间接荧光抗体技术在晚期丝虫病患者中的初步观察

近年来,随着免疫学的不断发展,微丝蚴阳性者免疫荧光研究已见于多篇文献;而对晚期丝虫病患者,国内外尚无这方面的报道。为此,我们用马来丝虫成虫冰冻切片抗原(Aw—Ag)及微丝蚴抗原(Mf—Ag)对马来和班氏丝虫病晚期患者作间接荧光抗体(IFA)试验,以了解晚期患者血中抗体水平。材料与方法一、试验血清标本的收集、保存、稀释1988～1989,我们分别在德江、务川、独山三县静脉采集班氏和马来丝虫病晚期患者血清标本51份,微丝蚴阳性血清10份,并在上述     

马来丝虫微丝蚴低温保存及在东乡伊蚊体内发育的观察

丝虫幼虫置液氮内(-196℃)冷冻保存作为“虫库”,对开展丝虫病的生物学和免疫学研究开辟了新的途径。1969年以来国外已有报道,但国内报道甚少。1985年我们开始进行马来丝虫微丝坳(Mf)于液氮内不同时间的低温保存研究,并观察它在东乡伊蚊体内发育的情况,现报告如下。材料和方法一、Mf 的收集及低温保护剂用腹腔内灌洗法从马来丝虫感染的长爪沙鼠腹腔液内收集 Mf 于离心管内,加入10倍37℃灭菌生理盐水,1500rpm 离心10分钟,     

马来丝虫感染期幼虫的低温保存及在沙鼠体内发育的观察

丝虫的感染期幼虫(L_3)于液氮内(-196℃)低温保存,对开展丝虫病的免疫学研究和体外培养以及建立动物模型均有着重要的实用价值。1975年Mecall最早报道。但对马来丝虫L_3的冷冻保存国外于1983年才获成功,国内尚未见报道。1985年我们在获得微丝蚴(mf)低温保存成功的基础上进行了L_3冷冻保存的探索,现已取得初步结果,报道如下。材料与方法一.冷冻保护剂及L_3的收集: (一)以6％二甲基亚砜、15％小牛血清的RPMI—1640培养液(PH7.2)作为L_3低温保护剂。     

周期型马来丝虫感染期幼虫体外培养发育的观察

马来丝虫感染期幼虫(L_3)体外培养是了解丝虫幼虫在终宿主体内生长发育的重要手段之一,同时为收集代谢产物和蜕皮液以制备抗原和虫苗等进行免疫学研究以及药物筛选开辟新的研究领域。1960和1965年,Taylor、Sawyer等相继报道犬恶丝虫感染期幼虫体外培养可存活30天,并蜕皮进入四期幼虫;1979年Chen和Howeus报道彭亨丝虫L_3体外培养存活20天,1982年Wong等报道犬恶丝虫和彭亨丝虫L_3分别存活31～33天,且均可完成蜕皮。在我国尚未见有类似的报道。1983年5月我们实验室成功地建立了马来丝虫感染期幼虫     

马来丝虫成虫冰冻切片抗原间接荧光抗体试验诊断丝虫病的初步观察

丝虫病间接荧光抗体试验(IFA)始于1962年,Chowdhury 等用微丝蚴为抗原诊断班氏和盘尾丝虫病,继而 Coudert(1968)、Ambrise—Thomas(1969)(1974)和 Diesfeld 等(1979)用 Dipetalonema viteae 丝虫成虫冰冻切片为抗原 IFA 试验诊断丝虫病和流行病学调查取得一些进展。Grove(1978)用感染沙鼠腹腔的马来丝虫成虫为抗原 IFA 试验可提高其敏感性和特异性。国内河南医学院冯祖梅等(1982)以马来丝虫成虫为抗原对丝虫病患者进行检查阳性符合率为92.81～98.39%、假阳性为0.66%,与钩虫、蛔虫、鞭虫等其他蠕虫感染未见交叉反应。1983年我们采用同法试验,现将结果介绍如下:材料和方法一.抗原的制备:断头法杀死实验感染马来丝虫的沙鼠,收集丝虫成虫,灭菌生理盐水     

