大肠杆菌O157∶H7多糖-重组铜绿假单胞菌外毒素A结合疫苗的研制

目的　用大肠杆菌O15 7∶H7(EscherichiacoliO15 7∶H7,E .coliO15 7)的一个重要保护性抗原即菌体脂多糖 (LPS)制备有效的候选疫苗。方法　选用Westphal热酚法提纯E .coliO15 7∶H7的LPS ,经酸水解法进一步脱毒处理后得到无毒但却具弱免疫原性的O 特异性多糖 (O SP) ,然后采用己二酸二肼 (ADH)将其共价结合到琥珀酰化 (或没琥珀酰化 )重组铜绿假单胞菌外毒素 (rEPAsucc或rE PA)上。结果　制备得到的E .coliO15 7∶H7的O SP rEPAsucc或O SP rEPA结合疫苗是安全有效的 ,其免疫原性要比单一O SP的免疫原性强 ,免疫小鼠后产生的血清抗LPSIgG抗体滴度比单一O SP免疫后产生的抗体水平均有显著性升高 (P <0 .0 1) ,且再次注射后存在加强应答。结论　E .coliO15 7∶H7的O SP rEPAsucc结合疫苗可望作为一种预防肠出血性E .coli引起的感染性腹泻的有效候选用疫苗     

抗大肠杆菌O157:H7特异性IgY的免疫反应特性初探

分别以水煮法灭活E.coli O157：H7制备菌体抗原、热酚水法提取脂多糖(LPS)和乙酸水解LPS制备O抗原多糖(OPS)3种抗原免疫产蛋母鸡4次.     

肠出血性大肠杆菌O157∶H7特异性脂多糖抗原的制备

肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrha-gicEscherichia coli,EHEC)O157∶H7是产Vero毒素的食源性肠道致病菌,可引起人类患血性腹泻、肾衰竭、尿毒综合征等症。本文应用热酚水法提取纯化了EHEC O157∶H7脂多糖抗原及其O-特异性多糖(O-specific polysaccharide,O-SP)侧链。菌株为EHEC O157∶H7 EDL933株,(由中国疾病预防控制中心CDC馈赠)。LPS的制备:菌悬液反复冻融3次后,与等量90%苯酚共同加热至68℃后混合,剧烈搅拌30 min后,冰浴至2℃离心(4℃,3000g×20 min)。酚相加等体积无热原水重复洗涤2次,收集水相溶液装于透析袋中,流水透…     

甲型副伤寒结合疫苗的制备及其免疫原性研究

目的 研制预防沙门菌属A组甲型副伤寒沙门菌感染的多糖蛋白结合疫苗。方法 通过对甲型副伤寒沙门菌尼泊尔株NTP-6的发酵培养，热酚水法提取脂多糖（LPS），酸水解脱毒，纯化出有效的型特异O-SP抗原；然后用CDAP对O-SP活化、ADH衍生后，在EDAC的缩合作用下，结合到破伤风类毒素TT上，制备出甲型副伤寒结合疫苗。用含2．5μg多糖甲型副伤寒结合疫苗免疫小鼠，以LPS为包被抗原，用间接ELISA法测定血清抗甲型副伤寒LPS IgG抗体；并测定血清多糖抗体的补体介导杀菌活性；在小鼠和豚鼠体内观察甲型副伤寒结合疫苗的安全性。结果甲型副伤寒结合疫苗第2次免疫NIH后，小鼠血清抗甲型副伤寒LPS IgG抗体平均几何滴度（GMT）均较第1次有4倍以上升高，第3次免疫后，有明显的加强效应；抗体的补体介导杀菌活性效价达1：1280以上；小鼠和豚鼠体内甲型副伤寒结合疫苗安全性良好。结论 成功建立了甲型副伤寒结合疫苗的制备工艺；制备的甲型副伤寒结合疫苗有良好的免疫原性，并具有明显的加强效应；刺激的血清多糖抗体有较高的补体介导杀菌活性效价；安全性达到人用生物制品相关要求。     

