模拟失重下氧化应激对EA. hy926细胞影响的转录组学研究

目的探索回转模拟失重下EA.hy926细胞(人脐静脉内皮细胞与人肺腺癌细胞株A549的融合细胞)氧化应激后差异表达基因及其生物学意义。方法以EA.hy926细胞为研究对象,设置对照组(Con组)、对照氧化应激组(Con+H_2O_2)、模拟失重组(MG组)和模拟失重后氧化应激组(MG+H_2O_2组),采用Illumina Hi Seq 2500平台开展转录组测序,筛选差异表达基因;采用在线分析工具对差异基因进行Gene Ontology(GO)功能富集分析、KEGG信号通路分析以及STRING蛋白互作分析;以qRT-PCR技术验证筛选出的差异基因。结果测序结果表明,与Con组相比,MG+H_2O_2组差异基因253个;与Con+H_2O_2组相比,MG+H_2O_2组差异基因169个。GO及KEGG通路显著性富集分析结果显示,与Con+H_2O_2组相比,MG+H_2O_2组差异基因可显著富集于细胞因子刺激的细胞反应等生物过程及TNF等信号通路。蛋白互作分析表明CXCL蛋白处于互作的关键位置;qRT-PCR结果显示筛选的差异表达基因BCL-2A1、CXCL-8、FAM196B在各组间的表达变化与测序结果一致。结论模拟失重下氧化应激可诱导EA.hy926细胞产生不同的生物学反应,并通过调节BCL-2A1、CXCL-8、FAM196B基因表达对内皮细胞增殖、凋亡等生理功能发挥调控作用。     

模拟失重下小鼠成骨细胞功能相关miRNA生物信息学预测

目的 应用生物信息学方法预测模拟失重环境下与小鼠成骨细胞功能变化相关的miRNAs.方法 收集并整理已报道的针对模拟失重环境下小鼠成骨细胞内mRNAs表达变化的基因芯片检测数据,分析差异表达显著的mRNAs,搜集其基因组定位信息;在miRBase数据库中查找处于这些基因组位置上的内含子miRNAs,并应用靶基因预测、GO富集分析和KEGG pathway富集分析进行后续miRNA功能预测.结果 鉴定出5种与宿主mRNA共处同一转录单元的潜在内含子miRNAs.结论 预测出的5种内含子miRNAs在模拟失重环境所致成骨细胞功能变化中具有潜在调控作用,为进一步实验研究提供数据支持和理论指导.     

失重/模拟失重对血管系统的影响及防护研究进展

失重或模拟失重环境下,人体内流体静压消失,体液头向转移,对机体血管产生显著影响,导致血管发生重塑和功能改变适应失重或模拟失重.由于不同部位血管结构和血流变化不同,因此失重或模拟失重可能会对人体各部位的血管产生不同的影响.综述了失重或模拟失重条件下脑血管、眼部血管、心血管、肺脏血管、胸腹部血管、下肢/后肢血管和微血管等不...     

模拟失重48h后血管内皮细胞长链非编码RNA的差异表达分析

目的探究模拟失重48h后人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中长链非编码RNA(lncRNAs)的表达差异。方法采用高通量测序技术检测HUVECs模拟失重48h组与水平静置对照组中lncRNAs的差异表达,对部分差异表达的lncRNAs进行PCR验证。结果差异表达lncRNAs共37个,模拟失重48h处理后,有22个lncRNAs显著上调(P0.05),15个lncRNAs显著下调(P0.05)。PCR结果表明,有4个lncRNAs的变化趋势与测序结果一致。结论模拟失重48h后HUVECs中lncRNAs的表达发生明显变化,lncRNAs的差异表达可为探索模拟失重下血管内皮细胞功能改变的发生机制提供依据。     

失重/模拟失重对肝脏结构和功能影响的研究进展

空间飞行期间,失重是威胁航天员健康的主要因素之一.肝脏是人体的重要器官,具有物质代谢、蛋白质合成、解毒等许多重要的生理功能.失重/模拟失重可造成人体肝脏血流动力学改变、鼠肝脏形态结构异常、鼠和金鱼氧化应激损伤,抑制鼠肝细胞增殖,鼠的糖、脂肪、酶等物质代谢紊乱.失重或模拟失重对动物肝脏组织形态、细胞增殖分化、氧化应激反应...     

