七子益肾理冲汤对DOR大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响

目的探讨七子益肾理冲汤对VCD致卵巢储备功能低下(diminished ovarian reserve,DOR)大鼠之卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法 60只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、中药低、中、高剂量组及DHEA组。模型组采用VCD注射制作DOR大鼠模型。观察各组大鼠HE染色卵巢切片中各级卵泡数及黄体数量,及TUNEL法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡率。结果与空白组比较,模型组卵巢原始卵泡数量及生长卵泡数量显著下降(P0.05);与空白组比较,中药高剂量组及西药组的原始卵泡数量及生长卵泡数量均无显著差异;模型组较空白组卵巢颗粒细胞凋亡率显著上升(P0.05),经治疗后,中药中剂量、高剂量组及西药组大鼠的颗粒细胞凋亡率均比较模型组明显降低(P0.05)。结论七子益肾理冲汤可減少卵巢细胞凋亡,修复卵巢原始卵泡储备的损失。     

坤泰胶囊对卵巢储备功能下降大鼠卵巢凋亡调控蛋白Bcl-2,Bax表达的影响

目的:探讨坤泰胶囊对去氧乙烯基环己烯(4-vinylcyclohexene diepoxide,VCD)所致卵巢储备功能下降(decreasing ovarian reserve,DOR)大鼠凋亡调控蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响,研究该药的作用机制。方法:SD雌性大鼠连续腹腔注射VCD(80 mg·kg~(-1))15 d,建立与人类相似的生理性卵巢储备功能下降模型。将动物分为正常组,模型组,坤泰胶囊高、中、低剂量组(1.89,0.63,0.21 g·kg-1),补佳乐(戊酸雌二醇,0.13 mg·kg~(-1))组,于造模第1天开始灌胃给药,每天1次,连续45 d。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清激素卵泡刺激素(FSH),黄体生成素(LH)及雌二醇(E2)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢、子宫的病理组织变化,蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测卵巢组织Bcl-2,Bax蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组FSH与LH明显升高,E_2明显降低(P0.05);模型组卵巢、子宫体积明显缩小,原始卵泡与初级卵泡数目明显减少,子宫内膜变薄,腺体数目减少;模型组大鼠卵巢Bcl-2蛋白表达明显减少,Bax蛋白表达明显增加(P0.05),Bcl-2/Bax显著下降(P0.01)。与模型组比较,坤泰胶囊高、中、低剂量组FSH明显降低,E_2明显升高(P0.05);补佳乐组FSH,LH明显降低,E2明显升高(P0.05)。各给药组卵巢、子宫体积增大,原始卵泡与初级卵泡数目增多,子宫内膜变厚,腺体数目增加,改善程度顺序依次为坤泰胶囊低、中、高剂量组、补佳乐组。坤泰胶囊高、中、低剂剂量组及补佳乐组大鼠卵巢Bcl-2蛋白表达明显增加(P0.05,P0.01);坤泰胶囊高、中、低剂量组及补佳乐药组大鼠卵巢Bax蛋白表达减少(P0.05);坤泰胶囊高、中、低剂量组及补佳乐组大鼠卵巢Bcl-2/Bax升高(P0.05,P0.01)。结论:坤泰胶囊可能通过上调卵巢Bcl-2蛋白表达及下调Bax蛋白表达,抑制卵泡的凋亡,从而改善卵巢功能。     

