乙肝病毒标志物两种检测方法的应用比较

目的：探讨酶联免疫检测和胶体金法在乙型肝炎血清学标志物检测中的应用情况[1],为乙肝的检测和防治提供科学的病原学依据。方法：选取521例血清,应用酶联免疫法和胶体金法联合检测乙肝表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体进行比较。结果：酶联免疫法检测乙型肝炎两对半结果同胶体金法比较灵敏度较高特异性稍差。结论：酶联免疫法检测乙型肝炎血清学5项标志物,灵敏度高、稳定性好,方法优于胶体金法,可作为乙型肝炎标志物的常规检测方法。     

化学发光法检测乙型肝炎病毒血清标志物组合模式与分析

目的 通过化学发光定量法检测乙型肝炎病毒血清标志物,试图客观地反映乙型肝炎病毒血清标志物的分布状态及其临床意义;并同步对乙型肝炎表面抗原阳性者进行乙型肝炎病毒DNA定量测定,探讨不同乙型肝炎病毒血清标志物与病毒复制的相关性.方法 用化学发光定量法和酶联免疫吸附测定法对491例临床样本进行乙型肝炎病毒血清标志物检测及分型.对其中乙型肝炎表面抗原阳性的103例样本进行乙型肝炎病毒DNA测定.结果 491例被检者用化学发光法检出15种模式,酶联免疫吸附测定法检出仅9种模式.前者中可见乙型肝炎表面抗原与乙型肝炎抗体双阳(9例,1.84%)和乙型肝炎e抗原与乙型肝炎e抗体双阳(10例,2.03%)等少见模式.检测103例乙型肝炎表面抗原阳性者乙型肝炎病毒DNA阳性63例,占61.16%.乙型肝炎表面抗原和乙型肝炎e抗原测定值在乙型肝炎病毒DNA拷贝数不同分组中差异有统计学意义(P＜0.000 1).结论 乙型肝炎病毒血清标志物分布具有多样性;化学发光法的灵敏性和准确性优于酶联免疫吸附测定法,可为临床诊治提供可靠的实验室依据.     

酶联免疫和胶体金法对丙型肝炎病毒抗体检测的对比分析

目的:结合临床实践经验,探讨丙型肝炎患者的有效检验方法.方法:2009-01～2009-12收治的门诊及住院患者1 005例为研究对象,所有患者均进行酶联免疫及胶体金法对丙型肝炎病毒抗体进行检测,观察和比较两种方法的检测有效性.结果:经过研究比较分析,酶联免疫法检测出丙型肝炎病毒抗体阳性率为3.38%,胶体金法检测出丙型肝炎病毒抗体阳性率为3.48%,两种方法比较,检验阳性率差别无统计学意义(χ2=0.33,P＞0.05).结论:临床采用胶体金法和酶联免疫法对丙型肝炎病毒抗体的检测均有较好的效果,都能够直观、准确的将丙型肝炎病毒抗体检测出来,为临床的诊断、预防、治疗提供可靠的依据,值得临床进一步推广应用.     

胶体金免疫层析测定法与酶免疫法检测血清乙肝表面抗原对比分析

乙肝的防治是我国医药卫生工作的长期而又艰巨的任务，现有的诊断方法主要是酶联免疫附试验(ELISA法)，但它一般是多样本操作，并且操作时间较长，影响因素较多，且不利于工作人员的自我保护。而胶体金免疫层析法(CAu-ICA)清中的乙肝表面抗原，可达到快速、简便、准确、早期诊断之目的，现报告如下：     

化学发光酶免疫分析法与酶联免疫吸附法检测乙肝病毒标志物比较

目的探讨化学发光酶免疫分析法(CLEIA)与酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙肝病毒标志物的作用评价。方法选取铁岭市中心医院感染科自2015年1月至2018年1月收治的的300例疑似乙肝体检者为研究对象。所有体检者分别采用CLEIA、ELISA法检测乙肝病毒标志物。结果经CLEIA法检测的乙肝表面抗原(HBs Ag)、乙肝e抗体(HBe Ab)阳性检出率分别为60. 3%(181/300)、46. 3%(139/300),均明显高于ELISA法检出的56. 7%(170/300)、42. 7%(128/300),两种检测结果比较,差异均有统计学意义(P <0. 05);而CLEIA法在乙肝表面抗体(HBs Ab)、乙肝e抗原(HBe Ag)、乙肝核心抗体(HBc Ab)的阳性检出率分别为47. 3%(142/300)、21. 7%(65/300)、59. 7%(179/300),均略高于ELISA法,但两种检测结果比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论在乙肝病毒标志物检测中,CLEIA应用价值明显高于ELISA,CLEIA法能够较好的保证测定效果,检测分析结果更为精准。     

