膜联蛋白A1与恶性肿瘤的关系

膜联蛋白A1(annexin A1,ANXA1)是Ca2+依赖的磷脂结合蛋白,参与多种细胞病理生理过程.研究发现ANXA1与多种恶性肿瘤关系密切,其可能参与肿瘤的发生、发展,并与肿瘤的分化、增殖、侵袭、转移及肿瘤预后关系密切.ANXA1与恶性肿瘤的关系研究将为肿瘤的诊断、治疗、预防开拓新的思路和方向.     

小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株中Annexin A7蛋白的表达及意义

目的观察Annexin A7(ANXA7)蛋白在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株(Hca-F、Hca-P)中的表达水平,分析其在两种细胞株中的表达及意义。方法采用免疫细胞化学、Western blot和流式细胞仪检测ANXA7在细胞株Hca-F和Hca-P中的表达。结果免疫细胞化学结果显示,ANXA7表达于Hca-F细胞胞核和胞质,以胞核为主,在Hca-P中表达位于胞质;Western blot结果显示,ANXA7在Hca-F、Hca-P中的表达相对值分别为0.09±0.01和0.23±0.02,ANXA7在Hca-F细胞中的表达明显低于Hca-P,差异有统计学意义(P0.01);流式细胞仪结果显示,ANXA7在Hca-F细胞中的相对荧光强度值(57.71±9.85)显著高于Hca-P(17.61±1.00),差异有统计学意义(P0.001)。结论 ANXA7在Hca-F、Hca-P中的差异性表达可能与肿瘤淋巴道转移能力相关。     

膜联蛋白A2对人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和凋亡的影响

 目的：研究膜联蛋白A2（annexin A2, ANXA2）对人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和凋亡能力的影响。方法：以HeLa细胞为研究对象,构建过表达载体以及ANXA2-siRNA,转染入细胞。将细胞分为正常对照组、scrambled组、ANXA2过表达组及ANXA2-siRNA组。应用real-time PCR法检测ANXA2 mRNA表达水平及Western blotting检测ANXA2蛋白表达水平。分别采用MTT法、Boyden小室法和流式细胞术观察ANXA2对HeLa细胞增殖、迁移及凋亡能力的影响。结果：ANXA2过表达组可以显著促进HeLa细胞的增殖和迁移;ANXA2-siRNA组明显抑制HeLa细胞的增殖和迁移;ANXA2对HeLa细胞凋亡几乎无影响。结论:沉默ANXA2对人宫颈癌细胞的凋亡无显著影响,但可显著抑制其增殖能力和迁移能力。ANXA2可能在宫颈癌的发生发展中具有十分重要的作用,提示它有可能成为宫颈癌治疗的分子靶点。     

磷脂对脂多糖诱导中性粒细胞CD11a表达的影响

本实验主要研究与磷脂作用后脂多糖（lipopolysaccharide,LPS)生物学活性的变化。用与不同磷脂预卵育后的LPS刺激细胞,检测中性粒细胞的粘附功能及巨噬细胞分泌细胞因子功能的变化。结果发现与磷脂卵育后,LPS可插入磷脂脂质体膜中,使中性粒细胞粘附功能降低,巨噬细胞分泌细胞因子减少。结果提示LPS6插入细胞磷脂中可以改变其生物活性,推测细胞膜磷脂成分降解可能是LPS诱发炎症反应的重要原因。     

ANXA1拮抗IL-1β导致的胰岛β细胞功能损伤的机制

目的探究ANXA1拮抗IL-1β引起的胰岛β细胞功能缺陷的作用及机制.方法将ANXA1基因插入pCMV-HA载体中,构建ANXA1过表达质粒,将其转染入小鼠胰岛β细胞系βtc-6细胞后,用IL-1β处理上述细胞,借助于MTT、葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验(GSIS)等方法研究ANXA1对胰岛β细胞的保护作用.结果IL-1β导致胰岛β细胞ANXA1表达降低,同时出现胰岛β细胞存活率下降以及胰岛素合成和分泌量减少;而过表达ANXA1可拮抗上述现象的发生.结论ANXA1保护胰岛β细胞免受IL-1β造成的细胞凋亡增加与功能下降.     