针刺对雷公藤多苷片所致卵巢功能减退大鼠氧化应激及凋亡的影响

目的:探索针刺是否通过调节大鼠抗氧化应激状态及颗粒细胞凋亡来改善雷公藤多苷片所致的卵巢功能减退(DOR)。方法:将有正常动情周期的SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、激素组、针刺组,每组10只。采用雷公藤多苷片混悬液灌胃(50 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续14 d)制备DOR大鼠模型。激素组予雌孕激素序贯疗法干预,针刺组针刺双侧"肾俞"或"关元""中脘"(隔日轮流进行),连续14 d。第9天开始观察各组大鼠的动情周期;实验结束后观察各组大鼠卵巢指数;采用HE染色法观察各组大鼠卵巢形态;ELISA法检测各组大鼠血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的含量;免疫组织化学法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达水平;荧光定量PCR法检测各组大鼠卵巢内Bax及Bcl-2 mRNA相对表达量。结果:与空白组比较,模型组卵巢内成熟卵泡减少,闭锁卵泡增多,颗粒细胞形态多出现异常,动情周期紊乱比例升高(P<0. 01),卵巢湿重及卵巢指数明显降低(P<0. 01),血清E2含量显著降低(P<0. 01),FSH、LH、MDA含量明显升高(P<0. 05,P<0. 01),血清SOD含量明显降低(P<0. 01),卵巢组织Bax蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0. 01),卵巢组织Bcl-2蛋白及mRNA表达水平显著降低(P<0. 05,P<0. 01)。与模型组比较,激素组及针刺组卵巢内成熟卵泡增多,闭锁卵泡减少,颗粒细胞形态异常情况明显减少,动情周期紊乱比例显著下降(P<0. 01),卵巢湿重及卵巢指数显著升高(P<0. 01),血清E2含量升高(P<0. 05),FSH、LH、MDA含量降低(P<0. 01,P<0. 05),血清SOD含量明显升高(P<0. 05,P<0. 01),卵巢组织Bax蛋白及mRNA表达水平显著降低(P<0. 01),卵巢组织Bcl-2蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0. 01)。与激素组比较,针刺组SOD含量显著升高(P<0. 01),Bax及Bcl-2蛋白表达水平上升(P<0. 05,P<0. 01),Bcl-2 mRNA表达水平下降(P<0. 01)。结论:针刺可以提高大鼠对抗卵巢氧化应激的能力,降低颗粒细胞的凋亡情况,从而减轻雷公藤多苷片所致的DOR损伤。     

隔药灸脐对卵巢早衰模型大鼠Bcl-2、Bax蛋白和mRNA表达的影响

目的观察隔药灸脐对卵巢早衰模型大鼠Bcl-2和Bax表达的影响,探讨其对卵巢的保护机制。方法采用腹腔注射环磷酰胺建立大鼠卵巢早衰模型。48只雌性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸脐组、西药组,每组12只。隔药灸脐组大鼠隔药灸"神阙",30 min/d,隔日1次,连续14 d;西药组大鼠予戊酸雌二醇灌胃,每日1次,连续14 d。采用免疫组化、Western blot和实时荧光定量PCR检测大鼠卵巢凋亡相关因子Bcl-2、Bax蛋白和mRNA的表达。结果模型组大鼠卵巢质量明显低于正常组(P0.05)。Bcl-2、Bax蛋白主要表达在细胞胞浆中,隔药灸脐组和西药组较模型组卵泡颗粒细胞Bax表达范围明显缩小,Bcl-2表达范围明显增加。与正常组比较,模型组大鼠卵巢Bcl-2蛋白和mRNA表达明显降低(P0.05,P0.01),Bax蛋白和mRNA表达显著升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,隔药灸脐组和西药组大鼠卵巢Bcl-2蛋白和mRNA表达显著升高(P0.05,P0.01),Bax蛋白和mRNA表达明显降低(P0.05,P0.01)。结论隔药灸脐可能通过上调卵巢早衰模型大鼠卵巢Bcl-2和下调Bax的表达,改善卵巢功能。     

