肿瘤坏死因子-α诱导核转录因子-κB信号通路在肺纤维化分子机制中作用

尘肺是以肺组织弥漫性纤维化为主的全身性疾病,由职业活动中长期吸人生产性粉尘后在肺内潴留而引起[1].其临床表现主要有咳嗽、咯痰、胸痛、胸闷和气短等,易合并呼吸道感染、慢性支气管炎、肺心病等,最终因呼吸衰竭、心力衰竭而危及生命[2].目前对肺纤维化的研究已进入细胞、细胞因子和信号转导通路等领域.通过参与调控肺纤维化的细胞因子、效应分子,特别是干预介导肺纤维化的重要信号转导分子,将为肺纤维化的治疗提供新的策略和方法.近年来对肿瘤坏死因子(TNF)-α和核转录因子-KB (NF-κB)在尘肺发病过程中作用的研究较为深入.本文就TNF-α和NF-κB在肺纤维化形成中的作用进行综述.     

镧对仔鼠海马核转录因子-κB表达影响

目的探讨亚慢性氯化镧(La Cl3)暴露对子代大鼠海马组织核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法健康成年雌性Wistar大鼠24只,随机分为对照组及0.25%、0.5%、1.0%La Cl3组,染镧组仔鼠自雌鼠受孕至断乳后1个月通过自由饮水摄入镧;利用免疫组化法检测海马p-IKKα/β的分布和表达;应用Western blot法检测海马组织p-IκBα和p-NF-κBP65的表达。结果 0.25%、0.5%、1.0%La Cl3组仔鼠海马CA1区p-IKKα/β表达分别为(54.72±10.04)、(40.73±4.90)、(32.99±5.42),CA3区表达分别为(64.80±8.27)、(47.78±4.92)、(36.17±7.71),DG区表达分别为(303.67±34.78)、(166.83±29.8)、(87.01±17.40);CA1、CA3、DG区各染镧组仔鼠海马3区的p-IKKα/β表达与对照组比较,除DG区0.25%La Cl3组外其他各染镧组仔鼠海马p-IKKα/β表达均低于对照组(P<0.05);0.25%、0.5%、1.0%La Cl3组仔鼠海马p-IκBα和p-NF-κBp65蛋白表达IDV值分别为(0.58±0.06)和(0.46±0.06)、(0.49±0.07)和(0.36±0.08)、(0.36±0.09)和(0.25±0.08),均低于对照组的(0.68±0.05)和(0.56±0.08)(P<0.05),仔鼠海马p-IκBα和p-NF-κBp65蛋白表达均与La Cl3染毒剂量呈负相关(r=-0.994、-0.978,P<0.05)。结论亚慢性La C13染毒可引起子代大鼠海马细胞NF-κB活性降低,可能是镧引起学习记忆能力下降的机制之一。     

矽肺患者外周血的单核细胞核转录因子-κB水平

目的观察矽尘接触者和矽肺患者外周血单核细胞核转录因子-κB(NF-κB)水平的变化,探讨NF-κB在矽肺发生发展中的作用。方法采用ELISA法对100名不接触粉尘的对照人群,200名接触矽尘1年以上的接尘工人,32名矽尘作业观察对象(原诊断0+患者)及79例矽肺患者,检测其外周血单核细胞胞核蛋白中的NF-κB水平。结果矽肺组NF-κB水平较对照组和接尘组明显升高,接尘组NF-κB水平较对照组明显升高,差异均有统计学意义;在不同期别矽肺患者中NF-κB水平随矽肺期别升高也有升高的趋势。多元回归分析也表明NF-κB水平与接尘情况和矽肺的病情有关。结论接尘组和矽肺组外周血单核细胞NF-κB均有升高,此种升高除与矽肺的发病有关外,与矽肺的严重程度也有关,提示对外周血单核细胞NF-κB水平的监测可能成为矽肺发病预测、预后评估的生物标志物,而适当干预NF-κB的活化可能是矽肺防治新的干预靶点。     

