黄芪多糖联合顺铂对人肺癌A549细胞增殖抑制作用及其机制研究

目的：观察黄芪多糖与顺铂对人肺癌A549细胞增殖、细胞周期、诱导凋亡的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法采用四甲基偶氮唑盐法检测黄芪多糖、顺铂及两药联合对细胞增殖的影响;用流式细胞仪分析对细胞周期及凋亡率的影响;用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting法检测对人肺癌A549细胞B细胞淋巴瘤-白血病2（Bcl-2）、Bcl相关X蛋白（Bax）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）基因表达水平的影响。结果黄芪多糖、顺铂及两药联合对人肺癌A549细胞的增殖抑制作用呈时间-浓度依赖关系;与阴性对照组比较,黄芪多糖作用后可出现G1期细胞阻滞,顺铂作用后出现S期细胞阻滞,两药联合出现G1、S期细胞阻滞,差异均有统计学意义（P<0.01）。两药联合较阴性对照组及单用黄芪多糖、顺铂明显上调Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白的表达,下调Bcl-2 mRNA及蛋白的表达,差异均有统计学意义（P<0.01）。结论黄芪多糖可协同顺铂增强对人肺癌A549细胞的促凋亡作用,其作用机制与上调Bax、Caspase-3的表达、下调Bcl-2的表达有关。     

6'-羟基爵床素A诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及其机制

目的探讨6'-羟基爵床素A(JR6)对人肝癌Hep G2细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法体外培养人肝癌Hep G2细胞,采用MTT法观察不同浓度的JR6和5-氟尿嘧啶(5-FU)对Hep G2细胞存活的作用,荧光显微镜观察Hoechst33258染色后细胞核形态改变,用流式细胞仪检测AnnexinⅤ-FITC/PI双染后Hep G2细胞的凋亡率,JC-1荧光染色观察药物对细胞线粒体膜电位的影响,Western蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白细胞色素c、Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果 JR6 6.1~196μmol·L-1和5-FU 3.4~192μmol·L-1分别作用Hep G2细胞48 h,对Hep G2细胞存活具有抑制作用,IC50分别为74.90和49.75μmol·L-1。JR6 12.3,49和196μmol·L-1作用Hep G2细胞48 h,细胞凋亡率明显增加,由正常对照组的(6.9±2.0)%增加至(13.8±2.0)%,(18.6±4.3)%和(32.4±3.2)%(P<0.05,P<0.01)。Hoechst33258染色结果显示,JR6 49和196μmol·L-1作用Hep G2细胞48 h,部分细胞出现细胞核固缩和染色质凝集等凋亡变化。线粒体膜电位检测结果发现,JR6 49和196μmol·L-1作用48 h能使Hep G2细胞线粒体膜电位水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。线粒体凋亡相关蛋白的检测结果表明,JR6 12.3,49和196μmol·L-1作用Hep G2细胞48 h,胞浆细胞色素c表达增加,促凋亡蛋白Bax表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,且Bax/Bcl-2比值增加(P<0.05,P<0.01)。JR6 49μmol·L-1和5-FU组上述蛋白表达无明显差异。结论 JR6可能通过促进细胞色素c释放、打破Bcl-2/Bax平衡诱导Hep G2细胞凋亡。     

异莲心碱对HepG2细胞周期和凋亡的影响

摘要：目的:研究异莲心碱对人肝癌Hep G2细胞周期与凋亡的影响。方法:采取流式细胞术检测不同浓度异莲心碱诱导Hep G2细胞24 h后对周期的影响; Hoechst33258染色观察异莲心碱诱导Hep G2细胞凋亡后细胞核形态的变化; JC-1染色检测细胞线粒体膜电位变化;蛋白免疫印记法(Western blot)检测Bax、Bcl-2蛋白的表达量。结果:流式结果显示,G0/G1期和G2/M期比例明显升高,而S期比例明显下降,并呈现剂量依赖性; Hoechst33258结果表明,药物诱导Hep G2细胞后,细胞数量减少,形态皱缩或改变,蓝色荧光加深; Western bolt检测可知,异莲心碱上调Bax蛋白并下调Bcl-2蛋白的表达水平。结论:异莲心碱可使Hep G2细胞阻滞于G0/G1期、G2/M期,诱导Hep G2细胞发生早期凋亡,其作用可能与Bax、Bcl-2两种凋亡蛋白表达水平变化相关。     