益气化瘀方对子宫复旧不全大鼠子宫内膜细胞凋亡相关蛋白的影响

目的观察益气化瘀方对子宫复旧不全大鼠子宫内膜细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响,探讨其作用机制。方法 40只分娩后SD大鼠随机分为空白组、模型组、新生化组和益气低、高剂量组。除空白组外,分娩后,将过夜培养的大肠杆菌进行子宫内接种制备大鼠炎症产后子宫复旧不全模型,并于造模后第1-7日分别给予相应药物灌胃。HE染色观察各组大鼠子宫切片病理变化;免疫组化检测子宫内膜组织Bcl-2、Bax蛋白表达。结果模型组Bcl-2蛋白表达明显低于空白组(P0.01),Bax蛋白表达明显高于空白组(P0.01);益气低、高剂量组和新生化组Bcl-2蛋白表达较模型组均明显升高(P0.01),Bax蛋白表达均明显降低(P0.01);益气低剂量组Bcl-2蛋白表达较新生化组明显降低(P0.01),Bax蛋白表达较新生化组明显升高(P0.01)。结论益气化瘀方可能通过上调Bcl-2、下调Bax蛋白表达,降低子宫内膜细胞凋亡的发生,促进子宫内膜增生修复,从而促进产后子宫复旧。     

补肾填精中药干预雷公藤多甙致卵巢储备下降大鼠卵巢功能的实验研究

目的:阐释补肾填精中药改善卵巢储备功能的效应机理与靶点。方法:12周龄雌性SD大鼠50只,随机分为5组:空白组、雷公藤模型组、补肾填精中药低、中、高剂量组。观察灌服上述不同药物后大鼠一般情况、卵巢指数、卵巢组织病理形态、血清E2、FSH、P、T水平,卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达及血管内皮生长因子VEGF、VEGF受体的表达。结果:补肾填精中药能升高DOR大鼠血清E2水平,降低FSH、P、T水平;上调卵巢颗粒细胞凋亡抑制因子Bcl-2,下调凋亡促进因子Bax、Caspase-3蛋白的表达;对卵巢颗粒细胞VEGF的表达有较弱的促进作用,对VEGF受体的表达无影响。结论:补肾填精中药干预卵巢储备功能低下、保护卵巢的效应机理主要是调节生殖激素、抑制细胞凋亡、促进血管生成,卵巢颗粒细胞是其发挥效应的靶点之一。     

针药联合对卵巢储备功能不足大鼠卵巢细胞凋亡因子和生殖激素的影响

目的:观察针药结合对卵巢储备功能不足(decreased ovarian reserve,DOR)大鼠卵巢细胞凋亡因子和生殖激素的影响,探讨其作用机理。方法:将72只SD大鼠随机分为对照组、中药组、针刺组、模型组、西药组和针药组,每组12只。除对照组采用等量生理盐水灌胃外,其余五组均采用雷公藤多苷药液灌胃,建立符合实验要求的DOR大鼠模型。针药组、中药组予护卵汤灌胃,针刺组和模型组采用等量生理盐水灌胃,西药组采用克龄蒙药液灌胃,同时对针药组、针刺组进行针刺,以上操作持续16 d。采用ElISA法检测血清雌二醇(estradiol,E2)、促卵泡生成素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)及抗缪勒氏管激素(Anti-Mullerian Hormone,AMH)水平,PCR检测卵巢组织中细胞凋亡因子Bax、Caspase-3、Bcl-2的表达。结果:与对照组比较,模型组FSH、LH、Bax、Caspase-3表达明显升高,E2、AMH、Bcl-2明显降低(P 0. 05);与模型组比较,针刺组、中药组、针药组及西药组FSH、Bax、Caspase-3明显降低,E2、AMH、Bcl-2明显升高(P 0. 05)。结论:针刺联合护卵汤可调节性激素和凋亡因子,促进卵泡生长,抑制卵泡闭锁,从而改善卵巢功能。     