肝内胆管癌中ANXA9的表达及其对细胞侵袭的影响

目的探讨肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma, iCCA)中ANXA9的表达及对iCCA细胞侵袭和MMP-9表达的影响。方法采用qRT-PCR法检测12例iCCA组织及癌旁正常组织中ANXA9 mRNA水平,应用免疫组化法检测67例iCCA组织中ANXA9的表达。选取iCCA细胞株HuCCT1进行体外实验,通过siRNA沉默HuCCT1细胞中ANXA9的表达;应用Transwell实验及Western blot法检测ANXA9沉默对HuCCT1细胞侵袭能力和MMP-9表达的影响。结果 iCCA组织中ANXA9的表达水平显著高于癌旁正常组织。免疫组化染色显示39例(58.2%)ANXA9呈阳性,28例(41.8%)ANXA9呈阴性。ANXA9的表达与iCCA淋巴结转移、TNM分期密切相关。细胞功能学实验结果显示,HuCCT1细胞转染针对ANXA9的siRNA后,ANXA9的表达水平下调;沉默ANXA9能够抑制HuCCT1细胞的侵袭能力和MMP-9的表达水平。结论 ANXA9在iCCA组织中高表达,其可以通过调控MMP-9的表达促进iCCA细胞的侵袭,ANXA9可能是iCCA的潜在生物学标志物和分子靶点。     

类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞中膜联蛋白A2磷酸化修饰增强基质金属蛋白酶9的活性

目的研究膜联蛋白A2(ANXA2)磷酸化修饰对类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RAFLS)基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9水平及活性的影响。方法原代培养RAFLS,构建包装ANXA2干涉慢病毒,制备ANXA2显著下调的FLS(si ANXA2/FLS)及同型对照作为细胞模型,采用2型胶原蛋白刺激法间接磷酸化RAFLS中的ANXA2。实时定量PCR(qRT-PCR)分析ANXA2磷酸化对RAFLS细胞中MMP-2和MMP-9表达的影响,明胶酶谱实验观察ANXA2活化对RAFLS中MMP-2和MMP-9活性的影响。结果 qRT-PCR结果提示ANXA2磷酸化修饰对RAFLS中MMP-2和MMP-9的水平无显著影响,明胶酶谱实验显示ANXA2磷酸化修饰能够增强MMP-9的活性。结论通过胶原蛋白刺激法间接促进RAFLS中ANXA2的磷酸化修饰,显著增强MMP-9的活性。     

肿瘤中磷脂酰肌醇信号系统的作用

磷脂酰肌醇信号系统是一个由酶、磷脂信使及其结合蛋白组成的复杂的细胞调节系统,对细胞的生长、增殖、存活以及细胞运动起着重要的调节作用。激活磷脂信使的酶若发生突变,将会导致磷脂酰肌醇信号系统高度激活,磷脂酰肌醇过度激活将会导致细胞增殖异常,胞吞胞吐异常以及细胞转移异常甚至肿瘤发生。由于磷脂酰肌醇信号系统在肿瘤增殖生长及其转移中的重要性,磷脂酰肌醇系统的各个组分很有可能成为好的临床治疗靶点,越来越多针对这一通路的药物逐步走向临床,磷脂酰肌醇3激酶（ PI3 K）抑制剂wortmannin、 LY294002等能够快速靶向PI3K,抑制肿瘤中AKT的磷酸化,阻止其对下游生长信号进行活化。 mTOR抑制剂rapamycin能够靶向mTOR,在非小细胞肺癌、乳腺癌、宫颈癌、肉瘤、淋巴瘤和胶质瘤等癌症中的治疗效果非常明显。除靶向药物外更有膜上的磷脂酰肌醇分布动态监测系统问世,为肿瘤的临床治疗提供新思路。     

Annexin 1抑制BCG诱导的巨噬细胞RAW246.7细胞炎性应答及凋亡

目的建立体外结核分枝杆菌感染巨噬细胞模型,探讨膜联蛋白A1(ANXA1)对卡介苗(BCG)菌株诱导的RAW246.7细胞炎性反应及凋亡的调控作用。方法用BCG感染RAW246.7细胞。用RT-q PCR检测ANXA1、IL-6和TNF-αmRNA表达。Western blot检测ANXA1及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及caspase-3的表达;用MTT检测细胞存活率;用ELISA检测细胞的凋亡率;ELISA试剂盒检测细胞因子IL-6和TNF-α的含量。结果 ANXA1在BCG感染的巨噬细胞RAW246.7中明显下调(P0.05),并呈时间依赖性。ANXA1高表达显著降低BCG刺激诱导的炎性细胞因子IL-6和TNF-α的表达水平(P0.05)。此外,过表达ANXA1明显提高BCG感染的巨噬细胞的存活率(P0.05),并抑制细胞凋亡,通过上调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达同时下调促凋亡蛋白Bax的表达水平(P0.05),并降低caspase-3的蛋白表达量(P0.05)。结论 ANXA1能够抑制BCG刺激诱导巨噬细胞的炎性应答进程及凋亡,为结核病的临床研究和治疗提供了理论基础。     