麦门冬汤加减方联合顺铂对Lewis肺癌移植瘤模型小鼠的抑瘤作用及机制研究

目的:研究麦门冬汤加减方联合顺铂对Lewis肺癌移植瘤模型小鼠的抑瘤作用,并探究其可能的作用机制。方法:通过腋下接种Lewis肺癌细胞复制Lewis肺癌移植瘤小鼠模型。将60只小鼠随机分为模型组(生理盐水,每天灌胃1次)、顺铂组(6mg/kg,每周腹腔注射1次)、麦门冬汤加减方组(20 g/kg,每天灌胃1次)和联合组(每周腹腔注射6 mg/kg顺铂1次+每天灌胃20g/kg麦门冬汤加减方1次),每组15只。所有小鼠均连续给药2周。给药结束后,检测各组小鼠瘤质量和胸腺指数,苏木精-伊红(HE)染色后观察其瘤体组织病理变化,TUNEL法检测其瘤体细胞凋亡指数,Western blot法检测其瘤体组织中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和促凋亡基因Bax蛋白表达。结果:与模型组比较,麦门冬汤加减方组、顺铂组和联合组小鼠瘤质量、Bcl-2蛋白表达量均显著降低(P<0.05),胸腺指数、瘤体细胞凋亡指数、Bax蛋白表达量均显著升高(P<0.05);并且联合组小鼠瘤质量、Bcl-2蛋白表达量明显低于麦门冬汤加减方组和顺铂组(P<0.05),胸腺指数、瘤体细胞凋亡指数、Bax蛋白表达量明显高于麦门冬汤加减方组和顺铂组(P<0.05)。HE染色结果显示,麦门冬汤加减方组、顺铂组和联合组小鼠肿瘤细胞密度有所降低,肿瘤组织坏死区域增多,并且联合组小鼠的坏死区面积明显大于麦门冬汤加减方组和顺铂组。结论:麦门冬汤加减方可通过下调瘤组织中Bcl-2蛋白表达和上调Bax蛋白表达,从而抑制Lewis肺癌移植瘤模型小鼠肿瘤的生长。     

紫杉醇脂质体联合卡铂对宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响

目的 研究紫杉醇脂质体联合卡铂对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法 用设定浓度的紫杉醇(0.5和1μmol/L)单独或联合(0.5和25 mg/L)卡铂分别处理Hela细胞24 h。用MTT比色法检测细胞活力,荧光探针检测细胞内活性氧,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用Western blot检测凋亡蛋白p53、Bax和Bcl-2的表达量。结果 与空白对照组相比,紫杉醇、卡铂单独处理组可降低细胞活力,提高ROS含量,使p53和Bax蛋白表达升高,降低Bcl-2蛋白表达,使Hela细胞发生凋亡。且紫杉醇联合卡铂对Hela细胞的杀伤作用显著大于单独作用组。结论 本实验初步证明紫杉醇和卡铂均通过引起Hela细胞活性氧升高,诱导p53蛋白介导线粒体凋亡通路,导致Hela细胞凋亡的发生,还进一步证明紫杉醇联合卡铂对Hela细胞的杀伤作用显著大于二者单独作用。     

