痰瘀同治方含药血清的药效强度与采血时间的关系

目的:探讨痰瘀同治方含药血清(TYTZ)的药效强度与采血时间的关系。方法:用两种不同的方案(TYTZ 78.0g·kg-1每日灌胃给药2次,持续5日和仅1次灌胃给药)制备痰瘀同治方的含药血清,分别在末次给药后0.5,1,1.5,2,3 h采血,应用MTT比色法检测不同方案制备的痰瘀同治方含药血清对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖作用的影响,并测定各组血清中基质细胞衍生因子(SDF-1)的含量,观察各组间的差异。结果:各组含药血清同空白血清比较,都能促进细胞增殖,且存在时间依赖;血清中SDF-1含量,同空白血清比较,差异有统计学意义。两种不同的给药方案相比,细胞增殖能力差异无统计学意义;血清中SDF-1含量差异有统计学意义。结论:在本实验条件下,制备含药血清不必拘泥于传统的"通法",制备方案可根据具体实验情况而定。     

西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞生长的影响

目的研究西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞系(MCF-7)生长及其细胞周期分布的影响。方法应用MTT比色法检测肿瘤细胞活性,流式细胞仪分析细胞周期相对分布。结果西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞系(MCF-7)有较强的抑制作用,其抑制率与含药血清浓度呈直线相关。流式细胞仪周期分析结果显示含药血清处理24 h,S期细胞比例增加,G2/M期细胞减少;处理48 h后,G0/1期细胞增多,S期细胞减少。结论西黄丸含药血清可抑制人乳癌细胞系(MCF-7)细胞生长,并可干扰其细胞周期。     

西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435和MCF-7细胞增殖的影响

研究西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞MDA-MB-435和MCF-7细胞增殖以及Bcl-2,Bax,TP53 mRNA及蛋白表达的影响,以期探讨西黄丸抗乳腺癌的作用特点和机制。大鼠灌胃给药制备西黄丸含药血清,实验设置大鼠空白血清组(Control)和西黄丸含药血清组(XH),以含药血清干预人乳腺癌细胞株MDA-MB-435和MCF-7,MTT法检测细胞增殖,RT-PCR法检测Bcl-2,Bax,TP53 mRNA的表达,免疫荧光法检测Bax蛋白的表达。结果显示,西黄丸大鼠含药血清可抑制MDA-MB-435细胞增殖(P0.05),西黄丸大鼠含药血清可以提高MDA-MB-435细胞中TP53和Bax mRNA以及Bax蛋白的表达(P0.05),降低Bcl-2/Bax的比值(P0.05)。同时西黄丸含药血清可以上调MCF-7细胞中Bax mRNA,并降低Bcl-2/Bax的比值(P0.05),而西黄丸含药血清干预MCF-7细胞后TP53 mRNA和Bax蛋白表达无显著性差异。结果表明,西黄丸含药血清可诱导雌激素受体阴性乳腺癌细胞凋亡,机制有可能是通过上调TP53 mRNA表达,从而诱导凋亡蛋白Bax表达,促进Bax向线粒体转移,最终发挥诱导细胞凋亡作用。     

西黄丸含药血清经Wnt信号转导通路细胞周期蛋白D1调控人肺癌干细胞增殖的机制

目的：观察葶苈草颗粒对炎症性肠病（IBD）的治疗作用并探讨其作用机制。方法：选昆明种小鼠,用3%恶唑酮（OXZ）复制小鼠OXZ结肠炎模型。实验分为正常对照、模型对照组（等容蒸馏水）、葶苈草颗粒（1.95,3.9,7.8 g·kg^-1）治疗组、柳氮磺胺吡啶（0.39 g·kg^-1）阳性药对照组,ig每天 1 次,连续治疗4 d。用酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清和结肠组织中白细胞介素-10（IL-10）、结肠组织中髓过氧化物酶（MPO）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量,进行疾病活动指数（DAI）评分和病理组织学观察。结果：治疗4 d后,与模型组比较,葶苈草颗粒3.9,7.8 g·kg^-1治疗组,血清和结肠组织IL-10含量明显升高（P<0.05或P<0.01）,结肠组织MPO,IL-1β,TNF-α和IL-6含量明显降低（P<0.05或P<0.01）;葶苈草颗粒治疗组总DAI值明显减少（P<0.05或P<0.01）。结论：葶苈草颗粒对OXZ诱导的小鼠实验性肠炎具有较好的治疗作用,其可能通过调节促炎细胞因子IL-1β,TNF-α,IL-6和抑炎细胞因子IL-10之间的平衡,有效减轻实验性结肠炎炎症,从而起到治疗IBD的作用。     