肠出血性大肠杆菌O157:H7 EspA-Stx2B融合蛋白的克隆、表达及生物学活性研究

目的 重组表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7的EspA与Stx2B融合蛋白,并对其生物学活性进行初步研究.方法 采用PCR技术从EHEC O157:H7基因组中扩增espA基因及stx2B基因,两基因通过连接子(linker)相连,T/A法克隆,克隆至pET-28a(+)表达载体上,转化宿主细胞E. coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测其表达量及表达形式,免疫印迹分析免疫反应性.用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,检测其免疫原性,然后对免疫小鼠进行O157活菌攻毒试验和O157超声上清致死保护试验.结果 构建的espA-stx2B融合基因片段的测序结果 与理论预测值完全一致.融合蛋白在工程菌中以包涵体的形式表达,表达量约40%.免疫印迹显示融合蛋白能分别与EspA和Stx2B抗体发生抗原抗体反应.免疫小鼠其特异性抗体阳转率达100%,EspA和Stx2B抗体的几何平均滴度(GMT)分别增长了124.30倍和58.49倍.免疫小鼠O157活菌攻毒保护试验免疫后排菌时间和排菌量与对照组相比并没有明显改变,O157菌超声上清致死保护试验免疫组存活率为10/15,对照组全部死亡.结论 在E. coli中高效表达了EspA-Stx2B融合蛋白,此融合蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,融合蛋白免疫小鼠并不能降低细菌在小鼠胃肠道的黏附与定植,但却起到明显的免疫保护作用,保护率为66.7%(10/15).     

Survey of O-islands in Escherichia coli O157 and Other Enteric Pathogens—O-islands of E. coli O157：H7

The genome of the enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7 EDL933 contains 177 “O”-islands (OIs). Tostudy their potential contribution to the O157-specific pathogenicity, we surveyed the distribution of 22 OIs by PCR and DNA hybridization in 17 isolates of Shiga toxin producing (Stx-positive) E. coli O157:H7, and compared with their distribution in 21 isolates of Stx-negative E. coli O157 and 21 isolates of non-O157 enteric pathogens. Fourteen of 22 OIs were present innon-O157 entericpathogens analyzed. Eight of 22 OIs were found only in the 17 Shiga toxin- (Stx) positive E. coli O157:H7 isolates, but they were absent from the 21 Stx-negative E. coli O157: NM and O157 Hund isolates tested. Among the 8OIs, only OI43 or OI48 were exclusively detected in Stx-positive E. coli O157 : H7, absent from neither of Stx-negative E. coli O157 and non-O157 enteric pathogens, such as Salmonella, ShigeUa, Citrobacter, Vibrio cholera, enteropathogen-ic E. coli (EPEC), enteroadherent E. coli (EAEC), enteroinvasive E. coli (E1EC) and enterotoxingenic E. coli (ETEC). The OI43 and OI48 are 83 kb in size and identical in DNA sequences, which encode genes for urease, tellurite resistance and adherence. By analyzing their junction genes with PCR and DNA hybridization, we found that 21 Chinese isolates have OI48 only. However, for 7 Japanese patient isolates, 4 have OI43 and 3 have OI48; for American isolates, 2have both of O143 and OI48, 2 have OI48 only. These data confirmed the highly plasticity of the pathogenic E. coli genome. The unique presence of OI43/OI48 in Stx-positive E. coli 0157:H7 denotes its critical role in the pathogenicity specific to this pathogen.     

肠出血型大肠埃希菌O157:H7Tir的表达、纯化及不同免疫途径对其免疫效价的影响

目的 克隆、表达和纯化肠出血型大肠埃希菌(enterohaemorrhagic E.coli,EHEC)O157:H7转位紧密黏附素受体蛋白(Tir),观察不同免疫途径对其免疫效价的影响,为EHEC O157:H7亚单位疫苗的研究提供了实验资料.方法 扩增tir基因,克隆到pET-30a(+)载体上,转化至大肠埃希菌BL21/DE3,诱导表达目的 蛋白,通过Ni-IDA亲和层析进行纯化;将重组蛋白Tir免疫小鼠,检测血清和粪便提取物中抗体效价.结果 双酶切和测序鉴定结果均显示重组质粒pET-30a (+)-tir构建成功.SDS-PAGE结果表明,目的 蛋白Tir在大肠埃希菌BL21(DB3)中得到表达.皮下免疫和鼻腔免疫小鼠,血清中均能检测到高效价的IgG类抗体,鼻腔免疫组小鼠血清和粪便lgA类抗体效价明显高于皮下免疫组.结论 Tir蛋白具有一定的免疫原性.

