环加氧酶和前列腺素E受体亚型基因在人卵巢的表达

目的：观察环加氧酶及前列腺素Ｅ受体基因在人体卵巢组织的表达。方法：应用组织石蜡切片ｍＲＮＡ原位杂交技术观察前列腺素合成的限速酶－环加氧酶两种亚型（ＣＯＸ－１和ＣＯＸ－２）及前列腺素Ｅ受体基因在人卵巢组织中的表达。结果：在卵泡期和黄体期的卵巢组织均可见ＣＯＸ－１基因表达的信号，以颗粒细胞表达最丰富；与此相反，卵巢组织中未见ＣＯＸ－２的ｍＲＮＡ的阳性信号。前列腺素Ｅ受体两个亚型（ＨＥＰ１和ＨＥＰ２）的     

应用免疫组织化学方法定位多囊卵巢促性腺激素受体的研究

本文对２０例多囊卵巢综合征患者及１２例正常育龄妇女取卵巢组织，应用免疫组织化学方法观察卵促性腺激素受体的分布情况，结果显示：（１）正常卵巢ＬＨ、ＦＳＨ受体主要分布在颗粒细胞及卵泡膜；（２）ＰＣＯＳ的ＬＨ、ＦＳＨ受体主要分布在增生的卵泡膜，增生的间质细胞只含少量；颗粒细胞层退化，变薄，ＦＳＨ，ＬＨ受体较少；（３）正常卵巢及ＰＣＯＳ的白膜均不含ＦＳＨ、ＬＨ受体。     

人卵巢颗粒细胞雌激素β型受体cDNA的克隆和序列分析

目的 测定和分析人卵巢颗粒细胞中雌激素β型受体（ＥＲβ）ｃＤＮＡ的核苷酸序列结构。方法 采用ＤＭＥＭ培养基、以ＰＥＲＣＯＬＬ方法从人体外受精卵泡液中制备颗粒细胞。根据ＴＲｌｚｏｌ Ｒｅａｇｅｎｔ试剂盒方法抽提ＲＮＡ,并在Ｄｉｓｐｏｃｏｌｕｍｎ柱中用寡聚（ｄＴ）纯化ｍＲＮＡ。用ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐ＾ＴＭⅡＲＴ试剂盒反转录ＰＣＲ合成ｃＤＮＡ。扩增产物与ｐＧＥＭ－Ｔ载体连接,并转化大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕ     

急性髓系白血病H-ras、凋亡及多药耐药的研究

目的研究急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｈｒａｓ／Ｐ２１、抗凋亡基因（ｂｃｌ２）、细胞凋亡与多药耐药基因（ｍｄｒ１／Ｐｇｐ）对疗效的影响,并证实流式细胞术（ＦＣＭ）检测Ｐｇｐ和逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测ｍｄｒ１ｍＲＮＡ间的相关。方法用ＦＣＭ检测８５例初治ＡＭＬ患者的Ｈｒａｓ／Ｐ２１、ｂｃｌ２、细胞凋亡和ｍｄｒ１产物Ｐｇｐ的表达;用ＲＴＰＣＲ检测其中４７例的ｍｄｒ１／ｍＲＮＡ。结果Ｐ２１＋／Ｐｇｐ＋者完全缓解（ＣＲ）率明显低于Ｐ２１－／Ｐｇｐ－者（分别为５８．１％和１００％,Ｐ＜０．０２５）,高ｂｃｌ２／Ｐｇｐ＋的ＣＲ率明显低于低ｂｃｌ２／Ｐｇｐ－者（分别为６０％和９６．３％,Ｐ＜０．００５）。Ｐｇｐ＋３１例中２９例ｍｄｒ１ｍＲＮＡ阳性,Ｐｇｐ－１６例中仅２例ｍｄｒ１ｍＲＮＡ阳性。结论Ｐｇｐ＋同时Ｐ２１＋、高ｂｃｌ２者ＣＲ低,ＦＣＭ检测Ｐｇｐ和ＲＴＰＣＲ检测ｍｄｒ１ｍＲＮＡ相关性良好     

促卵泡生成素、黄体生成素和胰岛素对多囊卵巢病人颗粒细胞甾体激素分泌的影响

目的研究在促卵泡生成素（ＦＳＨ）、促黄体生成素（ＬＨ）和胰岛素（ＩＮＳ）刺激作用下多囊卵巢综合症（ＰＣＯＳ）病人与正常卵巢的颗粒细胞甾体激素产生的异同。方法对１８例月经周期正常妇女卵泡期的３３个卵泡和８例ＰＣＯＳ的１００个卵泡的颗粒细胞行体外培养，利用放射免疫法测定培养液中的甾体激素水平，比较了两组颗粒细胞在ＦＳＨ、ＬＨ和ＩＮＳ刺激作用下雌二醇（Ｅ２）和孕酮（Ｐ）的产生。结果ＰＣＯＳ病人的颗粒细胞在基础状态下，ＦＳＨ和ＩＮＳ刺激作用下Ｅ２产生量明显高于对照组（Ｐ＜００５～００１），在ＦＳＨ、ＬＨ和ＩＮＳ刺激作用下ＰＣＯＳ组产生的Ｐ量明显高于对照组（Ｐ＜００５～００１）；ＩＮＳ能明显的增强ＦＳＨ和ＬＨ对颗粒细胞的刺激作用；外周胰岛素拮抗的ＰＣＯＳ病人的颗粒细胞对ＩＮＳ刺激仍然敏感。结论ＰＣＯＳ病人的颗粒细胞甾体激素合成酶在体内时可能已被活化，ＰＣＯＳ病人的高ＩＮＳ和高ＬＨ血症可能起关键作用     

