肝纤维化与肝硬化患者肝内CXCL13和CXCL16的表达变化

目的　观察正常人和肝纤维化与肝硬化病人肝组织中趋化因子CXCL13和CXCL16的表达变化。方法　用ELISA方法分别检测9例正常人和10例肝纤维化、11例肝硬化病人肝组织中的CXCL13和CXCL16含量。结果　正常对照组、肝纤维化组、肝硬化组的CXCL13浓度分别为(2.34±2.05)、(6.04±2.97)和(12.10±10.38) ng/g;肝硬化组的浓度显著高于正常对照组和肝纤维化组,正常对照组与肝纤维化组的CXCL13浓度差异无统计学意义。正常对照组、肝纤维化组、肝硬化组的CXCL16浓度分别为(1.32±0.91)、(3.34±1.81)和(3.49±1.90) ng/g;肝硬化组和肝纤维化组浓度均显著高于正常对照组浓度,肝硬化组和肝纤维化组的CXCL16浓度差异无统计学意义。结论　肝脏发生纤维化损伤时,肝脏表达CXCL13和CXCL16的数量都显著增多,但二者的变化规律不同。肝内CXCL13水平在肝纤维化阶段开始升高,至肝硬化阶段升高到显著水平。肝内CXCL16水平在肝纤维化阶段就已经升高到显著水平,至肝硬化阶段仍维持在高水平状态。     

活动期强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞CXCL16 mRNA和CXCL6 mRNA的表达及CXCL16对淋巴细胞增殖的影响

目的 观察活动期强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞CXC型趋化因子配体(CXC tchemokine ligand,CXCL)16和CXCL6的表达情况,探讨CXCL16对淋巴细胞增殖的影响。 方法 选择金华市中医医院2014年1月—2015年12月活动期强直性脊柱炎患者62例作为实验组,健康体检者62例作为对照组。测定血清CXCL16,外周血单个核细胞CXCL16 mRNA和CXCL6 mRNA水平、淋巴细胞增殖、培养上清液中RANKL水平。 结果 实验组患者血清CXCL16水平(2.47±0.97) ng/ml高于对照组(1.87±0.64) ng/ml (t=4.375,P=0.009),实验组CXCL16 mRNA和CXCL6 mRNA相对表达量(0.063±0.004、0.047±0.008)均高于对照组(0.034±0.003、0.020±0.005)(t=5.274、6.252,P=0.003、P<0.001)。在重组蛋白CXCL16作用下,实验组淋巴细胞增值率(169.23%±34.26%)和光密度值(0.038±0.002)均高于对照组(116.45%±23.54%、0.021±0.002)(t=6.847、6.035,均P<0.001),实验组淋巴细胞分泌RANKL水平(1.794±0.315) pmol/L高于对照组(0.957±0.264) pmol/L (t=5.264,P=0.002)。实验组中CXCL16组淋巴细胞p-ERK1/2、p-Raf-1蛋白表达量均高于其他3组(P=0.013、0.017、0.008;0.011、0.012、0.001)。实验组中CXCL16组S期和G₂/M期细胞比例高于其他3组(P=0.021、0.018、0.009;均P<0.001)。 结论 CXCL16及其受体CXCL6可能参与强直性脊柱炎发病,其机制可能与CXCL16促进淋巴细胞增殖有关。      

慢性肝脏疾病中趋化因子CXCL12α与CXCL12β的检测及其意义

目的：探讨慢性肝脏疾病中趋化因子CXCL12α和CXCL12β水平的变化及其临床意义。方法应用实时定量逆转录PCR检测72例肝癌、72例癌旁、20例肝纤维化及8例正常新鲜肝组织标本CXCL12α、12βmRNA的表达;ELISA检测71例慢性肝炎、24例肝硬化、26例肝癌患者及34例健康体检者血清CXCL12α、β的水平。结果肝癌、癌旁及肝纤维化组织中CXCL12αmRNA表达均高于CXCL12βmRNA,肝癌和癌旁组的差异有统计学意义（P=0.02,P 〈0.001）;肝癌、癌旁、肝纤维化组CXCL12α、12βmRNA水平均高于正常组。慢性肝炎、肝硬化、肝癌及正常组血清 CXCL12α水平分别为（497.44±216.54）、（675.17±565.43）、（812.54±446.69）、（282.47±220.78）pg/ml;CX-CL12β水平为（1619.72±730.22）、（1177.12±541.78）、（2487.96±1192.79）、（281.69±217.08）pg/ml;肝炎、肝硬化、肝癌组血清CXCL12α、12β含量均高于正常对照组。肝硬化及肝癌组血清CXCL12α水平明显高于肝炎组（P 〈0.05）;肝硬化组血清CXCL12β含量低于肝炎和肝癌组（P 〈0.05）。在肝炎患者中,随着肝纤维化程度加重（S1~S4期）,血清CX-CL12β含量升高,组间尚无明显差异（P=0.28）;血清CXCL12α水平无显著变化（P =0.686）。结论慢性肝脏疾病进展过程中CXCL12α、12β的表达差异显著,可成为慢性肝病辅助诊断和疾病监测的候选指标。     

