载血卟啉脂质微泡的制备及一般特性的实验研究

目的 制备一种载声动力药物的脂质超声微泡并测定其包封率、粒径大小、观察其体内超声显像效果.方法 采用机械振荡的方法制备载血卟啉的脂质超声微泡,用荧光分光光度仪测定其包封率,用倒置显微镜及马尔文激光粒径测量仪测量粒径大小、分布和Zeta电位;观察60Co射线灭菌前后造影剂外观、形态、浓度和平均粒径的改变,并观察其在兔肝内的显像效果.结果 载药脂质微泡的浓度为(3.24±0.79)×109/ml,粒径范围为1.5～5.3μm,平均粒径为(2.84±0.4)μm;脂质载血卟啉(1mg)微泡的包封率为(30.25±4.45)%;Zeta电位为-(15.4±2.4)mV.经60℃射线灭菌后观察微泡形态、粒径及包封率无明显变化,其平均粒径大小及包封率分别为(2.24±0.3)μm,(27.39±2.91)%.静脉注射此载药微泡后,小鼠肝脏可见良好、持续的增强显像效果.结论 采用机械振荡法制备的载血卟啉脂质微泡,包封率较高,粒径分布均一,体内显像效果好,有望实现实时监控下的体内定点靶向给药.     

载竹红菌素脂质微泡的制备及对兔VX2肝肿瘤的显影实验

目的 制备一种载光动力药物的脂质超声微泡,测定物理特性,并观察其对兔VX2肝肿瘤的显影效果及过程.方法 采用机械振荡的方法 制备载竹红菌素脂质微泡,并测定其粒径大小、分布、Zeta电位和包封率、稳定性及超声辐照后药物释放情况.采用不同超声模式观察微泡在兔VX2肝肿瘤的显像效果及过程.结果 载药微泡的粒径为(1052.4±322.7)nm,Zeta电位为 (21.1±7.4)mV,包封率为(88.1±4.6)%,超声辐照能够促使微泡释放药物,对兔VX2肝肿瘤的显影效果好.结论 载竹红菌素脂质微泡包封率高、微泡能够释放药物、显像好,符合理想的药物载体,为实时监控下的体内定位光动力治疗疾病提供了一种新的思路.     

载10-羟基喜树碱脂质超声微泡的处方制备及一般特性研究

目的 研究载10-羟基喜树碱(HCPT)脂质超声微泡的处方制备工艺,筛选出最佳处方制备载药微泡,研究微泡的一般特性及显影效果,并检测微泡的药物包封率和载药量.方法 以机械振荡法制备载HCPT脂质超声微泡;采用正交试验优选处方;采用紫外分光光度法和反相高效液相色谱法测定微泡的包封率和载药量;在光学显微镜下计数并观察微泡的外观和分布情况;以马尔文激光粒径测量仪测量微泡粒径大小和Zeta电位;观察并比较微泡经60Co射线灭菌前后其外观、形态、平均粒径和包封率的改变;并观察微泡在兔肝脏的增强显影效果.结果 以最佳处方制备的载10-羟基喜树碱(2 mg)微泡的药物包封率为86.70%,载药量为21.70%;浓度为(3.07±0.58)×109/ml,粒径范围为(1.10±0.20)μm,平均粒径为1.10 μm;Zeta电位为-(3.90±0.80)mV;超声定向辐照微泡后,药物吸光度值明显增加;经60Co射线灭菌后观察微泡形态、平均粒径及包封率无明显变化;静脉注射此载药微泡后,兔肝脏超声显影持续增强.结论 采用机械振荡法制备的载HCPT脂质微泡,包封率和载药量较高,粒径分布均匀,体内显影效果好,有望实现实时监控下的体内定点靶向给药,为进一步研究奠定了基础.     