加减益经汤对卵巢功能减退大鼠性激素与卵巢组织形态学的影响

目的:研究加减益经汤对环磷酰胺(CTX)所致卵巢功能减退(DOR)大鼠性激素与卵巢组织形态学的影响。方法:成年雌性SD大鼠随机选出10只作为空白对照组,其余大鼠采用CTX 75 mg/kg腹腔单次注射造模,造模成功后将大鼠分为模型对照组、补佳乐组和加减益经汤高、中、低剂量组,每组10只。加减益经汤高、中、低组予加减益经汤,生药剂量分别为23.58、11.79、5.895 g/kg;补佳乐组予补佳乐,0.09 mg/kg;模型对照组与空白对照组灌胃10 mL/kg蒸馏水。造模当日开始予灌胃给药,1次/d,连续28 d。模型对照组在造模后2周,其余各组在给药结束后,于动情间期处死。观察大鼠的一般情况、动情周期、卵巢指数、卵巢组织形态变化,检测血清FSH、LH、E2值。结果:与模型对照组比较,加减益经汤与补佳乐可恢复DOR大鼠动情周期,升高卵巢指数(P<0.01),降低血清FSH、LH(P<0.05或P<0.01),升高血清E2(P<0.01),改善卵巢组织形态,增加原始、成熟卵泡数(P<0.05或P<0.01),降低初级、次级、闭锁卵泡数(P<0.01)。结论:加减益经汤可明显改善CTX所致DOR大鼠的性激素与卵巢组织形态学,其中中剂量是最适宜剂量。     

养阴舒肝颗粒对VCD诱导卵巢功能下降大鼠Bcl-2,Bax及Caspase-3蛋白表达的影响

目的:探讨养阴舒肝颗粒对卵巢功能下降模型大鼠卵巢功能及;B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白的影响。方法:选取动情周期规则的雌性SD大鼠,取10只作为正常组,其余大鼠均采用160 mg·kg~(-1)去氧乙烯基环己烯(VCD)腹腔注射诱导卵巢功能下降模型,取造模成功的56只大鼠按体质量随机分为模型组,养阴舒肝颗粒低(2.1 g·kg~(-1)),中(4.2 g·kg~(-1)),高剂量组(8.4 g·kg~(-1))和坤泰胶囊组,每组11只(模型组12只)。采用养阴舒肝颗粒和坤泰胶囊进行灌胃给药,干预治疗4周后进行卵巢称质量,计算各级卵泡的数目,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清性激素水平卵泡刺激素(FSH),雌二醇(E_2),抗缪勒氏管激素(AMH),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织Bcl-2,Bax,Caspase-3的表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠的卵巢质量和卵巢指数下降(P0.01),闭锁卵泡数目增多(P0.01),FSH水平升高(P0.01),E_2和AMH水平下降(P0.05),卵巢组织Bcl-2蛋白的表达减少(P0.01),Bax,Caspase-3蛋白的表达(P0.01);与模型组比较,养阴舒肝颗粒可以增加模型大鼠的双侧卵巢质量(P0.05,P0.01);养阴舒肝颗粒和坤泰胶囊可以增加卵巢指数(P0.05,P0.01);养阴舒肝颗粒可以减少闭锁卵泡的数目(P0.05);养阴舒肝颗粒和坤泰胶囊均可以降低FSH水平(P0.05),升高E_2和AMH水平(P0.05),增加卵巢组织Bcl-2的表达(P0.01),同时抑制Bax,Caspase-3的表达(P0.01)。结论:养阴舒肝颗粒可以提高卵巢功能下降模型大鼠的卵巢功能,其机制可能与抗细胞凋亡有关。     

左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠卵巢Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的探讨左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠(POF)卵巢Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法以小鼠透明带3为抗原,皮下多点注射免疫BALB/c雌性小鼠建立免疫性卵巢早衰模型。设左归丸低、中、高剂量进行治疗,以泼尼松、己烯雌酚为阳性对照,免疫组化法检测卵泡、卵巢间质Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果与空白对照组比较,模型组大卵泡及小卵泡Bcl-2蛋白的表达均减少,Bax蛋白的表达均增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,左归丸高剂量组大卵泡及小卵泡Bcl-2蛋白的表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.001);左归丸高、中、低剂量组卵巢间质Bcl-2蛋白的表达均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05～0.001),大卵泡及小卵泡Bax蛋白的表达均减少,差异有统计学意义(P<0.01～0.001);左归丸中剂量组卵巢间质Bax蛋白的表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。左归丸各剂量组卵泡Bcl-2蛋白的表达呈现一定的量效关系。结论卵泡凋亡过快可能导致卵巢早衰,左归丸可能通过上调卵泡及卵巢间质Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,抑制卵泡的过快凋亡,从而改善卵巢功能。     

