食管癌bax和bcl-2蛋白的定性和定量研究

目的：探讨bax和bcl-2蛋白表达在食管癌发生和发展中的作用。方法：应用免疫组化，流式细胞术和细胞免疫荧光技术对70例食管鳞癌组织bax和bcl-2蛋白进行定性和定量检测。结果：免疫组化研究示bax 蛋白阳性表达32例，bcl-2蛋白阳性表达43例，bax和bcl-2蛋白表达与肿瘤病理分级和淋巴结转移密切相关（P＜0．05），但与临床分期之间差异无显著意义（P＞0．05），流式细胞定量研究示bax蛋白阳性表达39例,bcl-2蛋白阳性表达65例，bax和bcl-2蛋白表达率和表达量与肿瘤病理分级，分期和淋巴结转移无明显相关（P＞0．05），结论：bax和bcl-2蛋白的异常表达在食管癌发生和发展中起重要作用。     

凋亡相关基因bcl-2和TGF-β1在输尿管移行细胞癌中的表达研究

目的了解输尿管移行细胞癌组织中bcl-2和TGF-β1蛋白的表达.方法采用免疫组化技术,检测52例输尿管移行细胞癌与11例正常输尿管移行上皮细胞中bcl-2和TGF-β1蛋白的表达.结果11例正常输尿管中bcl-2蛋白表达阳性2例(18.2%),TGF-β1蛋白表达阳性11例(100%).52例输尿管移行细胞癌中bcl-2蛋白表达阳性20例(38.5%),TGF-β1蛋白表达阳性26例(50%).bcl-2阳性率在高、中、低分化癌中分别为21.1%、36.4%和72.7%.在TiS～T1和T2～T4期阳性率分别为31.6%和57.1%.TGF-β1阳性率在高、中、低分化癌中分别为73.7%、45.5%和18.2%.在TiS～T1和T2～T4期阳性率分别为60.5%和21.4%.在输尿管移行细胞癌中bcl-2表达程度随肿瘤分级增加而增加,在各级肿瘤分化间差异有显著性(x2=7.93,P＜0.05).浅表性癌bcl-2表达阳性率低于浸润性癌,但差异无显著性(x2=2.82,P＞0.05).随肿瘤分级增加,TGF-β1阳性率下降(x2=8.90,P＜0.05),随肿瘤由浅表型向漫润型转化,阳性率下降(x2=6.26,P＜0.05),差异均有显著性.结论bcl-2和TGF-β1参与了输尿管移行细胞癌的发生发展过程,可作为评估其生物行为的瘤标.     

结直肠癌bcl-2、p53蛋白的表达

目的 了解bcl-2,p53蛋白表达与结直肠癌的关系。寻求早期诊断结直肠癌的分子生物学参考指标。方法 采用免疫组织化学S-P法检测63份结直肠癌手术切除标本中bcl-2,p53的表达情况,观察其在癌组织中的表达状态,分析其与结直肠癌变的关系及对预后的影响。结果 63位结直肠癌标本中bcl-2蛋白表达为77.8%,p53蛋白的表达为63.5%。结论 bcl-2,p53蛋白的表达与结直肠癌的发生、发展及预后有密切关系,可作为早期诊断结直肠癌的重要参考指标。     

胃癌组织微血管密度和bcl-2蛋白的表达及其相关性研究

目的 探讨胃癌组织中bcl-2蛋白表达与微血管密度(MVD)之间的关系及其在胃癌发生、转移及预后中的意义。方法 采用免疫组化SP法检测60例胃癌标本中bcl-2蛋白表达,以血管内皮细胞表面抗原CD34单抗标记测定肿瘤微血管密度(MVD)。结果 MVD与胃癌的淋巴转移及临床分期相关(P＜0．05);MVD表达高预后差(P＜0．01)。bcl-2与胃癌的组织分型(P＜0．05)、胃癌的分化程度相关(P＜0．01),而与胃癌的淋巴结转移、PTNM分期、生存率无关;bcl-2阳性组MVD明显低于bcl-2表达阴性组(P＜0．05)。等级相关分析bcl-2蛋白表达与胃癌的MVD呈显负相关(r=0．375,P＜0．01)。结论 MVD是影响胃癌预后的重要因素,bcl-2可能在胃癌中抑制组织中微血管的生成,但并非一独立预后因素。     