二氢杨梅素诱导凋亡增敏顺铂抗肺癌A549细胞的研究

目的：探讨二氢杨梅素（dihydromyricetin,DMY）增强肺癌A549细胞对顺铂化疗敏感性的作用及机制,为肺癌减毒增敏治疗提供新思路。方法：体外培养A549细胞,分组（对照组、顺铂组、DMY组、顺铂+DMY组）干预细胞;倒置显微镜观察细胞生长状态;CCK-8检测各组细胞增殖情况;流式细胞术AV/PI双染检测各组细胞凋亡情况;蛋白印迹实验检测凋亡相关蛋白Parp、cleaved Parp、caspase-3、cleaved caspase-3、Bax和Bcl-2表达水平。结果：DMY联合顺铂对细胞的抑制作用显著高于单独应用DMY或顺铂组;流式细胞术AV/PI双染显示联合组的凋亡率显著高于单独用药组;蛋白印记结果显示联合组与单独用药组或与对照组比较总Parp及caspase-3蛋白表达显著降低,cleaved Parp及cleaved Caspase-3蛋白表达显著增加,Bax蛋白水平升高的同时Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比值显著升高。结论：DMY可以增强顺铂对A549细胞的治疗作用,其机制可能与抑制Parp表达介导的线粒体凋亡有关。     

柚皮素通过AMPK通路介导的自噬对顺铂耐药宫颈癌细胞(HeLa/DDP)顺铂耐药性的影响

目的探究柚皮素对顺铂耐药宫颈癌细胞(HeLa/DDP)顺铂耐药性的影响,并探究其分子机制。方法体外培养人HeLa/DDP细胞、HeLa细胞,CCK-8法检测不同质量浓度顺铂对HeLa/DDP、He La细胞增殖的影响及不同质量浓度柚皮素对HeLa/DDP细胞增殖的影响。设置对照组、顺铂组(2 mg/L顺铂)、顺铂+柚皮素组(2 mg/L顺铂+60 mg/L柚皮素)和顺铂+柚皮素+AMPK通路抑制剂组(2mg/L顺铂+60mg/L柚皮素+50μmol/LCompoundC);CCK-8法检测各组HeLa/DDP细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组HeLa/DDP细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(Westernblotting)法检测各组HeLa/DDP细胞中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、p-AMPK、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达情况。结果顺铂对HeLa/DDP细胞、HeLa细胞的半数抑制浓度(IC50)分别在4～8、1～2 mg/L,柚皮素对HeLa/DDP细胞的IC50在30～60mg/L。与对照组相比,顺铂组He La/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率及细胞中p-AMPK/AMPK、Bax、Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P0.05),LC3Ⅰ蛋白表达水平显著降低(P0.05);与顺铂组相比,顺铂+柚皮素组HeLa/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率及细胞中p-AMPK/AMPK、Bax、Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表达水平显著升高(P0.05),LC3Ⅰ蛋白表达水平显著降低(P0.05);与柚皮素组相比,AMPK通路抑制剂组He La/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率及细胞中p-AMPK/AMPK、Bax、Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表达水平显著降低(P0.05),LC3Ⅰ蛋白表达水平显著升高(P0.05)。结论柚皮素可能通过激活AMPK通路介导的自噬反应,与顺铂联用发挥对HeLa/DDP细胞增殖抑制作用及凋亡促进作用。     

扶正解毒祛瘀方联合奥沙利铂对人结肠癌HT-29细胞增殖与凋亡的影响及机制研究

目的:研究扶正解毒祛瘀方(简称"扶正方")联合奥沙利铂(L-OHP)对人结肠癌HT-29细胞增殖与凋亡的影响及机制。方法:将HT-29细胞分为空白对照组(不加药物)、扶正方组(1 000 mg/L)、L-OHP组(31.25 mg/L)和联合用药组(1 000 mg/L扶正方+31.25 mg/L L-OHP)。加入相应药物作用48 h后,采用MTT法检测细胞增殖情况,倒置显微镜下观察细胞形态的改变,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率,实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)法检测细胞中促凋亡基因Bax、抑凋亡基因Bcl-2 m RNA的表达,Western blot法检测细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,L-OHP组和联合用药组细胞增殖均受到抑制、S期和G_2/M期细胞比例升高、G_0/G_1期细胞比例降低(P<0.05),L-OHP组、扶正方组和联合用药组细胞凋亡率升高、细胞中Bax m RNA及蛋白的表达上调、细胞中Bcl-2 m RNA的表达下调(P<0.05),且联合用组变化较两药单用组更明显(P<0.05)。结论:扶正方与L-OHP联合应用可抑制HT-29细胞的增殖、促进细胞凋亡,且作用优于两药单用;其机制可能与上调细胞中Bax基因与蛋白表达、下调细胞中Bcl-2基因表达有关。     

