茶蚕颗粒体病毒的安全性试验

茶蚕颗粒体病毒的安全性试验蒋家璞，黄晓沐，姜宗荣，刘茜，姚根和，崔守强，赵垣奎，阙惠芬，叶如美（安徽省卫生防疫站，安徽医科大学２３００６１）安徽省农科院植保所分离的茶蚕颗粒体病毒（ＡｂＧｖ）对茶蚕的防治效果达７５．５～９７．５％，为有效的生物杀虫剂。...     

新城疫病毒HN基因对肝癌细胞SMMC7721的细胞毒性研究

目的:探讨新城疫病毒HN基因对肝癌细胞SMNC7721的杀伤作用及其机制.方法:以脂质体介导方法在体外转染含新城疫病毒HN基因的质粒pVHN于细胞SMMC7721 24 h后,采用MTT法检测细胞活性;3,5-二羟基甲苯测定其唾液酸含量的变化;丫啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色,荧光显微镜观察细胞形态学改变;以及FCM检测病毒HN基因和HLA-A,B,C的表达.结果:体外转染pVHN能显著地降低细胞表面唾液酸含量(P＜0.05),有效地杀伤肿瘤细胞SMMC7721;荧光显微镜观察可见典型的细胞死亡形态学改变;实验组细胞与对照组比较HN表达差异显著,HLA-A,B,C表达上调.结论:HN基因在体外能够显著降低肿瘤细胞表面唾液酸含量,同时,使其高表达HN抗原,上调HLA-A,B,C表达,从而,可能增强了肿瘤细胞的抗原性和免疫识别,诱导了细胞SMMC7721死亡.     

五氯酚钠的细胞遗传毒性研究

背景与目的:探讨五氯酚钠诱发中国仓鼠卵巢细胞(CHO)DNA损伤和染色体畸变的效应.材料与方法:五氯酚钠对中国仓鼠卵巢细胞(CHO)进行梯度染毒,应用单细胞凝胶电泳试验和体外染色体畸变试验观察其诱发细胞DNA损伤和染色体畸变.结果:80 μg/ml和160 μg/ml五氯酚钠诱发细胞DNA链断裂损伤的频率与对照组相比显著升高(P＜0.01),且随着剂量增加,其损伤程度加重;无论是否加入代谢活化剂,受试物均引起染色体畸变率的明显增加(P＜0.01).结论:五氯酚钠能诱发CHO细胞DNA损伤和染色体畸变.     

国产汽车尾气颗粒提取物的遗传毒性研究

为了解国产汽车排放物的遗传毒性，本研究选择桑塔纳轿车、吉普212、跃进131，公交客车和解放141货车5种汽油机车为代表，于待速状态收集尾气中的颗粒物，经二氯甲烷提取，进行如下研究。     

稀土元素镨对蚕豆的遗传毒性和细胞毒性研究

背景与目的:研究稀土元素镨对蚕豆的遗传毒性和细胞毒性。材料与方法:蚕豆初生幼苗浸入7个PrCl3浓度(1,2,4,8,16,32,64μg/ml)系列溶液,25℃恒温培养6h,之后双蒸水中修复培养24h,切取根尖。进行蚕豆根尖细胞微核试验,计数有丝分裂指数、染色体畸变率。结果:PrCl3浓度在≥8μg/ml时可损伤蚕豆根尖细胞,影响根尖的生长;在1～32μg/ml浓度范围内根尖细胞微核率呈剂量_效应关系(r=0.948,P<0.05);在2～64μg/ml浓度范围内有丝分裂指数呈剂量_效应关系(r=-0.789,P<0.05);在1～8μg/ml浓度范围内染色体畸变率呈剂量_效应关系(r=0.992,P<0.05)。结论:稀土元素镨对蚕豆根尖细胞具有一定的遗传毒性和细胞毒性。     

CS_2对小鼠精子毒性及某些细胞遗传学毒性研究

本文报道腹腔注射CS_2对雄性小鼠三个时相的骨髓嗜多染红细胞,外周血淋巴细胞微核率,精子数目,精子活动度及精子畸形率的影响。结果表明高剂量CS_2组能引起小鼠精子畸形率增高,一周,五周与对照组有非常显著和显著性差异,但到第十周经修复后无差异,其余实验结果未呈现有意义的改     