马来丝虫感染期蚴低温保存

丝虫感染期蚴(L_3)的低温保存,国内外已有一些报道。冷冻后的L_3仍能保持原有的生物学特性,在易感宿主体内能继续发育至成虫;亦能在体外继续培养,蜕皮发育至童虫(L_4)。鉴于L_3的来源和虫种的不同,所采用的冷冻方法也各异,目前尚无标准化的方法。本实验采用不同冷冻方法,对马来丝虫L_3进行低温保存研究,以探索长时间冷冻保存L_3的实验方法。材料与方法一、虫源周期型马来丝虫(Brugia malayi)感染期蚴,从本实验室马来丝虫长爪沙鼠动物模     

周期型马来丝虫微丝蚴在不同基础培养液中存活情况的比较观察

1983年WHO丝虫病专家委员会报道班了氏丝虫微丝蚴能在培养液中进行培养,大部分微丝蚴脱鞘后8天发育为第一期蚴虫(L_1)。1987年2月,我们对马来丝虫微丝蚴(mf)在不同基础培养液中存活情况进行了观察比较,现将结果报道如下: 一、mf的收集: 以生理盐水腹腔灌洗法从感染丝虫的鼠体内获取mf。方法详见贵州省丝虫病防治与科研资料汇编(1955—1966页) 二、培养技术: (一)基础培养液:应用Earle液;Earle加0.5％水解乳旦白(L+E);Hanks液;RPMI—1640;No199。每种培养液取2ml加     

氯喹、呋喃嘧酮、痢特灵和海群生对体外培养的周期型马来丝虫成虫、感染期幼虫和微丝幼作用的观察

1987年4月,我们用抗疟药氯喹作了体外抗周期型马来丝虫成虫、感染期幼虫和微丝蚴的效果观察,并与呋喃嘧酮、痢特灵和海群生比较,结果报道如下。材料与方法一.虫源(一)周期型马来丝虫成虫和微丝蚴(Mf)的收集:分别用腹腔灌洗法和解剖法从感染马来丝虫沙鼠腹腔内收集 mf 和成虫于消毒离心管,盛 Mf 管加入10倍灭菌 RPMI—1640液(加青、链霉素各500u/ml),1500rpm 离心10分钟,弃去上清液,如此反复3     

DNA探针聚合酶链反应免疫发光技术鉴定蚊体内班氏丝虫幼虫

在丝虫病防治和监测过程中,对蚊体内幼丝虫的感染率和感染度的检测,从而了解丝虫病传播强度和动态,评价丝虫病防治效果,是流行病学研究中非常重要的内容之一。传统鉴定蚊媒体内幼丝虫的方法是以形态学为依据,往往不易鉴别动物丝虫或人丝虫(特别Ⅰ、Ⅱ期幼虫)。近年来由于分子生物学和基因工程技术的发展,对丝虫生物学的研究开始进入基因水平。DNA 重组技术是鉴定寄生虫的基因,了解丝虫病的发病机制,传播规律,虫种鉴定,诊断及丝虫病防治与鉴测评价具有重要实用价值的新技术。我们应用非放射性同位素标记物标记实验室内制成的班氏丝虫种特异性 DNA 探针,通过聚合酶链反应(PCR)以便增加要分解出靶 DNA 量。在最初实验中,我们发现蚊虫     

福建蚊体内5种常见丝虫感染蚴的形态比较

福建已发现有寄生于人体、家畜、家禽及各种鸟类的丝虫15种,其中以吴策丝虫属班氏丝虫(W.banerofti)、布鲁丝虫属马来丝虫(B.malayi)、恶丝虫属的犬恶丝虫(D.immitis)和猫恶丝虫(D.repens)及腹腔丝虫属的牛腹腔丝虫(S.digitata)为在丝虫病调查和蚊媒监测工作中,正确鉴别人体丝虫和动物丝虫的幼虫,现将蚊体内5种常见丝     

经卫生部初步选定的我省部分重大医药卫生科研成果

周期型马来丝虫长爪沙鼠模型主要研究单位:遵义医学院建立人体寄生丝虫病的动物模型,对丝虫生物学特性的认识、抗丝虫药物的筛选、丝虫病免疫和免疫诊断方法的研究以及丝虫病理学的研究都有重要的意义。以往用大动物猴和猫建立马来丝虫动物模型。至于用小动物感染人体丝虫的研究,国外报导是用人体的亚周期型马来丝虫人工感染长爪沙鼠成功。但我国寄生人体的马来丝虫属于周期型,与国外的不同。一九七四年遵义医学院用人工接种(腹腔注射)的方法,成功地将我国寄生人体的周期型马来丝虫感染长爪沙鼠成功,并可传种接代,今已     