Abstract：

Objective To clone and express translocation intimin receptor(Tir)of enterohemorrhagic Escherichia coli(EHEC)O157:H7,and to analyze the effect of different routes on the induction of immunity to the recombinant protein.Methods The tir eucoding genes were amplified from EHEC O157:H7 strain guangzhou 246 genome,and genes were cloned into the vector pET-30a(+).The pET-30a(+)tir recombinant was transformed into E.coli BL21.and expression was induced bv IPTG.The expressed product was analyzed by SDS-PAGE and purified by Ni-IDA affinity chromatography.The immunized mice sera and fecal against the recombinant protein was detected.Resuits The length of the tir is 1677 bp,with the initiation codon ATG and the termination codon TAA.Double enzyme digestion and DNA sequencing confirmed that the recombinant expression plasmid pET-30a(+)-tir was constructed.The recombinant protein was expressed in Escherichia coli expression system,and was purified by Ni-IDA affinity chromatography.The mice were able to produce a high serum IgG antibody titer after both subeutaneous and intranasal immunizations.Meanwhile,the intranasal immunization induced serum and fecal IgA antibody titer was significantly higher than that of the subcutaneous immunization group.Conclusion Tir molecule is potential vaccine candidate for preventing EHEC disease.     

甲型H7N9流感裂解疫苗制备及免疫保护效果的评价

目的构建、拯救重配甲型H7N9流感病毒疫苗候选株并制备甲型H7N9流感裂解疫苗,动物实验评价甲型H7N9流感裂解疫苗的免疫原性及免疫保护性效果。方法采用反向遗传学技术将A/Anhui/1/2013(H7N9)疫苗株的HA、NA基因和A/Puerto Rico/8/34(PR8)毒株的PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因进行重配,转染细胞后筛选拯救甲型H7N9流感病毒疫苗候选株,制备rgPR8-H7N9流感裂解疫苗抗原。腹腔注射免疫Balb/c小鼠,检测血清IgG、IgG1、IgG2a、HI效价,进一步用野生株攻毒,评价rgPR8-H7N9流感裂解疫苗的免疫保护效果。结果成功拯救甲型H7N9流感病毒疫苗候选株rgPR8-H7N9。制备的重配甲型H7N9流感裂解疫苗对小鼠产生较高的HI抗体效价。IgG1/IgG2a亚型检测结果表明小鼠体内以诱导体液免疫为主。攻毒实验显示甲型H7N9流感裂解疫苗能够有效降低肺部的病毒载量,肺组织病变显著减轻、体质量下降后趋于稳定,疫苗剂量达到15μg即可全部存活。A/Anhui/1/2013(H7N9)野生株流感病毒攻毒,甲型H7N9流感裂解疫苗能够达到保护小鼠效果。结论成功拯救重配甲型H7N9流感病毒疫苗候选株rgPR8-H7N9,制备的甲型H7N9流感裂解疫苗具有较好的免疫原性及免疫保护性,为H7N9流感裂解疫苗的研发及进入临床研究提供了实验依据。     

流感疫苗株为载体的重组HAdV疫苗候选株构建及免疫效果

目的以冷适应、减毒流感活疫苗株为载体,构建并拯救喷鼻重组HAd V疫苗候选株,并评价其免疫效果,为腺病毒候选疫苗研制提供实验数据。方法应用反向遗传学技术,以冷适应、减毒流感活疫苗A/Ann Arbor/6/60ca(H2N2)株为骨架,与季节性流感病毒A/California/07/209疫苗株的血凝素(haemagglutination,HA)及插入HAd V六邻体蛋白抗优势原表位的2个重复序列经改造的神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因构建流感病毒八质粒系统,转染COS-1/MDCK细胞筛选疫苗候选株并鉴定;制备的候选疫苗株滴鼻免疫Balb/c小鼠,通过中和抗体、s Ig A黏膜抗体及细胞因子的测定评价其免疫原性,并用野生HAd V-7病毒株攻击评价免疫保护效果。结果成功拯救获得重组HAd V疫苗候选株,命名为rg Flu/HAd V-Ca,其形态符合流感病毒典型特征,可有效表达HAd V病毒Hexon优势表位,且具有冷适应、减毒表型。小鼠免疫后可产生针对HAd V-7及H1N1流感病毒的特异性中和抗体,肺鼻灌洗液中可检测到针对HAd V-7中和抗体s Ig A抗体,并可检测到脾淋巴细胞分泌HAd V-7特异性细胞因子IFN-γ、IL-4;攻毒实验显示,rg Flu/HAd V-Ca疫苗候选株可有效降低小鼠肺病毒载量。结论重组冷适应、减毒HAd V活疫苗株rg Flu/HAd V-Ca具有良好的免疫效果,为腺病毒候选疫苗的研制提供了新思路。     