采用细胞毒性试验对23个药用包装材料进行生物安全性评价

目的：用体外细胞毒性试验对23个药用包装材料进行生物安全性评价,探讨样品浸提液制备方法对检测结果的影响。方法：设定样品质量/浸提液体积比值为0.2 g/mL,药用包装材料分别用MEM培养基(37℃、24 h)、氯化钠注射液和去离子水(121℃、1 h)制备浸提液。小鼠成纤维细胞L929培养于96孔板中,每孔加入样品浸提液100μL培养48 h后,用酶标仪测定吸光度值,根据细胞的相对增殖度(RGR)进行细胞毒性反应分级,≤1级为阴性,2级为可疑阳性,≥3级为阳性。结果：23个受试样品的MEM培养基浸提液均为0～1级;氯化钠注射液浸提液检出9个受试样品为2级以上,其中3个为3级以上;用去离子水浸提液复核9个受试样品可疑阳性结果,仅3个为2级以上,其中1个为3级。结论：体外试验在排除渗透压、pH值等的干扰,用最大溶出度浸提液作为溶剂配制培养基进行试验,能够明显增加药用包装材料毒性反应阳性结果的检出率。     

不同材料压舌板体外细胞毒性效应研究

目的： 对不同材料压舌板的体外细胞毒性效应进行评价,旨在为压舌板的安全使用提供科学依据。方法： 将3种材料的压舌板分别配制成25%、50%、75%、100%等不同浓度的浸提液作为受试物组,另设空白对照组、阴性对照组和阳性对照组,采用L929小鼠成纤维细胞株体外培养24 h,置于显微镜下观察细胞形态,通过MTT法检测受试物组和对照组的吸光度值进行定量分析,对压舌板的体外细胞毒性效应进行综合评价。结果： 空白对照组和阴性对照组胞内颗粒明显,细胞无溶解,生长状态良好。阳性对照组所有细胞坏死。100%木制压舌板浸提液组几乎所有细胞全部坏死,100%竹制压舌板浸提液组胞内颗粒明显,细胞无溶解,生长状态良好,100%不锈钢压舌板浸提液组圆缩、疏松贴壁及无胞内颗粒的细胞比例小于20%。经MTT法所测D（570）值计算得出100%木制压舌板浸提液的细胞存活率为20.1%;100%竹制压舌板浸提液的细胞存活率为89.1%;100%不锈钢压舌板浸提液的细胞存活率为81.2%。根据细胞毒性判定标准,木制压舌板对L929细胞有潜在细胞毒性。结论： 木制压舌板具有潜在细胞毒性,在使用过程中应注意加强安全保障。     

乙型脑炎病毒E蛋白HLA—A＊0201限制性细胞毒性T细胞表位的预测

目的:预测乙型脑炎病毒E蛋白(Japanese encephalitis virus envelope protein,JEV E 蛋白)的HLA-A2限制性CTL表位.方法:采用SYFPEITHI超基序法、量化基序多项式方案分析及延展基序方案联合应用,筛选JEV E 蛋白HLA-A2限制性的九肽细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL)表位.结果:通过预测获得了9个JEV E 蛋白HLA-A0201限制性的九肽CTL表位.结论:超基序法与量化基序多项式方案分析及延展基序方案的联合应用所产生的JEV E 蛋白CTL表位,为进一步研制新型乙脑肽疫苗奠定了重要的基础.     

β-胡萝卜素对人体乳腺癌MCF-7细胞的细胞毒性研究

 目的　研究 β 胡萝卜素对人体乳腺癌MCF 7细胞毒杀作用。 方法　应用MTT比色法 ,在试管内研究 β CA对MMTOD值的影响 ,检测 β CA对MCF 7人乳腺细胞的毒杀作用。 结果　不同浓度的 β CA对MCF 7癌细胞均有杀伤作用。特别是 0 .5、0 .1、0 .0 5mg/ml组 ,其对癌细胞的杀伤率分别达到 99%、88.19%和 5 6 .35 % ,有极显著的统计学差异 (P <0 .0 1)。结论　β CA在试管内对MCF 7乳腺癌细胞有直接的毒杀作用 ,作用机理可能与其直接调控癌基因和抗癌基因的表达有关 ,最终可导致癌细胞的死亡。     