原发性中枢神经系统恶性淋巴瘤bcl—2基因产物的表达

运用免疫组化标记方法，观察１６例中枢神经系统Ｂ细胞淋巴瘤ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果表明：１２例滤泡中心性淋巴瘤ｂｃｌ－２蛋白阳性，１例淋巴瘤细胞淋巴瘤ｂｃｌ－２蛋白阳性，总阳性率８１．２５％。其中以裂细胞表达为主。阳性细胞呈弥漫性分布或围绕血管呈袖套状分布，阳性者中１０例ｂｃｌ－２蛋白表达为Ⅱ－Ⅲ级。     

基底细胞癌中p16、bcl-2基因蛋白的检测

基底细胞癌,又称基底细胞上皮瘤,是皮肤的恶性上皮瘤,可能有起源于表皮及其附件的基底细胞。近年来的研究发现,一些与凋亡有关的基因如 p53、Bax、bcl-x 及增殖细胞核抗原等在基底细胸癌中表达异常,提示基底细胞癌可能有异常的细胞凋亡。bcl-2是与细胞凋亡关系密切的原癌基因之一,p16为近年发现的新的抑癌基因,我们采用免疫组化技术对30例基底细胞癌组织中细胞凋亡相     

重楼总皂苷对胃癌细胞株MGC-803生长的抑制作用

目的研究重楼总皂苷对胃癌细胞株MGC-803生长的抑制作用,并探讨其作用机制。方法采用MTT法检测重楼总苷对MGC-803细胞生长的抑制作用,采用流式细胞术测定细胞周期变化及细胞凋亡率,并分析E-phA2、survivin及Caspase-3蛋白的表达变化。结果重楼总皂苷可显著抑制MGC-803细胞的生长,并且呈时间-剂量依赖关系;可阻滞细胞于S期,诱导细胞凋亡率的升高;可显著抑制EphA2、survivin蛋白的表达,同时上调Caspase-3蛋白的表达。结论其作用机制可能与下调EphA2和survivin的表达以及促进Caspase-3的表达有关。     

胃癌组织中细胞凋亡与bcl-2、bax基因蛋白表达的关系

为了探讨胃癌发生发展与细胞凋亡、ｂｃｌ ２ 和ｂａｘ 基因蛋白表达之间的关系,采用原位末端标记ＤＮＡ 断裂片段技术和免疫组化方法对６０ 例胃癌和２５ 例正常胃粘膜中的细胞凋亡指数、ｂｃｌ ２ 和ｂａｘ 进行检测。正常胃粘膜凋亡指数为１１－２ ±４－５１ ,高于胃癌的６－３５ ±３－８４（ Ｐ ＜ ０－０１） 。胃癌中ｂｃｌ ２强表达组凋亡指数为５－１９ ±２－０５ ,低于弱表达组的７－１２ ±３－８９（ Ｐ ＜ ０－０５） ;ｂａｘ 强表达组凋亡指数为７－１９ ±３－７２ ,高于弱表达组的５－２８ ±２－１３（ Ｐ ＜ ０－０５） ,胃癌分化好组凋亡指数为７－８９ ±３－１２ ,高于分化差组的５－２３ ±２－２１（ Ｐ ＜ ０－０５） 。ｂｃｌ ２ 表达越强,ｂａｘ 表达越弱,癌组织分化越差,凋亡指数就越少。提示ｂｃｌ ２ 和ｂａｘ 参与了胃癌组织中细胞凋亡的凋节,并在胃癌的发生发展中发挥着重要作用     

银屑病组织中bcl—2基因蛋白的表达

近年来人们认识到细胞凋亡不仅在皮肤发育、更新、平衡稳定中起作用,在某些增殖性皮肤病如银屑病中也表现异常。bcl-2是与细胞凋亡关系密切的原因之一,为探讨 bcl-2基因蛋白的表达与银屑病发病之间的关系,我们采用免疫组化技术对28例银屑病组织中细胞凋亡相关基因 bcl-2的表达情况进行了检测,现将结果报道如下。1 材料与方法1.1 标本采用1996～2000年我院保存的石蜡包埋组织块,确诊为银屑病的病例共28例,其中男16例,女12例,年龄17～54岁,平均年龄35.3岁。12例正常皮肤组织,取自外科整形术后切除的皮肤,男3例,女9例,年龄20～58岁,平     