人血清趋化因子CXCL8在HBV感染性肝脏疾病中的表达水平及相关性研究

目的：研究趋化因子CXCL8在乙型肝炎病毒性肝炎的发生、发展过程中的数量变化,探讨趋化因子CXCL8与疾病严重程度的相关性。方法：用酶联免疫吸附法检测54例病毒性肝脏疾病的血清趋化因子CXCL8的含量。结果：CXCL8正常对照组、慢性乙型肝炎、肝硬化、肝细胞癌、急性型乙型肝炎的CXCL8含量分别为(4.88±0.67)、(6.45±1.97)、(6.52±1.92)、(7.01±1.86)、(6.44±1.37) μg/L,病例组含量显著高于正常对照组(P<0.05);各病例组间差异无统计学意义,趋化因子CXCL8的含量与病毒的载量相关性不明显。结论：趋化因子CXCL8的表达水平对乙型肝炎的诊断和治疗具有重要的研究价值。     

肝纤维化和肝硬化患者肝内趋化因子CCL25和CX3CL1的表达变化

目的:观察趋化因子CCL25和CX3CL1在正常肝组织和肝纤维化与肝硬化病人肝组织中的表达变化.方法:ELISA法测定9例正常肝组织和10例肝纤维化与11例肝硬化病人肝组织中CCL25和CX3CL1的含量.结果:CCL25在正常肝组、肝纤维化组和肝硬化组的含量分别为(4.06±2.23)、(14.46±4.10)和(21.97±2.98)ng/g.肝硬化组的含量显著高于正常肝组和肝纤维化组,肝纤维化组的含量又显著高于正常肝组.CX3CL1在正常肝组、肝纤维化组和肝硬化组的的含量分别为(4.84±3.72)、(13.72±5.59)和(14.70±3.52)ng/g.肝纤维化组和肝硬化组的含量均显著高于正常肝组,但肝纤维化组与肝硬化组的含量差异无统计学意义.结论:趋化因子CCL25和CX3CL1在人的正常肝组织中有表达,但表达的数量水平较低.肝脏发生纤维增生性损伤时,肝内CCL25和CX3CL1的含量都显著增加,随着病变由肝纤维化向肝硬化阶段发展,肝内CCL25和CX3CL1的含量呈现出不同变化,CCL25表现为进一步升高,CX3CL1表现为在高水平维持.     

不同剂量血府逐瘀汤对动脉粥样硬化小鼠主动脉斑块负荷及CXCL16和MMP-1表达水平的影响

目的:探讨血府逐瘀汤对动脉粥样硬化小鼠主动脉斑块负荷及炎症因子CXCL16、MMP-1表达的影响。方法:APOE基因敲除小鼠高脂饲料喂养8周后,油红O染色证实造模成功。将30只小鼠随机分为血府逐瘀汤高剂量组、低剂量组、对照组。4周后对每组主动脉根部切片的斑块面积进行测定,检测主动脉组织中CXCL16、MMP-1蛋白及mRNA的表达水平。结果:三组小鼠主动脉根部AS斑块平均面积为(0.047±0.019)、(0.073±0.018)、(0.079±0.011)mm^(2),高剂量组斑块面积小于低剂量组(P<0.05),低剂量组斑块面积小于对照组(P>0.05)。三组CXCL16蛋白的相对水平分别为(0.422±0.065)、(0.640±0.070)、(0.849±0.054),差异均有统计学意义(P<0.001)。MMP-1蛋白的相对水平分别为(0.260±0.031)、(0.535±0.050)、(0.736±0.039),差异均有统计学意义(P<0.001)。CXCL16mRNA相对表达水平分别为(0.407±0.023)、(0.725±0.044)、(0.823±0.038),差异均有统计学意义(P<0.001)。MMP-1mRNA相对表达水平分别为(0.392±0.034)、(0.513±0.033)、(0.668±0.046),差异均有统计学意义(P<0.001)。结论:血府逐瘀汤抑制AS小鼠主动脉斑块CXCL16、MMP-1的表达,高剂量干预下可降低斑块负荷。     

