硫化氢对幽门螺杆菌感染GES-I细胞CSE，NF-KB及lL-8mRNA表达的影响

目的：观察硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）对幽门螺杆菌（Hpylori）感染的GES．1细胞CSE,NF—gB及IL．8mRNA表达及其形态学的影响,探讨其对Hpylori所致胃黏膜细胞炎症的作用及机制。方法：将GES．1细胞培养24hA分为对照组（不加Hpylori及NariS）、Hpylori组、NaHS组（又分为4个亚组,分别加入50,100,200或400umol／LNariS）和Hpylori＋NariS组（又分为4个亚组,分别加入Hpylori与50,100,200或400~tmol／LNariS）,每组分别培养3,6,及12h,用RT-PCR法检测各组GES-1细胞CSE,NF-kB及IL-8mRNA表达,并分析其相关性。结果：Hpylori组CSE,NF—gB及IL-8mRNA表达均较对照组增加／1（P〈0．05）,200umol／LNariS组和4008mol／LNariS组CSE表达较对照组降低（p〈o．05）;而NariS各组NF,KB和IL-8mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义（P〉O．05）;NariS各组、Hpylori＋200um01／LNaHS组及Hpylori＋400umol／LNaris组CSE,NF—KB及IL-8m对弧表达均较Hpylori组降低（P〈0．05）;Hpylori组、Hpylori＋200umol／LNariS组及Hpylori＋4008mol／LNaHS组CSE,NF—KB及IL．8mRN．~达之间均呈正相关（P〈O．05）。结论：Hpylori诱导GES-1细胞NF．gB和IL-8mRNA表达,并上调CSEmRNA表达;200和400[tmol／LNaHS能抑NH．pylori感染诱导的GES—1细胞NF．KB和IL-8mRN朦达,改善Hpylori感染所致的细胞形态学变化,对细胞起保护作用。     

幽门螺杆菌感染患儿血清IL-6、IL-8水平的变化

目的:检测幽门螺杆菌(H.pylori)感染患儿血清IL-6、IL-8的水平变化.方法:采用ELISA法(酶联免疫吸附实验),测定32例H.pylori感染患儿和34例无H.pylori感染患儿血清IL-6和IL-8水平的变化.结果:IL-8在H.pylori感染组和无H.pylori感染组的浓度分别是(292.40±252.14)和(155.55±144.40)pg/mL,两组比较有差异性(P<0.05).IL-6在H.pylori感染组和无H.pylori感染组的浓度分别是(10.62±3.54)和(10.59±3.89)pg/mL,两组比较无差异性(P>0.05).结论:H.pylori感染患儿的血清IL-8水平会升高,而血清IL-6的水平不升高,IL-8可能参与了H.pylori感染的致病过程.     

血清IL-8表达水平和IL-8-251A/T基因多态性及幽门螺杆菌感染与胃癌发生的相关性

目的 探讨血清白细胞介素-8(IL-8)水平、IL-8-251A/T基因多态性和幽门螺杆菌感染与胃癌发生的相关性.方法 选择2016年3月-2019年3月在郑州市第七人民医院进行胃部内镜筛查以及住院患者作为研究对象,其中胃癌患者167例(胃癌组),包括幽门螺杆菌感染104例、无幽门螺杆菌感染63例;正常对照者219例(...     

B细胞单克隆形成与幽门螺杆菌感染

为探讨淋巴细胞性胃炎是否有Ｂ细胞单克隆形成，以及该克隆形成的意义及其与幽站螺杆菌（ＨＰ）感染的关系。采用Ｇｉｅｍｓａ染色，免疫组化染色以及半巢式ＰＣＲ技术对２６例淋巴细胞性胃炎及１１例对照标本进行ＨＰ检查和Ｂ细胞单克隆性检测。结果显示：在２６例淋巴细胞性胃炎中有１４例查见ＨＰ，其检出率为５３．８％，但与对照组比较无差异（Ｐ〉０．０５）。免疫组化发现２６例淋巴细胞性胃炎均为多克隆性，但ＰＣＲ技术却发现有７例存在Ｂ细胞单克隆性重排（２６．９％），且ＨＰ阳性组其单克隆性重排检出率明显高于ＨＰ阴性组（Ｐ〈０．０５）。结果提示，组织学及免疫组化显示良性的淋巴细胞性胃炎中确有Ｂ细胞单克隆形成，该单克隆的形成可能是肿瘤早期病变的潜在标志，且与ＨＰ感染有关，但并非仅与ＨＰ感染有关。     

