术期,各观察指标明显改善;与术前比较,术后收缩压、舒张压、平均动脉压、中心静脉压、脉搏血氧饱和度、血红蛋白、红细胞压积均显著升高(P<0.05),心率显著减慢(P<0.05),休克指数显著降低(P<0.05)。结论合理的容量治疗可以补充失血性休克的循环血容量,改善患者的休克状态和转归。     

颅脑损伤后白细胞变化的临床意义

目的　探讨白细胞变化在颅脑损伤后继发性脑损害中的作用。方法　随机选取伤后 2 4h内入院的颅脑损伤患者 2 4例 (实验组 ) ,对照组选取同期于我院进行体检健康者 12例。实验组按照入院时格拉斯哥昏迷评分法(GCS)评分及预后 (GOS)分组 ,在入院时、2 4h、4 8h、96h不同时间段采集血标本 ,同时进行GCS评分 ,采用我院Beckman Coulter(HMX ,America)自动血液分析仪进行白细胞计数及分类 ,计数中性粒细胞。结果　颅脑损伤后2 4h内白细胞明显升高且达高峰 ,中性粒细胞在 4 8h达高峰 ,伤后 96h较对照组仍高。不同时间段白细胞与对照组有统计学意义 (P <0 .0 5 )。GCS≤ 8分组白细胞计数显著高于GCS >8分组 (P <0 .0 5 ) ;预后不良组白细胞计数显著高于预后良好组 (P <0 .0 5 )。结论　白细胞在颅脑损伤后继发性脑损害中起重要作用 ,颅脑损伤后白细胞明显升高 ,且与损伤程度及预后密切相关。     

The effects of amniotic membrane on polymorphonuclear cells

Objective To investigate the effects of fresh and preserved amniotic membrane on polymorphonuclear neutrophils (PMNs) so as to understand the antiinflammatory mechanism of amniotic membrane transplantation.Methods Conditioned medium was collected 48 hours after fresh or preserved amnions were cultured in DMEM and 5% CO2 at 37℃. Then, polymorphonuclear cells were cultured in conditioned culture or DMEM. Fluorescent microscopy with 4’,6diamidino2phenylindole (DAPI) staining and cytometry were performed 6, 9, 12, and 15 hours later. Results Apoptotic neutrophils were found in each group at different time points. The percentage of apoptotic cells at 6, 9, 12, and 15 hours after culture in the fresh and preserved amnion groups and the control group was 17.3%, 24.4%, 29.8%, 37.1%, and 16.2%, 20.1%, 23.7%, 27.7%, and 10.2%, 13.7%, 21.1%, 26.4%, respectively (t test, P1&lt;0.01, P2&lt;0.01 and P3&lt;0.01).Conclusion Amniotic membrane can accelerate apoptosis of polymorphonuclear neutrophils, reduce inflammation, and prevent ocular surface collagen from resolution, indicating that fresh amnion might have a stronger effect than preserved amnion.