地塞米松对顺铂诱导的HepG2细胞凋亡及Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的影响

目的:探讨地塞米松对顺铂诱导HepG2细胞凋亡的影响,并观察Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达。方法:HepG2细胞与顺铂及不同浓度的地塞米松共培养,RT-PCR检测Bcl-2、Caspase-3的mRNA表达,Western blot检测Bcl-2、Caspase-3蛋白表达,流式细胞术(FACS)检测各组HepG2细胞的凋亡情况。结果:随着地塞米松浓度的增加,HepG2细胞中Bcl-2蛋白表达量升高,Caspase-3蛋白表达量下降。同时细胞凋亡率降低。结论:地塞米松部分通过Bcl-2途径抑制肝癌细胞的凋亡,而Caspase-3又在调控细胞凋亡中起重要作用。     

大黄素调控组蛋白乙酰化促进HpG2肝癌细胞焦亡及凋亡的发生

目的 研究天然产物大黄素是否能够影响HpG2肝癌细胞中组蛋白乙酰化水平,进而加速肝癌细胞焦亡和凋亡,为肝癌的治疗提供新的靶点。方法 CCK-8法检测不同浓度大黄素对Hp G2细胞活力的影响;生物信息学分析TCGA数据库中肝癌患者组蛋白乙酰化相关基因表达情况,验证候选基因赖氨酸乙酰基转移酶2A(KAT2A)与细胞凋亡通路的相关性;实时荧光定量PCR(q PCR)检测Hep G2细胞与L02细胞KAT2A m RNA水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大黄素对Hp G2细胞中组蛋白乙酰转移酶(HAT)、组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的影响;流式细胞术检测大黄素对肝癌细胞凋亡的影响;Western blot检测细胞凋亡、细胞焦亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2-相关X蛋白质(Bax)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、Gasdermin家族成员D N端(GSDMD-N)及KAT2A的表达情况。结果 大黄素能降低Hp G2细胞活性,半抑制浓度(IC₅₀)95%置...     

山茱萸多糖通过上调Klotho表达和抑制PI3K/AKT通路对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响

目的探究山茱萸多糖通过上调Klotho表达和抑制PI3K/AKT通路对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响。方法分别以6.25、12.5、25 mg/mL山茱萸多糖作用于人肝癌细胞株HepG2,CCK8法检测细胞增殖能力,采用Hoechst 33258荧光染色以及流式AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;通过免疫印迹法检测增殖相关蛋白Ki67、凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3以及PI3K/Akt通路相关蛋白水平,并检测Klotho蛋白表达水平。结果与对照组相比,6.25、12.5、25 mg/mL山茱萸多糖组HepG2细胞克隆形成数显著下降(P0.05),且随山茱萸多糖浓度升高克隆形成数显著下降;与对照组相比,6.25、12.5、25mg/mL山茱萸多糖组HepG2细胞凋亡率显著升高(P0.05),且随山茱萸多糖浓度升高细胞凋亡率逐渐升高(P0.05);与对照组相比,6.25、12.5、25mg/mL山茱萸多糖组HepG2细胞中Bax、cleaved-caspase-3、Klotho蛋白表达升高(P0.05),Ki67、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达下降(P0.05),且呈剂量相关性。结论山茱萸多糖可能通过上调Klotho表达抑制PI3K/AKT通路活化,抑制HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡。     

败酱草单萜环烯醚酯类对HepG2、MCF7细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨败酱草单萜环烯醚酯类（patrinia monoterpene iridoid ether esters,PMIEE）对HepG2和MCF7细胞增殖抑制和凋亡的影响。方法 HepG2和MCF7细胞经PMIEE作用后,采用CCK8法检测细胞增殖抑制情况;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡及周期情况;细胞划痕实验检测细胞迁移状况;Western blot法检测Bcl-2、Bax、caspase3、cdc2和CyclinB1的表达情况。结果 CCK8、划痕实验和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测显示,PMIEE对HepG2和MCF7细胞均有显著的增殖抑制、促凋亡率和降低迁移率作用（P<0.05）,呈一定量效关系,且PMIEE对HepG2细胞的周期阻滞以G2/M期为主,MCF7细胞以G0/G1期为主;Western blot结果显示,PMIEE可显著下调2种细胞Bcl-2、cdc2、CyclinB1的表达,上调Bax和caspase3的表达水平。结论 PMIEE可诱导HepG2和MCF7细胞增殖抑制和凋亡,下调Bcl-2、cdc2和CyclinB1表达及上调Bax和caspase3表达,其抗癌的潜在机制可能与此有关。     