沙眼衣原体激活MAPK通路而非NF-κB通路诱导IL-8生成

目的：研究沙眼衣原体诱导上皮细胞产生IL-8的信号通路。方法：应用Western印迹、免疫荧光技术和酶联免疫吸附实验（ELISA）检测沙眼衣原体感染Hela 229细胞后诱导的细胞内、外IL-8表达情况,并对细胞内IL-8定位;Western印迹和免疫荧光技术检测沙眼衣原体感染后MAPK 和NF-κB 信号通路活化情况;利用MAPK 和NF-κB 信号通路化学抑制剂抑制MAPK 和NF-κB 通路,观察其对沙眼衣原体诱导IL-8生成的影响。结果：沙眼衣原体感染可诱导IL-8产生,呈时间依赖性;沙眼衣原体感染可激活MAPK/ERK 和MAPK/p38 信号通路,但不能激活NF-κB信号通路;利用化学抑制剂抑制ERK和p38通路可以抑制沙眼衣原体诱导上皮细胞产生IL-8。结论：沙眼衣原体诱导上皮细胞产生IL-8依赖于MAPK 信号通路,但不依赖NF-κB信号通路。     

幽门螺杆菌外膜蛋白cagL基因的克隆、表达及其对IL-8 mRNA表达的影响

目的:克隆表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H.pylori)NCTC11637菌株cagL基因,并探讨其对IL-8 mRNA表达的影响.方法:设计cagL引物,应用PCR扩增目的基因片段,TA克隆后测序分析, 用信息学软件分析其物理化学特性,并构建表达载体cagL-PET28a(+)转化E.coli BL-21(DE3),IPTG诱导表达, 镍亲和层析纯化,SDS- PAGE及蛋白质印迹鉴定表达蛋白.纯化蛋白与细胞GES-1共培养,提取细胞总RNA,RT-PCR检测细胞IL-8mRNA表达.结果:测序分析表明cagL编码成熟肽的碱基序列为654 bp,编码217个氨基酸,与基因库公布的其他H.pylori菌株的基因序列同源性为96%～98%,氨基酸同源性为 97%～99%,软件预测显示有多个明显的具有抗原活性的结构域;表达蛋白的相对分子质量约为32 000,蛋白质印迹检测融合蛋白具有良好的抗原活性;重组蛋白作用于GES-1细胞后,可诱导细胞因子 IL-8 在 mRNA 水平上的表达.结论:CagL蛋白可刺激GES-1细胞IL-8 mRNA的表达.     

幽门螺杆菌CagA相关胃炎与IL-8、IL-6及TNF-α关系的探讨

目的 :探讨幽门螺杆菌 Cag A相关胃炎与血清 IL- 8、IL- 6及 TNF- α的关系。方法 :将 1 2 0例病人随机分为两组 ,健康对照(AC)组 4 8例 ,慢性胃炎 (CAG)组 72例。全部病例取胃黏膜行快速尿素酶试验 (RUT)及病理特殊染色 (Gram's)检查、并行血清抗 HPIg G(EL ISA)检测 ,两项阳性者为 HP感染 ,均呈阴性者为无 HP感染 ,仅一项阳性者不计入内 ;确诊 HP感染后 ,用Western Blotting方法检测 Cag A抗体 ,根据 Cag AHP感染阳性标准分为 Cag A+ HP组及 Cag A- HP两组 ,并分别检测两组血清IL- 8、IL- 6、TNF- α含量。结果 :两组间 HP感染率差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,而 Cag A+ HP感染率及 Cag A+ HP/ HP比值 ,CAG组明显高于 AC组 (P<0 .0 1 ) ,Cag A+ HP组 IL- 8、TNF- α含量明显高于 AC组 ,而 IL- 6含量两组间差异无统计学意义 (P>0 .0 5 )。结论 :Cag A+ HP、IL - 8、TNF-α在引起胃炎进一步炎症反应及病理损害过程中可能起重要的作用 ;IL - 6可能不参与致病过程     