西黄丸含药血清对SW480人结肠癌细胞迁移及侵袭的影响

目的:研究西黄丸对人结肠癌细胞SW480迁移及侵袭的影响,并初步探讨其作用机制。方法:以人结肠癌细胞SW480为研究对象,细胞划痕试验检测不同剂量西黄丸含药血清对SW480细胞迁移的影响,并Transwell侵袭实验检测西黄丸含药血清对细胞侵袭能力的改变;用Western blot的方法检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)和p-ERK蛋白表达水平,RTq PCR法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin),多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)、波形蛋白(Vimentin)和转录因子Snail的mRNA水平。结果:与空白组比较,西黄丸含药血清可降低SW480细胞迁移及侵袭的能力,增加E-cadhenrin mRNA表达水平,并抑制PARP-1,Vimentin和Snail mRNA表达水平,明显降低ERK蛋白的磷酸化水平,均具有统计学意义(P0.05)。结论:西黄丸含药血清可抑制SW480细胞的体外侵袭及迁移,并影响上皮-间皮转化(EMT)相关基因E-cadherin,PARP-1,Vimentin和Snail的mRNA表达,其机制可能与ERK/MAPK信号通路有关,本研究为西黄丸抑制结肠癌转移提供了科学证据。     

癌平口服液含药血清对人胃癌细胞增殖的影响

目的研究中药复方癌平口服液对人胃癌细胞增殖的影响.方法采用癌平口服液含药血清,温育体外培养的人胃癌细胞BGC-823,通过3H-UR掺入法、MTT比色法观察,研究该方对体外培养的人胃癌细胞BGC-823增殖的影响.结果癌平口服液药物血清能抑制人胃癌细胞BGC-823的增殖.结论癌平口服液药物血清能够有效抑制人胃癌细胞BGC-823的增殖,是其抗癌的机制之一.     

西黄丸含药血清对大肠癌细胞干性标志物表达的影响

目的研究西黄丸含药血清对人体大肠癌细胞干性标志物表达的影响,初步探讨其作用机制,为西黄丸的临床应用提供新的理论依据。方法以人大肠癌LoVo细胞为研究对象,流式细胞分析术检测不同浓度西黄丸含药血清作用于人体大肠癌LoVo细胞后,CD44和Ep CAM双阳性的细胞数量占大肠癌LoVo细胞数量的比例变化。结果西黄丸能够降低大肠癌肿瘤细胞干性标志物CD44~+/EpCAM~(high)的表达百分比。结论西黄丸对大肠癌肿瘤干细胞活性存在抑制作用,这可能是西黄丸防治大肠癌的重要机制之一。     

半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响

目的:探讨半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响及其机制。方法:体外常规培养人卵巢癌SKOV3细胞,倒置显微镜下观察半枝莲含药血清作用后SKOV3细胞形态的改变,MTT法检测细胞增殖抑制率,应用流式细胞技术检测细胞周期及凋亡率。结果:与空白对照组比较,给药后细胞状态变差,形态和贴壁情况等发生改变。半枝莲含药血清可有效抑制SKOV3细胞生长,低、中、高剂量组抑制率呈递增趋势,同剂量组24 h、48 h、72 h抑制率递增。流式细胞仪检测结果显示,与空白对照组比较,半枝莲含药血清组G0/G1期细胞所占比例增多,空白对照组、半枝莲含药血清低、中、高剂量组48 h细胞凋亡率分别为7.94%、8.36%、17.82%、21.12%。结论:半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞的增殖有抑制作用,其机制与影响细胞周期和诱导细胞凋亡有关。     

牛膝含药血清促进人T细胞增殖的作用与分子机制研究

目的 :研究牛膝对体外培养的人 T淋巴细胞增殖的影响及其可能的分子机制。方法 :制备牛膝含药血清 ,3 H-Td R掺入法检测其对体外培养的 T细胞的促增殖作用 ,RT-PCR检测 PKAR β的表达。结果 :牛膝含药血清能明显促进 T细胞的增殖 ,并导致 PKAR β表达的增加。结论 :初步认为牛膝在体外有促进人 T细胞增殖的作用 ,并有可能通过 c AMP介导的信号传导途径进行。     