滋肾清心汤对围绝经期大鼠卵巢bcl-2和bax表达影响的实验研究

目的:研究中药滋肾清心汤对围绝经期大鼠卵巢bcl-2和bax蛋白表达的影响,探讨滋肾清心汤治疗围绝经期综合征可能的作用机制。方法:选用自然衰老的围绝经期雌性大鼠,随机分为4组(每组10只):更年期大鼠模型组(模型组)和滋肾清心汤高、中、低剂量组,另选10只青年雌性大鼠作为青年对照组。连续灌胃处理4周后,采用蛋白印迹(Western blot)及RT-PCR检测大鼠卵巢中Bcl-2和Bax蛋白及基因的表达。结果:与模型组相比,滋肾清心汤高剂量能显著降低卵巢组织中Bax蛋白的表达,显著上调Bcl-2/Bax的比值;滋肾清心汤各剂量均能明显降低卵巢组织中Bax基因表达,明显升高Bcl-2基因表达,从而显著上调Bcl-2/Bax比值,延缓卵巢颗粒细胞的凋亡。结论:滋肾清心汤通过调节围绝经期大鼠卵巢中凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白及基因的表达,上调Bcl-2/Bax蛋白及基因的比值,从而延缓卵巢衰老,这可能是其治疗围绝经期综合征的分子机制之一。     

益气化瘀方对子宫复旧不全大鼠子宫内膜细胞凋亡与产后子宫内膜增殖影响研究

目的:通过对比分析益气化瘀方对子宫复旧不全SD级大鼠子宫内膜细胞凋亡及子宫内膜增殖影响的研究,为孕妇产后疾病的治理提供理论依据。方法:选取试验用无特定病原体级实验动物(SPF级动物)SD大鼠为研究对象,按照实验需求,分为5组,除去空白组以外的四组进行子宫内接种大肠杆菌,进行造模,然后给药,观察大鼠子宫内膜细胞凋亡率、大鼠子宫内膜细胞凋亡因子Bcl-2和Bax的表达情况。结果:(1)与模型组对比,新生化颗粒组、益气化瘀方低剂量组和益气化瘀方高剂量组大鼠子宫内膜凋亡率降低,P0.05;与新生化颗粒组比较,益气化瘀方高剂量组大鼠子宫内膜细胞凋亡率无统计学差异,P0.05,益气化瘀方低剂量组大鼠子宫内膜凋亡率升高,P0.05;与空白组比较,模型组大鼠子宫内膜凋亡率显著升高,P0.05。(2)与模型组对比,新生化颗粒组、益气化瘀方低剂量组和益气化瘀方高剂量组Bcl-2蛋白表达增加,Bax表达减少,P0.05;与新生化颗粒组比较,益气化瘀方高剂量组Bcl-2蛋白表达和Bax表达无统计学差异,P0.05,益气化瘀方低剂量组Bcl-2蛋白表达减少,Bax表达增加,P0.05;与空白组比较,模型组Bcl-2蛋白表达明显下降,Bax表达增加,P0.05。结论:益气化瘀方能通过调节使Bax蛋白表降低,使Bcl-2蛋白表达增加,从而降低子宫内膜细胞凋亡率,促进产后子宫增殖恢复。     