载药脂质微气泡的制备及其应用

目的制备载紫杉醇脂质微气泡并测定其包封率、载药量、药物释放及观察其体内超声显像效果。方法制备载紫杉醇脂质微气泡,测定其包封率,载药量,粒径大小、分布和Zeta电位;观察苏丹黑对脂质微气泡的染色,以及超声辐照后苏丹黑的释放情况;观察辐照后载药脂质微气泡各层溶液药物的释放;并观察其在小鼠肝内的显像效果。结果载药脂质微气泡的浓度为2.3×109~3.5×109/ml,粒径范围为90%以上2~6μm,平均粒径为2.95μm。脂质微气泡紫杉醇的包封率大于90%,载药量为(26.5±0.7)%;Zeta电位为-(21.8±1.1)mV;苏丹黑染色后光镜下可见微气泡壁被染成黑色,超声辐照后微气泡稀释液变黑,并且超声辐照载药脂质微泡溶液后,上层和中间层的药物释放明显增加;静脉注射此载药微气泡后,小鼠肝可见良好、持续的增强显像效果。结论采用机械振荡法制备的紫杉醇脂质微气泡,包封率和载药量均较高,粒径分布好,体内显像效果好,超声辐照能促使微泡中的药物释放,有望实现实时监控下的体内定点靶向给药。     

载多西紫杉醇脂质微泡超声造影剂的制备及其性质

目的 制备载多西紫杉醇脂质微泡并测定性质及观察其体内显像效果.方法 制备载多西紫杉醇脂质微泡,测定粒径、包封率等性质;观察60Co射线灭菌前后微泡性质的差异,观察超声辐照后载药微泡药物的释放,并观察其对兔VX2肝癌的显像效果.结果 载多西紫杉醇微泡的浓度为2.2×109～3.2×109个/ml;粒径分布范围为473.4～706.6 nm,平均粒径为623.1 nm;微泡的包封率为70%以上,载药量为(17.5±0.8)%;Zeta电位为-(3.1±0.9)mV;超声辐照微泡溶液后,药物可释放;静脉注射此微泡后,兔肝实质见良好、持续的增强显像,肝癌病灶可见明显的"快进快出"显影表现.结论 载多西紫杉醇脂质微泡包封率较高,性质较佳,体内显像效果好,提高了超声在肝癌等肿瘤诊断中的价值,超声辐照能促使微泡中的药物释放,有望在实时监控下体内定点靶向给药,实现对肿瘤的靶向治疗.     

载长春新碱长循环聚合物超声微泡造影剂的制备及性能评价

目的 制备载硫酸长春新碱的聚乳酸-乙醇酸-聚乙二醇共聚物(PLGA-PEG)超声微泡造影剂,观察微泡的一般特性及体内、外显影效果.方法 采用W/O/W复乳-溶剂挥干法制备超声微泡造影剂,正交实验设计获得最佳制备工艺,采用紫外分光光度法测定微泡的包封率和载药量,光学显微镜观察微泡形态,以马尔文激光粒径测量仪测定微泡造影剂的粒径、Zeta电位,并观察微泡在兔心腔的显影效果.结果 获得的微泡造影剂为球形,平均粒径约为1.27 μm,包封率为(37.63±0.61)%,Zeta电位为-24.88 mV,静脉注射载药微泡后,能增强兔心腔超声显影效果.结论 采用复乳-溶剂挥干法成功制备超声微泡造影剂,能增强体内外超声显影效果.     

比较两种制备载紫杉醇超声微泡的方法

目的 比较能被超声击破的两种载紫杉醇超声微泡的制备方法,并评价其理化性质以及超声散射强度.方法 用单纯紫杉醇法Ⅰ号和三醋酸甘油酯溶解法Ⅱ号分别制备载紫杉醇脂质超声微气泡,测定其包封率、载药量、粒径大小、分布和Zeta电位、pH值,并行超声击破试验及兔VX2皮下肿瘤显像试验. 结果两种微泡显像无明显差异,可被低能量超声击破,但Ⅱ号(加入三醋酸甘油酯)脂质微泡较Ⅰ号(常规冷冻干燥法制备)载药微泡粒径显著减小[(1.07±0.38)μm vs(2.79±0.41)μm,P<0.01],表面电位增高[(19.10±0.32)mV vs (-5.90±0.21)mV,P<0.01],包封率和载药量显著增高[(95.00±1.22)% vs (36.10±4.74)%,P<0.01;(5.60±0.11)% vs (0.50±0.04)%, P<0.01]. 结论 三醋酸甘油酯溶解法制备的Ⅱ号微泡在局部药物释放中具有更大的应用价值.     