失重或模拟失重对基因表达的影响

综述了前人在失重或模拟失重与基因表达的关系方面的研究成果,从三个方面重点阐明了失重或模拟失重对呆区神经系统内基因表达的影响,从中可以看出,中枢神经系统的基因的表达是受重力因素精确调节的,在分子水平上研究问题微重力环境中枢神经系统的影响具有重要意义。     

模拟失重对大鼠肺动脉eNOS表达的影响

目的通过研究模拟失重对大鼠肺动脉血管内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响,探讨肺动脉反应性改变的发生机制。方法采用尾悬吊大鼠模拟失重,分为模拟失重组(尾悬吊14天)和对照组,每组8只健康雄性Wistar大鼠,用蛋白免疫印迹分析模拟失重组和对照组大鼠肺动脉组织eNOS表达,硝酸还原酶法测定肺动脉组织一氧化氮(NO)含量。结果同对照组相比,模拟失重组大鼠肺动脉组织eNOS表达增强,胶片图像扫描后的相对光密度值为247±2·60,对照组的相对光密度值为141±1·72,两组间有显著性差异(P<0·01)。模拟失重组肺动脉组织NO含量亦增加,其浓度为15·7±4·1μmol/L,对照组为7·6±3·2μmol/L,两组间有显著性差异(P<0·05)。结论模拟失重条件下肺动脉eNOS表达增加可能促进了立位耐力不良的发生。     

多不饱和脂肪酸对模拟失重大鼠脂质代谢的影响

目的：研究添加以鱼油为来源的不同剂量的多不饱和脂肪酸（PUFA）对模拟失重大鼠血清红细胞膜微粘度、循环内皮细胞、以及血清总胆固醇、血清甘油三酯等脂质代谢的调节。方法：选用3周龄断乳雄性SD大鼠49只，采用最小体差法分为5组：Ⅰ组悬吊对照，饲喂含10%玉米油饲料；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组悬吊实验组，分别饲喂含0.5%和3.0%鱼油的合成饲料；Ⅴ组地面正常对照组，饲喂含10%玉米油饲料。悬吊时间为30d。结果：血清红细胞膜微粘度Ⅱ、Ⅳ组与Ⅴ组无显著性差异，Ⅲ组红细胞膜流动性有了显著的增加。Ⅱ组较为明显的减轻了模拟失重对循环内皮细胞（CEC）的增加作用，血清总胆固醇（TC）的含量与鱼油的添加量呈负相关，而血清甘油三酯（TG）含量在各剂量组中无显著性差异。Ⅰ组相对Ⅴ组血清冠心病指数（LDL/HDL）有显著升高而各悬吊实验组中LDL/HDL分别比Ⅰ组降低13.9%、11.1%和31.4%。结论：在模拟失重条件下，补充PUFA会减少失重对脂质代谢的不利作用，从而对动脉粥样硬化及冠心病（CHD）的发生起到一定的预防作用。     

模拟失重对大鼠心肌组织缝隙连接蛋白表达谱的影响

目的 研究模拟失重对大鼠心肌组织缝隙连接蛋白(CX)亚型表达谱的影响,为探讨模拟失重条件下心律失常部分发生机制提供新的实验依据.方法 将20只成年雄性Wistar大鼠随机平均分为正常对照组(Con)及尾部悬吊模拟失重组(SUS),应用电子透射电镜检测大鼠心肌组织超微结构,RT-PCR、Western bloting检测连接蛋白CX37、CX40、CX43、CX45 mRNA及CX40、CX43、CX45蛋白表达水平.结果 与Con组相比,模拟失重可致部分心肌细胞肌纤维变性,线粒体变性、数量减少,胶原增多,局部间隙连接增宽、结构消失.RT-PCR结果显示,SUS组心肌组织CX各亚型mRNA表达水平普遍显著下降,Western bloting结果显示,模拟失重条件下,CX43和CX45蛋白表达水平亦显著下降.结论模拟失重2 wk,大鼠心肌组织超微结构发生明显改变,缝隙连接出现非均质性结构变化,心肌组织缝隙连接蛋白表达谱普遍下调.结果提示,失重可以导致心肌缝隙连接蛋白重构,其可能影响心肌细胞间电兴奋传导的速度及方向,从而使传导阻滞和微折返易于出现,诱发心律失常.     

失重或模拟失重对人体交感肾上腺活动的影响

失重或模拟失重对人体交感肾上腺活动的影响杨玉华高淳航天时航天员的体液头向转移，使机体产生一系列的生理、生化变化。心血管功能失调是航天员返回地面时超重耐力和立位耐力下降的主要原因。因此失重对心血管系统的影响、失重时心血管系统的适应性变化过程，一直是航天...     