氯化铝对大鼠皮层神经元凋亡及bcl-2、bax基因表达的影响

目的探讨氯化铝(AlCl3)对大鼠皮层神经元凋亡的诱导作用及对bcl-2、bax基因表达的影响.方法体外原代无血清培养至第7天的大鼠皮层神经元,实验组的培养液中加入A1C13(终浓度分别为10、100、1000μmol/L),对照组的培养液中加入等体积分数为0.9%的生理盐水,培养48 h后,用原位末端标记法(TUNEL)测定其细胞凋亡率;培养24h后,用RT-PCR法检测bcl-2、bax基因的表达.结果各染铝组大鼠皮层神经元凋亡率明显升高,与对照组相比,差异有显著性(P＜0.05),并具有明显的剂量-反应关系;bcl-2基因表达明显下降,bax基因表达明显升高,bcl-2/bax逐渐下降,与对照组相比,差异有显著性,也具有明显的剂量-反应关系.相关分析表明,大鼠皮层神经元凋亡率与bcl-2基因表达呈负相关,与bax基因表达呈正相关,而与bcl-2/bax呈负相关(P＜0.01).结论铝可以诱导大鼠皮层神经元凋亡,其机制可能与bcl-2基因表达下调,bax基因表达上调以及bcl-2/bax下降有关.     

癌基因bcl-2及抑癌基因p53在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的　探讨宫颈癌 bcl- 2和 p5 3基因表达的改变与其临床意义。方法　对 2 4例宫颈癌组织及对照组宫颈组织采用半定量反转录聚合酶链反应 (RT- PCR)法检测 bcl- 2和 p5 3基因蛋白的表达 ,结合临床资料分析基因改变的临床意义。结果　宫颈癌中 bcl- 2基因蛋白表达高于对照组 ,p5 3基因蛋白表达低于对照组 ,其中二者均为 期高于 期 , 期均低于 期和 期 ,P<0 .0 1。结论　 bcl- 2和 p5 3基因的表达在宫颈癌的发生发展中起重要作用 ,在宫颈癌早期 ,bcl- 2主要抑制细胞凋亡 ,而 p5 3则在癌组织中促进细胞凋亡     

人胃癌组织MMP—2,MT—MMP基因的过度表达——免疫组织化学和原位杂交研究

探讨组织金属蛋白酶类在人胃癌组织中的表达。方法：应用免疫组织化学（ＳＰ法）和原位杂交（ｃＤＮＡ－ｍＲＮＡ）技术对４１例入胃癌和１７例癌旁组织中的金属蛋白酶ＭＭＰ－２、ＭＴ－ＭＭＰ基因进行检测。结果：（１）免疫组化分析ＭＭＰ－２、ＭＴ－ＭＭＰ蛋白在胃癌组织的阳性率分别为７３．１％（３０／４１）和６８．３％（２８／４１），在癌旁组织的阳性率分别是２２．５％（４／１７）和４１．１％（７／１７）。（２）原位杂交分析胃癌组织ＭＭＰ－２及ＭＴ－ＭＭＰｍＲＮＡ阳性分别为７０．７％（２９／４１）和５６．０％（２３／４１），癌旁组织分别为２３．５％（４／１７）和３５．２％（６／１７）。一致性检验显示二种基因的免疫组化和原位杂交检测结果的关系密切（ｒ＝０．９９８ ４，Ｐ＜０．０５）。结论：提示ＭＭＰｓ基因的过度表达参与了胃癌的发生发展过程，同时证实ＭＭＰｓ的免疫组化是检测胃癌组织侵袭、转移倾向的可靠方法，为建立肿瘤转移的分子标志提供了理论和实验依据。     