免疫胶体金检验不孕症患者血清抗心磷脂抗体（ACA）

抗磷脂抗体（antiphospholipid antibody,APA）是一组酸性磷脂的异质性自身抗体的总称,有IgG、IgA、IgM类,靶物质为各种带负电荷的磷脂抗原,包括心磷脂（cardiolipin）、     

抗磷脂抗体对妊娠的影响

自身免疫性疾病或免疫功能异常影响妊娠，在自身免疫疾病中，抗磷脂综合征（antiphospholipid syndrome APS）占了一定比例。本文就抗磷脂抗体的性质进行详细阐述。血栓形成是APS的主要病理基础和突出临床表现，随着研究深入，APA对早孕期滋养细胞的影响越来越受到重视，而APA导致不良妊娠结局的作用机制，目前仍有争论。本文还介绍了APS最新的治疗进展，为今后的APS发病机制研究及临床治疗带来更多的启示。     

维生素D3结合蛋白对人单核细胞的激活作用

本文通过溶血磷脂处理外周血淋巴细胞 (粘附细胞和非粘附细胞 )后加入维生素D3结合蛋白DBP ,37℃、 5 %CO2 孵育 3h ,其上清液超氧阴离子产物浓度明显增高 (P <0 0 1)。未用溶血磷脂处理或不加入DBP ,超氧阴离子产物无明显升高(P >0 5 )。提示溶血磷脂激活巨噬细胞 ,是通过DBP的作用而实现的。单独用溶血磷脂不能激活巨噬细胞 ,因此DBP可能是巨噬细胞激活因子前体。     

含生物功能基团磷脂胆碱的聚乳酸亲水性及细胞亲合性研究

研究用天然来源的甘油磷脂胆碱开环丙交酯获得具有仿生功能的生物降解聚乳酸的亲水性和细胞亲合性.结果表明,由于磷脂胆碱引入到了聚乳酸链段中,其亲水性较纯聚乳酸有了很大的改善;在水环境中聚合物分子结构中的磷脂胆碱官能团有向表面迁移的趋势.用内皮细胞(ECV304)进行的材料浸提液的细胞毒性和材料细胞黏附、增殖实验证明,这种可全降解的、含生物功基团磷脂胆碱的聚乳酸与聚乳酸一样没有细胞毒性,内皮细胞可以在其上面黏附、增殖.因此,它们可以用作为新型的药物载体和组织工程支架材料.     

膜联蛋白A5低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨膜联蛋白A5(ANXA5)低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组、转染试剂对照组和空白对照组,采用脂质体转染法将siRNA转染干扰组HeLa细胞,在转染72h后采用RT-PCR和Western blotting检测各组ANXA5的表达以鉴定抑制效率;细胞划痕实验检测各组HeLa细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组HeLa细胞的侵袭能力;RT-PCR和Western blotting分别检测ANXA5低表达对E-钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA及蛋白表达的影响。结果干扰组ANXA5蛋白及mRNA的表达均明显低于阴性对照组(P0.05);其表达均被显著抑制,干扰组细胞的迁移及侵袭能力比阴性对照组明显增强(P0.05),E-cadherin mRNA及蛋白的表达显著低于阴性对照组(P0.05);干扰组MMP-9mRNA及蛋白的表达均显著高于阴性对照组(P0.05)。结论靶向ANXA5的siRNA可有效抑制ANXA5的表达,且ANXA5低表达可能通过影响E-cadherin和MMP-9的表达来促进HeLa细胞的迁移和侵袭能力。     

改良酶联免疫吸附试验检测抗磷脂抗体及其临床意义

应用改良的酶联免疫吸附试验拾测抗磷脂抗体。该法特异性强,经心磷脂抑制试验,其抑制率达67%,经心磷脂吸附纯化后,各类抗心磷脂抗体(ACL)与相应的抗人IgG、IgA、IgM均无反应,沉淀线消失。该法重复性好,三次重复实验附合率达87%。本文对111例系统性红斑狼疮(SLE)患者检测IgG、IgA、IgM三类抗心磷脂抗体及抗磷脂酰丝氨酸、抗磷脂酰肌醇、抗磷脂酰甘油、抗磷脂酸等五种负电性磷脂抗体,分析其阳性率及该抗体与疾病的相关性。本文发现各种抗磷脂抗体(APL)在SLE的阳性率十分接近,33～45%。但各类抗不同磷脂抗体的阳性率差异较大,5～32%。SLE患者的血栓形成与阳性抗磷脂抗体显著相关,分别是IgG-ACL(P=0.002),IgG-APA(P<0.05),IgG-APG(P<0.05)。抗磷脂抗体的升高还与SLE患者的血小板减少,中枢神经系统病变有关(P<0.05);但异常APL与自发性流产的关系尚无统计学意义。本文还发现抗ds-DNA(Farr试验)的升高和阳性直接Coomb′s试验与升高水平的APL显著相关(P<0.05)。抗心磷脂抗体较其他四种负电性磷脂抗体的阳性率高且敏感。因此ACL可作为临床血栓形成的危险标志性检测。     

