miR-365-3p抑制CDK-10表达对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡和周期的影响

目的探讨miR-365-3p通过周期素依赖性激酶-10(CDK-10)影响口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡与周期的机制。方法收集在本院就诊的40例口腔鳞癌患者肿瘤组织样本及癌旁正常组织样本,检测其miR-365-3p和CDK-10表达水平。随机将人舌鳞癌细胞系(CAL-27)分为空白组、对照组及miR-365-3p三组。对照组与miR-365-3p组分别转染miR-365-3p NC与miR-365-3p mimic,空白组不进行转染。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-365-3p表达,CCK-8法及流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞凋亡。qPCR和Western blot检测CDK-10的表达水平。结果相较于对照组与空白组,miR-365-3p在miR-365-3p组的表达水平显著升高(P＜0.05),细胞增殖指数显著降低(P＜0.05);细胞凋亡水平显著升高(P＜0.05)。转染72 h后,相较于空白组与对照组,miR-365-3p组G1期比例显著降低(P＜0.05),S期+G2期比例则显著增加(P＜0.05)。转染48 h与72 h后,相较于空白组与对照组CDK-10蛋白在miR-365-3p组的相对表达量显著降低(P＜0.05)。结论miR-365-3p在口腔鳞癌细胞中的高表达能够抑制CDK-10表达,从而抑制细胞增殖,调节细胞周期,促进细胞凋亡。     

微小RNA-6833-3p负调控LPIN1基因表达对肺癌细胞周期和增殖的影响

目的 探讨微小RNA-6833-3p(miR-6833-3p)通过靶向调控脂蛋白1(lipin 1,LPIN1)的表达影响肺癌细胞周期和增殖的作用及机制.方法 采用实时定量PCR(qPCR)检测miR-6833-3p在肺癌细胞(HCC827、A549、H1650、H1299)和永生化正常肺泡上皮细胞(HPAEpiC)中...     

肿瘤外泌体来源的miR-126-5p通过抑制NLRC3促进口腔鳞癌细胞的增殖和迁移

目的 探索口腔鳞癌外泌体中miR-126-5p对肿瘤细胞生物学功能的影响.方法 qPCR分析口腔鳞癌组织芯片、临床样本及口腔鳞癌外泌体中miR-126-5p的表达情况;荧光素酶报告基因法确定与miR-126-5p相互作用的分子,qPCR检测外泌体与共孵育后的肿瘤细胞中NOD样受体家族蛋白3(NLRC3)的表达情况;通过...     

增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 Real time PCR检测miR-146b-3p在6种人胰腺癌细胞系(MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC-1、SW1990、PC-3)和手术切除的12对胰腺癌/癌旁组织中的表达.将Pre-miR-hsa-miR-146b-3p Precursor 转染MIA PaCa-2 细胞,Real time PCR检测转染后miR-146b-3p的表达变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8的表达变化.结果 与正常胰腺组织相比,miR-146b-3p在6种胰腺癌细胞系中均呈低表达,以MIA PaCa-2细胞最为明显;12对胰腺组织中,癌组织miR-146b-3p表达水平均低于癌旁组织.同阴性对照组比较,转染前体组的MIA PaCa-2细胞,miR-146b-3p表达增强383.25倍,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加,蛋白Bcl-2表达降低(50.0%),Bax表达升高(4.29倍).结论 miR-146b-3p在胰腺癌细胞系和癌组织中低表达;上调胰腺癌细胞MIA PaCa-2中 miR-146b-3p的表达,能够抑制增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax的表达有关.     

miR-216a-3p miR-128-3p通过调控RGS17抑制口腔鳞状细胞癌细胞表型恶化的机制研究

目的:观察miR-216a-3p、miR-128-3p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞表型表达的影响,并探究其潜在的作用机制。方法:运用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测癌组织、癌旁组织、人正常口腔角质形成细胞(hNOK)、OSCC癌细胞(SCC-9、SCC-25、HN4)中miR-216a-3p、miR-128-3p、G蛋白信号调节器17(RGS17)的表达;脂质体法将mimic-NC组(转染mimic)、mimic-miR-216a-3p组(转染miR-216a-3p mimic)、mimic-miR-128-3p组(转染miR-128-3p mimic)、si-NC组(转染si-NC)、si-RGS17组(转染si-RGS17)、mimic-miR-216a-3p+pcDNA组(共转染miR-216a-3p mimic和pcDNA)、mimic-miR-216a-3p+pcDNA-RGS17组(共转染miR-216a-3p mimic和pcDNA-RGS17)、mimic-miR-128-3p+pcDNA组(共转染miR-128-3p mimic和pcDNA)...     