不同表面修饰的氧化铁纳米颗粒对A549细胞的毒性及DNA损伤

目的：比较不同表面修饰的氧化铁纳米颗粒（IONPs）对A549细胞的细胞毒性、染色体和DNA损伤及其作用机制的差异。方法：比较相同粒径范围（约5 nm）的胺基表面修饰的纳米氧化铁颗粒（Amine-IONP）和聚乙二醇表面修饰的纳米氧化铁颗粒（PEG-IONP）对A549细胞存活率和细胞周期的影响;使用高内涵法检测细胞经IONPs处理后的胞内活性氧簇（ROS）含量、线粒体膜电位（MMP）和内质网（ER）状态的变化;采用体外胞质分裂法微核试验和彗星电泳评价IONPs对染色体和DNA完整性的影响。结果：两种纳米氧化铁颗粒处理48 h对A549细胞生长抑制率均小于20%。相同浓度条件下,PEG-IONP主要表现为对A549细胞G0/G1期阻滞,自20 μg/mL起即明显减少S期细胞比率（P < 0.01）,320 μg/mL PEG-IONP处理24 h后可诱导p21与p53表达水平显著升高（P < 0.05）。给药48 h时,Amine-IONP作用后细胞ROS、MMP及ER水平显著性改变的起始浓度分别为20、20和80 μg/mL,而PEG-IONP作用后产生显著性改变的起始浓度分别为40、40和160 μg/mL。此外,与PEG-IONP比较,Amine-IONP可在较低浓度条件下诱导微核和彗星拖尾形成（Amine-IONP的起始浓度为20和80 μg/mL;而PEG-IONP则为40和160 μg/mL）。经氧自由基清除剂乙酰半胱氨酸和叔丁基对羟基茴香醚预处理后,两者导致的胞内ROS含量和尾部DNA百分率均明显降低（P < 0.05）。结论：带正电荷的Amine-IONP更易于诱导A549细胞氧化应激及与之有关的DNA损伤;相比之下,PEG-IONP的细胞毒性和遗传毒性较弱,但除氧化损伤外也可通过抑制细胞周期干扰细胞增殖,作为肿瘤诊断试剂具有一定优势。     

钒对睾丸支持细胞／生精细胞的体外毒性研究

钒对睾丸支持细胞／生精细胞的体外毒性研究李宏霞，杨在昌，张天宝，曾祥贵（成都华西医科大学环境卫生学教研室６１００４１）已有研究表明，Ｖ２Ｏ５对雄性大鼠有明确的生殖毒性，但对其毒作用机制尚缺乏深入的研究。本实验在建立大鼠支持细胞／生精细胞（Ｓｅｒｔｏｌ...     

莫合烟对小鼠胚胎细胞遗传毒性的研究

本文用微核试验的方法检测了新疆产莫合烟（一种组制烟草）对小鼠胚胎细胞的遗传毒作用，并与新疆卷烟厂生产的天池牌香烟加以比较。给妊娠１３─１５ｄ的瑞士小鼠腹腔注射烟雾凝聚物，共二次，间隔２４ｈ，第二次染毒后１６ｈ杀死动物，取胎鼠的肝脏及母鼠的骨髓，制片，计数多染红细胞（ＰＣＥ）的微核率。结果表明莫合烟烟雾凝聚物在中等浓度（１２０ｍｇ／ｋｇ）时胎肝细胞的微核率（７．９３±２．２３）与溶剂对照（６．１７±１．８５）相比有显著性差异。骨髓细胞的微核率（８．３１±２．２１）与对照细（５．１１±１．０５）相比，亦有显著增高。在高浓度（２４０ｍｇ／ｋｇ）时，胎肝细胞的微核率上升至１２．１３±４．４３．骨髓细胞为１０．６７±４．３３，与溶剂对照相比有极显著差异（Ｐ＜０．０００５）。且均呈剂量效应关系。而天池香烟只在高浓度时胎肝细胞微核率（９．２９±２．５６）与骨髓细胞微核率（５．５±２．０７）的增高才有显著意义。两种烟相比较，在高涨度即１．３支烟／ｋｇ时，莫合烟诱发的胎肝细胞微核率大于天池香烟（Ｐ＜０．０５）。以上结果说明莫合烟雾凝聚物对小鼠胚胎细胞有遗传毒性，其毒性在高浓度时大于天池香烟。     

胆汁酸遗传毒性和细胞间隙连接通讯抑制作用的研究

胆汁酸遗传毒性和细胞间隙连接通讯抑制作用的研究梁立新，毕洁，刘建，印木泉（上海军医大学卫生毒理学教研室２００４３３）本文应用Ａｍｅｓ试验，ＣＨＬ细胞株染色体畸变试验检测了脱氧胆酸和石胆酸的遗传毒性，用ＮＩＨ／３Ｔ３细胞恶性转化试验观察了脱氧胆酸和石胆...     