趋化因子CXCL10作为肝硬化生物标志物的意义

目的 探讨CXCL10作为一种肝硬化无创生物标志物的潜力及其在肝纤维化进展中的机制。方法 收集2021年3～8月期间昆明医科大学第二附属医院肝硬化患者（n=64）和健康体检者（n=64）EDTAK2抗凝管外周血标本,严格记录患者的基本信息和实验室检查结果。ELISA检测血浆中CXCL10浓度。分析CXCL10表达水平与生化检验结果的关系。用ROC曲线分析血浆CXCL10水平对肝硬化的预测价值。结果 肝硬化患者血浆CXCL10浓度显著高于健康体检者,差异有统计学意义（P <0.000 1）。肝硬化患者血浆CXCL10水平与检验结果如ALT、AST、PT、APTT、DD成正相关关系（P <0.05）。CXCL10的ROC曲线下面积为0.826 4,具有较好的诊断效能。结论 CXCL10可作为肝硬化的一种无创生物标志物,也是肝硬化潜在的治疗靶点。     

长效奥曲肽影响大鼠肝纤维化形成的研究

目的：观察和探讨长效奥曲肽对四氯化碳（CCl4）诱发的大鼠肝纤维化的影响及机制。方法：SD大鼠40只，随机分为正常对照组（n=8）、肝纤维化组（n=16）、长效奥曲肽组（n=16）。通过40％CCL皮下注射（3ml／kg）诱导建立大鼠肝纤维化模型，长效奥曲肽组同时给与长效奥曲肽（善龙，0．8mg／kg）肌肉注射，每28天给药1次。8周后观察大鼠肝脏大体形态、肝脏重量／体重比和组织学改变；用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原N端肽（PⅢNP）含量。结果：正常对照组大鼠肝脏大体形态和组织学无异常改变。肝纤维化组及长效奥曲肽组大鼠肝脏质地变硬，表面明显结节，组织学见肝细胞脂肪变性、坏死、纤维组织增生，假小叶形成等，但后者组织学损害显著轻于前者（P〈0．05）。肝纤维化组及长效奥曲肽组肝脏重量／体重比均明显高于正常对照组（P〈0．01），但长效奥曲肽组低于肝纤维化组（P〈0．05）。正常对照组大鼠血清HA、PIlINP含量分别为（18．5±3．8）ng／ml、（8．2±3．4）ng／ml，肝纤维化组大鼠血清HA、PIIINP含量分别为（179．3±33．5）ng／ml，（59．6±15．6）ng／ml。高于正常对照组（P〈0．01）。长效奥曲肽组大鼠血清HA、PIlINP含量分别为（152．4±36．1）ng／ml，（41．2±13．4）ng／ml，显著高于正常对照组（P〈0．01），但低于肝纤维化组（HAP〈0．05：PⅢNPP〈0．01）。结论：长效奥曲肽能减缓大鼠肝纤维化形成。     