化学发光法和酶联免疫法检测乙肝病毒血清学的对比

目的 探讨化学发光法和酶联免疫法检测乙肝病毒血清学的对比分析.方法 采用随机数字表法,对检验科的400例血清标本进行检验,依照血清学检验方法的不同,分为对照组和观察组,每组200例,对照组给予酶联免疫法检验,观察组给予化学发光法检验,观察每组对在乙型肝炎血清标志物HBeAg的诊断疗效.结果观察组HBeAg阳性和HBeAg抗阳性的检验正确率为95(190/200)明显高于对照组检验正确70%(140/200),两组数据差异具有统计学意义(P<0.05).结论 化学发光法在乙肝病毒血清学检测中的应用疗效确切,具有较高的阳性检出率和正确率,且比酶联免疫法有着更高的敏感性和特异性强特点,值得临床应用实施.     

乙型肝炎26510例病毒血清学标志物分析

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)血清学标志物表现模式的临床意义。方法　应用酶联免疫吸附测定 (ELISA)法检测 2 65 1 0例受检者血清标本中HBsAg、抗 HBs、HBeAg、抗 HBe、抗 HBcIgM。 结果　HBV血清学标志物的表现模式共 1 9种 ,其中常见模式 1 2种 ,罕见模式 7种。结论　HBV血清学标志物的表现模式在乙型肝炎的诊断、疗效评价及预后具有重要意义 ,但如何正确判断罕见模式的临床意义 ,需进一步研究与探讨。     

酶联免疫反应加速仪在化学发光法检测HBsAg的临床评价

目的:探讨酶联免疫反应加速仪在化学发光法快速检测HBsAg及患者乙肝两对半的应用效果.方法:用酶联免反应加速仪取代乙型肝炎病毒检测操作步骤中的恒温箱37℃温育,其余操作步骤均相同,同时检测HBsAg标准品、正常人血清和196例乙肝患者血清两对半标志物.结果:加速仪反应30 min已达最佳实验效果,加速仪的特异性为100%,加速仪反应30 min与恒温箱37℃温育60min实验结果一致.结论:酶联免疫反应加速仪应用于化学发光法检测乙型肝炎病毒标志物具有加速反应功能,可缩短一半反应时间,准确度高,可替代常规温育方法,值得在临床推广使用.     

健康查体乙肝病毒5项血清标志物的体会

我所于 1 999年 1 1月～ 1 2月对某部机关部分人员进行了乙肝病毒 (ＨＢＶ) 5项血清标志物ＨＢｓＡｇ、抗 -ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗 -ＨＢｅ和抗 -ＨＢｃ的检测。此次查体较易引起大家困惑的是抗 -ＨＢｃ阳性率高的问题以及与其他医院检验结果的可比性问题 ,对此有必要加以阐释 ,以供商讨。1　材料和方法1 1　对象　某部机关干部战士、离退休老干部共 96 9人 ,年龄 1 8～ 71岁。1 2　仪器　ＳｔａｔＦａｘ 2 1 0 0型酶标仪 ,ＳｔａｘＦａｘ 2 6 0 0型洗板机 (美国产 )。1 3　试剂　上海科华公司ＥＩＡ试剂盒 ,批号 991 0 1 6。1 4　…     

聚合酶链反应检测血清乙肝病毒——三种血清标本制备方法比较

病毒性乙型肝炎在我国属高发病、常见病，感染率达60～70％，表面抗原携带者达10％左右〔1〕。因此，十分需要一种简便、快速、敏感和特异的乙肝病毒（HBV）检测方法。近年来出现的体外扩增DNA的一项新技术──聚合酶链反应（PGR），为临床检测开辟了一条新的途径。经实验和临床证明，用PCR检测HBV－DNA具有极高的敏感性和特异性，在临床上有使用价值〔2-〕。然而，许多文献报导用PCR检测HBV－DNA的血清样本处理方法不同，用何种实验方法制备HBV－DNA样品使其能够在较短的时间内达到较高的灵敏度，是目前PCR技术在临床推广应…     