载紫杉醇脂质微泡的改良制备研究

目的 探讨加入三醋酸甘油酯改良制备载紫杉醇脂质微泡的可行性,及其对载药微泡质量、载药量、包封率的影响.方法 采用冷冻干燥法制备携带紫杉醇的脂质微泡,分别于制备过程中加入或不加入三醋酸甘油酯,测定载药微泡的包封率、载药量、粒径大小、分布和Zeta电位、pH值.结果 改良法(加入三醋酸甘油酯)制备的载紫杉醇脂质微泡与常规冻干法制备的载药微泡相比较,微泡粒径显著减小,二者的平均粒径分别是(1.1±0.4)μm和(2.8±0.4)μm,P<0.01;其表面电位显著增高(19.1±0.3)mV和(-5.9±0.2)mV,P<0.01;包封率和载药量显著增高,包封率分别为(95.0±1.2)%和(36.1±4.7)%,载药量为(5.60±0.10)%和(0.50±0.04)%,P<0.01.结论 制备过程中加入三醋酸甘油酯可显著提高载药微泡的包封率和载药量.     

载基因及穿膜肽脂质超声造影剂制备的实验研究

目的 研究自制的脂质超声造影剂载基因及穿膜肽的能力,评价其物理性质及显影效果.方法 采用机械振荡法制备载基因及穿膜肽的脂质超声造影剂,检测微泡形态、分布、浓度、粒径、表面电位及载基因和穿膜肽的能力,并观察其对兔心脏的显影效果.结果 自制载基因及穿膜肽脂质超声微泡造影剂的粒径为(2.27±0.38)μm,浓度为(3.07±0.42)×109个/ml,表面电位为(1.95±0.13)mV.该造影剂中基因的包封率为32%,穿膜肽的包封率为35%.体内造影显示该造影剂能有效增强心肌显影.结论 自制载基因及穿膜肽脂质超声造影剂符合理想超声造影剂的要求,载基因及穿膜肽的效率高,可作为携带基因等生物活性物质的载体材料.     

包裹阿霉素的新型载药微泡制备及体外缓释实验研究

目的 将包裹阿霉素(ADM)的乳/羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米缓释药物微球(ADM-NP)通过共价结合方式连接于带正电氨基脂质超声微泡(MB-NH2)表面,制备包裹ADM的新型载药微泡,并观察其基本理化特性、载药量、包封率、体外缓释特性及显影效果.方法 采用双乳化法,制备ADM-NP,并通过碳二亚胺法活化ADM-NP表面的羧基,在一定条件下,使ADM-NP以共价结合的方式,连接于MB-NH2表面.用光镜观察连接情况、微泡形态并检测其粒径大小.用高效液相色谱法(HPLC)检测其包封率及载药量,观察该新型载药微泡的体外缓释药特性以及对兔VX2肝癌的显像效果.结果 48 h后光镜观察,可见大量ADM-NP连接于MB-NH2表面,呈花环状,分布较为均匀,其平均最大径为(2.68±0.98)μm.该新型载药微泡的载药量为(8.71±0.46)％,包封率为(86.11±6.76)％.两组体外释药均符合Hignch方程,其结果无明显差异性(P＞0.05),48 h体外累积释药量达90％以上.经兔耳缘静脉注射该微泡后,兔肝实质明显持续增强,肝癌呈“快进快退”显像表现.结论 采用碳二亚胺法可将ADM-NP通过共价结合方式连接于MB-NH2表面,提高微泡载药量,延长药物的持续作用时间,并且在兔VX2肝癌肿瘤中显影效果好,为采用超声靶向爆破微泡进行药物定位释放技术提供了一种新型高效的载药微泡系统.     

机械振荡法制备激肽原酶载药微泡的实验研究

目的:探讨机械振荡法制备激肽原酶载药微泡的最佳参数。方法:机械振荡法制备激肽原酶载药微泡,利用不同的振荡时间,激肽原酶与微泡不同的混合比例,检测载药微泡的携带率、激肽原酶的效价、载药微泡的粒径及粒径分布、浓度、pH值、包封率。结果:振荡时间在45 s,载药微泡携带率最高,为(93.46±1.7)%。激肽原酶与微泡混合比在4∶1的条件下,激肽原酶效价最高且达到合格标准。载药微泡的表面电位为(-56.47±8.23)mV,平均粒径为(13.2±7.3)μm,粒径范围为6~20μm,浓度为(6~7)×108/mL,pH值为(6.20±0.01),包封率为(52.5±0.8)%。结论:采用机械振荡法可成功制备激肽原酶载药微泡,该载药微泡药物携带率高,稳定性较好,且能维持良好的药物效价。     