鼻咽癌细胞中MDM2基因扩增与表达的研究

应用斑点杂交和半定量逆转录－多聚酶链反应技术对３２例鼻咽癌（ＮＰＣ）标本,１０例慢性鼻咽炎症粘膜（ＣＩＮＥ）标本,ＮＰＣ细胞株进行ＭＤＭ２基因扩增与表达的检测。结果显示;１例ＮＰＣ有ＭＤＭ２基因的扩增,ＮＰＣ细胞株ＨＯＮＥ１和１０例ＮＰＣ有ＭＤＭ２ ｍＲＮＡ高表达,ＣＩＮＥ无ＭＤＭ２基因的扩增及ｍＲＮＡ的高表达。     

蛋白激酶C在热休克基因表达中的作用

热休克（４２℃，２ｈ）或Ｈ＿２Ｏ＿２预处理，均能在蛋白翻译合成水平使牛肺动脉内皮细胞（ＢＰＡＥＣｓ）中ＨＳＰ７０增多；在基因转录水平使ＢＰＡＥＣｓ中ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ含量增加。蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂──Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴＰ）能显著减少热休克和Ｈ＿２Ｏ＿２诱导的ＨＳＰ７０合成及ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ转录的增加。提示ＰＫＣ在热休克和Ｈ＿２Ｏ＿２诱导的热休克基因表达的信息传递中具有重要作用。     

内皮氧化低密度脂蛋白受体介导了氧化低密度脂蛋白对内皮细胞的损伤

目的：探讨氧化低密度脂蛋白（ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｌｏｗ ｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ,ｏｘＬＤＬ） 血管内皮受体（ｌｅｃｔｉｎｌｉｋｅ ｏｘＬＤＬｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＬＯＸ１）在ｏｘＬＤＬ致内皮细胞损伤中的作用及其机制。方法：放射配基结合及竞争抑制实验检测人脐静脉内皮细胞（ｈｕｍａｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌｖｅｉｎ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｃｅｌｌｓ,ＨＵＶＥＣｓ）存在ＬＯＸ１ 的高亲和位点,采用倒置相差显微镜观察细胞形态的改变,测定细胞及上清乳酸脱氢酶（ｌａｃｔｉｃ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ,ＬＤＨ）活性,计算细胞死亡率,发色底物法检测内皮细胞培养液中的组织纤溶酶原激活物（ｔｉｓｓｕｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ,ｔＰＡ） 和纤溶酶原激活物抑制剂（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒ１ ,ＰＡＩ１）的活性; 反转录聚合酶链反应检测ＬＯＸ１ ｍＲＮＡ 表达水平,Ｃａ２＋ 示踪测定细胞钙转运功能。结果：ＨＵＶＥＣｓ 存在ＬＯＸ１ 的高亲和位点［Ｂｍａｘ（５４ ±２０） ｎｇ／１０６ ｃｅｌｌｓ,Ｋｄ（２．０ ±０．６） ×１０－８ ｍｏｌ·Ｌ－ １］ ,单纯加入ｏｘＬＤＬ作用２４ ｈ      

地塞米松和阿斯匹林对猪肺血管内巨噬细胞环氧合酶II型的作

目的：探讨地塞米松（ＤＥＸ）和阿斯匹林（ＡＳＡ）对脂多糖致猪肺血管内巨噬细胞（ＰＩＭ）环氧合酶－－ＩＩ（ＣＯＸ－ＩＩ）表达及活性的影响。方法：改良分离,培养猪ＰＩＭ,分为：（１）对照组;（２）ＬＰＳ组：予ＬＰＳ刺激,以反转录聚合酶链反应和免疫组化染色法检测ＣＯＸ－ＩＩ ｍＲＮＡ及酶蛋白的改变,放射免疫分析法测定细胞上清ＰＧＥ２浓度,间接表示ＣＯＸ活性。结果：ＬＰＳ组ＰＩＭ ＣＯＸ－ＩＩ ｍＲＮＡ和     

蛋白激酶C在热休克基因表达中的作用

热休克（４２℃,２ｈ）或Ｈ２Ｏ２预处理,均能在蛋白翻译合成水平使牛肺动脉内皮细胞（ＢＰＡＥＣｓ）中的ＨＳＰ７０增多;在基因围录水平使ＢＰＡＥＣｓ中ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ含量增加。蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂－－Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴＰ）能显著减少热休克和Ｈ２Ｏ２诱导的ＨＳＰ７０合成及ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ转录的增加。提示ＰＫＣ在热休克和Ｈ２ＯＳ诱导的热休克基因表达的信息传递中具有重要作用。