miR-628-3p对胃癌细胞HGC-27增殖和迁移能力的影响

目的 初步探究miR-628-3p对胃癌细胞系HGC-27增殖和迁移能力的影响.方法 qRT-PCR检测人正常胃黏膜细胞GES-1及HGC-27细胞miR-628-3p的表达水平.转染miR-628-3p模拟物后MTT法检测HGC-27细胞增殖,Transwell小室实验检测HGC-27细胞迁移能力,Western b...     

miR-1-3p抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖、迁移并诱导其凋亡

目的 探讨在肝癌细胞SMMC-7721中微小RNA(miR)-1-3 p的表达变化对其增殖、迁移和凋亡的影响及miR-1-3p的作用机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-1-3p和CAAP1的相对表达量;SMMC-7721细胞按miR-1-3p过表达载体(miR-1-3p组)、pcDNA3组、miR-1-3p inhib-itor组和NC inhibitor组(对照组)分别转染,采用qRT-PCR检测转染效果,CCK-8实验检测细胞增殖能力,克隆形成实验观察并比较组间克隆形成率,流式细胞术和Western blot检测细胞凋亡及CAAP1蛋白表达,划痕和Transwell实验观察SMMC-7721迁移和侵袭.利用miRDB、TargetScan、miRanda数据库预测miR-1-3 p靶基因,双荧光素酶报告验证miR-1-3和CAAP1靶向性.结果 miR-1-3p在SMMC-7721细胞中的表达明显低于正常肝细胞LO2,差异有统计学意义(P<0.05);miR-1-3p上调,SMMC-7721增殖、迁移和侵袭能力显著下降,凋亡显著增强,而下调miR-1-3p的表达则作用相反;miR-1-3p和CAAP1具有靶向性;miR-1-3p过表达明显抑制CAAP1表达.结论 miR-1-3p上调可能通过与CAAP1的3'-UTR结合抑制SMMC-7721细胞增殖、侵袭、迁移.     

绝经后骨质疏松患者骨组织中miR-124-3p、miR-328-3p、miR-338-3p的表达

目的：探讨绝经后骨质疏松患者骨组织中miR-124-3p、miR-328-3p、miR-338-3p表达。方法：选取30例绝经后骨质疏松妇女(PMOP组)和30例非骨质疏松的绝经后妇女(对照组),髂前上棘穿刺取骨组织300mg,研磨、匀浆,通过RT-qPCR方法分析检测两组miR-124-3p、miR-328-3p、miR-338-3p的表达水平。结果：miR-338-3p在PMOP组骨组织中的表达水平升高;miR-124-3p、miR-328-3p在PMOP组骨组织中的表达水平降低。结论：miR-124-3p、miR-328-3p、miR-338-3p可调节成骨、破骨引起PMOP,可通过调控其表达干预PMOP的发生和治疗。     

MicroRNA-150-5p对肝细胞癌细胞增殖、凋亡和周期的影响

目的  研究microRNA-150-5p（miR-150-5p）在人正常肝细胞和肝细胞癌细胞中的表达,及其对肝细胞癌细胞增殖、凋亡和周期的影响及潜在机制。方法  通过实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测各处理组细胞中的miR-150-5p的表达水平;MTT法检测miR-150-5p对肝细胞癌细胞增殖的影响;流式细胞术检测miR-150-5p对肝细胞癌细胞凋亡和周期的影响;荧光素酶报告基因实验检测锌指蛋白609是否为miR-150-5p的直接靶基因。结果  miR-150-5p在肝细胞癌细胞系中的表达较人正常肝细胞细胞系降低,miR-150-5p可抑制肝细胞癌细胞的增殖,促进肝细胞癌细胞的凋亡,并阻滞细胞周期于G1期。miR-150-5p在肝细胞癌中发挥肿瘤抑制分子作用的潜在机制为直接靶向抑制ZNF609的表达。结论  miR-150-5p在肝细胞癌细胞中表达降低,并可通过调控ZNF609的表达而调控肝细胞癌细胞增殖、凋亡和周期。

     

PTEN基因调控口腔鳞癌细胞TCA-8113增殖及凋亡

目的 评估PTEN基因在人口腔鳞癌细胞系TCA-8113中的增殖抑制和促凋亡功能.方法 利用PTEN真核表达质粒转染TCA-8113细胞,另设PBS处理作为空白组,转染pcDNA3.1质粒和Lipofectamine处理作为对照组.采用MTT和克隆形成实验检测细胞增殖情况,采用流式细胞术、TUNEL和Western b...     

