清肝浸膏对实验性肝损伤模型细胞因子水平的影响

目的研究清肝浸膏对实验性肝损伤模型细胞因子水平的影响。方法采用D-氨基半乳糖(D-GalN)诱导大鼠的急性肝损伤模型,用卡介苗联合脂多糖(BCG LPS)诱导小鼠的免疫性肝损伤模型,观察清肝浸膏不同剂量组对血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-8(IL-8)和白介素-18(IL-18)活性的影响。结果清肝浸膏能明显降低肝损伤模型的转氨酶水平,并能降低D-氨基半乳糖所致急性肝损伤模型大鼠血清中的TNF-α、IL-1β、IL-8含量(P<0.01),也能明显降低BCG LPS诱导的免疫性肝损伤模型小鼠血清中的TNF-α、IL-18含量(P<0.01)。结论清肝浸膏对实验性肝损伤模型有一定的保护作用,其保护作用的机制可能和降低细胞因子的水平有关。     

五味子醇甲对KC介导的肝纤维化抑制作用的初步研究

目的:观察五味子醇甲(SCH)对肝纤维化大鼠枯否细胞(KC)释放活性介质的影响.方法:分离、纯化大鼠KC细胞并建立脂多糖(LPS)诱导KC细胞释放细胞因子(TNF-α,IL-6,IL-8)模型;制备及采用I<'125>放射免疫法分别测定正常对照组、LPS模型组及SCH治疗组的细胞因子水平;酶谱法检测细胞培养上清谷草转氨酶(AST),谷丙转氨酶(ALT)的变化.结果:SCH治疗组可抑制KC细胞分泌TNF-α(21.2±6.3),IL-6(0.17±0.01),IL-8(0.8±0.1)等细胞因子(P<0.05).结论:SCH甲具有治疗肝纤维化的作用.     

中药复方降酶合剂对大鼠肝脏细胞因子调节的实验研究

目的研究中药复方制剂降酶合剂对Ｄ－氨基半乳糖所致动物急性肝损伤的保护作用,和对内毒素（ＬＰＳ）刺激后肝 枯否细胞（ＫＣ）分泌ＩＬ－６、ＩＬ－８和ＴＮＦ－а的调节作用。方法　复制大鼠Ｄ－氨基半乳精致急性肝损伤模型,制备ＳＤ大鼠 降酶合剂和联苯双酯的含药血清。以ＬＰＳ和含药血清刺激ＳＤ大鼠体外培养ＫＣ,采用ＥＬＩＳＡ夹心法检测ＩＬ－６、ＩＬ－８和 ＴＮＦ－ａ水平。结果Ｄ－氨基半乳糖所致急性肝损伤模型转氨酶和细胞因子分泌水平明显增高,中药降酶合剂可以降低转 氨酶和调节细胞因子分泌水平。培养细胞在加入ＬＰＳ刺激后,上清中ＩＬ－６、ＩＬ－８和ＴＮＦ－а浓度明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。 而在加入降酶合剂后,上清中的ＩＬ－６、ＩＬ－８和ＴＮＦ－а水平明显下降（Ｐ＜０．０１）。结论降酶合剂降低ＡＬＴ的作用可能与 其通过对机体免疫功能的调节,降低ＩＬ－６、ＩＬ－８和ＴＮＦ－ａ等细胞因子的产生有着密切的关系。     

生脉散对急性肝衰竭大鼠内毒素诱导细胞因子水平的影响

目的探讨生脉散在不同时间点对急性肝衰竭大鼠内毒素（脂多糖,LPS）诱导细胞因子水平的影响。方法D-氨基半乳糖腹腔注射建立大鼠急性肝衰竭模型,拟用LPS攻击建立肝衰竭内毒素血症模型。用生脉散治疗与对照组比较。取造模后2h及8h两个时间点,检测大鼠血清LPS与细胞因子如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、细胞间黏附分子-1（ICAM—1）、一氧化氮（NO）、诱导型一氧化氮舍酶（iNOS）和总一氧化氮合酶（zNOS）水平。结果2h后生脉散可减低急性肝衰竭内毒素血症大鼠血清LPS、TNF—α、IL-1β、IL-6、ICAM-1和NO水平,差异有统计学意义（P〈0．05）;8h后生脉散可减低急性肝衰竭内毒素血症大鼠血清LPS、TNF—α、IL-1β和ICAM—1水平,差异有统计学意义（P〈0．001）。结论急性肝衰竭状态下,可存在不同程度的内毒素血症,并引起细胞因子水平变化的炎症级联反应,生脉散通过调节细胞因子水平起到治疗作用。     

