黄芪皂甙对培养心肌细胞跨膜电活动与自发性搏动的影响

培养Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠的心肌细胞。向培养基中加入黄芪皂甙５００μｇ·ｍＬ－１使搏动的心肌细胞群落数目增多；心肌细胞动作电位的发放频率增高，波幅、波宽、超射、最大舒张电位、阈电位、最大除极速度等各项参数减小；心肌细胞膜的静息电位减小１０ｍＶ。洗脱后恢复。以上结果表明黄芪皂甙能抑制Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰ酶。     

黄芪皂甙对培养心肌细胞跨膜电活动与自发性搏动的影响

培养Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠的心肌细胞。向培养基中加入黄芪皂甙５００μｇ．ｍＬ＾－＾１使搏动的心肌细胞群落数目增多；心肌细胞动作电位的发放频率增高，波幅，波宽，超射，最大舒张电位，阈电位，最大除极速度等各项参数减小；心肌细胞膜的静息电位减小１０ｍＶ。洗脱后恢复。以上结果表明黄氏皂甙能抑制Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰ酶。     

刺五加叶皂甙单体S_c1对培养大鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响／

培养Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心室肌细胞，向培养基中分别加入浓度为５０μｇ／ｍＬ至８００μｇ／ｍＬ的刺五加叶皂甙单体（ＡｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｉｄｅｓＣ１，Ｓｃ１），可使心肌细胞的自发性搏动呈剂量依赖性抑制，洗脱后能使之得以恢复。向培养基中加入１００μｇ／ｍＬＳｃ１，使培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞动作电位的波幅、波宽、阈电位、最大舒张电位、最大除极速度及复极（１０％、５０％、９０％）水平的动作电位波宽一致减小。Ｃａ２＋８０μｇ／ｍＬ能使之反转。Ｓｃ１作用与０．４μｇ／ｍＬ尼莫地平作用相似。上述结果表明Ｓｃ１具有钙通道阻滞作用。     

刺五加叶皂甙单体Sc1对培养在鼠心肌细胞自发性搏动及动…

培养Ｗｉｓｔａｒ大鼠乳鼠心室肌细胞，向培养基中分别加入浓度为５０μｇ／ｍＬ至８００μｇ／ｍＬ的刺五加叶皂甙单体，可使心肌细胞的自发性搏动呈剂量依赖性抑制，洗脱后能使之得以恢复。     

大豆甙对培养大鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响

观察大豆（ｄａｉｄｚｉｎ）对培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位电参数的影响。将０．７８～６．２５μｇ／ｍｌｄａｉｄｚｉｎ，分别加入到培养４～８ｄ的Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞的培养液中，依次记录加药前、后心肌细胞群落的自发性搏动及动作电位电参数的变化。结果：大豆甙可剂量依赖性的抑制培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位参数，该作用可被Ｃａ２＋８０μｇ／ｍｌ与肾上腺素１０μｇ／ｍｌ所反转。结论：大豆甙具有钙通道阻滞作用。     

人参三醇组皂甙单体对培养心肌细胞自发性搏动与动作电位的影响

培养新生Ｗｉｓｔａｒ大鼠的心室肌细胞。向培养基中加入人参三醇组皂甙单体Ｒｇ、，ＲＧ２，Ｒｅ，Ｒｈ１，Ｒｆ各３０μｇ／ｍｌ。除Ｒｆ外，均使呈现自发性搏动的群落 及心肌细胞动作电位各参数减小，洗脱后恢复，肾上腺素１０μｇ／ｍｌ能使之逆转 。显示其钙通道阻滞作用     

西洋参茎叶皂甙湖养的大鼠心肌细胞动作电位的影响

西洋参茎叶皂甙(PQS250、500μg/ml)使培养的Wistar大鼠心肌细胞动作电位的波幅、波宽、阈电位、最大舒张电位、最大除极速度及复极50％水平的动作电位波宽一致减小。实验结果表明,ROS可能具有钙通道阻滞作用。     

西洋参茎叶皂甙对培养的大鼠心肌细胞动作电位的影响

西洋参茎叶皂甙（POS250、500μg/ml）使培养的Wistar大鼠心肌细胞动作电位的波幅、波宽、阀电位、最大舒张电位、最大除极速度及复极50％水平的动作电位波宽一致减小。实验结果表明，PQS可能具有钙通道阻滞作用。     

大豆甙对培养大鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响

观察大豆甙对培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位电参数影响。将０．７８－６．２５μｇ＝ｍｌ ｄａｉｄｚｉｎ，分别加入到培养４８－ｄ的Ｗｉｓｔａｒ大鼠民肌细胞的培养液中，依次记录加药前、后心肌细胞群落的自发性搏动及动物电参数的变化。结果：大中剂理信赖性的抑制培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞自发性搏劝及动作是位参数，该作用可被Ｃａ＾２＋８０μｇ／ｍｌ与肾上腺素１０μｇ／ｍｌ所反转。结论：大     