洛伐他汀联合顺铂对人肝癌HepG2细胞生物学特性的影响及其机制

目的 研究洛伐他汀单用或与化疗药物顺铂联用时对人肝癌HepG2细胞生物学特性的影响,初步探索其抗肿瘤作用机制。方法 不同浓度洛伐他汀、洛伐他汀联合顺铂处理细胞 48 h后,CCK-8法检测HepG2细胞的增殖抑制作用,金氏公式计算联合应用效果;平板克隆形成实验评价药物作用于肝癌细胞的远期效应;划痕实验检测药物对细胞迁移能力的影响;Transwell小室法检测药物对细胞侵袭能力的影响;流式细胞术检测药物处理后细胞周期和凋亡情况;蛋白印迹技术（Western-blot）检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达水平变化。结果 洛伐他汀呈浓度依赖性抑制HepG2细胞的增殖,金氏公式计算结果显示洛伐他汀可协同增强顺铂的抗肿瘤作用;平板克隆形成实验结果表明洛伐他汀能显著抑制HepG2细胞克隆形成率;划痕实验提示洛伐他汀能显著降低肝癌细胞的迁移率;Transwell小室侵袭实验结果发现洛伐他汀能明显减少穿膜细胞数量;流式细胞检测发现洛伐他汀可引起G0/G1期细胞增加,S期细胞减少,细胞凋亡率增加;Western-blot检测结果显示洛伐他汀可下调Bcl-2蛋白表达,同时上调Bax和Caspase-3蛋白表达。结论 洛伐他汀可明显抑制HepG2细胞增殖、迁移和侵袭能力,与顺铂联用可增强顺铂体外抗肿瘤效果,通过线粒体途径诱导肿瘤细胞凋亡是其可能的抗肿瘤作用机制之一。     

表没食子儿茶素-3-没食子酸酯通过ERK1/2通路对肝癌HepG2细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨表没食子儿茶素-3-没食子酸酯（EGCG）通过ERK1/2通路对肝癌HepG2细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的影响。方法 将体外培养的肝癌HepG2细胞分为空白组、EGCG组、EGCG+ERK抑制剂组。收集细胞裂解液,CCK-8检测细胞增殖,相差显微镜和Hoechst 33258染色观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-qPCR检测ERK mRNA水平,Western blotting分析ERK、磷酸化ERK、Bax和Bcl-2表达水平,并计算Bax/Bcl-2比值。结果 EGCG可以显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭（P<0.01）,并促进HepG2细胞的凋亡（P<0.01）;加入ERK通路抑制剂可显著逆转EGCG对HepG2的作用。结论 EGCG可通过ERK1/2信号通路发挥对肝癌HepG2细胞的抑制作用。     

莪术油对直肠癌SW1463细胞株增殖、凋亡及Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨莪术油对直肠癌SW1463细胞株增殖、凋亡及相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2表达的影响。方法 水蒸气蒸馏法提取黔产莪术挥发油,配制成40、80、120、160、200、240、280 mg/L浓度梯度,干预SW1463细胞24、48、72 h,MTT法检测莪术油对SW1463细胞的增殖抑制率;Giemsa染色法观察莪术油对SW1463细胞凋亡形态的影响;蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测Capase-3、Bax与Bcl-2蛋白表达。结果 莪术油对SW1463细胞的增殖有明显抑制作用,并呈现时间-剂量相关性,24、48、72 h的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为144.33、134.11、120.04 mg/L;Giemsa染色可见细胞明显的凋亡形态学特征;莪术油干预SW1463细胞24 h后,与对照组比较,Caspase-3、Bax蛋白表达显著上调、Bcl-2蛋白表达显著下调（P<0.05）。结论 莪术油能明显抑制SW1463细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与上调Caspase-3和Bax蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达相关。     