杀菌-通透性增强蛋白对分泌性中耳炎大鼠中耳黏膜TNF-α和IL-6表达的影响

目的：探讨杀菌-通透性增强蛋白（BPI）对分泌性中耳炎（OME）大鼠中耳黏膜TNF-α和IL-6 mRNA及蛋白表达的影响和意义。 方法：采用大鼠中耳腔注射脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）制备OME模型,动物分为LPS实验组和BPI治疗组。利用ELISA和RT-PCR方法检测中耳黏膜组织TNF-α和IL-6 mRNA及其蛋白的表达。结果：LPS实验组和BPI治疗组在第1、2天均有IL-6的表达,但LPS组表达量高于BPI组（P<0.05）。在第7天后两组均无表达;而TNF-α的表达贯穿于两组实验的始终,但LPS组表达量高于BPI组（P<0.05）。结论：IL-6和TNF-α在中耳炎病变的形成中起作用;BPI通过抑制细胞因子表达和分泌,减轻炎症刺激;BPI是一个潜在的治疗OME 的有效药物,可能预防慢性OME的发生。     

D-半乳糖胺和脂多糖介导大鼠急性肝衰竭的机理研究

目的研究D-半乳糖胺和脂多糖导致大鼠急性肝衰竭的发病机理。方法8周龄雄性SD大鼠,使用D-半乳糖胺(D-GalN,1250mg/kg)和脂多糖(LPS,200μg/kg)腹腔注射建立急性肝衰竭模型,并研究肝衰竭大鼠血清和肝匀浆的各种生化指标及肝组织的病理学改变。结果使用1250mg/kg的D-GalN和200μg/kg的LPS腹腔注射能够导致大鼠出现急性致死性的肝损伤,大鼠血清中TNF-α、IL-1β显著升高;大鼠肝组织中GSH、GR和SOD降低,MDA、NO、T-NOS和iNOS升高;与正常大鼠的肝匀浆蛋白分离图相比,肝衰竭大鼠肝匀浆蛋白的1峰升高较明显,5峰、6峰降低较明显。结论使用1250mg/kg的D-GalN和200μg/kg的LPS腹腔注射能够制备急性肝衰竭大鼠模型,其发病机理可能与D-GalN和LPS能够促进炎症细胞因子TNF-α、IL-1等大量的产生,促进机体过度的氧化反应及氧化产物的产生,导致肝组织中某些分子量范围内蛋白的增加及另外一些分子量范围内蛋白的减少有关。     

青蒿琥酯对大鼠肝Kupffer细胞分泌肝纤维化相关细胞因子的影响

目的探讨青蒿琥酯对大鼠肝巨噬(Kupffer)细胞分泌致炎细胞因子的影响。方法 CCl4皮下注射SD大鼠进行肝纤维化造模,Percoll密度梯度离心法分离纯化大鼠肝Kupffer细胞,ELISA检测不同浓度青蒿琥酯处理LPS刺激的大鼠肝Kupffer细胞分泌致炎细胞因子TNF-α、TGF-β1和IL-6的变化。结果造模12周后,模型组大鼠出现明显的肝纤维化,Percoll密度梯度离心纯化后的大鼠肝Kupffer细胞在LPS刺激后TNF-α、TGF-β1和IL-6的表达量在模型组较对照组显著增加(P<0.05)。0μmol/L、125μmol/L、175μmol/L、225μmol/L 4个浓度的青蒿琥酯处理后,模型组较对照组致炎细胞因子TNF-α、TGF-β1和IL-6的表达量显著下调,并且175μmol/L为最佳抑制浓度(P<0.05)。结论青蒿琥酯可以抑制大鼠肝Kupffer细胞分泌致炎细胞因子     

青天葵注射液对内毒素诱导急性肺损伤大鼠炎症细胞因子调控的影响

【目的】观察青天葵注射液对内毒素(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠炎症细胞因子分泌水平的调控作用,探讨其干预机制。【方法】将大鼠随机分为正常组、模型组、参麦组、青天葵组,采用LPS刺激J774巨噬细胞和舌底静脉注射LPS法复制ALI模型,通过电子显微镜和双抗夹心酶联免疫吸附(ELISA)法,观察各组对J774细胞增殖、炎症因子分泌的影响,以及对ALI模型大鼠炎症细胞因子的影响。【结果】LPS刺激J774巨噬细胞大量增殖、炎症因子分泌失衡,大鼠舌底静脉注射LPS诱导肺部炎症反应失控。青天葵及参麦注射液可抑制J774巨噬细胞的增殖。青天葵注射液能显著抑制细胞上清液和大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的表达水平(P0.05或P0.01),增加细胞上清液IL-10的含量(P0.01),使ALI大鼠血清IL-10的含量降低(P0.05),但不能调控单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的表达(P0.05)。【结论】青天葵注射液可能通过抑制TNF-α、IL-6的过量表达,发挥炎症调控效应,减轻肺损伤,对ALI具有一定的防治作用。     