B细胞单克隆形成与幽门螺杆菌感染

为探讨淋巴细胞性胃炎是否有 B细胞单克隆形成 ,以及该克隆形成的意义及其与幽门螺杆菌(HP)感染的关系。采用 Giem sa染色 ,免疫组化染色以及半巢式 PCR技术对 2 6例淋巴细胞性胃炎及 11例对照标本进行 HP检查和 B细胞单克隆性检测。结果显示 :在 2 6例淋巴细胞性胃炎中有 l4例查见 HP,其检出率为5 3.8% ,但与对照组比较无差异 (P>0 .0 5 )。免疫组化发现 2 6例淋巴细胞性胃炎均为多克隆性 ,但 PCR技术却发现有 7例存在 B细胞单克隆性重排 (2 6 .9% ) ,且 HP阳性组其单克隆性重排检出率明显高于 HP阴性组 (P <0 .0 5 )。结果提示 ,组织学及免疫组化显示良性的淋巴细胞性胃炎中确有 B细胞单克隆形成 ,该单克隆的形成可能是肿瘤早期病变的潜在标志 ,且与 HP感染有关 ,但并非仅与 HP感染有关。     

兰索拉唑对幽门螺杆菌诱导人胃上皮细胞产生IL-1β和IL-8的影响

目的：探讨兰索拉唑对幽门螺杆菌（helicobacter pylori,Hp）感染的胃上皮细胞的体外抗炎效应。方法体外培养胃上皮细胞系AGS,加入兰索拉唑和培养的Hp感染不同时间。ELISA检测IL-1β和IL-8的产生,Western blot检测NF-κB p 65亚基的核转位以及红素氧合酶1（Heme oxygenase-1, HO-1）蛋白表达水平。结果兰索拉唑孵育8 h后,能显著抑制Hp诱导的IL-1β和IL-8。同时,兰索拉唑能抑制NF-κB p 65亚基的核转位,并能上调HO-1蛋白的表达。结论兰索拉唑可能通过抑制NF-κB的激活,上调HO-1的表达而发挥对胃上皮细胞的抗炎作用。     

幽门螺杆菌感染对十二指肠球部溃疡患者血清IL-6、IL-8及NO的影响

目的：探讨幽门螺杆菌（Hp）感染对十二指肠球部溃疡患者血清白细胞介素6、8（IL-6、IL-8）及一氧化氮（NO）的影响。方法：分别采用双抗体夹心ELISA法和硝酸还原酶法检测40例Hp感染的十二指肠球部溃疡患者（根除Hp组和未根除Hp组）治疗前、后和10例正常对照组血清中IL-6、IL-8及NO水平的变化,并进行比较。结果：治疗2周后根除Hp组血清IL-6、IL-8及NO水平高于正常对照组,但差异无统计学意义（P〉0．05）,未根除Hp组血清IL-6、IL-8及NO水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;根除Hp组治疗后IL-6、IL-8及NO水平较治疗前均有显著下降（P〈0．01）,而未根除Hp组治疗后IL-6、IL-8及NO水平较治疗前也均有下降,但差异无统计学意义（P〉0．05）;与未根除Hp组比较,根除Hp组治疗后IL6、IL-8及NO均有显著下降（P〈0．01）。结论：Hp感染的十二指肠球部溃疡存在不同程度炎症,而且Hp对炎症起促进作用,根除Hp对其炎症反应起到明显抑制作用。     