偶联双基因靶点的多功能金纳米颗粒对三阴性乳腺癌细胞的毒性分析

目的:设计并构建偶联双基因靶点的多功能金纳米棒颗粒（TKI-258-pGNRs@mSiO2-RGD）,并探讨该多功能金纳米棒颗粒对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的细胞毒性,初步明确该新型多功能金纳米棒颗粒在体外实验中所需的剂量范围。方法:运用种子介导生长法制备金纳米棒,以改良的奥伯法对其表面进行介孔二氧化硅包裹,通过表面修饰偶联整合素αvβ3和表皮生长因子受体（VEGFR）的特异性抑制剂RGD和TKI-258,采用紫外分光光度计和透射电镜对其特征进行检测。以不同浓度（0、12.5、25、50、100、200μg/ml）多功能金纳米棒颗粒孵育人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞株,采用CCK-8法检测细胞增殖率,并进行细胞毒性评级。结果:多功能金纳米棒颗粒物理状态稳定,吸收峰位于515、860 nm处。偶联的双基因靶点抑制剂TKI-258、RGD分别在360、204 nm处有特征性吸收峰,药物包封率分别为58.18%±7.13%,57.95%±5.22%,载药率分别为4.26%±0.42%,4.35%±0.79%。不同浓度多功能金纳米棒处理后,细胞增殖率在50%-100%之间,细胞毒性评级为I-II级,0-100μg/ml浓度范围内无细胞毒性。结论:偶联双基因靶点的多功能金纳米棒颗粒（TKI-258-pGNRs@mSiO2-RGD）具有热疗/放疗增敏的特殊光学性质,偶联双基因靶点抑制剂TKI-258、RGD的载药量稳定,生物相容性良好,可作为三阴性乳腺癌细胞特异性靶向的热疗/放疗载药增敏材料。     

膀胱癌来源的外泌体通过促进髓系抑制性细胞的扩增介导毒性T细胞的免疫抑制

目的:探究膀胱癌细胞系MB49来源的外泌体(MB49-Exo)对髓系来源的抑制性细胞(MDSCs)的影响及后者对MB49抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫功能的调控.方法:试剂盒分离MB49-Exo,并应用透射电子显微镜(TEM)观察外泌体形态,纳米粒径颗粒跟踪分析仪(NTA)和Western blot进行鉴定...     

乙双吗啉的遗传毒性及其细胞动力学效应的研究

乙双吗啉是双内酸胺化合物，为我国70年代末合成的抗癌药物，具有抑制癌细胞，抑制癌细胞转移和增强放疗疗效等作用。但是前几年不断有报告指出，长期服用己双吗批药物可诱发相关性白血病。江苏省肿瘤防治研究所细胞遗传室薛开先研究员等经过五年来的认真研究，对乙双吗啉的Ames试验（诱变性）、体内外微核试验、染色体畸变分析，揭示了该药的遗传毒性。通过放射性自显影和肥质分裂阻滞等技术研究该药，揭示了它的细胞动力学效应。结果显示该药可使血球细胞染色体明显断裂，并使之重排，同时也可抑制细胞周期演进和胞质分裂，从细胞遗传学…     

多聚赖氨酸-硅纳米颗粒的生物相容性研究

背景与目的：多聚赖氨酸-硅纳米颗粒是一种新型的非病毒纳米颗粒基因传递载体。本研究主要阐述其生物相容性,为其进一步的体内应用提供实验依据。方法：细胞转染和流式细胞仪分析在含血清培养基中多聚赖氨酸-硅纳米颗粒介导质粒DNA和反义寡核苷酸的转染能力,随后通过血浆蛋白反应滤过试验和红细胞聚集试验进一步评价其生物相容性。结果：在含血清培养基中,多聚赖氨酸-硅纳米颗粒介导质粒DNA和反义寡核苷酸传递的能力显著下降。多聚赖氨酸-硅纳米颗粒／DNA(／ODN)复合物可与小鼠血浆蛋白成分结合,并可引起红细胞聚集。结论：多聚赖氨酸-硅纳米颗粒可能与含血清培养基中的血浆蛋白相互作用,影响体外细胞转染效率。多聚赖氨酸-硅纳米颗粒可能与体内外周血血浆蛋白和外周血红细胞反应而影响其体内基因传递能力,其生物相容性还有待于进一步提高。