急性肝功能衰竭大鼠肝组织细胞因子信号转导抑制因子及肝细胞凋亡的动态变化

目的 建立急性肝功能衰竭（ALF）大鼠模型,观察其细胞因子信号转导抑制因子（SOCS）在肝组织中的表达及肝细胞凋亡的动态变化.方法 将雄性SD大鼠经腹腔注射D-胺基半乳糖（D-GaIN）800 mg/kg和LPS 8 μ g/只建立急性肝功能衰竭大鼠模型（模型组）,并设正常对照组,模型组分别于注射D-GaIN/LPS后2、6、12、24、48h时留取大鼠血及肝脏标本;同时采用免疫组化法检测大鼠肝组织中SOCS-1和SOCS-3蛋白表达;ELISA法测定血清TNF-α、tFN-γ水平;TUNEL法检测原位细胞凋亡.结果 模型组大鼠各时点的血清TNF-α、IFN-γ水平均较对照组增高（均P〈0.01）,且均于造模后6h时达峰值,后逐渐降低;模型组大鼠造模后6、12、24、48h时肝组织凋亡指数均高于对照组（均P〈0.05）;模型组大鼠各时点的肝组织SOCS-1和SOCS-3蛋白表达水平均较对照组明显增高（均P〈0.01）.且均于12 h达峰值,后逐渐降低.结论 急性肝功能衰竭可诱导体内SOCS表达上调,其改变可能与TNF-α、IFN-γ水平的变化及肝细胞凋亡密切相关,提示SOCS可能在急性肝功能衰竭的病理过程起重要作用.     

粒细胞集落刺激因子对小鼠急性肝衰竭的保护作用

目的：观察重组人粒细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte colony stimulating factor;rhG-CSF）对D-氨基半乳糖（D-galactosamine,D-GaIN）加脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）联合诱导的小鼠急性肝衰竭的保护作用,并探讨其机制。方法：D-GAIN／LPS腹腔联合注射制造小鼠急性肝衰竭模型,治疗组小鼠于造模前4h,2h及造模同时予以G-CSF300μg／kg腹腔注射,观察小鼠24h存活率。造模后6h每组随机选择5只小鼠处死,观察肝组织损伤情况,用半定量逆转录一聚合酶链反应和TanonGis3、73软件分析各组小鼠肝组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）、白介素-6（IL-6）和白介素-10（IL-10）的表达情况。结果：治疗组小鼠24h存活率明显高于对照组（P〈0.01）,造模后6h治疗组小鼠肝组织损伤明显减轻（P〈0．05）,肝组织中7YvF-α和IFN-γ的mRNA表达水平明显低于对照组（P〈0．01）,IL-6和IL-10的mRNA表达水平明显高于对照组（P〈0．01）。结论：G-CSF对D-GalN／LPS所致的小鼠急性肝衰竭具有保护作用。     

三七对酒精性肝病大鼠肝脏细胞因子的影响

目的观察三七对酒精性肝病大鼠肝组织TNF-α、Leptin、IL-6、IL-8等因子的影响,探讨其抗酒精性肝病的作用机制。方法 70只雄性SD大鼠随机分为模型组、三七低剂量组、三七高剂量组和硫普罗宁组各15只及正常组10只,模型组大鼠灌服白酒-玉米油-吡唑混合液14周建立酒精性肝病模型,三七低、高剂量组和硫普罗宁组大鼠在造模的同时予以相应的药物干预,正常组以蒸馏水代替,连续14周;酶联免疫法和放射免疫法检测肝组织中TNF-α、Leptin、IL-6及IL-8等细胞因子的含量。结果模型组大鼠肝组织TNF-α、Leptin、IL-6及IL-8含量较正常组明显升高(P<0.01),应用不同剂量三七及硫普罗宁干预后肝组织TNF-α、Leptin、IL-6及L-8含量较模型组明显降低(P<0.05)。结论三七防治大鼠酒精性肝病的机制可能与降低ALD大鼠肝组织TNF-α、Leptin、IL-6及IL-8等细胞因子的水平有关。     