爱普列特对原代培养大鼠输精管上皮细胞及bcl-2表达的影响

目的　探讨爱普列特对原代培养SD大鼠输精管上皮细胞及原癌基因bcl 2表达的影响。方法　应用HE染色、电镜、流式细胞术和免疫组化方法研究爱普列特对输精管上皮细胞形态改变、细胞凋亡率以及bcl 2表达的影响。结果　 0 1 μmol·L- 1 爱普列特对细胞形态无显著影响 ;0 3和 1 0 μmol·L- 1 爱普列特作用 72h后 ,细胞呈核固缩、深染、碎裂、染色质边集等多种形态改变 ,电镜下可见典型的凋亡细胞特征 ;流式细胞仪分析结果显示 ,溶剂对照组细胞凋亡率为 3 42 %± 1 49% ,0 1、0 3和 1 0 μmol·L- 1 爱普列特作用 72h后 ,细胞凋亡率分别为 4 66 %± 2 2 3 % ,39 0 4 %± 1 0 69%和 52 74%± 8 91 % ;免疫组化结果显示输精管上皮细胞bcl 2阳性率为 76 96 %± 9 2 5 % ,0 1、0 3和 1 0 μmol·L- 1 爱普列特作用 72h后 ,Bcl 2阳性表达的百分率分别为 63 93 %± 3 40 %、52 82 %± 8 66 %和 2 9 64 %± 8 74%。结论　 0 1 μmol·L- 1 爱普列特对大鼠输精管上皮细胞无影响 ,0 3和 1 0 μmol·L- 1 可诱导大鼠输精管上皮细胞发生凋亡 ,其作用机制可能与降低bcl 2表达有关     

COX-2、Ki-67在胃癌发生发展中的表达及其相关性研究

目的：研究胃癌组织和正常胃黏膜中COX-2、Ki-67的表达情况,探讨它们在胃癌发生发展中的作用及其相关性。方法：应用免疫组化SABC法。结果：1胃癌组织COX-2蛋白、Ki-67蛋白阳性表达率高于正常胃黏膜组织（P〈0.05）。2随着胃癌浸润深度的增加、分化程度的降低、淋巴结转移的出现COX-2及Ki-67阳性表达率升高（P〈0.05）。3在胃癌组织中COX-2与Ki-67的表达呈正相关（rs=0.390,P〈0.05）,均呈升高趋势。结论：COX-2、Ki-67均参与胃癌的发生和发展,二者可成为判断胃癌恶性程度有价值的指标,也可成为预后评估的指标。     

胃腺癌中COX-2蛋白的表达及意义

目的探讨还氧化酶-2（COX-2）蛋白在胃腺癌和胃黏膜不典型增生、正常胃黏膜中的表达情况,分析其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、大体形态、组织学分级以及淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化ABC法,检测正常胃黏膜38例、非典型性增生胃黏膜36例及胃腺癌51例石蜡包埋标本中COX-2蛋白的表达,并分析其临床意义。结果COX-2蛋白在胃腺癌组织表达明显增强,其阳性率为64.71%（33/51）,明显高于胃黏膜非典型增生的38.89%（14/36）及正常胃黏膜组织中的36.84%（14/38）,差异有统计学意义（P〈0.05）;在胃腺癌中,淋巴结转移组阳性表达率为84.38%（27/32）,淋巴结无转移组表达率为31.58%（6/19）,差异有统计学意义（P〈0.05）;并且溃疡型胃癌阳性表达率为71.11%（32/45）,非溃疡型胃癌阳性表达率为16.67%（1/6）,差异有统计学意义（P〈0.05）;COX-2蛋白的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、组织学分级无相关性（P〉0.05）。结论COX-2蛋白与胃癌的发生、发展及淋巴结转移有关。     