HBcAg ELISA法测定的临床分析

目的研究ELISA法测定HB cAg在HBV感染者中的阳性检出率、分布规律及与其他乙肝标志物的关系,探讨其在反映HBV复制及传染性和观察疗效方面的临床价值。方法采用ELISA法对416例HBV感染者进行血清乙肝6项指标测定,按其不同阳性结果分9种模式对比分析。结果416例HBV感染者中HB cAg ELISA法测定阳性总检出率达56.7%,而70例未感染者及65例抗-HB s单项阳性者中无阳性检出。结论ELISA测定血清HB cAg在HBV感染者中的阳性检出具有特异性,并可作为疑有抗-HBe阳性“逆转”为HBeAg阳性者的筛选检测,对判断HBV复制程度、病程、疗效及预后评估均有临床价值。     

胶体金免疫层析技术快速定量检测相思子毒素

目的：建立胶体金免疫层析技术快速定量检测相思子毒素。方法：利用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术,建立相思子毒素的快速检测方法,评价其特异性和敏感性,并拟合检测曲线进行定量检测。在面粉、饼干、奶粉、苹果汁、牛奶、果冻等食品样品中添加相思子毒素模拟污染样品,评价该方法对固体、半固体、液体等食品样品的检测能力。结果与结论：该法可在15min内完成定性和半定量检测,灵敏度为30ng/ml,线性范围30～600ng/ml、回收率80%～110%,变异系数小于15%。所建立的检测相思子毒素的胶体金免疫层析方法,能快速、灵敏、特异、准确地检测样品中的相思子毒素,并可实现定量,适用于现场快速检测。     

非竞争性ELISA法测定人源抗HBsAg Fab功能性亲和常数

目的　测定完全人源化基因工程抗体HBsAgFab的亲和常数。方法　采用非竞争性ELISA固相法 ,经确定最佳抗原包板浓度、最佳抗原包板时间及最佳抗原与抗体结合反应时间后 ,得到了HBsAg与抗体片段抗HBsAgFab及完整抗体抗HBsAgIgG的抗原抗体结合反应曲线 ,计算出抗HBsAgFab及抗HBsAgIgG的亲和常数。结果　人源基因工程抗体抗HBsAgFab的功能性亲和常数在 10 7～10 8M 1水平 ,比完整抗HBsAgIgG仅仅小约 1个数量级 (10 8～ 10 9M 1)。结论　该基因工程抗体与抗原结合能力较强 ,为今后开发应用Fab进行生物导向治疗提供了理论基础。     

医护人员HBV,HCV感染的血清流行病学研究

对北京解放军总医院２６１名经常接触病人血液的医护人员ＨＢＶ、ＨＣＶ感染的血清流行病学进行了调查，并同河北省固安县某农村自然人群作了比较。结果表明，医护人员ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶＭ和抗ＨＣＶ阳性率分别为３．１％（８／２６１）、４５．６％（１１９／２６１）和０．８％（２／２６１），ＨＢＶ总感染率高于农村自然人群（２９．４％），而抗ＨＣＶ阳性率同我国普通人群相似（低于１％）。说明北京医护人员感染肝炎的职业威     

HBsAg携带母亲所生婴幼儿HBV标志物动态变化分析

目的 了解HBsAg携带母亲所生婴幼儿经高效价免疫球蛋白(HBIG)和乙肝疫苗联合免疫后乙肝病毒血清标志物(HBVM)的动态变化及其临床和流行病学意义.方法 对209例HBsAg携带母亲的213例婴幼儿(双胎4例)进行随访调查,分别于婴幼儿0、1、4、7、12、24、36月龄应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其HB...     