金丹肝泰1号对大鼠急性肝损伤防治作用的实验研究

用D-氨基半乳糖（D-GaIN）制备大鼠急性肝损伤模型。方法：检测血清丙氨酸氨基转氨酶（ALT）和血清天门冬氨酸氨基转氨酶（AST）的活性，观察光镜下肝组织的病理学改变，探讨对急性肝损伤的保护作用。结果：口服浸膏可显降低急性肝损伤大鼠血清ALT和AST水平，减轻肝细胞的变性坏死，其作用强度与肝炎宁相当，但弱于联苯双酯。     

不同因素致急性肺损伤大鼠TNF-α、IL-6的释放水平及地塞米松的影响

目的 探讨TNF-α和IL-6在急性肺损伤中（ALI）的作用和地塞米松的治疗意义。方法 本实验通过静脉注射内毒素（LPS）和盲肠结扎穿孔（CLP）复制大鼠ALI模型,观察在这两种ALI模型早期,动脉血氧分压(PaO2)和肺湿干重比率（W/D）、血浆促炎症细胞因子TNF-α、IL-6的变化,以及地塞米松干预的影响。结果 （1）在LPS刺激12h和CLP24h大鼠PaO2均显著降低。W/D显著增加,在同一时相LPS组损伤较CLP组重;地塞米松能减轻两组ALI模型大鼠PaO2的降低和W/D的增加。（2）两种模型大鼠血浆中TNF-α的含量先迅速增加,后逐渐降低,IL-6的浓度逐渐增加;LPS组TNF-α的峰值浓度出现较CLP组早,IL-6的浓度高于CIP组;地塞米松能显著降低两组模型中TNF-α的峰值浓度和IL-6浓度的增加。结论 血浆TNF-α峰值浓度出现的早晚和IL-6浓度的水平可能反映损伤的严重程度。糖皮质激素对LPS刺激和CLP大鼠ALI有保护作用,可能在ALI早期有治疗应用价值。     

桦褐孔菌多糖对脂多糖刺激小鼠巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响

[目的]观察桦褐孔菌多糖对脂多糖(LPS)刺激小鼠巨噬细胞株Raw264.7细胞与小鼠腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响.[方法]利用桦褐孔菌多糖(40mg/L)处理被LPS(100μg/L)刺激的Raw264.7细胞株和小鼠腹腔巨噬细胞,采用半定量RT-PCR方法测定促炎性细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1βmRNA的表达;采用ELISA法测定TNF-α和IL-1β水平.[结果]与给予LPS刺激相比较,给予桦褐孔菌多糖和LPS同时刺激的Raw264.7细胞株和小鼠腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子TNF-α和IL-1βmRNA表达水平均明显降低(P<0.05);给予桦褐孔菌多糖和LPS同时刺激的Raw264.7细胞株在48 h后与只给予LPS刺激相比较,细胞所分泌的促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β水平均明显下降(P<0.05).[结论]桦褐孔菌多糖对LPS刺激Raw264.7细胞株和小鼠腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子TNF-α和IL-1βmRNA表达水平及Raw264.7细胞株促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的分泌均有抑制作用.     

MSP对COPD大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激和细胞因子产生的影响

目的 探讨巨噬细胞刺激蛋白(MSP)对COPD大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激和细胞因子产生的影响.方法 培养正常和COPD大鼠肺泡巨噬细胞,予不同浓度MSP干预,采用酶联免疫法检测细胞上清液中细胞因子TNF-α、IL-8、IL-1β和IL-10的浓度,比色法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平.结果 经MSP处理后,正常大鼠和COPD大鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-8、IL-1β和IL-10呈浓度依赖性增加,而COPD大鼠肺泡巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-8和IL-1β浓度较正常大鼠增加更显著.MSP呈浓度依赖性刺激正常和COPD大鼠肺泡巨噬细胞分泌MDA增加,抑制其SOD的产生,而COPD大鼠肺泡巨噬细胞上清液中SOD水平较正常大鼠降低更加明显.结论 MSP能显著增加COPD大鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-8和IL-1β,抑制其产生SOD.提示MSP在COPD的发病机制中可能起重要作用.     