类鼻疽杆菌鞭毛蛋白FliC与EHEC O157∶H7 EspA蛋白的融合表达及其免疫学性质研究

目的融合表达类鼻疽杆菌鞭毛蛋白FilC与肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157 EspA蛋白,并评价其免疫学性质。方法 PCR扩增类鼻疽杆菌FilC编码基因bpsl3319,连接到基于EHEC O157 EspA的表达载体pEspA上,表达并纯化EspA-FliC融合蛋白,Western blot分析其抗原性;EspA-FliC免疫Balb/c小鼠评价其免疫原性。结果获得了bpsl3319目的基因,构建了重组表达质粒pEspA-bpsl3319;实现了EspA-FilC的高效表达,其表达量约占菌体总蛋白的25%,纯化后蛋白纯度超过85%。Westernblot结果显示EspA-FliC能分别与抗类鼻疽杆菌多克隆抗体、抗EHEC O157∶H7 EspA的单抗和多抗血清发生特异性抗原抗体反应。EspA-FilC免疫Balb/c小鼠可刺激其产生高效价特异的IgG,且此抗体能识别EspA-FilC、EspA以及天然类鼻疽杆菌的FliC。结论重组表达了融合蛋白EspA-FilC,该蛋白具有较好的免疫反应性和良好的免疫原性。此研究为下一步研制类鼻疽杆菌和EHEC O157的二联疫苗奠定了基础。     

肠出血性大肠杆菌O157:H7溶血素保护性片段(HlyAN436)克隆、表达、初步纯化与生物学活性研究

目的获取重组表达肠出血性大肠杆菌O157的溶血素（Ehx）保护性片段，并研究其基本的生物学及免疫学特性。方法PCR法从EHECO157-SMR2菌株克隆O157：H7的HlyA亚单位的N端片段（436个氨基酸），T-A克隆后构建表达载体pET-28a（＋）-HlyAN436，测序鉴定后转化到E.coliBL21（DE3），IPTG诱导表达，初步纯化后免疫动物。结果Hly-AN436成功地在大肠杆菌表达系统表达，动物实验证实其具有良好的免疫原性和反应性以及一定的免疫保护性。结论Hly-AN436蛋白有可能用于肠出血性大肠杆菌O157基因工程疫苗的研究。     

应用酶联免疫吸附试验检测肠出血性大肠杆菌O157:H7

目的制备和纯化O157：H7抗原，免疫家兔和豚鼠，获得高效价的抗O157：H7免疫血清并进行纯化及酶标记。建立对O157：H7感染患者快速诊断方法，做到早期发现及时治疗，有效控制疫情的蔓延。方法ELISA双抗体夹心法检测O157：H7抗原。步骤：包被特异性抗体，加处理后的粪便等标本，然后加入抗O157：H7酶结合物，最后加入底物显色。结果本课题所研制的抗O157：H7酶结合物只对O157：H7呈阳性反应，而与其他相关细菌无交叉反应。结论应用酶联免疫吸附试验(即双抗体夹心法)对肠出血性大肠杆菌O157：H7抗原的检测较常规法实验程序简捷、快速、敏感。临床和现场验证结果表明，其方法具有灵敏度高，特异性强操作简单等特点，为肠出血性大肠杆菌O157：H7的鉴定及快速诊断提供了一种新的检测手段。     