幽门螺杆菌感染患者胃泌素、IL-8、IL-10水平变化

目的：研究幽门螺杆菌（HP）感染与白介素-8（IL-8）、白介素-10（IL-10）和胃泌素（GAS）的关系。方法：108例患者均经^13C-尿素呼气实验和血清学检测HP,并于晨起空腹在胃镜检查前后取静脉血2mL,3000rpm离心10分钟,分离血清,测定血清中GAS、IL-8、IL-10的含量。结果：HP阳性组血清IL-8、IL-10、GAS含量分别为51．49±9．41pg／mL、312．84±47．91pg／mL、10．34±7．24ng／mL。HP阴性组血清IL-8、IL-10、GAS含量分别为37．44±9．05pg／mL、356．39±51．89pg／mL和5．12±3．51ng／L。HP阳性组血清IL-8、GAS含量分别高于阴性组（P〈0．01）,IL-10含量低于HP阴性组（P〈0．01）。HP阳性组血清IL-8与GAS间呈正相关（r=0．382,P〈0．01）,IL-10与GAS间呈负相关（r=-0．202,P〈0．05）。结论：HP感染的慢性胃炎和消化性溃疡患者IL-8、IL-10、GAS含量变化与HP感染有关,HP感染胃肠黏膜产生的炎症损伤与IL-8有关,血清IL-10对炎症有抑制作用。     

不同类型幽门螺杆菌对GES-1细胞GJIC功能的影响

目的:观察不同类型幽门螺杆茵(Helicobacter pylori,H.pylori)对GES-1细胞间隙连接通讯功能(gap junction intercellular communication,GJIC)的影响,探讨与GJIC功能异常有关的H.pylori菌株类型.方法:将临床培养分离的不同H.pylori茵...     

幽门螺杆菌对胃癌细胞线粒体外膜电压依赖阴离子通道的影响

目的 观察幽门螺杆菌(HP)作用于胃癌细胞后VDAC1、VDAC2和VDAC3 mRNA的表达变化,探讨HP通过线粒体途径致凋亡的分子机制.方法 HP分别作用于胃癌细胞,0、12、24、48h后收集细胞,提取RNA,应用RT-PCR 检测各时相点VDAC1、VDAC2和VDAC3 mRNA表达的变化.结果 HP与胃癌细胞共培养12h后,VDAC1、VDAC2和VDAC3 mRNA的表达均增加,24、48h仍呈上升趋势.各时相点的表达量明显高于对照组(P<0.05).结论 HP可能通过上调VDAC 基因的表达,使线粒体膜通透性改变,引发凋亡.     

幽门螺杆菌感染与胃粘膜炎症反应和IL-8活性的关系

目的 评价幽门螺杆菌（Hp）感染与胃粘膜炎症反应和组织IL－8活性的关系。方法 采用改良Giemsa染色、Hp免疫组化染色和PCR方法检测Hp感染并对Hp分类;组织IL－8含量测定采用ELISA方法。结果 十二指肠溃疡（DU,95％）、胃溃疡（GU,80％）和慢性萎缩性胃炎（CAG,70％）组Hp感染率显著高于正常对照组（30％）,而慢性浅表性胃炎（CSG,37．5％）组与正常对照组相比则无显著差异;DU（85％）、GU（60％）和CAG（50％）组cagA^ Hp感染率显著高于正常对照组（15．0％）,而CSG组（15．6％）与对照组相比则无显著差异;Hp感染率和IL－8水平随炎症程度的加重而增高。Hp感染和cagA^ Hp感染胃粘膜IL－8水平分别显著高于非Hp感染和cagA^-Hp胃粘膜。结论 胃粘膜Hp感染以及Hp cagA的表达状态与胃粘膜炎症反应程度以及胃粘膜IL－8含量密切相关。     

不同程度慢性乙型肝炎患者血氨浓度比较及幽门螺杆菌感染对血氨的影响

目的观察不同程度慢性乙型肝炎患者的血氨浓度及幽门螺杆菌(Hp)感染对血氨浓度的影响.方法对420例慢性乙肝病人采用14C呼气试验检测Hp感染,用谷氨酸脱氢酶两点法测定病人的血氨浓度,同时对随机选取的70例Hp阳性乙肝患者进行抗Hp治疗.结果血氨浓度重度肝炎组[(87.0±14.7)μmol/L]高于轻度[(59.0±18.9)μmol/L]和中度[(62.0±20.1)μmol/L]肝炎组(均P＜0.05).血氨浓度轻度、中度、重度肝炎组病人中Hp感染者[(56.0±14.7)μmol/L、(58.0±17.9)μmol/L、(87.0±14.7)μmol/L]与非感染者[(55.0±14.7)μmo1/L、(60.0±15.5)μmol/L、(86.0±20.1)μmol/L]的差别均无显著性意义(均P＞0.05).伴Hp感染的乙肝病人抗Hp治疗前血氨浓度[(59.0±15.4)μmol/L]与治疗后血氨浓度[(64.0±21.5)μmol/L]的差别也无显著性意义(P＞0.05).结论乙肝患者的血氨浓度与是否存在Hp感染无关,而与肝炎的严重程度有关.     