免疫因素在特发性门脉高压症发病机制中的作用

目的：探讨免疫因素在特发性门脉高压症（IPH）发病机制中的作用。方法：采用流式细胞术检测IPH和正常对照组外周血T淋巴细胞亚群和CD19+B细胞，IPH和肝硬化患者及正常对照组血清可溶性TNF α受体 II（ sTNF α r II） 、可溶性血管细胞粘附分子 1（sVCAM 1）的水平及血管细胞粘附分子 1（VCAM 1）在肝脏中的表达。结果：与对照组相比，IPH组CD3+、CD4+、CD8+明显降低(P＜0.05)， CD4+/CD8+明显升高(P＜0.05)，CD19+无差别(P＞0.05)；IPH组血清中sTNF α r II 和sVCAM 1水平明显高于对照组［（38.84±8.38）ng/ml vs （28.14±7.37 ）ng/ml；（44.06±17.28）ng/ml vs （32.18±8.72）ng/ml，P均＜0.05］，与肝硬化组无明显差异［（38.84±8.38）ng/ml vs（36.33±11.06）ng/ml；（44.06±17.28）ng/ml vs（34.78±11.32）ng/ml，P均＞ 0.05］；IPH组sTNF 和sVCAM 1水平呈正相关 (r=0.556, P＜0.05)；VCAM 1在IPH和肝硬化患者的肝脏中均有明显的表达，但IPH患者在汇管区周围表达明显，而肝硬化患者表达散在，正常肝脏则几乎无表达。结论：IPH患者细胞免疫降低，在IPH发生中VCAM 1介导了炎症细胞对肝内门脉损伤，最终导致纤维化，sTNF α r II可独立也可通过上调VCAM 1表达起作用。     

肝病患者血清HA、PCⅢ水平在肝纤维化诊断中的意义

目的　探讨肝病患者血清HA、PCⅢ水平在肝纤维化诊断中的意义。方法　采用放射免疫测定法测定了 316例乙型肝炎及肝硬化患者血清透明质酸和Ⅲ型胶原水平。结果　除急性肝炎组外 ,各组肝病患者HA、PCⅢ水平均高于对照组 ,HA(P <0 .0 5) ,PCⅢ (P <0 .0 1)。以肝硬化组升高最为明显 ,HA达 62 9.56± 2 93.98ng mlPCⅢ达 2 2 1.96± 12 0 .64ng ml。其次为慢性活动性肝炎组及重症肝炎组。将 19例肝硬化、慢活肝患者血清HA、PCⅢ水平与其肝活检组织纤维增生程度进行相关分析 ,发现两者相关显著 (r=0 .75,P<0 .0 1)。结论　HA、PCⅢ能够较好地反映肝纤维增生情况 ,是一个较好的肝纤维化血清学诊断指标。     

Upregulation of TNF-α mRNA in hepatic fibrosis rats induced by dimethylnitrosamine

Objective：To observe the expression level of TNF-α mRNA in rats with hepatic fibrosis induced by dimethylnitrosamine （DMN） and to explore its relationship with collagen metabolism and its diagnostic value for hepatic fibrosis.Methods： Twenty-five male Wistar rats were randomly divided into normal control group （n=10） and model group （n=15）. Model rats were induced by DMN for 4 weeks and at final stage were executed. TNF-α mRNA were detected by RT-PCR and the inflammatory necrosis and collagen deposition in hepatic tissue were observed by HE stain and Sirius red stain. The liver functions were determined by automatic biochemical analytic device. The serum marks of liver fibrosis, such as HA, LN and Ⅳ-C were measured with ELISA and RIA. Results： In this study, the rat model of liver fibrosis induced by DMN was successfully constructed. RT-PCR reveals that TNF-α mRNA expression in control group is lower than that of model group. The liver functions of model group were impaired compared with those of the control group （P〈0.01）. Semi-quantitive analysis revealed that TNF-α/β-actin of normal rats was 0.39±0.12, while 0.93±0.05 of model rats. The concentration of HA （434.44±98.81 vs 252.9±26.59 ng/ml, P〈0.01）, LN （70.67±6.32 vs 37.90±5.97 ng/ml, P〈0.01） and Ⅳ-C （79.39±10.52 vs 21.40±4.17 ng/ml, P〈0.01） were significantly increased in the model group as well. Changes of the indexes were similar to the pathological damage of the liver. Conclusion： The results suggested that activation of TNF-α in liver tissues may be the common pathogenic mechanism of liver fibrosis. TNF-α may be a useful index for the diagnosis of hepatic fibrosis which worthies further investigation.     