诊断超声照射后人早孕绒毛细胞p53 mRNA bcl-2 mRNA表达改变

目的　探讨诊断超声与人早孕绒毛 p5 3 m RNA和 bcl-2 m RNA表达的关系。方法　对拟进行人工流产的 2 4例早孕 (4 5～ 60 d)妇女随机分为 4组 :对照组、10 m in组、2 0 min组和 3 0 min组。应用 HP-85 0 0彩色多普勒超声诊断仪 ,对孕囊进行不同时间的持续照射 ,照射后 2 4h取材。用原位杂交技术检测上述各组绒毛滋养层细胞 p5 3 m RNA和 bcl-2 m RNA表达情况。结果　超声照射后 10 min组绒毛滋养层细胞 p5 3 m RNA和 bcl-2 m RNA表达率与对照组差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,2 0 min组和 3 0 min组滋养层细胞 p5 3 m RNA表达率明显增加 ,显著大于对照组和 10 min组 (P<0 .0 1) ;而 bcl-2 m RNA表达率却明显下降 ,显著低于对照组和 10 min组 (P<0 .0 1)。结论　诊断超声持续照射早孕孕囊组织 >10 min可引起绒毛滋养层细胞 p5 3 m RNA表达率增加和 bcl-2 m RNA表达率下降 ,从而诱导滋养层细胞凋亡增加。     

圣和散对胃癌SGC-7901细胞Bcl-2表达的影响

目的研究中药圣和散对胃腺癌细胞SGC-7901Bcl-2表达的影响。方法圣和散作用于胃腺癌细胞SGC-7901,48h后收集细胞爬片,用抗Bcl-2mAb和免疫组织化学SABC法及图像分析技术分析Bcl-2。结果圣和散作用的胃腺癌细胞Bcl-2表达量A值120.13±0.18,较对照组细胞104.536±0.091下降显著(P<0.05)。结论圣和散对胃癌细胞的凋亡诱导作用可能与其影响Bcl-2表达有关。     

番茄红素对胃癌细胞SGC-7901生长的抑制作用

目的研究番茄红素体外对胃癌细胞SGC7901生长的抑制作用。方法将番茄红素作用于胃癌细胞SGC7901,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长抑制率,3H胸腺嘧啶核苷(3HTdR)参入试验测定对细胞DNA合成的影响,TRAPPCRELISA法检测端粒酶活性,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。结果番茄红素作用后胃癌细胞生长明显受抑制,24、48、72和96h的IC50分别为22×10-4、15×10-4、67×10-6和40×10-6mmolL-1。10-5mmolL-1的番茄红素作用胃癌细胞24、48、72、96h后,3HTdR掺入量分别为(442512±13409)cpm、(365647±15391)cpm、(275365±12833)cpm、(161482±9456)cpm,低于对照组的(624831±26563)cpm、(750582±25898)cpm、(832124±22352)cpm、(859130±36821)cpm(P<001);TRAPPCRELISA法显示A值分别为1102±0026、0846±0018、0735±0017、0586±0014,低于对照组(1801±0048、1887±0072、2047±0085、2131±0076,P<001)。10-5mmol·L-1的番茄红素作用胃癌细胞96h后,G0/G1期细胞比例为(697±52)%,高于对照组的(456±37)%(P<001),凋亡率达(256±28)%。结论番茄红素能明显抑制胃癌细胞增殖及端粒酶活性,能使细胞产生G0/G1期阻滞,并诱导凋亡。     

肝细胞癌细胞株HepG2细胞甲胎蛋白基因沉默对Survivin表达的影响

目的 研究肝细胞癌细胞株HepG2细胞甲胎蛋白基因沉默(即基因不表达或表达量极低)对Survivin表达的影响.方法 应用siRNA技术对肝细胞癌细胞株HepG2细胞中甲胎蛋白基因的表达进行下调,应用ELISA法(即酶联免疫吸附测定法)对转染前后上清液甲胎蛋白的浓度进行测定,应用MTT比色法对转染前后细胞存活和生长情况进行检测,应用流式细胞术对细胞凋亡率进行分析,应用逆转录PCR技术对转染前后细胞Survivin mRNA水平进行检测.结果 与转染前相比,转染后研究组的上清液中甲胎蛋白的浓度均发生逐渐降低,且转染48 h后,观察组的下降更为明显.观察组的吸光度明显逐渐下降,肝癌细胞生长活性减弱了45.23％;HepG2细胞的凋亡率增至36.8％,较转染前升高了24.4％,HepG2细胞中Survivin mRNA表达下降了74.32％.对于上述情况,空白组和对照组均未见明显的变化.结论 肝细胞癌细胞株HepG2细胞甲胎蛋白基因沉默可抑制Survivin mRNA表达,从而降低肝癌细胞的生长活性以及增加细胞的凋亡率.