人参二醇组皂甙对培养心肌细胞动作电位的双向性效应

人参二醇组皂甙(PDS)对培养的Wistar大鼠心肌细胞动作电位呈双向性效应:低浓度使动作电位的波幅、波宽、超射、阈电位、最大舒张电位、最大除极速度等电参数一致增大;高浓度使这些电参数一致减小;无论在低浓度范围,或者在高浓度范围,电参数的改变均随PDS剂量的增大而更加显著。在电位记录前,临时向培养基中加入PDS,只表现对跨膜电活动的抑制效应。而且此效应可被肾上腺素所抵销。以上结果提示人参二醇组皂甙既有膜保获作用也有钙通道阻滞作用。     

在离体工作心脏上对比观察人参二醇组与三醇组皂甙的钙通道阻滞作用

在Wister大鼠的离体心脏上进行观察,以主动脉流量、冠脉流量、心输出量、每搏输出量、脉压、左室最高压、左室舒末压、室内压最大上升与最大下降速率等9项参数为心肌收缩性能的指标。100μg/ml人参二醇组皂甙与人参三醇组皂甙均使心肌收缩性能立即减弱,后者的作用比前者强。洗脱后,各项指标迅速恢复Ca~(2+)8μ/ml或肾上腺素0.01μg/ml均可使两种人参皂甙的作用逆转。同法应用2.66μg/ml尼莫地平时,心肌收缩性能的表现相似。以上结果表明人参二醇组与人参三醇组皂甙均有钙通道阻滞作用,且后者比前者的作用强。     

刺五加叶皂甙单体Sb对培养大鼠心肌细胞动作电位的影响

本研究中所用的刺五加叶皂甙单体Ｓｂ（５０、２００μｇ／ｍＬ），使培养的ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞动作电位的波幅、波宽、阈电位、最大舒张电位、超射、最大除极速度及复极（１０％、５０％、９０％）水平的动作电位波宽一致减小。Ｃａ２＋８０μｇ／ｍＬ能使之反转，Ｓｂ作用与尼莫地平作用相似。上述结果表明Ｓｂ具有钙通道阻滞作用。     

依赖Ca2+的ATP过量释放在机械牵张所致气道上皮黏蛋白5AC高分泌中的作用

目的探讨人气道上皮细胞三磷酸腺苷(ATP)释放量的改变在机械通气所致气道黏液高分泌中的作用。方法人气道黏膜上皮细胞(HBE16)体外培养,通过节律性倾斜细胞培养板,利用液体的表面张力、大气压及液体重力所产生的牵张力(剪应力)及压力(压应力)给予压力牵张刺激,并利用向密闭盒中注入医用氧气增加压力以模拟机械通气,各组培养细胞依施加条件不同而分为对照组、单纯倾斜组、倾斜+钙离子螯合剂BAPTA-AM、倾斜+BAPTA-AM+钙离子螯合剂EGTA、加压+倾斜、加压+倾斜+嘌呤P2Y受体阻断剂reactive blue-2(RB-2)、加压+倾斜+BAPTA-AM、加压+倾斜+BAPTA-AM+EGTA,共8组,分别采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定细胞活性、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组黏蛋白(MUC)5AC mRNA表达水平、ELISA法检测细胞培养上清液中MUC5AC含量、高效液相色谱法(HPLC)检测培养液中ATP释放量。结果加压+倾斜组细胞MUC5AC mRNA相对含量、培养上清液中ATP释放量和MUC5AC蛋白分泌量分别为:(11.80±0.01)、(7.41±0.45)μmol/g、(0.77±0.26),显著高于单纯倾斜组的(6.60±0.01)、(2.76±0.47)μmol/g、(0.25±0.01)及对照组的(3.40±0.01)、(0.00±0.01)μmol/g、(0.02±0.01)(均P<0.05)。RB-2、EGTA+BAPTA-AM处理后的加压+倾斜组细胞的MUC5AC mRNA相对含量分别为:(10.5±0.03)、(11.9±0.11),与加压+倾斜组相比抑制作用不显著(P>0.05);培养上清液中ATP释放量分别为:(0.05±0.02)μmol/g、(0.08±0.02)μmol/g,较加压+倾斜组显著降低(均P<0.05)。结论机械通气可以显著提高气道黏膜上皮MUC5AC的分泌,其机制与气道上皮细胞依赖Ca2+的ATP的过量释放密切相关。     

