快速荧光灶抑制试验测定的人抗狂犬病免疫球蛋白对狂犬病主动免疫的抑制作用

以往报道快速荧光灶抑制试验(RFFIT)可代替小鼠中和试验(MNT)检测狂犬病免疫血清(RIS)和人狂犬病免疫球蛋白(HRIG),两法结果是可比的。近来文献相继报道RFFIT检测结果要比MNT法低2～10倍。如用RFF-IT测抗体,那么实际使用时HRIG用量将要比常规推荐量大2～10倍,会干扰接种疫苗者的抗体生成。最近,由于全欧药典委员     

荧光抗体试验组织培养病毒分离和酶免疫试验快速诊断狂犬病的比较

本文介绍在法国国家狂犬病参考中心(FNRCR)和亚非拉国家的12个实验室分别对快速诊断狂犬病的狂犬病组织培养感染试验(RTCIT)和狂犬病快速酶免疫诊断试验(RREID)与荧光抗体试验(FAT)作了比较.在FNRCR,分别用FAT和RTCIT检测了15248份来自不同动物的样品.结果1511份FAT阳性,但其中有19份(1.25%)RTCIT阴性,FAT阴性的样品用RTCIT测定亦为阴性,两种试验的符合率为99.75%.用FAT、RTCIT及RREID同时检测了2290     

快速检测人血清狂犬病抗体的免疫粘连血凝试验

本文报道用免疫粘连血凝(IAHA)试验快速检测人血清狂犬病抗体含量。狂犬病抗原用狂犬病病毒CVS-11株接种子乳地鼠肾传代细胞(BHK-21),经37℃孵育,直至观察到90％的细胞发生病变(48小时后),收液后先用2,000rpm离心沉淀10分钟,以去除细胞碎片,再用0.45孔径的滤     

用于荧光抗体试验的狂犬病病毒的灭活

试验采用狂犬病病毒CVS株及衔毒,用含20％正常灭活兔血清的PBS将感染狂犬病病毒的鼠脑制成20％悬液。乳鼠脑内滴定CVS株的LD_(50)为10~(9.1)/ml,街毒为10~(6.0)/ml。     

提高狂犬病病毒抗体血凝抑制试验的敏感性

作者用含5%硅酸胶的pH 9.0硼酸盐水与等量豚鼠血清混合后,室温作用30分钟,取上清,血清即为1:2稀释,人血清则先用丙酮处理,然后用硅酸胶除去血清中的非特异性狂犬病病毒血凝素抑制物。结果表明:296份人血清中有289份(97.6%)的1:2稀释血清,用血凝抑制(HI)试验未能检出非特异性抑制物;7份1:8～1:16稀释血清可检出低水平的抑制物,其中3份经1:4稀释后,即测不到抑制物,但另4份经各种处理,仍不能去除抑制物。多次鸡胚传代(HEP)的狂犬病病毒Flu-ry株、攻击病毒标准(CVS)株及RCEH株经     

假病毒中和试验对狂犬病毒中和抗体效价的检测效能分析

目的：组织不同的实验室分析假病毒中和法（Pseudo Virus-based Neutralization Assay,PBNA）对不同样品的狂犬病病毒中和抗体水平的检测能力,并比较其与经典的快速免疫荧光灶抑制试验（Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test,RFFIT）以及小鼠中和试验法（Mouse Neutralization Test,MNT）的相关性。方法：共9家实验室,分别采用PBNA、RFFIT以及MNT法对6份样品进行狂犬病病毒中和抗体检测,每个实验室进行3～5次重复实验。采用配对t检验及Pearson相关系数对3种检测方法的结果进行统计学分析。结果：PBNA与RFFIT、PBNA与MNT、RFFIT与MNT Pearson相关系数分别为0.985、0.988和0.974,抗体几何平均滴度进行t检验,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：3种方法重复检测6份样品的定量结果具有高度的相关性,PBNA法可作为《中华人民共和国药典》方法RFFIT、MNT的一种替代或补充方法,用于人用狂犬病疫苗临床血清、狂犬病人免疫球蛋白及抗狂犬病血...     

提高狂犬病病毒抗体血凝抑制试验敏感性的方法

自从1968年Halonen建立了狂犬病病毒血凝试验之后,血凝抑制(HI)试验已被用作测定抗狂犬病保护性抗体的一种简便、可靠的方法.但是血凝试验至今仍不能被广泛应用于狂犬病的研究,大概是由于人和各种动物的血清中含有高滴度的非特异性抑制物,这些抑制物主要由脂蛋白组成,不易消除.本试验主要用胶态硅酸和菠萝蛋白酶分别处理血清和鹅红细胞来提高HI试验的敏感性.     