补肾壮督方对大鼠退变椎间盘细胞线粒体凋亡通路的影响

目的:观察补肾壮督方对大鼠退变椎间盘细胞凋亡的影响,探讨其改善椎间盘退变的机制。方法:100只SD雄性大鼠,采用纤维环全层针刺造模,随机分为空白组,模型组,补肾壮督方低、中、高剂量组(0. 38,0. 77,1. 53 g·kg-1),连续中药灌胃4周后,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠椎间盘组织病理学变化;原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测退变椎间盘中髓核细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测椎间盘组织中活化半胱氨酸蛋白酶-3(active Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),细胞色素C(cyt C)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠椎间盘组织病理学评分显著增加,髓核细胞凋亡率明显增加(P 0. 05),active Caspase-3,cyt C和Bax表达量均明显增加(P 0. 05),Bcl-2表达量明显下降(P 0. 05)。与模型组比较,补肾壮督方低、中、高剂量组组织病理学评分明显降低(P 0. 05),髓核细胞凋亡率明显减少(P 0. 05),active Caspase-3,cyt C及Bax表达量均明显下降(P 0. 05),Bcl-2表达量明显增加(P 0. 05)。结论:补肾壮督方可能通过减少active Caspase-3,cyt C和Bax蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达,抑制线粒体凋亡通路,并存在一定剂量依赖性,从而改善椎间盘退变。     

益肾调经方调控PI3K/Akt通路对早发性卵巢功能不全大鼠卵巢功能及凋亡蛋白表达的影响

目的：探讨益肾调经方对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠的影响及相关机制。方法：在60只动情周期正常的SD大鼠中随机选取10只大鼠作为空白组,其余50只大鼠腹腔注射环磷酰胺(CTX)诱导POI大鼠模型,建模成功后,随机分为模型组、对照组和中药低、中、高剂量组,连续给予相应药物灌胃14 d。灌胃结束后处死各组大鼠,观察大鼠的一般情况、动情周期、卵巢指数、性激素水平,HE染色观察卵巢组织结构,RT-qPCR和免疫组化检测卵巢组织中PI3K、Akt、Bcl-2和Bax mRNA及蛋白表达。结果：与空白组比较,模型组大鼠体质量明显下降(P <0.000 1),动情周期延长(P <0.000 1),卵巢指数明显下降(P <0.000 1),E2、AMH水平下降(P <0.000 1,P <0.001)、FSH、LH水平升高(P <0.000 1),模型组PI3K、Akt及Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显降低(P <0.000 1,P <0.001),Bax mRNA及蛋白表达明显升高(P <0.000 1);与模型组比较,给药组大鼠一般状况明显改善,体质量出现不同程度增长(P <0.05,P <0.001,P <0.000 1),动情周期缩短(P <0.000 1),卵巢指数升高(P <0.000 1),E2、AMH水平升高(P <0.000 1,P <0.01),FSH、LH水平降低(P <0.01,P <0.001,P <0.000 1,),PI3K、Akt及Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显升高(P <0.01,P <0.001,P <0.000 1),Bax mRNA及蛋白表达明显降低(P <0.01,P <0.000 1),且呈现明显的剂量依赖性,其中中药高剂量组改善效果最佳。结论：益肾调经方可能通过调控PI3K/Akt通路及凋亡相关蛋白从而达到改善POI模型大鼠卵巢功能的目的。     

调经活血汤对多囊卵巢大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及机制研究

目的 研究调经活血汤对多囊卵巢(PCO)大鼠的血清激素水平、卵巢质量、形态及卵巢颗粒细胞凋亡等的影响,探讨其治疗效果及作用机制.方法 大鼠造模成功后随机分成中药治疗组和对照组,观察动物体重增加幅度、血清激素水平变化情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)观察卵巢颗粒细胞凋亡,免疫组化法观察颗粒细胞凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax表达水平的变化.结果 治疗组动物体重增加幅度明显降低,中药治疗组血清T浓度较对照组、正常组显著性降低;血清E2较对照组明显降低;血清P水平较对照组明显升高,血清FSH、LH浓度与对照组无明显差异.中药治疗组卵巢镜下可见多个囊状扩张的卵泡,但体腔较对照组明显缩小,颗粒细胞层数增加至4～7层,并可见少量黄体形成;中药治疗组卵巢颗粒细胞凋亡率较对照组显著降低,卵巢颗粒细胞Bcl-2表达的OD值较对照组显著增高,Bax表达的OD值显著降低.结论 调经活血汤能使多囊卵巢大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白bcl-2表达明显升高,Bax表达明显降低,巢颗粒细胞凋亡率显著性降低;卵巢颗粒细胞层数增加,黄体形成增加:体重、血清T、E2激素水平明显下降,血清P激素水平明显升高,其作用可能与调节卵巢颗粒细胞上Bcl-2和Bax蛋白表达,影响两蛋白的比例关系,增加Bcl-2/Bax的比值,使Bax与Bcl-2蛋白形成异源二聚体,发挥其抗细胞凋亡的作用有关.     