西黄丸含药血清对人甲状腺癌细胞TPC-1增殖、凋亡及迁移的影响

目的：观察西黄丸含药血清对人甲状腺癌细胞TPC-1增殖、凋亡及迁移的影响。方法：SPF级新西兰大白兔灌胃4、8、16 g/kg西黄丸制备低、中、高浓度西黄丸含药血清,并制备对照血清,分别处理人甲状腺癌细胞株TPC-1。取对数期生长的TPC-1细胞,分为低、中、高浓度组和对照组,每组5个复孔,分别用低、中、高浓度西黄丸含药血清和对照血清进行干预。采用四唑盐比色法（MTT）检测干预24 h、48 h、72 h细胞增殖情况;分别采用流式细胞仪、Transwell小室实验检测干预48 h后细胞凋亡率、穿膜细胞数;采用实时荧光定量-聚合酶链反应法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞黏附分子1 (CADM1)、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax） m RNA;采用蛋白质印迹法检测PCNA、CADM1、Bcl-2、Bax及裂解的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3 (Cleaved Caspase-3)蛋白表达情况。结果：与对照组比较,低、中、高浓度组不同时间点MTT实验OD值均较低（P<0.05）;与低浓度组比较,中浓度组48 h、72 h MTT实验OD值较低（P...     

含药血清药理作用强度与体内给药的量效、时效关系研究

目的:考察含药血清药理作用强度与体内给药的量效、时效关系。方法:以中药有效组分配伍方剂双参通冠方不同灌胃剂量、药后不同取血时间所得的药物血清为受试药物;培养心肌细胞,进行缺氧复氧实验,复氧同时给予不同双参通冠方药物血清处理,实验结束后取培养上清检测LDH值,以LDH释放抑制率为指标,观察含药血清药理作用强度与体内给药的量效、时效关系。结果:体内给药量大所获得的药物血清其LDH释放抑制率并不一定高,二者之间无明显量效关系;药后不同时间取血所获得的药物血清对LDH释放的抑制率亦不相同,以药后90 min所得药物血清药理效应最佳。结论:体内给药量并非越大其药物血清药理效应越好,药后最佳取血时间亦得自行摸索。     

半夏泻心汤含药血清对人胃癌腹膜转移细胞增殖的影响

目的：研究半夏泻心汤含药血清对体外人胃癌腹膜高转移潜能细胞株GC9811-P增殖的影响。方法：采用血清药理学方法、MTT法及台盼兰染色法观察半夏泻心汤对GC9811-P细胞的敏感性及生长抑制作用。结果：半夏泻心汤含药血清对GC9811-P较为敏感,对其增殖有明显的抑制作用,且有显著的剂量-效应关系（P＜0.05）。结论：半夏泻心汤对GC9811-P细胞的增殖有一定的抑制作用,提示辛开苦降法可能是中医药防治胃癌腹膜转移的主要治法之一。     

中药多糖及其含药血清对小鼠淋巴细胞增殖的影响

目的 探讨中药复方多糖与各单味中药多糖及其含药血清对小鼠淋巴细胞增殖的影响.方法 制备各中药多糖,并分离服用各多糖后的小鼠血清,分别加入到淋巴细胞悬液中,检测小鼠淋巴细胞增殖情况.结果 各多糖组和含多糖血清组均能不同程度的促进淋巴细胞增殖,其中复方多糖和含复方多糖血清组最显著.结论 血清药理学方法更能真实地反映药物的药理作用;各单味中药多糖对细胞免疫具有协同促进作用.     

风湿宁胶囊含药血清干预对CIA-FLS细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨风湿宁胶囊(FSN)含药血清干预对CIA-FLS细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用CCK-8法检测各组血清干预24、48、72 h后对CIA-FLS细胞增殖状态的影响;采用Annexin V-FITC/PI双染法通过流式细胞仪观察各组血清干预48 h后对CIA-FLS细胞早期和晚期凋亡情况的影响。结果:CCK-8法结果表明,在24 h,FSN各浓度(20%、10%和5%)含药血清干预对CIA-FLS细胞的增殖无抑制作用;在48 h,20%FSN含药血清和10%FSN含药血清干预对CIA-FLS细胞的增殖都表现出不同程度的抑制。在72 h,FSN各浓度(20%、10%和5%)含药血清对CIA-FLS细胞增殖均可见显著的抑制效果,其中20%风湿宁胶囊含药血清效果最好。Annexin V-FITC/PI双染检测结果表明,风湿宁胶囊含药血清各浓度(20%、10%和5%)组都不同程度地提高了细胞总凋亡率,其中20%风湿宁胶囊含药血清组对CIA-FLS细胞凋亡促进作用最强。结论:风湿宁胶囊含药血清对CIA-FLS细胞增殖的抑制及凋亡的促进可能是其治疗类风湿关节炎的机制之一。     