An ultrasound scoring system for the diagnosis of liver fibrosis and cirrhosis

ＬｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓｉｓａｃｏｍｍｏｎｐａｔｈｗａｙｔｏｃｉｒｒｈｏｓｉｓａｎｄｈａｓｄｒａｗｎｍｕｃｈａｔｔｅｎｔｉｏｎｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓＩｎｒｏｕｔｉｎｅｈｅｐａｔｏｌｏｇｉｃａｌｐｒａｃｔｉｃｅ,ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｌｉｖｅｒｂｉｏｐｓｙｉｓｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｆｏｒｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇｔｈｅｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｌｉｖｅｒｆｉｂｒｏｓｉｓ1　ａｎｄｆｏｒｇｕｉｄｉｎｇａｎｄｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｔｒｅａｔｍｅｎｔＨｏｗｅｖｅｒ,ｔｈｅｒｅａｒｅａｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏ…     

纤溶酶原激活物抑制剂-1在大鼠肝纤维化模型及自发逆转肝组织中的动态变化及意义

目的 :探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)在肝纤维化发生、发展及消退过程中的表达变化及意义。方法:采用皮下注射四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)方法制备大鼠肝纤维化模型,在注射及停止注射后不同时间,取组织标本,HE和Van Gieson氏(简称VG)染色。明确纤维化分期后,利用免疫组化及RT-PCR方法,观察PAI-1在肝纤维化进程及逆转中表达变化情况。结果:在正常大鼠肝脏中,PAI-1仅在汇管区细胞浆有少量表达;在纤维化肝脏,PAI-1主要分布于肝血窦壁及细胞浆。随着纤维化的进展,PAI-1表达量进行性增加(正常对照组为0.142±0.030,模型组注射CCl42、6和8周组分别为0.361±0.048、0.757±0.068和0.838±0.048);肝纤维化自然消退过程中又逐渐减弱(自发逆转2、4和6周组分别为0.613±0.054、0.524±0.060和0.210±0.044)。RT-PCR检测,模型组注射CCl42、6和8周后,PAI-1 m RNA在肝脏组织中的表达分别是正常肝组织的(6.83±2.60)倍、(12.43±2.65)倍和(26.32±5.17)倍,停止注射CCl4后,在自发逆转2、4和6周时,PAI-1 m RNA在肝脏组织中的表达只是正常肝组织中的(17.86±4.60)倍、(14.62±5.99)倍和(11.21±1.98)倍。结论:PAI-1在肝纤维化进程中持续上调,在肝纤维化逆转过程中表达下调,可能在肝纤维化发生发展中起重要作用。     

血清脂联素与慢性乙型肝炎肝纤维化的相关性研究

目的 探讨血清脂联素(APN)浓度与慢性乙型肝炎肝纤维化的关系.方法 选择我院传染科2013年1月至2015年6月期间收治的63例慢性乙型肝炎肝纤维化患者,根据肝纤维化程度分为轻度组(n=28)、重度组(n=22)、肝硬化组(n=13),并选择30例健康体检者纳入对照组,检测各组受检者的血清APN浓度及透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)和Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)浓度,并比较慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后上述指标水平的变化.结果 血清APN浓度在对照组、轻度组、重度组及肝硬化组分别为(6.41±2.21)μg/mL、(9.46±3.27)μg/mL、(15.11±4.30)μg/mL、(20.54±5.52)μg/mL,两两比较依次上升,血清HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ浓度也依次上升,差异均有统计学意义(P<0.05),且血清APN浓度与肝纤维化分级之间存在正相关性(P<0.05);肝纤维化患者抗病毒治疗后血清APN及HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ均明显降低,与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 脂联素与慢性乙型肝炎肝纤维化的发生、发展关系密切,血清脂联素浓度可反映肝纤维化的程度及抗病毒治疗后肝纤维化的改善程度.     

实验性肝纤维化过程中基质分解素-1酶原的表达变化

目的：研究实验性肝纤维化过程中基质分解素-1(MMP-3)酶原蛋白表达的动态变化。方法：建立四氯化碳中毒性大鼠肝纤维化模型，采用半定量Western免疫印迹方法，对肝纤维化不同阶段肝内MMP-3的酶原蛋白的表达水平进行了检测。结果：在正常大鼠肝组织中有MMP-3的酶原表达。在肝纤维化发生发展过程中MMP-3酶原蛋白表达水平逐渐增强，至肝纤维化中期到达最高峰，到肝纤维化晚期及肝硬化阶段其表达较中期下降，但仍高于正常对照水平。结论：MMP-3在肝纤维化的发生、发展直至肝硬化形成过程中可能发挥着重要作用。