肠出血性大肠埃希菌O157:H7 espA基因的克隆与表达

目的 通过DNA重组技术表达肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157：H7的EspA蛋白，并分析其免疫学性质。方法 采用PCR技术从EHEC O157：H7基因组中扩增espA基因，T／A法克隆，连接至pET-28a（＋）载体上，转化宿主细胞E．coli BL21（DE3），IPTG诱导表达，亲和层析法纯化目的蛋白，SDS-PAGE测定其相对分子质量，同时分析其N端氨基酸序列，免疫家兔鉴定其抗原性。结果 重组espA基因片段的测序结果与GenBank上基因序列只有1个碱基不同，一致性为99．83％，所编码的氨基酸序列没有改变。重组EspA蛋白在工程菌中以包涵体的形式表达，表达量约30％。免疫家兔所得抗体滴度为1：32。结论构建高效表达EspA蛋白的重组载体pET-28a（＋）-espA，表达的蛋白具有良好的免疫原性，为进一步制备亚单位疫苗奠定基础。     

甲型H1N1流感病毒亚单位疫苗对小鼠的免疫原性观察

目的:观察国产甲型H1N1流感病毒亚单位疫苗对小鼠的免疫原性.方法:将不同血凝素含量(20、30、40 μg/ml)各3批甲型H1N1流感病毒亚单位疫苗分别免疫小鼠,腹腔注射0.5 ml/只,每批疫苗又分为1针组、2针组,每组10只,2针间隔1周,同时设对照组.首针免疫后21天,分别采血,分离血清,检测血凝抑制抗体效价和中和抗体效价,观察疫苗的免疫原性.结果:血凝素含量为20 μg/ml的甲型H1N1流感病毒亚单位疫苗1针组、2针组血凝抑制抗体效价均小于1:40,中和抗体效价均小于1∶200;血凝素含量为30、40 μg/ml的甲型H1N1流感病毒亚单位疫苗1针组、2针组的血凝抑制抗体效价均大于1∶40,中和抗体效价均大于1∶200;血凝素含量为30、40 μg/ml的甲型H1N1流感病毒亚单位疫苗1针组和2针组的血凝抑制抗体和中和抗体效价比较,差异均无统计学意义.结论:血凝素含量为30 μg/ml的甲型H1N1流感病毒亚单位疫苗接种1针即可达到理想的免疫效果.     

EHEC O157:H7志贺毒素Ⅱ型A、B亚单位的表达及功能鉴定

目的 克隆、表达肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157:H7志贺毒素(Shiga toxin,Stx)Ⅱ型A、B亚单位,并鉴定其免疫学功能.方法 从EHECO157:H7基因组中克隆编码Stx Ⅱ型A、B亚单位的基因,经测序、酶切后,导入表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌Topl0F',经诱导、纯化得到谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)-A和GST-B融合蛋白.分别用A、B亚单位融合蛋白免疫BALB/c小鼠获得高免血清,观察A、B亚单位血清对小鼠进行毒素攻击的保护作用.结果 Stx Ⅱ型A、B亚单位的GST融合蛋白获得高效表达并纯化;A、B亚单位的高免血清可以保护小鼠对致死量毒素的攻击.结论 Stx Ⅱ型A、B亚单位蛋白可以作为EHEC O157:H7疫苗的候选分子,同时针对A、B亚单位蛋白的中和单抗可以对易感人群起到紧急保护作用.     

幽门螺杆菌ureB及ureB-hspA融合基因在减毒鼠伤寒沙门菌中的表达及小鼠的免疫应答

目的　构建H .pyloriureB单基因及ureB和hspA融合基因的减毒鼠伤寒沙门菌疫苗候选株 ,并进行初步的免疫原性分析。方法　将H .pyloriureB单基因及ureB和hspA融合基因分别克隆入pTrc99A asd质粒的多克隆位点之内。挑取单菌落质粒鉴定后 ,分别将其电击经中间宿主X3730转入最终宿主X4 0 72 ,SDS PAGE和Westernblot检测蛋白表达。将疫苗候选株经口或鼻免疫BALB c小鼠。结果　疫苗候选株能够分别表达出相对分子质量 (Mr)为 6 4× 10 3的UreB蛋白及 77× 10 3的UreB HspA融合蛋白。在免疫BALB c小鼠的肠液和血清中可以分别检测到针对H .pylori的特异性分泌型IgA和IgG抗体。结论　构建了能够表达幽门螺杆菌UreB及UreB HspA融合蛋白的活菌疫苗候选株 ,为探索制备H .pylori口服活菌疫苗奠定了基础。     