失重或模拟失重条件下血管收缩反应变化的研究进展

失重或模拟失重条件下血管收缩功能的改变是立位耐力下降的重要原因。血管功能的实现与血管内的压力、血流状态和血管结构有密切关系,由于血管所处部位不同,其结构和特点也不尽一致。失重或模拟失重时流体静压消失和血液的头向分布,使身体各部位血管的结构和功能发生着不同的变化,本文就近年来有关这方面的研究作了简要的回顾。     

模拟失重大鼠腹主动脉内皮依赖性舒张反应变化与氧化应激水平有关

目的探讨模拟失重大鼠腹主动脉内皮依赖性舒张反应的变化与氧化应激水平的关系。方法采用3周尾吊大鼠模型模拟失重状态,通过血管环张力实验检测内皮依赖性血管舒张反应,蛋白印迹技术以及DHE荧光探针技术观察悬吊(SUS)大鼠和正常对照(Con)大鼠动脉血管NOX4、p22phox蛋白表达及氧化应激水平变化。结果尾吊3周后,大鼠腹主动脉内皮依赖性舒张反应减弱,NADPH氧化酶抑制剂Apocynin以及超氧化物歧化酶SOD能够部分恢复舒张反应。SUS组腹主动脉活性氧簇(ROS)水平较Con组增高(P<0.05);腹主动脉p22phox蛋白表达悬吊组较对照组增高(P<0.05);NOX4蛋白表达两组间无明显变化。结论氧化应激水平增高可能与模拟失重所致腹主动脉内皮依赖性舒张反应减弱有关。     

回转模拟失重对静脉内皮细胞血管生成能力的影响及内皮型一氧化氮合成酶的作用

目的 观察回转器模拟失重对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECC)血管生成能力的影响,并分析探讨可能涉及的关键信号分子内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthetase,eNOS)的作用.方法 体外培养HUVEC-C,随机分为回转模拟失重组、1G静止对照组及回转+抑制剂组,选用内皮型一氧化氮合成酶的特异性抑制剂L-NAME(N-nitro-L-arginine methyl ester hydrochloride).Matrigel胶小管形成实验观察不同处理组HUVEC-C血管生成能力的变化情况.RT-PCR和Western blot分别检测模拟失重前、后HUVEC-C中eNOS mRNA和蛋白的表达变化.结果 24 h模拟失重使HUVEC-C的血管生成能力较对照组明显增强(P＜0.01),且这种增强效应可以被LNAME所抑制.模拟失重24 h后,HUVEC-C中eNOS mRNA和蛋白的表达均显著高于对照组(P＜0.05).结论 回转模拟失重可以诱导HUVEC-C血管生成能力增强,其发生机制与eNOS表达上调有关.     

模拟失重对大鼠心肌组织细胞因子基因表达谱的影响

目的 研究模拟失重对大鼠心肌组织中部分细胞因子基因表达谱的影响,探讨模拟失重条件下心脏结构/功能可能发生的变化机制.方法 将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(Con)及尾部悬吊模拟失重组(SUS),应用包含96种基因的细胞因子基因芯片检测各组细胞因子表达水平,选取部分表达变化细胞基因,应用Real time-PCR给予验证.结果与Con组相比,模拟失重可导致心肌组织中17种细胞因子基因表达差异超出2倍,5种(IFNA4、IL-15、IL-1b、LT-b、FGF7)被上调,12种(IGF-1、IGF-II、FGF5、VEGF-D、VEGF-C、IFN r、IL-11、IL-12B、IL-13、IL-17、IL-18、CD40L)被下调.其中,生长因子呈现较普遍下调趋势,炎性类细胞因子表达水平变化不一.结论 模拟失重2 wk可导致心肌组织中细胞因子网络调控平衡偏移,促生长性、保护性细胞因子普遍下调,而致病性、炎性细胞因子部分明显上调,其可能是失重/模拟失重条件下心肌组织功能结构重塑的重要调控机制.     