三种方法检测乙肝表面抗原的结果分析

目的探讨三种方法对乙肝表面抗原的定性和定量检测的结果并进行对比分析。方法采用临床上常用的胶体金方法、酶联免疫吸附实验法(ELISA法)、化学发光微粒子免疫分析法(CMIA法)对400例标本进行乙肝表面抗原检测,分别计算ELISA法、CMIA法、胶体金法检测结果的阳性率、灵敏度和特异度。结果 CMIA方法检测乙肝表面抗原的阳性率、灵敏度和特异度高于ELISA法和胶体金法。结论 CMIA法检测乙肝病毒标志物特异性强、灵敏度高,具有很高的临床应用价值。     

YMDD突变株HBV转基因小鼠的制备及检测

目的建立YMDD耐药突变株HBV转基因小鼠,为乙肝防治研究提供转基因动物模型。方法采用受精卵显微注射法,将带有YMDD突变的对拉米夫定有耐药性的1.3拷贝HBV基因注入FVB/N单细胞受精卵的原核内,制备YMDD耐药突变株HBV转基因小鼠。采用PCR检测外源基因的整合和传代情况,采用ELISA和免疫组化等方法检测HBsAg在肝、肾中的复制和表达情况。结果注射受精卵3401枚,产269只F0代仔鼠,PCR阳性33只,外源基因的整合率12.3%。9只转基因鼠血清HBVDNA弱阳性,拷贝数低于103拷贝/ml;免疫组化结果显示肝组织和肾组织均有HBsAg表达,且肾组织中的表达强于肝组织。经传代产下47只F1代转基因鼠,目的基因PCR阳性率为27.6%,且肝组织和肾组织中HBsAg均有表达,分布特性与F0代一致。结论成功制备出体内有复制表达而且可以传代YMDD耐药突变株HBV的转基因小鼠。     

乙型肝炎患者血清HBV前C区A1896变异的检测分析

目的了解HBsAg(+)/HBcAb(+)/HBeAb(+)的慢性乙肝病人血清乙肝病毒(HBV)DNA前C区A1896的变异情况及其与临床关系。方法对所有试验对象检测肝功能指标,根据检测结果分为丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高组和ALT正常组。用聚合酶链反应杂交(PCR-ELISA)定量检测HBV-DNA并进一步检测HBV前C区A1896位点的变异情况。结果 38例患者中有18例HBV-DNA阳性,其中15例发生A1896位点变异,变异率为83.3%(15/18)。ALT升高组的18例中,血清HBV-DNA阳性13例,阳性率72.2%,平均浓度为9.62×106(1.10×103～1.09×108)拷贝/ml,A1896变异13例,变异率为100%(13/13)。ALT正常组的20例中,HBV-DNA阳性5例,阳性率25.00%,平均浓度2.55×104(3.28×103～4.61×104)拷贝/ml。A1896变异2例,变异率为40%(2/5)。两组比较无论在HBV-DNA阳性率,还是A1896位变异率都具有统计学差异(P<0.05)。结论 HBsAg(+)/HBcAb(+)/HBeAb(+)的慢性乙肝患者存在较高的A1896变异率,ALT升高组HBV-DNA阳性率和变异率均高于ALT正常组(P<0.05),提示HBV A1896位点变异与肝脏病变活动加重和ALT升高有关。     

隐匿性HBV感染相关S基因突变对HBsAg检测的影响及其机制

目的 探讨隐匿性HBV感染(OBI)相关S基因突变对多种抗-HBs及HBsAg临床检测试剂的反应性.方法 9种代表性S基因突变株(M1-M9,其中M1-M5为本课题组首次报道)分离自1例OBI患者和3例OBI献血人员血清.分别采用野生型及突变型S基因重组质粒转染中国仓鼠卵巢细胞,分析9种突变株HBsAg表达及其突变蛋白对抗体和检测试剂反应的影响.结果 采用HBsAg罗氏诊断试剂Elecsys定量检测9种突变株胞内HBsAg水平,均较野生株的水平明显下降;相同样品用抗-His抗体检测显示仅M1、M6和M7的HBsAg-His融合蛋白表达水平与野生株比较明显降低.6种抗-HBs与各突变HBsAg的反应性结果(S/CO值)显示,与野生株相比,多数突变株与6种抗-HBs的反应性明显降低,M1、M4、M7和M9产生的HBsAg与抗体4及M9产生的HBsAg与抗体6反应性最差(S/CO＜1).6种商品化HBsAg临床试剂检测结果显示,多数突变株与6种HBsAg试剂反应性较野生株明显降低(P＜0.05),ELISA试剂D、E和F漏检率分别为11.1％、22.2％和55.6％.结论 本实验涉及的突变HBsAg与抗-HBs的结合力降低是引起OBI表现的主要原因之一.当前临床常用HBsAg检测试剂对突变HBsAg的检测能力存在明显不足,亟待提高.