肠出血性大肠杆菌O157∶H7志贺毒素I型A亚基的表达与鉴定

目的表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7志贺毒素1型A亚基(Stx1A)重组蛋白并鉴定。方法从EHEC O157∶H7基因组中扩增编码Stx1A的基因,经测序无误后,克隆入表达载体pET-22b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),经诱导、纯化获得目的蛋白Stx1A,并对纯化的目的蛋白进行质谱鉴定。重组的Stx1A蛋白免疫BALB/c小鼠,观察小鼠抗血清与EHEC O157∶H7毒株特异性反应。结果 PCR扩增的Stx1A基因为945 bp,成功构建重组质粒pET22b(+)-Stx1a,重组蛋白在原核细胞中获得高效表达,通过AKTATM-His亲和层析柱获得纯化。质谱分析表明目的蛋白为Stx1A。Western blot显示鼠抗Stx1A血清可与EHEC O157∶H7毒株产生的天然毒素蛋白结合。结论成功克隆了EHEC O157∶H7 Stx1A基因,并获得重组表达,为后续研究奠定基础。     

EHEC O157:H7志贺样毒素Ⅱ结合亚单位Stx2B的基因克隆、表达与纯化

目的克隆表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157H7志贺样毒素B亚单位(Shiga liketoxin 2B,Stx2B),并对其初步纯化.方法设计引物采用PCR法自EHEC O157H7基因组扩增志贺样毒素B亚单位的编码基因stx2b,T-A克隆后构建原核表达质粒pET-22b(+)-stx2b,经测序鉴定后转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,以Tricine-PAGE和Western blot分析目的蛋白的表达,并采用固相镍离子亲和层析纯化重组蛋白.结果扩增的stx2b基因约210 bp;原核表达质粒pET-22b(+)-stx2b经酶切和测序鉴定与预期序列一致;并在E.coli BL21(DE3)中得到高效可溶性表达,蛋白表达率约30%;PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量(Mr)约7×103;经固相镍离子亲和层析纯化后,蛋白纯度可达90.1%.结论EHEC O157H7志贺样毒素B亚单位的高效表达与初步纯化,有利于进一步的生物学性质研究.     

LPS表位模拟肽诱导小鼠保护性免疫的研究

目的 鉴定三种LPS模拟位合成肽的抗原性、诱导抗LPS抗体的产生及对细菌攻击的保护性.方法 三种LPS模拟位合成肽与载体BSA交联后,ELISA测定其与多种抗LPS单、多克隆抗体的结合活性;合成肽与蓝载体交联物免疫Balb/c小鼠,观察其诱发小鼠体内抗LPS抗体产生的规律及血清抗LPS抗体效价;鉴定针对细菌感染的保护性效应. 结果 三种合成肽均能与抗鼠伤寒和大肠杆菌LPS抗体结合;用合成肽-蓝载体交联物免疫动物可诱发小鼠体内针对两种LPS的抗体反应,并对细菌攻击的免疫动物具不同程度的保护性作用,以合成肽13a,13b及12W与蓝载体交联物免疫的小鼠在鼠伤寒沙门氏菌攻击后存活时间分别为(6.5±0.77),(9.5±1.38)及(9.3±0.75) d,而PBS/蓝载体对照组存活时间为5 d.结论 本研究所采用的3种LPS表位模拟肽作为疫苗免疫小鼠能够产生针对细菌攻击的保护性效应,提示此3种表位模拟肽作为LPS交叉保护性疫苗候选的可行性与可靠性.     

痢疾多糖-蛋白结合疫苗小鼠母子抗体传递试验

目的　以小鼠为试验动物模型 ,用不同的痢疾多糖 蛋白结合疫苗免疫母鼠 ,观察IgG抗体的母婴传递情况。方法　用福氏 2a痢疾多糖 重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)结合疫苗 (F2a O SP rEPA)和宋内痢疾多糖 重组铜绿假单胞菌外毒素A结合疫苗 (S O SP rEPA)分别皮下免疫母鼠 ,待其怀孕、分娩 ,用ELISA分别检测母体、子体小鼠的IgG抗体滴度。结果　子体小鼠出生第 2周的IgG抗体水平较高 ,随着小鼠周龄的增加 ,抗体水平逐渐下降。结论　痢疾多糖 蛋白结合疫苗免疫母体后 ,诱导的特异性抗体可经母体传递给子体 ,抗体滴度随时间的推移而逐渐降低。