黄芪多糖对脑缺血再灌注大鼠脑组织Bcl-2、Bax蛋白及NO含量的影响

目的:探讨黄芪多糖对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织Bcl-2、Bax蛋白及NO含量的影响。方法:将SPF级Wistar大鼠72只分为假手术组、模型组、阳性对照组及黄芪多糖高、中、低剂量组,采用改良的线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,各药物组分别给予相应药物15天后采用免疫组化法检测Bax、Bcl-2蛋白含量的表达,采用硝酸盐还原酶法检测NO蛋白含量的表达。结果:1)Bcl-2、Bax的含量模型组较假手术组表达明显增加;与模型组比较,Bcl-2表达黄芪多糖高、中剂量组增加(P0.05);Bax含量黄芪多糖高剂量组表达显著减少(P0.05)。与假手术组比较,模型组Bcl-2/Bax比值明显降低,阳性对照组与黄芪多糖各剂量组比较比值升高。2)与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中NO的水平明显升高(P0.05),与模型组比较,黄芪多糖高剂量组中NO含量明显降低(P0.05)。结论:黄芪多糖可增加凋亡抑制基因Bcl-2蛋白和降低凋亡促进基因Bax蛋白的表达,通过增加Bcl-2/Bax比例,降低NO含量,减少细胞凋亡的凋亡程度。     

育泡饮对自身免疫性POF小鼠卵巢颗粒细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

探讨育泡饮对自身免疫性POF小鼠颗粒细胞凋亡及Bax、Bcl-2表达的影响。方法:以成熟的SD雌性大鼠卵巢组织制备卵巢抗原,皮下多点注射免疫BALB/C雌性小鼠,建立卵巢早衰模型。在3次免疫后连续灌服不同剂量育泡饮,以强的松为阳性对照,分别在实验结束后用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)法观察各组卵巢颗粒细胞凋亡,免疫组化法测各组卵巢Bax、Bcl-2的表达。结果:模型组卵巢颗粒细胞Bax蛋白高表达,与正常组比较有显著性差异,育泡饮各剂量组Bax表达有不同程度降低。模型组Bcl-2蛋白低表达,与正常组比较有显著性差异,育泡饮各剂量组Bcl-2表达有不同程度提高。模型组卵巢颗粒细胞凋亡数量增加,与正常组比较有显著性差异。育泡饮各剂量组颗粒细胞凋亡数量有不同程度降低。结论:颗粒细胞凋亡是自身免疫性卵巢早衰发病的一个重要环节。育泡饮能降低自身免疫性卵巢早衰小鼠卵巢颗粒细胞Bax的蛋白表达,升高Bcl-2的蛋白表达,育泡饮可抑制颗粒细胞凋亡,从而恢复卵巢功能。     

茯苓杏仁甘草汤合橘枳姜汤对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨茯苓杏仁甘草汤合橘枳姜汤对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:SD大鼠50只,随机分为正常对照组、急性心肌缺血模型组、中药低剂量组、中药高剂量组及欣康组,每组10只。采用异丙肾上腺素腹腔注射制备大鼠急性心肌缺血模型。分别采用DNA-末端标记法及免疫组化法观察心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组细胞凋亡数量、Bax及Bcl-2蛋白表达明显增多(P0.01);与模型组比较,各药物组细胞凋亡数量及Bax蛋白表达均明显减少(P0.05),Bcl-2蛋白表达明显增多(P0.05);其中中药高剂量组抑制细胞凋亡作用明显,与中药低剂量组及欣康组差异具有统计学意义(P0.05),中药低剂量组与欣康组差异无统计学意义(P0.05)。结论:茯苓杏仁甘草汤合橘枳姜汤能通过上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白的表达,降低细胞凋亡率,达到抑制心肌细胞凋亡的目,从而起到抗心肌缺血的作用。     