三子颗粒下调miR-205-5p抑制小鼠脾虚型肠道腺瘤生长研究

目的 探讨三子颗粒通过降低微小核糖核酸-205-5p（miR-205-5p）水平抑制小鼠脾虚型肠道腺瘤生长的作用。方法 取70只4周龄的雄性C57BL/6J小鼠,采用对氧化偶氮甲烷（AOM）/葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导小鼠结直肠腺瘤模型,将建模小鼠随机分为模型组、阿司匹林（200 mg·kg^-1）组、miR inhibitor-NC （2 mg·kg^-1）组、miR-205-5p inhibitor （2 mg·kg^-1）组和三子颗粒低、中、高剂量（1.7、3.4、6.8 g·kg^-1）组,造模期间ig给药,每天1次。比较各组小鼠肠道腺瘤的数量并测量腺瘤体积;苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肠道腺瘤的病理情况;CCK-8法检测各组小鼠肠道腺瘤细胞增殖活力;原位末端标记（TUNEL）法检测小鼠肠道腺瘤细胞凋亡;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测肠道腺瘤miR-205-5p表达量及磷酸酯酶与张力蛋白同源物（PTEN）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Ki67 mRNA表达量;Western blotting法检测PTEN、Bcl-2、Bax、Ki67蛋白表达水平;荧光素酶活性实验验证miR-205-5p和PTEN的靶向关系。结果 与模型组比较,阿司匹林组和三子颗粒低、中、高剂量组小鼠肠道腺瘤数量、体积及细胞增殖活性均显著降低,凋亡率显著升高（P＜0.05）,miR-205-5p表达量、Bcl-2、Ki67 mRNA及蛋白表达量显著降低,PTEN、Bax mRNA及蛋白表达量显著升高（P＜0.05）,其中三子颗粒作用呈剂量相关性;与miR inhibitor-NC组比较,miR-205-5p inhibitor组小鼠肠道腺瘤数量、体积及细胞增殖活性均显著降低,凋亡率显著升高（P＜0.05）,miR-205-5p表达量、Bcl-2、Ki67 mRNA及蛋白表达量显著降低,PTEN、Bax mRNA及蛋白表达量显著升高（P＜0.05）;荧光素酶活性实验证实miR-205-5p可靶向调控PTEN。结论 三子颗粒可抑制小鼠脾虚型肠道腺瘤生长,可能是通过下调miR-205-5p,上调PTEN、Bax表达,下调Bcl-2、Ki67表达发挥作用的。     

基于AMPK/ULK1介导的自噬探讨牡荆素对鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤生长抑制作用及其机制

目的 探究牡荆素对鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其可能的调控机制。方法 将BALB/c裸鼠通过左侧前肢腋窝下接种CNE-2细胞构建鼻咽癌裸鼠成瘤模型,待模型构建成功后随机分为模型组、牡荆素组（5、10 mg/kg）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）激动剂组（AICAR,200 mg/kg）、牡荆素+AMPK抑制剂组（Compound C,20 mg/kg）,每组各10只。牡荆素组分别按照相应剂量ig;AICAR组ip 200 mg/kg AICAR;牡荆素+Compound C组采取ig 10 mg/kg牡荆素的同时ip 20 mg/kg Compound C,以上各组连续给药21 d。给药结束后测定裸鼠移植瘤体积和质量;苏木素–伊红（HE）染色观察移植瘤组织病理学改变;TUNEL染色检测肿瘤组织细胞凋亡情况;免疫组织化学检测肿瘤组织微管相关蛋白轻链3(LC3)-II、泛素结合蛋白（p62）蛋白表达;免疫荧光检测肿瘤组织LC3-II和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达;Western blotting检测肿瘤组织Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B淋巴细胞...     