体外条件下蜕皮甾酮对大鼠脐带间充质干细胞增殖的实验研究

目的:研究体外条件下蜕皮甾酮(ecdysterone,EDS)对于大鼠脐带间充质干细胞增值活性的影响。方法：采用胶原酶消化法分离培养大鼠脐带间充质干细胞,并通过动态观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面抗原加以鉴定;取第3代脐带间充质干细胞分别在基础培养基(DMEM-LG培养基、10%的胎牛血清、100U/ml青/链霉素、2mmol/L L-谷氨酰胺)中加入不同浓度（0、25、50、100、150、200μg/ml）EDS予以干预,分别于第1、3、5、7天MTT法检测细胞增殖活性;另外,设置相同分组EDS干预培养大鼠脐带间充质干细胞7天,绘制细胞生长曲线。结果：采用酶消化法能有效分离纯化大鼠脐带间充质干细胞。细胞细胞流式仪鉴定显示,第3代细胞阳性表达CD44、CD90,阴性表达CD34、CD45。实验采用MTT法检测大鼠脐带间充质干细胞活力,结果显示经EDS干预培养的大鼠脐带间充质干细胞生长状态良好,在细胞活力方面较空白对照组有明显差异(P<0.05),EDS 100μg/ml、150μg/ml及200μg/ml三组细胞活性比较无显著差异(P>0.05),其他实验组之间无统计学意义(P>0.05)。细胞生长曲线同样显示EDS实验组可有效促进干细胞的增殖,缩短细胞倍增时间,此作用在EDS浓度为100μg/ml时达到最佳。结论：体外条件下,EDS对大鼠脐带间充质干细胞具有促增殖作用,该作用在EDS浓度为100μg/ml时较为显著,不再随浓度的增加而增强。这有望成为促进脐带间充质干细胞增殖的新方法。     

铜在培养的大鼠心肌细胞上的抗氧化损伤作用

在培养的大鼠心肌细胞的培养基中加入0.42×10~-3 mol/L黄嘌呤及5.3×10~-9 mol/L黄嘌呤氧化酶可使心肌细胞产生氧化损伤,表现为APA、MDP、OS、Vmax减小,SDF增大;膜输入阻抗减小;细胞自由基含量增加;细胞的超微结构被破坏。向培养基中加0.0625ppm,Cu可阻止黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶的氧化损伤作用。铜作为超氧化构歧化酶及细胞色素氧化酶的活性中心成份,可能通过提高这些酶的活性而起抗氧化及清除自由基作用。     

UVB对HaCaT细胞凋亡的影响

①目的　探讨紫外线B(UVB)对HaCaT细胞凋亡的影响及其作用机制。②方法　取培养的HaCaT细胞 ,用 30mJ/cm2 的UVB照射后继续培养 18h ,以流式细胞术检测细胞的凋亡率、线粒体膜电位和细胞内游离Ca2 +水平 ,用透射电镜观察细胞的超微结构。③结果　UVB照射增加了HaCaT细胞的凋亡率 (t =5 .2 36 ,P <0 .0 1) ,降低了线粒体膜电位 (t=6 .897,P <0 .0 1) ,升高了细胞内游离Ca2 + 水平 (t =6 .0 4 6 ,P <0 .0 1)。细胞的超微结构因UVB照射而遭到严重破坏 ,胞浆内的细胞器大量减少 ,线粒体严重空泡化 ,髓样小体形成 ,核内染色质成块并边聚。④结论　线粒体膜电位的下降和胞内游离Ca2 + 的升高可能参与了UVB诱发HaCaT细胞凋亡的过程     

R_(b1)对B型钙通道的阻滞作用及其机理的单通道分析

在Wistar大鼠单个心室肌细胞上记录了B型钙通道的单通道活动。人参二醇组皂甙单体R_(b1)250μg/ml显著抑制B型钙单通道活动,其机制在于使其开放概率减少与开放时间缩短,而对通过此通道的离子流幅度无影响。     

红霉素、阿奇霉素、磺胺嘧啶、大蒜素体外抗弓形虫作用的研究

目的　比较阿奇霉素、红霉素、磺胺嘧啶、大蒜素体外抗弓形虫的效果。方法　用弓形虫RH株速殖子感染培养的巨噬细胞 ,每一种药物根据预实验设立 2至 3个浓度 ,分别在速殖子侵入细胞前和侵入细胞后用不同浓度的药物处理 ,每隔 1h在倒置显微镜下观察细胞及弓形虫的形态及生长情况 ,9d后取出盖玻片 ,染色透明后 ,镜下观察。再将培养液及培养细胞注入鼠腹腔 ,观察小鼠的发病情况。结果　阿奇霉素的浓度在 2 0 μg/ml时具有抑制虫体生长的作用 ,>40 μg/ml时对巨噬细胞有明显的毒性。红霉素的浓度在 10 0 μg/ml、15 0 μg/ml时可抑制弓形虫的生长与繁殖 ,但不能完全杀死虫体 ,形成假包囊。将假包囊及培养液接种小鼠腹腔 6d后小鼠发病死亡 ,解剖小鼠后 ,可见大量的虫体。没有观察到 10 0 μg/ml、2 0 0 μg/ml的磺胺嘧啶及 2 0 μg/ml、40 μg/ml的大蒜素有抑制弓形虫生长的作用。 结论　阿奇霉素具有明显杀灭速殖子的作用。低浓度的红霉素有利于包囊形成。磺胺嘧啶、大蒜素体外无杀灭速殖子的作用。