ATP4B在不同程度胃黏膜病变中的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系

目的研究ATP4B在胃黏膜病变演化过程中的表达变化。并探讨其与幽门螺杆菌（Hellcobacter pylori,Hp）感染的关系。方法根据组织形态学检查将221例胃镜活检标本分为慢性浅表性胃炎（CSG）、慢性萎缩性胃炎（CAG）、肠上皮化生（IM）和异型增生（Dys）4组;采用免疫组织化学方法检测ATP4B的表达情况;根据胃镜检查时快速尿素酶试验结果确定Hp感染状态。结果ATP4B表达水平随胃黏膜病变演化而降低,在4组的表达率分别为51．4％、15．4％、15．9％及5．0％．CSG组ATP4B表达水平显著高于其他各组（P〈0．05）。CSG组中Hp阳性标本ATP4B的表达率为33-3％,显著低于其在Hp阴性标本中的表达率（59．7％,P〈0．05）;在另外3组中,Hp阳性标本与阴性标本ATP4B的表达率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在胃黏膜病变演化过程中,ATP4B的表达随胃黏膜病变的进展而降低;Hp在胃黏膜病变演化的早期阶段抑制了ATP4B的表达。     

3种中药有效成分对幽门螺杆菌培养滤液转化的人胃黏膜上皮细胞的杀伤作用

目的明确3种中药有效成分三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙单用或配伍对经过幽门螺杆菌培养滤液转化后的永生化人胃黏膜上皮GES-1细胞(简称HP细胞)的凋亡诱导作用。方法以三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙单独或联合作用HP细胞,AnnexinV及PI双染,流式细胞仪检测药物对HP细胞凋亡/坏死的影响;电镜和Hoechst33258及PI双染荧光显微镜观察凋亡细胞形态。结果三七皂甙、黄芪皂甙及黄芩甙单用可引起HP细胞凋亡及死亡比例增加并呈一定的时间依赖性,配伍应用作用强于单独应用(与对照组比较P<0.05),增强程度从大至小依次为三药合用>三七皂甙黄芪皂甙合用>黄芪皂甙黄芩甙合用>三七皂甙黄芩甙合用。结论3种中药有效成分单用及配伍对HP细胞有明显的毒性作用;引起细胞死亡的机制部分是通过诱导凋亡实现的;不同药物配伍应用的增效程度不同。     

幽门螺杆菌对胃黏膜上皮细胞自噬和凋亡的影响

目的：探讨幽门螺杆菌（Hp）对胃黏膜上皮细胞（GES-1）自噬和凋亡的影响。方法：Hp与GES-1体外共培养,同时设立雷帕霉素（RAPA）、3-甲基腺嘌呤（3-MA）干预组及空白对照组,于2、4、6、12及24 h终止感染,通过免疫蛋白印迹、荧光染色、透射电镜、流式细胞术及细胞内活菌计数等方法观察Hp对GES-1自噬和凋亡的影响。结果：Hp＋GES-1组在2 h出现自噬标志蛋白LC3-Ⅱ表达及细胞内荧光自噬颗粒,透射电镜观察到细胞内出现双层或多层膜包裹的自噬小体样结构,细胞自噬在4 h达高峰,感染中后期逐渐减弱并消失;RAPA＋Hp＋GES-1组细胞自噬程度进一步增强,细胞凋亡率及细胞内活菌数均降低（P〈0.05-P〈0.01）;3-MA＋Hp＋GES-1组细胞自噬强度显著降低,而其细胞凋亡率和细胞内活菌数均明显升高（P 〈0.01）。结论：Hp可在感染早期诱导GES-1自噬;RAPA和3-MA可增强或降低自噬发生程度,从而减轻或促进细胞损伤。