全身炎症反应综合征患儿核因子-κB活化及IL-6合成的检测

目的探讨全身炎症反应综合征核因子-κB3活化及IL-6合成的情况。方法用中性粒细胞核因子-κB活性测定法、血清免疫因子IL-6放射免疫浓度测定法测定30例全身炎症反应综合征患儿及30例正常人组中性粒细胞核因子-κB活性、血清免疫因子IL-6放射免疫浓度。结果全身炎症反应综合征患儿核因子-κB活化及IL-6合成增加。结论患儿发生全身炎症反应综合征时存在核因子-κB活性及IL-6合成的变化。     

迁移率改变法检测核转录因子-κB实验参数的建立

目的建立迁移率改变法检测核转录因子-κB实验参数,为准确检测核转录因子-κB奠定基础。方法分子探针标记,细胞的分离、培养和核转录因子的提取,NF-κB聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果实验条件为300V,电泳18分钟后,对分子探针活性没有影响,分子探针与核转录因子结合特异性良好,电泳条带清晰。结论本文建立的方法省时、简便,敏感性高、特异性强。     

核因子-κB在胚胎发育、毒物致畸中研究进展

胚胎及胚胎微环境的细胞因子对于维持正常妊娠很重要,其精细调控细胞的增殖、分化和凋亡.核转录因子-κB是调节凋亡的关键因子,通过对多种基因表达的调节,对妊娠的维持,胚胎发育有重要作用.该文对核转录因子-κB家族的基本组成结构和核转录因子-κB在胚胎发育及毒物致畸中的作用作以综述.     

核因子-κB抑制剂调控癌性恶病质的实验研究

目的:本研究旨在评价核因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对C26恶病质小鼠炎性细胞因子的合成及对恶病质的调控作用.方法:采用雄性BALB/c小鼠皮下接种C26结肠癌细胞诱导恶病质模型,每天监测小鼠食物摄入量、体质量及肿瘤体积.于接种肿瘤后第7天开始,每天给予荷瘤鼠腹腔内注射等渗盐水及不同剂量的PDTC(10、50 及100 mg/kg),第16天处死小鼠,检测血生化指标、血清及肿瘤组织中IL-6水平,肿瘤组织NF-κB活性.结果:荷瘤组小鼠出现明显的组织消耗,第16天去瘤体质量为正常小鼠的71.3% (P＜0.01);腓肠肌及附睾脂肪重量分别减少42.4%和70.4% (P＜0.01);血清清蛋白、葡萄糖及三酰甘油水平显著下降(P＜0.01);血清及肿瘤组织IL-6水平显著升高(P＜0.01).PDTC呈剂量依赖性地抑制肿瘤组织NF-κB激活,抑制肿瘤组织IL-6的合成,抑制了去瘤体质量、腓肠肌及附睾脂肪的消耗,改善了恶病质.PDTC 100 mg/kg明显抑制肿瘤生长(P＜0.05).各组间食物摄入量无明显统计学差异.结论:PDTC通过抑制肿瘤组织NF-κB的激活,抑制炎性细胞因子的合成,从而改善了恶病质.     

PM2.5对变应性鼻炎大鼠NF-κB信号通路的影响

目的 探究大气PM2.5对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)大鼠核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路的影响.方法 将40只SPF级雄性Wistar大鼠分为对照组、AR组、AR+PM2.5组和四氢化吡咯二硫代甲酸铵(pyrrolidin-edithioc...     

活性氧对核因子-κB和低氧诱导因子-1的调控

氧是需氧生物必不可少的基本物质.需氧细胞在代谢过程中产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS),不仅参与细胞的凋亡、坏死;还作为信号分子,参与细胞信号转导、激活转录因子、影响基因表达,以协调应答各种氧分压变化.     