检测乙型脑炎病毒中和抗体的简化试验

在亚洲乙型脑炎 ( JE)病毒是病毒性脑炎的常见原因 ,估计每年有 4 50 0 0例病例 ,并且发病率和病死率较高。　　由于登革热也在 JE流行区流行 ,因此为了与登革热区分 ,所有 JE阳性血清必须检测 JE特异性中和抗体才能确诊。蚀斑减少中和试验 ( PRNT)是定量检测 JE中和抗体的金标准。然而该方法需在 6孔或 2 4孔板上进行 ,需时 1周 ,这样就限制了其在大规模筛选 ,尤其是在疫苗效力研究和血清流行病学调查中的应用。因此 ,目前已建立了几种改进的定量检测 JE中和抗体的方法。　　微灶减少中和试验和荧光灶抑制试验 ,应用过氧物酶结合抗…     

不同狂犬病疫苗初免和加强免疫后的中和抗体水平比较

作者对实验性狂犬病 DNA疫苗、编码狂犬病病毒糖蛋白基因的重组痘苗病毒疫苗(RVV)和市售人二倍体细胞病毒灭活疫苗(HDCV)分别免疫小鼠后的中和抗体持续时间及加强免疫后的回忆应答进行了比较。　　小鼠经 3种狂犬病疫苗初免后 90天所产生的中和抗体滴度均超过 0 .5 IU/ ml。RVV组的抗体几何平均滴度 (GMT)分别高于 HDCV和 DNA疫苗组 1 0倍和 1 0 0倍以上 ,初免后第 5 40天 ,RVV免疫鼠的中和抗体滴度高于 HDCV或 DNA疫苗免疫鼠 1 0倍以上。　　接受 3种狂犬病疫苗初免后的小鼠 ,再以 HDCV加强免疫后均能诱导早期 (7天 )稳定…     

一种检测狂犬病抗体的狂犬病凝集试验

目前用于检测狂犬病抗体水平的几种方法都费时、费钱,本文介绍一种快速、价廉的狂犬病凝集试验(RAT),其原理是狂犬病抗体能特异性地凝集狂犬病病毒致敏的胶乳珠。病毒包被胶乳珠(Estapor K109,直经为0.8μm的白色或红色珠)的方法是:用0.05M碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液稀释纯化的灭活病毒,至蛋白浓度为1000μg/ml,pH9.6。用包被碳酸盐缓冲液彻底清洗1ml10%的胶乳珠,然后经2500g离心30分钟,沉淀悬浮于3ml碳酸     

用敏感的中和试验检测抗HIV抗体阳性率

本文介绍和比较了大量和微量中和试验检测的抗人类免疫缺陷症病毒(HIV)抗体的阳性率。作者用HIV HTLV-Ⅲ_B株、HTLV-Ⅲ_(RF)株和LAV株感染HUT-78、CEM、Molt-3及H9 T细胞系。用逆转录酶(RT)试验、间接免疫荧光试验及抗原捕获ELISA检测病毒繁殖情况。于核心抗原释放时和RT释放前检测HIV诱导形成的巨细胞,第1次检出RT     

HIV抗体检测确证试验结果分析

目的:对本艾滋病确证实验室2007~2015年检测的我市507例HIV抗体待确证样品的WB试验的阳性、阴性、不确定结果分析,了解我市艾滋病流行现状HIV感染者人群分布,分析艾滋病病毒(HIV)抗体不确定结果的特点提出更加合理的处理方法,对阴性结果分析查找造成筛查假阳性的原因。方法:对初筛阳性血清用双ELISA或ELISA和胶体金试验复检,任一复检试验阳性的血清再用WB试验确证,对确证试验结果不确定者进行随访复检。结果:507例样本经WB确证397份HIV-1抗体阳性,不确定45份,阴性65份。397例确证试验阳性标本经流行病学调查79.8%(317/397)是经男男性行为传播。45例WB不确定样本中要集中在孕产妇占33.3%(15/45)献血员占22.2%(10/45)VCT占20%(9/45),在随访的25例被检测中有3例明确高危行为者随访4复检进展为WB确证阳性,其余均为阴性。在WB结果阴性的65的样本,采用ELISA+胶体金或双ELISA复检73.8%(48/65)结果为一阴一阳,并且ELISA的S/CO值在1~6之间。结论:性接触传播尤其是男男性接触者(MSM)是我市报告HIV/AIDS的主要传播途径;不确定样品主要集中在孕妇及献血员及VCT人群多是非特异性免疫反应,在低流行人群尤其孕产妇HIV抗体不确定样本最终以阴性转归为主;胶体金和ELISA复检可排除大部分初筛假阳性,但两种复检试验均存在一定的假阳性,初筛实验室应严格进行质量控制选用敏感性和特异性高、质量稳定的试剂。     