基因重组丝虫融合蛋白抗原检测晚期丝虫病血清特异性抗体的实验研究

目的 评价基因重组丝虫融合蛋白抗原用于检测晚期丝虫病血清特异抗体的价值。方法 以基因重组丝虫融合蛋白抗原Ｃｈｉｔｉｎａｓｅ,ＳＸＰ１,ＥＬＩＳＡ和ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ方法检测８０例晚期丝虫病者血清特异性抗体。结果 Ｃｈｉｔｉｎａｓｅ,ＳＸＰ１检测晚期丝虫病者血清特异性抗体的阳性率为２５～４０＾,Ｍｆ－ｘｔ则为１０～２５％,敏感性明显高于Ｍｆ－ｘｔ（Ｐ〈０．０１）。ＳＸＰ１可检测到病程为     

周期型马来丝虫微虫蚴的体外培养

建立丝虫的体外培养系统对丝虫病的防治与监测有着重要的价值。Sawyer和Weinstein(1963)首次报道犬恶丝虫在NCTC_(109)培养液中可发育到一期。1966年Wood和Suitor利用埃及伊蚊细胞的Grece＇s细胞系培养台湾猴丝虫微丝蚴,至第19天发育到第2期幼虫。此后,体外培养受到广泛注意,并取得一定进展。1987年,姜维维用CaCl_2人工脱鞘的马来丝虫微丝蚴在HamF_(12)和RPMI_(1640)含30％小牛血清中最高有20％可发育至腊肠期。陶鸿章(1989)用CaCl_2脱鞘的马来丝虫微丝蚴在含中华按蚊细胞系的TC_(199)培养液中有25.5％发育致腊肠期,并且认为有鞘微丝虫蚴的体外培养,脱鞘是使其发育的先决条件。本文报道未经人工脱鞘及人工脱鞘的微丝蚴在各种培养液及含东乡伊蚊胸肌细胞系的培养液中发育情况。     

伊维菌素降低马来丝虫感染东乡伊蚊和长爪沙鼠传播能力的效果观察

作者用伊维菌素(IVM)0.05ug/ml、0.1 ug/ml和海群生(DEC)150ug/ml浓度在体外与兔血混合马来丝虫微丝蚴实验感染东乡伊蚊。12天后全部蚊虫进行个体解剖:伊维菌素组蚊体内未发现马来丝虫三期幼虫,而海群生组东乡伊蚊感染率为30.5％、对照组为36.0％。单剂量的伊维菌素以400ug/kg体重,对照组用无菌生理盐水,经皮下或腹腔液内注入微丝蚴阳性的长爪沙鼠。治疗组和对照组分別于治疗后间隔1、7、30和75天喂饲东乡伊蚊。实验组于治疗后1—15天蚊体内未发现幼虫,对照组东乡伊蚊自然感染率为13.6％—14.6％。在治疗后75天蚊体内检获L_3数目,仍低于对照组。本研究提示伊维菌素能降低马来丝虫在蚊媒中的传播作用。其作用方式将进一步探讨。     

苯硫脲嗪对棉鼠丝虫和马来丝虫感染的治疗

新化合物苯硫脲嗪(4-硝基-4’-(1-甲基哌嗪-4-硫代甲酰氨基)二苯胺)具有抗丝虫作用。感染棉鼠丝虫的棉鼠或长爪沙鼠和感染马来丝虫的长爪沙鼠用苯硫脲嗪ig 200mg/(kg·d)×3d皆获治愈。苯硫脲嗪对微丝蚴亦有作用,给药开始后3d,受治棉鼠周围血中的微丝蚴即消失,而受治长爪沙鼠腹腔内的马来丝虫微丝蚴活动减弱、僵直或自溶。两种丝虫经苯硫脲嗪作用后,虫体被破坏、崩解,特别是马来丝虫,出现大量死虫肉芽肿,虫周细胞反应强烈。     