雌马酚通过抑制核转录因子-κB表达水平诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡

目的研究雌马酚对雌激素受体表达阴性的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的作用。方法用MTT法测定雌马酚干预对MDA-MB-231细胞活力的影响;光学显微镜观察雌马酚对细胞形态的影响;流式细胞术及免疫细胞化学法检测雌马酚对细胞凋亡的作用。结果雌马酚可以抑制MDA-MB-231细胞的活力(P<0.05)。雌马酚可抑制NF-κB的表达而诱导细胞凋亡。结论雌马酚可通过降低NF-κB的表达诱导MDA-MB-231凋亡。     

熊去氧胆酸对妊娠期肝内胆汁淤积症患者临床疗效妊娠结局核转录因子-κB白细胞介素-17及Toll样受体4的影响

目的 探讨熊去氧胆酸对妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者临床疗效、妊娠结局、核转录因子-κB(NF-κB)、白细胞介素(IL-17)及Toll样受体4(TLR4)的影响.方法 选择2018年4月-2020年2月于该院收治的ICP患者92例作为研究对象,按照随机抽签方法分为对照组和观察组各46例.其中对照组行腺苷蛋氨酸治...     

核转录因子κB的结构功能及在DNA损伤修复中作用的研究进展

核转录因子κB(NF-κB)是一类关键性的核转录因子,通常以同源或异源二聚体非活性形式存在于几乎所有类型细胞的胞质,具有十分重要的功能。在胞外刺激信号作用下,NF-κB从细胞质转位于细胞核,与NF-κB反应性基因的κB位点结合并调控众多靶基因的转录表达而参与机体的免疫、炎症、细胞增殖与凋亡及肿瘤发生等许多生理学过程。本文将对NF-κB的结构功能及其在DNA损伤研究中作用的研究进展阐述如下。1NF-κB结构、功能及国内外研究现状1.1NF-κB结构NF-κB是SEN等[1]1986年在B细胞中发现的一种能和免疫球蛋白κ轻链基因的增强子序列…     

血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-17水平检测对儿童病毒性脑炎的临床意义

目的探讨血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-17水平检测对儿童病毒性脑炎的临床意义。方法随机选取本院2013年1月—2015年11月期间收治的轻症病毒性脑炎组60例、重症病毒性脑炎组60例,以及60例健康儿童组(保健科体检),对其进行血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-17的水平检测,并采用SPSS18.0对数据进行分析处理。组间均数比较采用方差分析、方差齐性检验,再进行组间两两比较,P0.05为差异有统计学意义。结果重症病毒性脑炎组血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-17水平显著高于轻症病毒性脑炎组及健康对照组,对比差异均有统计学意义(均P0.05),重症病毒性脑炎组危重症评分越低,血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-17水平越高,对比差异均有统计学意义(均P0.05)。结论血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-17与小儿病毒性脑炎的病理过程密切相关,与病情危重程度相关,对病情判断及评估预后有一定参考意义。     

丙烯腈对大鼠脑组织和神经胶质细胞中核因子-κB信号传导通路活性及相关基因表达的影响

目的丙烯腈(ACN)对大鼠脑组织和大鼠神经胶质细胞中核因子κB(NF-κB)信号传导通路活性及相关基因表达的影响。方法利用micorarray和EMSA实验测定了SD大鼠经0和200mg/kg ACN分别作用14、28和90天后,大鼠脑组织NF-κB信号传导通路活性的变化及相关基因表达的变化;大鼠神经胶质细胞经0、25、50和75μg/ml ACN作用4和24h后细胞NF-κB信号传导通路活性的变化及相关基因表达的变化。结果ACN促进大鼠脑组织(体内)和神经胶质细胞(体外)NF-κB信号传导通路相关基因(NIK、IKK、NF-κB1、NF-κB2、IκBa和c-myc)的表达。EMSA实验也进一步证实了ACN可激活大鼠脑组织和大鼠神经胶质细胞中NF-κB信号传导通路。结论ACN诱导的氧化应激和ACN激活NF-κB信号传导通路具有一定的关系。     