膜钙泵分子结构、功能及其调控

Ca~(2+)在胞内的生物功能,主要是作为第二信使,通过各种钙结合蛋白,特别是钙调蛋白(CaM)调节胞内许多酶及有关的功能。Ca~(2+)的生物功能依赖于其跨膜的不均衡分布。一般讲,细胞浆内Ca~(2+)浓度大约为10~(-7)M,而胞外及胞内某些细胞器内(如线粒体、ER、SR体系)Ca~(2+)浓度高达10~(-3)M,正常情况下,细胞必需保持这样高的浓度梯度(图1)。不同的刺激如神经递质、激素、抗原、光、电等可引起Ca~(2+)一阵性流入胞内或触发胞内Ca~(2+)储库释放Ca~(2+)到胞     

Annexin A2在肿瘤发生中的作用研究进展

Annexins是一组钙离子依赖的磷脂结合蛋白。它们参与一系列细胞活动,比如胞吐、胞吞、细胞增殖、分化和凋亡。最早在急性早幼粒细胞白血病中发现Annexin A2高表达,而其家族的另一成员Annexin V与抗磷脂综合征相关,因此提出Annexinopathy的概念。研究发现Annexin A2与其他Annexins不同,具有RNA结合的特性,与DNA合成、复制相关,在肿瘤的发生、浸润和转移中起作用。本文着重阐述Annexin A2在肿瘤中的研究进展。     

黄芪多糖对红斑狼疮小鼠6种抗磷脂抗体的影响

目的 :观察黄芪多糖 (PG2 )对红斑狼疮小鼠抗心磷脂 (anticardiolipin ,aCL)、抗磷脂酰胆碱 (antiphosphatidylcho line ,aPC)、抗磷脂酰丝氨酸 (antiphosphatidylserine,aPS)、抗磷脂酰肌醇 (antiphosphatidylinositol,aPI)、抗磷脂酸 (antiphosphatidicacid ,aPA)和抗磷脂酰乙醇胺 (antiphosphatidylethanolamine ,aPE) 6种自身抗体的影响。方法 :19只雌性NZB×NZWF1小鼠随机分为黄芪I组 (2 5mg kg) 7只 ,黄芪II组 (5 0mg kg) 6只及生理盐水组 (0 2ml d) 6只 ,日一次腹腔注射 ;雌性BXSB及C5 7BL 6小鼠作对照 ,用酶联免疫吸附 (ELISA)法测定各组小鼠的 6种抗磷脂抗体A值进行比较。结果 :NZB×NZWF1小鼠黄芪II组各种抗磷脂抗体A均值比生理盐水组明显降低 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,与BXSB ,C5 7BL 6小鼠比无统计学差异 ;黄芪I组与生理盐水组比有所升高 ;黄芪I组及生理盐水组与BXSB、C5 7BL 6比明显升高 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 :黄芪多糖低剂量有使抗磷脂抗体升高的趋势 ,高剂量可明显抑制抗磷脂抗体的产生     

微颗粒在调节血管功能中的作用及意义

当细胞激活或凋亡．会以“出泡”的方式从细胞膜上脱落微颗粒（microparticles，MP）。MP曾被认为是细胞“垃圾”．只是细胞活化或损伤后的标志。但是，最近的研究显示，MP具有来源细胞的表面膜蛋白和细胞浆成分，表面带有负电荷的磷脂，主要是磷脂酰丝氨酸，有促凝、促炎症和改变血管功能的作用，在血液循环中成为循环细胞和血管细胞相互作用的主要介质。     

膜联蛋白A7低表达对胃癌MGC-803细胞生物学特性的影响

目的 探讨膜联蛋白A7(ANXA7)低表达对人胃癌低分化细胞MGC-803的影响。方法 将细胞分为实验组、阴性对照组和空白对照组。采用RNA干扰技术将靶向ANXA7的siRNA和阴性对照siRNA以脂质体转染法分别转染胃癌细胞系MGC-803细胞, 空白对照组不予任何处理。转染48h后,采用Western blotting 和实时定量-PCR法进行抑制效果的鉴定。检测ANXA7低表达对MGC-803细胞黏附、伸展、剥脱和迁移等生物学行为的影响。 结果 靶向ANXA7的siRNA可显著抑制ANXA7的表达;ANXA7表达受抑后,细胞黏附、伸展和剥脱能力降低,与阴性对照组和空白对照组相比,差异显著（P<0.05）。细胞迁移变化不显著。结论 ANXA7表达降低后MGC-803细胞行为学发生明显改变。