黄芪含药血清对人乳腺癌MCF-7细胞的实验研究

目的:研究不同浓度黄芪含药血清对雌激素受体阳性的人乳腺癌MCF-7细胞增殖和细胞周期的作用以及Bcl-2蛋白表达的影响,初步探讨黄芪的植物雌激素效应情况.方法:采取MTT法观察不同含药血清组对人乳腺癌MCF-7细胞在不同时间段(24h,48h,72h)的增殖活性,检测细胞周期及细胞凋亡率,检测细胞凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达.结果:黄芪含药血清可以抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并且呈现不同剂量的梯度性;不同浓度黄芪含药血清均不能诱导细胞的凋亡;但黄芪高剂量组可以明显的增加G0/G1期比例;黄芪含药血清可以上调Bcl-2蛋白的表达.结论:黄芪含药血清可以抑制MCF-7细胞的增殖;高剂量组可以使MCF-7固定在G0/G1期;可部分上调Bcl-2蛋白的表达,抑制细胞凋亡.     

西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移的影响

目的:研究西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移以及对环氧化酶2(COX-2)转录的影响,以期探讨西黄丸对三阴性乳腺癌细胞的作用。方法:大鼠灌胃给药制备西黄丸含药血清,实验设置大鼠空白血清组和西黄丸含药血清组,以含药血清干预三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕实验检测细胞迁移,RT-PCR法检测COX-2、TNF-αmRNA表达。结果:西黄丸含药血清可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,可以促进MDA-MB-231细胞凋亡,并且西黄丸含药血清可以降低MDA-MB-231细胞划痕愈合率,可以降低在炎性环境下MDA-MB-231细胞中COX-2 mRNA表达(P<0.05)。结论:西黄丸含药血清可以有效地抑制MDA-MB-231细胞增殖,促进其细胞凋亡,可能抑制细胞迁移,并且可以减少炎性因子的转录。     

中药芪红合剂含药血清对人外周血内皮祖细胞增殖的影响

目的观察中药芪红合剂含药血清对体外培养的人外周血内皮祖细胞（EPCs）增殖的影响。方法将12只雄性Wistar大鼠随机分为中药芪红合剂组（低剂量组、中剂量组、高剂量组）和对照组,制备含药血清和空白血清。采用密度梯度离心法分离获得人外周血单个核细胞,经激光共聚焦显微镜、流式细胞仪鉴定为EPCs。加入各实验血清组培养液培养EPCs,分别作用不同时间（24h、48h、72h）后,倒置相差显微镜下观察EPCs生长情况,噻唑蓝比色试验（MTT法）测定EPCs的吸光度值。结果与对照组比较,中药芪红合剂合药血清低、中、高剂量组EPCs增殖明显（P〈0．05）,且呈一定的量效、时效关系。在同一作用时间,低剂量芪红合剂含药血清干预后EPCs的增殖明显（P〈0．05）。在同一剂量组中,芪红合剂含药血清干预后EPCs的增殖随时间推移逐渐增强,于72h达到高峰（P〈0．05）。结论中药芪红合剂含药血清对体外培养的人外周血EPCs的增殖具有一定的促进作用,可能是其防治血管内皮损伤及内皮功能障碍相关性疾病的作用机制之一。     

荔枝核含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨荔枝核含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用血清药理学方法制备荔枝核、环磷酰胺含药血清以及对照血清,作用于HepG2细胞,MTT法检测各种血清对HepG2细胞增殖的影响,Hochest33258荧光染色观察细胞凋亡,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:荔枝核含药血清处理HepG2细胞后,呈剂量依赖性抑制肿瘤细胞增殖活性;并出现细胞核浓染与核碎裂;流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率明显高于对照组。结论:荔枝核含药血清能抑制人肝癌HepG2细胞增殖,其机制可能与诱导HepG2细胞凋亡有关。