载组织型纤溶酶原激活物及精-甘-天-丝氨酸四肽超声微泡造影剂的实验研究

目的 制备一种同时携带组织型纤溶酶原激活物(Tissue plasminogen activator,tPA)与精-甘-天-丝氨酸四肽(RGDS)靶向配体的新型脂质超声微泡造影剂.方法 以冷冻干燥法制备包载tPA的脂质超声微泡造影剂并应用共价键桥连剂法结合RGDS配体.光镜及荧光显微镜观察其形态;测量其粒径、表面电位、pH值;以ELISA法测定tPA包封率;流式细胞仪检测RGDS携带率;琼脂糖纤维蛋白平板法检测其纤溶活性;以该造影剂对正常家兔肝脏进行静脉声学造影,绘制时间-强度曲线,检测其成像功能.结果 微泡膜上同时携带tPA和RGDS,浓度(7～9)×109/ml,粒径(2.08±0.93) μm,表面电位-51.3,pH值5.58,tPA包封率(81.12±2.44)%,RGDS携带率(94.49±6.19)%.微泡在超声辐照条件下显示溶栓活性.声学造影后,该造影剂能明显增强实验兔肝实质回声.结论 以冷冻干燥法和共价键桥连剂结合法能成功制备同时包载tPA并携带RGDS的脂质超声微泡造影剂,将为血栓的靶向释药促溶治疗提供一条新的可行之路.     

成骨生长肽壳聚糖—海藻酸钠微球的制备及体外检测

背景:成骨生长肽体外注射可以刺激外周血和骨髓细胞数增加,增加动物的骨量,加速骨折愈合,但因多肽不稳定性及注射应用不方便,限制了其临床应用。目的:应用乳化交联法制备成骨生长肽壳聚糖-海藻酸钠缓释微球,并对其粒径、载药、体外释药、理化特性进行检测。方法:以戊二醛作为交联剂,应用乳化交联法制备具有控制释放功能的负载成骨生长肽壳聚糖-海藻酸钠微球,显微镜及扫描电镜观察微球的形态和粒径;利用酶联免疫吸附实验动态检测成骨生长肽壳聚糖-海藻酸钠微球的载药率、包封率和缓释规律。结果与结论:乳化交联法制备的壳聚糖-海藻酸钠微球,球形良好,球体表面有较多微孔,具有较高的包封率(>72%)。体外药物释放实验表明,成骨生长肽可以从壳聚糖-海藻酸钠微球中缓慢释放,整个释放过程可达49d,累积释放率>85%。提示应用乳化交联法制备的负载成骨生长肽壳聚糖-海藻酸钠缓释微球,具有很好的控制释放成骨生长肽的能力。     

载血卟啉的乳酸/羟基乙酸共聚物超声微泡造影剂制备及工艺优化

目的 探讨载声敏剂血卟啉(hematoporphyrin,HP)的高分子材料乳酸/羟基乙酸共聚物[Poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]超声微泡造影剂的优化制备工艺.方法 采用双乳化法制备包裹HP的PLGA超声微泡造影剂,通过正交设计筛选出比较理想的制备工艺,并对所制备的造影剂进行药物体外释放评估及体外超声造影观察.结果 载HP的PLGA造影剂(HP-PLGA)平均粒径602.3 nm,平均包封率63.5%,平均载药量2.15%,电位-(17.1±1.6)mV,体外14 d缓释约86.5%,体外超声显影良好.结论 通过采用双乳化法制备的HP-PLGA造影剂,具备缓释长效的特性,体外显像效果好,符合理想药物载体的基本特性,为实时监控下体内声动力治疗肿瘤提供了一种新型的药物剂型.     

Microvascular rheology of Definity microbubbles after intra-arterial and intravenous administration.