流体剪切应力对EA.Hy926细胞IL-8基因表达的影响

目的 探讨流体剪切应力作用下,人内皮细胞株EA.Hy926细胞白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)基因的表达规律.方法 观察体外培养的人内皮细胞株EA.Hy926细胞的生长形态,检测EA.Hy926细胞Ⅷ因子相关抗原以及Weibel-Palade小体的表达情况,并以低剪切应力(0.420 Pa)作用于人内皮细胞株EA.Hy926细胞,定量RT-PCR检测IL-8 mRNA的表达情况.结果 EA.Hy926细胞在体外生长特性类似于人脐静脉内皮细胞,并表达内皮细胞特征性的Ⅷ因子相关抗原以及Weibel-Palade小体,与未受剪切应力对照组相比,1 h时 IL-8 mRNA表达量明显增加,2 h时IL-8 mRNA表达量至峰值,3 h后随着剪切应力作用时间的延长,IL-8 mRNA表达量逐渐下降.直至实验结束(12 h),IL-8 mRNA表达量仍高于未受应力对照组.不同流体剪切应力水平(0.182、0.420、1.000、1.640 Pa)作用人内皮细胞株EA.Hy926细胞2 h后,IL-8 mRNA 的表达与剪切应力作用强度呈反变关系.结论 流体剪切应力可以诱导人内皮细胞株EA.Hy926细胞表达IL-8,并且这一表达规律与人脐静脉内皮细胞相似,EA.Hy926细胞可作为研究流体剪切应力影响内皮细胞IL-8表达研究的细胞源.     

失重/模拟失重对肠黏膜屏障功能影响的研究进展

空间失重环境可引起人体体液头向转移、肌肉萎缩、骨丢失、消化道功能紊乱等一系列生理适应性变化.完整的肠黏膜屏障在抵御外源性抗原入侵机体方面具有重要意义.综述了近年来失重/模拟失重对肠黏膜屏障功能影响的研究进展,失重/模拟失重对肠道黏液、肠黏膜上皮屏障、组织形态和通透性造成影响;在肠黏膜免疫功能方面,失重/模拟失重影响免疫...     

失重／模拟失重对心肌结构与功能的影响

自开展载人航天活动以来,已发现在失重环境停留可引起航天员运动能力及立位耐力下降.后者主要表现为:在失重条件下受到下体负压作用时,或返回地面IG条件下取直立体位时,航天员感到心慌、头晕,甚至出现晕厥,其体征则为心率过分增快,维持正常动脉血压的能力明显减弱;一般需数日至数周始能恢复.目前,将此类症状与体征称为“心血管脱适应(cardiovascular deconditioning)”,或者称为心血管机能障碍(cardiovascular dysfunct-ion).虽经几十年研究,对这种心血管机能障碍的机理仍然不甚清楚,特别是关于长期失重所致的心血管机能障碍的机理则了解更少.虽然为期一年的载人航天已经实现,但所用对抗措施并不理想,亦不能完全克服心血管机能障碍所带来的各种问题.为保证未来长时间航天活动,也急需发展新的对抗措施.     

模拟失重对大鼠后肢动脉血管床血管反应性的影响

目的 观察模拟失重对大鼠后肢血管床血管反应性的影响。方法 采用尾部悬吊大鼠模型模拟失重，利用离体后肢恒流灌流技术测定模拟失重２ｗｋ后动及血管床反应性的变化。     

失重/模拟失重对中枢神经系统影响的研究进展

失重作为一种主要的空间环境因素,对航天员的心理和生理等方面会产生一定的影响。本文综述了失重/模拟失重对动物行为的影响,以及对神经可塑性、神经细胞结构和功能、神经细胞内蛋白及基因表达的影响,由表观及微观,并展望了航天医学领域中对于神经系统研究的发展方向,以期为当前航天医学领域的相关研究提供思路。     

模拟失重对心肌细胞间缝隙连接蛋白CX43表达及分布的影响

目的观察模拟失重大鼠心肌细胞间缝隙连接蛋白CX43表达量及分布的变化 ,探讨该状态下易于发生心律失常的部分机制。方法将成年雄性Wistar大鼠 1 6只 ,随机分为正常对照组及尾部悬吊 30°模拟失重 2周组 ,应用免疫组化、WesternBlot、电子透射电镜检测大鼠心肌组织间连接蛋白CX43的表达、分布变化及缝隙连接超微结构的改变。结果与对照组相比 ,模拟失重组CX43表达量明显减少 (P <0 .0 5 ) ,并出现分布紊乱 :横向侧缝连接占总连接比例增加 (P <0 .0 5 ) ,电镜扫描显示 ,部分缝隙连接间隙消失。结论模拟失重可引起大鼠心肌间CX43表达减少及分布紊乱 ,从而可能改变心肌细胞间传导速度及途径 ,易于出现传导阻滞及折返 ,诱发心律失常。