miR-124-3p对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的抑制作用及其机制

观察微小RNA-124-3p（miR-124-3p）对口腔鳞癌（OSCC）HSC2和KON细胞增殖及侵袭的影响,并探讨其可能作用机制。     

miR-141抑制头颈部鳞癌细胞增殖

目的 考察microRNA-141(miR-141)对人头颈部鳞癌细胞增殖的影响。 方法 通过qRT-PCR分析19例头颈部鳞状细胞癌患者的肿瘤组织与癌旁正常组织标本中miR-141的表达。通过miR-141 mimics 或miR-141 反义寡核苷酸(ASO)上调或抑制人喉癌细胞株(Hep-2)和人舌鳞状细胞癌细胞株(SCC-9)细胞中miR-141的表达水平。采用MTT实验分析上调或抑制miR-141的表达水平对Hep-2和SCC-9细胞增殖的影响。利用生物信息学方法预测miR-141的靶基因。 结果 qRT-PCR的结果表明,头颈部鳞状细胞癌组织的miR-141的表达水平低于癌旁正常组织(P<0.05);上调miR-141的表达能够抑制Hep-2和SCC-9细胞的增殖(P<0.05),而抑制miR-141表达可以促进Hep-2和SCC-9细胞的增殖(P<0.05)。生物信息学方法预测miR-141的靶基因可能为ZEB1基因。 结论 miR-141可能通过ZEB1基因抑制头颈部鳞状细胞癌的增殖。     

miR-145-5p对口腔鳞癌细胞增殖的调控作用及其机制

目的 探究miR-145-5p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖的调控作用及其机制。方法 利用GEO数据库构建OSCC的miRNA差异表达谱;通过生物信息学技术预测miR-145-5p靶基因并对其进行GO、KEGG及PPI分析;以人OSCC细胞株(HSC-3)为实验对象,将实验分为CN组(未做处理)、NC组(转染mimic NC)和miR-145-5p组(转染miR-145-5p mimic),通过CCK-8法检测不同剂量(50、100、200 nmol/L)miR-145-5p对HSC-3细胞增殖的影响;JC-1和Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测miR-145-5p对HSC-3细胞的凋亡诱导情况;RT-qPCR检测miR-145-5p调控神经母细胞瘤鼠肉瘤同系物(NRAS)、C-JUN氨基端激酶(C-JUN)、信号转导和转录激活因子1(STAT1)的表达情况。结果 miRNA差异表达谱显示,miR-145-5p在OSCC中表达下调(P<0.05);GO和KEGG分析显示,miR-145-5p靶基因主要调控MAPK信号通路;PPI蛋白互作显示,NRAS是...     

转录因子FoxO1与miR-142-3p在口腔鳞癌中的表达关系及意义

【摘要】 目的 探讨转录因子叉头框转录因子O亚族1（FoxO1）与微小RNA-142-3p（miR-142-3p）在口腔鳞癌（OSCC）中的表达关系及意义。 方法 选取2016年5月～2018年6月于本院手术中留取的OSCC组织72份为观察组,选取50份形态学正常的癌旁口腔黏膜组织为对照组,比较两组FoxO1、miR-142-3p表达与OSCC临床病理特征的关系及二者的相关性,并采用COX回归模型分析OSCC患者预后不良事件的影响因素。 结果 观察组较对照组FoxO1阳性表达率、miR-142-3p表达均较低（P＜0.05）;高分化、中分化、低分化相比,FoxO1阳性表达率、miR-142-3p表达均依次降低（P＜0.05）;与Ⅰ~Ⅱ期相比,Ⅲ~Ⅳ期FoxO1阳性表达率、miR-142-3p表达均较低（P＜0.05）;与无淋巴结转移相比,淋巴结转移者FoxO1阳性表达率、miR-142-3p表达均较低（P＜0.05）。Spearman结果显示,观察组FoxO1、miR-142-3p表达呈正相关（P＜0.05）。单因素分析显示,性别、年龄、BMI、病理分级均与OSCC患者不良预后无关（P＞0.05）,临床分期、淋巴结转移、FoxO1、miR-142-3p均是OSCC患者不良预后的影响因素（P＜0.05）。多因素分析显示,临床分期、淋巴结转移、FoxO1、miR-142-3p均是影响OSCC患者预后发生不良事件的独立危险因素（P＜0.05）。 结论 FoxO1、miR-142-3p与OSCC的发生、发展及预后密切相关,FoxO1可能受miR-142-3p的靶向调控,这一结果可为病情评估及治疗靶点提供临床参考依据。