The microvascular rheology and extent of pulmonary retention of second-generation microbubble ultrasound contrast agents has not previously been well characterized. We assessed the microvascular behavior of Definity, a lipid-shelled microbubble agent containing perfluoropropane gas, using intravital microscopy of either rat spinotrapezius muscle or mouse cremaster muscle. Immediately after intra-arterial injection, which was performed to model pulmonary retention, larger microbubbles (> 5 microm) were entrapped within small arterioles and capillaries. The retention fraction of microbubbles was low (1.2% +/- 0.1%) and entrapment was transient (85% dislodged by 10 minutes), resulting in no adverse hemodynamic effects. Leukocyte or platelet adhesion at the site of entrapment was not seen. After intravenous injection, no microbubble entrapment was observed and the velocities of microbubbles in arterioles, venules, and capillaries correlated well with those of red blood cells. We conclude that after intravenous injection and pulmonary passage, the microvascular rheology of Definity microbubbles is similar to that of red blood cells. Microbubble entrapment within the pulmonary microcirculation after venous injection should be negligible and transient. These findings are important for establishing the safety of this agent.     

鬼臼毒素纳米脂质载体的制备及质量考察

目的：纳米脂质载体是近年来继固体脂质纳米粒发展起来的第2代亚微粒载药系统，具有较高的载药量和物理稳定性。探讨鬼臼毒素-脂质纳米粒（podophyllotoxin-loaded nanostructured lipid carrier，PPT-NLC）的制备方法及理化性质。方法：实验于2006—08／2007—10在南方医科大学药学部实验室完成。选择固体脂质硬脂酸、单硬脂酸甘油脂和液态脂质油酸，采用改良的乳化蒸发-低温固化法制备PPT-NLC，用同法制备不含油酸的PPT-固体脂质纳米粒（Solid lipid nanoparticles，SLN）纳米粒混悬液。用透射电镜、Zeta电位仪、高效液相色谱法、pH计考察PPT—NLC理化性质，并比较SLN与NLC的包封率和稳定性。结果：透射电镜下PPT—NLC外形呈圆形或椭圆形，平均粒径为（88．2±8.4）nm，多分散指数为0．190±0．085，Zeta电位为（-33．2±3．1）mV，包封率为86．6％。PPT-SLN分别为（75．3±16．2）nm，0．300±0．072，（-25．2±3．4）mV，包封率为76．5％。结论：PPT-NLC制备工艺简单，分布均匀，稳定性较SLN好，包封率高。     

纳米脂质微泡超声造影剂制备及其显影效果的实验研究

目的 制备一种纳米级脂质超声微泡造影剂,并将其与普通脂质微泡在正常兔肝的造影效果进行比较,以评价其造影效果.方法 经机械振荡法制备纳米脂质微泡,检测其形态、粒径、表面电位等物理特性.分别经兔耳缘静脉团注自制纳米脂质、普通脂质微泡造影剂(2.5 ml/kg),动态观察肝的实质回声增强情况,并用DFY型超声图像分析诊断仪对造影效果进行定量分析.结果 纳米脂质微泡平均粒径为415.8 nm,平均电位为-(13.7±1.6)mV.造影后观察:该纳米微泡能明显增强兔肝的二维灰阶显像,与普通脂质微泡比较,纳米微泡达峰时间较晚,峰值持续时间较短,增强持续时间较普通脂质微泡长,纳米微泡对肝的增强峰值强度略低于普通微泡.结论 自制纳米微泡形态好,粒径均一,显影效果理想,为肿瘤的靶向性研究提供了一个前期基础.     

口服榄香烯微乳的制备与表征

背景:研究显示,微乳可保护稳定性差的药物,增加难溶性药物的溶解度,提高生物利用度,控制药物释放及减少用药个体差异等。其主要缺点在于需要较多的表面活性剂和助表面活性剂,对人体的安全性是一个重要挑战。目的:探讨榄香烯微乳的制备方法,并对其结构与性能进行表征。方法:榄香烯药物直接作为油相,吐温80作为表面活性剂,乙醇、丙二醇、甘油作为助表面活性剂,采用超声法制备成榄香烯微乳。结果与结论:榄香烯微乳粒径为(67±13)nm,Zeta电位为(3.2±0.4)mV,pH值为5.16,黏度为6mPa?s,表面张力为31.7mN/m。榄香烯微乳中β-榄香烯含量为(8.273±0.018)g/L,平均包封率为(99.81±0.24)%。结果可见该方法制备的榄香烯微乳粒径小,分布窄,呈弱酸性,黏度低,表面张力较低,体系稳定性好,适用于口服给药。