氧化槐果碱对胃癌MGC80-3细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察氧化槐果碱对胃癌MGC80-3细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法 采用CCK-8、Hoechest 33342染色、倒置显微镜和流式细胞术测定氧化槐果碱干预后对细胞的增殖、凋亡的影响,qRT-PCR检测胃癌MGC80-3细胞中Bcl-2、Bax mRNA水平,Western blot法检测胃癌MGC80-3细胞中Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白水平。结果 氧化槐果碱能抑制胃癌MGC80-3细胞增殖（P<0.05）,并具有时间和浓度依赖性。0.48,0.95,1.91 mmol·L^-1氧化槐果碱能诱导细胞凋亡（P<0.05）,凋亡抑制剂Z-DEVD-FMK能逆转氧化槐果碱的凋亡诱导作用,0.95,1.91 mmol·L^-1氧化槐果碱能上调Bax的mRNA水平,下调Bcl-2的mRNA水平,差异均有统计学意义（P<0.05）。0.95,1.91 mmol·L^-1氧化槐果碱能上调Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9的蛋白水平,下调Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。凋亡抑制剂Z-DEVD-FMK能逆转氧化槐果碱对Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白的影响。结论 氧化槐果碱能通过调节Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9的表达水平,抑制胃癌MGC80-3细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

注射用丹参多酚酸对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的 研究注射用丹参多酚酸（SAFI）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤的保护作用及机制。方法 体外培养HUVEC,设置对照组、模型组、SAFI（0.05、0.10、0.20、0.40、0.80 mg/mL）组,对照组及模型组不加药,继续培养24 h,模型组及SAFI组分别加入1 mmol/L H₂O₂作用1 h,对照组不加H₂O₂。CCK-8法检测HUVEC增殖;酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞间黏附因子（ICAM-1）、血管细胞黏附因子（VCAM-1）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量;TUNEL染色法观察HUVEC凋亡状态;Western blotting法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的变化。结果 与模型组比较,质量浓度大于0.1 mg/mL的SAFI组细胞存活率显著增加（P<0.05）;质量浓度大于0.2 mg/mL的SAFI组LDH、MDA水平显著降低,SOD水平显著增加（P<0.05）;0.4、0.8 mg/mL的SAFI组ICAM-1、VCAM-1水平显著降低（P<0.05）;TUNEL染色结果显示,0.4、0.8 mg/mL的SAFI显著抑制凋亡;Western blotting结果显示,0.4、0.8 mg/mL的SAFI组Bcl-2蛋白表达显著升高（P<0.05）,Bax蛋白表达显著下降（P<0.05）。结论 SAFI对H₂O₂诱导的HUVEC损伤有保护作用,主要是通过提高SOD含量,降低氧化指标LDH、MDA以及炎症因子ICAM-1、VCAM-1水平,调节凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达发挥作用。     

AlCl3 induces lymphocyte apoptosis in rats through the mitochondria–caspase dependent pathway

To investigate apoptosis mechanisms in lymphocytes induced by aluminum trichloride (AlCl₃) through the mitochondria–caspase dependent pathway, the spleen lymphocytes of rats were cultured with RPMI‐1640 medium and exposed to AlCl₃·6H₂O in the final concentrations of 0 (control group, CG), 0.3 (low‐dose group, LG), 0.6 (mid‐dose group, MG), and 1.2 (high‐dose group, HG) mmol·L^?1 for 24 h, respectively. Mitochondrial transmembrane potential (ΔΨm), cytochrome C (Cyt C) protein expression in cytoplasm, Caspase‐3 and Caspase‐9 activity, Bcl‐2, Bax, Caspase‐3 and Caspase‐9 mRNA expressions, DNA ladder and lymphocytes apoptosis index were detected. The results showed that Cyt C protein expression in cytoplasm, Caspase‐3 and Caspase‐9 activity, Bcl‐2, Bax, Caspase‐3 and Caspase‐9 mRNA expressions, the ratio of Bcl‐2 and Bax mRNA expression, lymphocytes apoptosis index increased, while ΔΨm decreased in the AlCl₃‐treated groups compared with those in CG. The results indicate that AlCl₃ induces lymphocyte apoptosis in rats through the mitochondria–caspase dependent pathway. © 2014 Wiley Periodicals, Inc. Environ Toxicol 31: 385–394, 2016.