间接血凝试验与毒素中和试验测定小鼠血清白喉抗毒素的比较

作者用不同剂量的吸附白喉、破伤风类毒素、吸附DTP和纯化白喉类毒素免疫42组小鼠,然后用间接血凝试验(IHA)和毒素中和试验(TN)测定小鼠血清中的白喉抗毒素含量。实验证明,TN和IHA测定的白喉抗毒素滴度的相关系数(r)是0.91,回归方程是:y=0.7935x+0.0647。TN滴度和IHA滴度在统计学上无明显差异。IHA的灵敏度比TN高,可测出白喉抗毒素的最低水平为0.00039IU/ml。IHA在不同时间测定同一血清的滴度几乎相等,证实了这一试验的可重复性。结果表明,IHA可代替TN用于测定白喉抗毒素,     

狂犬病病毒抗体检测的研究进展

狂犬病是目前世界上许多发展中国家的一个严重问题,因此迫切需要建立和推广与狂犬病病毒(rabies virus,RV)有关的快速、实用的检测方法.本文简要介绍了几种传统的RV抗体检测方法,系统阐述了近期发展的一些RV抗体检测方法的原理及特点,以及与WHO推荐的RV中和抗体检测方法对比的统计学分析,并对RV中和抗体检测技术进行了综合评价.     

丹东市2003～2006年狂犬病病毒抗体检测结果分析

目的了解我市犬咬伤人群接种狂犬病疫苗后免疫应答效果。方法对丹东市2003年～2006年狂犬病病毒抗体检测结果进行分析。结果狂犬病病毒抗体总阳性率95．8％，年度之间有差异，其效果不同；季节有差异，春夏季低于秋冬季；年龄有差异，中老年组低于青年组，性别间无显著差异。结论狂犬病抗体检测应作为狂犬病疫苗注射后必检项目。     

2006年盐城市狂犬病疫苗接种后病毒抗体检测结果分析

狂犬病是一种人畜共患的自然疫源性疾病,目前尚无特异性治疗方法,发病后死亡率高。暴露后立即按程序进行狂犬病疫苗接种,并于全程接种后做狂犬病病毒抗体检测以观     

狂犬病特异性抗体定量测定Ⅲ.MCIE、HAI试验与SN试验的比较

作者用改良的反向免疫电泳(MCIE)、血凝抑制(HAI)试验对接种了狂犬病疫苗者的73份血清样品测定狂犬病特异性抗体,以常规的血清中和(SN)试验作为衡量标准。倍比稀释血清与30～50半数致死量(LD_(50))的狂犬病病毒CVS株于37℃水浴1小时,颅内注射LACA小鼠,14天后判定ND_(50)。采用Kuwert方法进行HAI试验,73份血清样本经丙酮-氧相二氧化硅处理去除非特异性抑制因子,鹅红细胞用0.25%菠萝蛋白酶处理以增加敏感性,并计数出HAI单位量,MCIE中血清样本预先用2-巯基乙醇于25℃处理30分钟,倍     

不同献血人群HIV抗体检测结果比较

目的了解本地区不同献血人群的人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体检测结果,寻找出献血者的HIV感染高危人群,预防控制艾滋病的传播,确保临床输血安全。方法对本站接收的无偿献血者58621例次的血液样本进行HIV抗体检测,并针对其中的不同人群进行检测结果的比较。结果无偿献血者初检阳性率为0.0665%(39/58621),复检阳性率为0.0478%(28/58621);男性阳性率为0.0494%(18/36458),女性阳性率为0.0451%(10/22163);复检确认阳性的28例次均是首次献血者。不同性别、首次与非首次献血的HIV复检确认阳性率比较均有显著性差异均有统计学意义(P<0.05)。公务员、医务工作者、在校学生人群中均无HIV抗体阳性者;其他人群HIV抗体检出的阳性率由低到高排序分别是:企事业单位工作人员、本地务农者、其他人员、外来流动人口。结论血站人员应加强对HIV感染高危人群的HIV抗体检测,同时鼓励首次献血人群再次献血,有利于增加临床用血的安全性。