西太区淋巴丝虫病地理分布和流行近况

淋巴丝虫病是西太区主要公共卫生学问题之一,虽然通过防治有些国家丝虫病流行已基本控制,如日本、中国、美属萨摩亚和波利尼西亚等国家。一、中华人民共和国:50年代初期,周期型班氏和马来丝虫病广泛地流行于中国中部和东部的15个省(市)自治区。班氏丝虫病流行于482县(市),马来丝虫病流行于231县(市),153县为混合感染。由于中国面积大,且地形复杂,各地感染率变化较大,5%以下有419县,而30%以上有11个县(市),平均微丝蚴阳性率在3.05%～21.8%,橡皮肿率2.17%～6.8%范围。据统计丝虫感染者30,999,000人,其中有临床症状和体征者有5,400,000人。在中国有5属12种蚊虫为淋巴丝虫病的媒介(表1),在北纬32°以北班氏丝虫主要媒介为淡色库蚊,而在32°以南为致倦库蚊,     

周期型马来丝虫感染期幼虫在人卵巢癌细胞中的体外培养(科研简报)

1985年我室成功地建立了我国第一株人卵巢粘液性囊腺癌细胞系(OMC_(685))。1986年7～10月我们用 OMC_(6(?)5)细胞系作营养层的培养系统,体外培养周期型马来丝虫感染期幼虫(L_(?)),L_3可在体外蜕皮发育为第四期幼虫(L_4),幼虫最长可存活66天。从感染周期型马来丝虫的阳性沙鼠腹腔液获取微丝蚴,人工感染中华按蚊,7.5～8天后收集 L_(?),置于含有高浓度青、链霉素(各1000 u/ml)的培养液中37±0.5℃温箱中静置约2小时,再用该培养液换液洗涤三次。     

抗丝虫病药物的进展

据世界卫生组织1974年的报道,全世界丝虫病患者约有2亿5千万。流行于亚州、非洲、大洋洲、中南美洲等地。过去丝虫病在我国的流行也很广,解放后,尤其是无产阶级文化大革命以来,在毛主席革命卫生路线的指引下,各地区积极开展丝防工作,使发病率大大降低,流行区日趋缩小。寄生于人体丝虫主要有班氏丝虫(Wuchereria Bancrofti)、马来丝虫 (WuchereriaMalayi)、蟠尾丝虫(Onchcerca Volvulus)和罗阿丝虫(Loa Loa)等。在我国主要为班氏和马来二种丝虫。早期使用有机砷药物治疗丝虫病。自1947年发现海群生(Hetrazan)对丝虫病有效之后,     

病家服海群生药盐防治马来丝虫病效果的初步观察

应用海群生药盐(以下称药盐)防治马来丝虫病,国内已作了不少研究。我们于1981年5月至1983年8月,对从江县宰戈大队进行了病家服药盐防治马来丝虫病的效果观察,结告如下。一般情况观察大队地处山区,主产水稻,属亚热带气候。共81户,407人,均系侗族农民。服药盐前查出有马来微丝蚴阳性患者的病家18户,阳性患者20人,年龄在2～60岁之间,均未给予过海群生等抗丝虫药物治疗。人群微丝蚴率为5.3％,传播媒介为中华按蚊。     

ApoAⅡ单克隆抗体对抗原决定簇的测定及应用研究

目的　研究载脂蛋白AⅡ (ApoAⅡ )单克隆抗体 (McAb)对其抗原的决定簇。方法　应用淋巴细胞杂交瘤技术 ,建立抗人ApoAⅡ杂交瘤细胞株 (BI1 ,BI2 ,BI3,BI4 ,BI5,BI6 ,BI7) ,以制备的McAb用双向免疫扩散法和ELISA对其免疫学特性进行了测定 ,用单抗相加试验和双抗体竞争试验对其抗原决定簇进行分析。结果　Ig亚类测定 :BI1 、BI2 、BI5和BI7为IgG1 ,而BI3、BI4 和BI6 均为IgG2b,腹水效价BI1与BI6 为 1× 10 - 6 ,BI2 、BI3、BI4 、BI5和BI7均达到 1× 10 - 5。特异性测定 :与载脂蛋白AⅠ、B、CⅠ、CⅡ、CⅢ、E、脂蛋白 (a)、人血清白蛋白及纤维蛋白溶酶原 (pg)没有交叉反应。单抗相加试验和双抗体竞争试验结果证实 ,BI1 、BI4 和BI5为识别apoAⅡ上同一抗原决定簇的McAb、BI2 、BI3、BI6 和BI7则为针对apoAⅡ上另一抗原决定簇的McAb。结论　ApoAⅡ的McAb对抗原决定簇的测定为预测动脉粥样硬化危险性提供了理论依据