“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全大鼠HPO轴和Bcl-2、Bax蛋白的影响研究

摘要：目的 探讨“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全大鼠模型的作用机制研究。方法 筛选60只雌性SD大鼠,随机分为空白组、模型组、秩边组（“秩边透水道”）、普针组（“关元”、“三阴交”、“肾俞”）和西药组（戊酸雌二醇片）,每组12只。除空白组, 其余组连续15日腹腔注射环磷酰胺建立早发性卵巢功能不全大鼠模型。普针组和秩边组分别行隔日针刺,西药组采用戊酸雌二醇灌胃,每天1次,均治疗1个月。治疗结束,采用苏木素-伊红（HE）染色观察卵巢组织病理变化;酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清中卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）水平;免疫印迹法（Western blotting）检测卵巢组织中Bcl-2和Bax蛋白水平。结果 ① 空白组卵巢组织结构清晰,含有数量丰富的生长卵泡;模型组生长卵泡几不可见,闭锁卵泡数量明显增多;干预组闭锁卵泡数量减少,生长卵泡的数量均有所增加。 ②与空白组相比,模型组FSH、LH水平明显升高（P<0.01）,E2水平显著降低（P<0.01）;与模型组相比,干预组FSH、LH水平明显降低（P<0.01）,E2水平显著升高（P<0.01）;与秩边组相比,普针组FSH水平明显升高（P<0.01）,E2水平明显降低（P<0.01）,LH水平无显著性差异（P>0.05）,西药组FSH、LH、E2水平无显著性差异（均P>0.05）。③较空白组,模型组大鼠卵巢Bcl-2蛋白水平显著降低（P<0.01）,Bax蛋白水平明显增加（P<0.01）,Bcl-2/Bax值明显下降（P<0.01）;较模型组,秩边和西药组Bcl-2水平明显增加（P<0.01）,普针组Bcl-2水平无显著性差异（P>0.05）,秩边、普针、西药组Bax水平均降低（P<0.05）,以及Bcl-2/Bax值均显著升高（P<0.01）;较秩边组,普针组Bcl-2水平明显降低（P<0.01）,Bax水平明显升高（P<0.01）,Bcl-2/Bax值显著降低（P<0.01）,西药组Bcl-2、Bax水平,Bcl-2/Bax值均无显著性差异（P>0.05）。 结论 “秩边透水道” 针法通过降低大鼠血清中FSH、LH水平,增加E2水平,纠正紊乱的下丘脑-垂体-卵巢轴（HPO）,上调Bcl-2蛋白以及下调Bax蛋白水平,延缓细胞凋亡速度,减少闭锁卵泡数量,改善POI大鼠的卵巢功能,效果优于普针组,和西药组相当。     

内障丸对青春期PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2及Bax的影响

目的：探讨内障丸对青春期PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡因子Bcl-2及Bax表达的影响。方法：以23日龄幼年SD清洁雌性大鼠为研究对象,应用皮下埋植左炔诺孕酮硅胶棒联合皮下注射HCG法建立青春期PCOS动物模型,运用免疫组织化学SABC方法及光、电镜技术等方法,检测大鼠造模前后及给药前后卵巢颗粒细胞Bcl-2,Bax的表达情况。结果：造模后模型组颗粒细胞Bcl一2,Bax,Bcl-2／Bax表达水平与正常对照组差异明显,运用阳性目标面密度进行比较,经治疗后内障丸高、中、低剂量组Bcl-2表达均强于Bax。其中高剂量组的表达与正常组接近。在对照组中,Bax表达较Bcl-2强。结论：内障丸可以抑制多囊卵巢大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及卵泡闭锁,而且可以使多囊卵巢大鼠卵泡闭锁时间提前,减轻卵巢多囊样改变,从而改善卵巢功能。