细菌内毒素对人工关节磨损钛微粒诱导巨噬细胞释放破骨细胞因子的影响

目的:探讨细菌内毒素(LPS)对人工关节磨损钛微粒诱导巨噬细胞释放破骨性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)和前列腺素(PGE2)的作用。方法:巨噬细胞分别与清洁钛微粒、LPS结合钛微粒、LPS联合培养,相应分为4组:清洁钛微粒组,LPS结合钛微粒组,LPS组及对照组。各组在1,2,3,4,6,8,10,12,16,20,24h时点分别取细胞培养上清液,用酶联免疫吸附法(ELISA)技术检测TNF-α、IL-1、IL-6、PGE2含量。结果:LPS组和LPS结合钛微粒组巨噬细胞在各相应时点较对照组和清洁钛微粒组分泌TNF-α、IL-1、IL-6和PGE2显著增高(P<0.01)。LPS组1-4h内巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1、IL-6和PGE2迅速增加,并在随后24h维持在较高水平。LPS结合钛微粒组巨噬细胞释放TNF-α、IL-1、IL-6和PGE2缓慢逐步增高。LPS组和LPS结合钛微粒组巨噬细胞分泌TNF-α量比清洁钛微粒组高约一个数量级。LPS组巨噬细胞分泌TNF-α较LPS结合钛微粒组高1-3倍。清洁钛颗粒组较对照组IL-1、IL-6和PGE2分泌量无差异。结论:LPS具有强大的诱导巨噬细胞分泌破骨性细胞因子的作用。钛微粒与LPS结合后,延缓了LPS对巨噬细胞的刺激。LPS与清洁磨损钛微粒在人工关节假体周围溶骨中可能具有不同的作用机制。     

D-氨基半乳糖/内毒素诱导的急性肝衰竭与Th1/Th2失衡

目的:研究Th1/Th2失衡与D-氨基半乳糖/内毒素所致大鼠急性肝衰竭的关系.方法:30只Wistar大鼠腹腔内注射D-氨基半乳糖/内毒素诱导大鼠急性肝衰竭模型(AHF组),另取30只腹腔内注射等量生理盐水为正常对照(N组).两组动物于建模后3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h各取5只动物检测其血清丙氨酸转氨酶(ALT)与肝组织的病理形态学变化;ELISA检测不同时间点动物血清中Th1/Th2型细胞因子(IFN-γ/IL-4)水平的变化.结果:AHF组肝组织显示炎细胞浸润和明显坏死的急性肝衰竭特征,且各时间点血清ALT值均明显高于N组(P＜0.05);AHF组与N组相比血清内Th1型细胞因子(IFN-γ)的增高在3 h(P＜0.01)、6 h(P＜0.01);Th2型细胞因子(IL-4)水平在各时间点无明显变化(P＞0.05).结论:在D-氨基半乳糖/内毒素所致大鼠急性肝衰竭模型中,存在Th1/Th2失衡,机体内发生了促炎反应,对此急性肝衰竭早期损伤起重要作用.     

实验性急性肝衰竭大鼠血清中TNF-α的来源及水平变化

目的研究D-氨基半乳糖／内毒素所致大鼠急性肝衰竭模型中血清内TNF-α的来源及不同时间点的水平变化。方法取30只Wistar大鼠腹腔内注射D-氨基半乳糖／内毒素诱导大鼠急性肝衰竭模型（AHF组，n=30），于建模3h、6h、12h、24h、48h、72h各取5只动物检测其血清丙氨酸转氨酶（ALT）与肝组织的病理形态学变化；采用ELISA检测不同时间点动物血清中TNF-α水平的变化；通过免疫组化法检测不同时间点动物肝、肺组织内TNF-α的表达。另取30只Wistar大鼠腹腔内注射等量生理盐水为正常对照（N组，n=30）。结果AHF组各时间点血清ALT的增高与N组相比有统计学差异（P〈0．05），肝脏内炎细胞浸润、坏死明显；AHF组与N组相比血清内TNF-α的增高在3h（P〈0．01）、6h（P〈0．05）有统计学差异；AHF组肺组织与N组相比TNF-α的表达在3h、6h、12h（均为P〈0．01）有统计学差异。结论本实验成功建立了大鼠AHF模型；TNF-α在此模型的早期阶段起重要作用；肺脏可能是血清内TNF-α的主要来源之一。     

五灵胶囊对LPS诱导枯否细胞释放细胞因子的影响

目的:探讨五灵胶囊对枯否细胞(Kupffer cells, KC)释放细胞因子介导肝细胞(hepatocellular cells, HC)损伤的作用. 方法:分离并纯化HC与KC并建立LPS及D-GlaN损伤肝细胞模型,观察五灵胶囊对2种损伤模型的作用以及对LPS诱导KC释放细胞因子介导肝细胞损伤的作用. 结果:五灵胶囊2个剂量能有效地阻滞LPS,D-GlaN损伤肝细胞以及降低LPS诱导KC释放TNF-α,IL-6,IL-8水平,抑制KC释放细胞因子损伤肝细胞. 结论:五灵胶囊遏制KC大量释放细胞因子是治疗慢性肝炎作用机制之一.