肿瘤抑制因子在溃疡性结肠炎肠黏膜的表达及其对NF-κB信号通路的影响

目的 观察肿瘤抑制因子Cylindromatosis(CYLD)在溃疡性结肠炎患者肠黏膜组织中的表达水平,探讨其对NF-κB通路P65、P50表达的影响。方法 选取2021年5月～2023年2月广西医科大学第四附属医院收治的60例溃疡性结肠炎(UC)患者肠黏膜标本(UC组),并选取同期30名正常者为健康对照组。采用RT-PCR法检测两组受检者组织中CYLD mRNA表达。以CYLD shRNA转染结肠Caco-2细胞株,Western blot法检测NF-κB信号通路P65、P50蛋白的表达以及加入NF-κB信号通路抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PTDC)后P65、P50蛋白的表达。结果 与健康对照组比较,UC组mRNA表达水平明显降低[(0.624±0.087)vs.(0.993±0.056)],组间差异有统计学意义(t=21.119,P<0.05)。UC亚组间比较,重度组mRNA表达(0.418±0.059)低于中度和轻度组[(0.690±0.103)、(0.722±0.076)],差异有统计学意义(P<0.05),轻度、中度组间比较差异无统计学意义(P> 0.05)...     

血清白细胞介素-6、白细胞介素-18及肿瘤坏死因子-α在高血压性脑出血患者诊断中的作用及其临床意义

目的 探讨血清白细胞介素(IL)-6、IL-18及肿瘤坏死因子(TNF)-α在高血压性脑出血患者诊断中的作用及其临床意义.方法 分别检测116例高血压性脑出血患者(高血压性脑出血组)和40例健康体检者(健康对照组)血清IL-6、IL-18及TNF-α水平变化,并进行比较.结果 高血压性脑出血组血清IL-6、IL-18和TNF-α水平分别为(13.82±4.96)、(14.17±5.68)和(48.80±6.39)ng/L;健康对照组血清IL-6、IL-18和TNF-α水平分别为(6.62±1.37)、(8.89±2.56)和(39.70±3.54)ng/L.高血压性脑出血组血清IL-6、IL-18和TNF-α水平明显高于健康对照组(P＜0.05),并且随着病情的进展,血清IL-6、IL-18和TNF-α水平逐渐增高(P＜0.05).结论 IL-6、IL-18和TNF-α在高血压性脑出血中发挥着重要作用,可以作为临床判断病情的指标.     

双歧杆菌黏附素对应激大鼠肠黏膜核因子-κB和细胞因子的影响

目的 研究双歧杆菌黏附素对大鼠肠黏膜核因子-κB （NF-κB）和细胞因子的影响.方法 将48只实验大鼠按随机数字表法分成应激组、黏附素组,每组24只,以束缚为应激条件建立应激模型,造模后持续实验8d.两组大鼠肠内营养供给量为热量125.4 kJ/（kg·d）,氮量0.2 g/（kg·d）.黏附素组大鼠喂养肠内营养加双歧杆菌黏附素5 mg/（kg·d）,应激组大鼠喂养肠内营养加等量的生理盐水5 mg/（kg·d）.测定造模前、造模后、实验第3天和第8天两组大鼠肠黏膜NF-κB定性表达结果以及肠黏膜和血浆NF-κB、白细胞介素-10 （IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）定量表达结果.透射电镜下观察小肠黏膜形态学变化.结果 （1） NF-κB的表达：造模前、造模后、实验第3天、实验第8天应激组肠黏膜NF-κB的阳性表达率分别为O、79.2％ （19/24）、63.5％（15/24）、66.7％ （16/24）,黏附素组分别为O、68.4％ （17/24）、55.7％ （14/24）、45.8％ （11/24）;与造模前比较,造模后两组肠黏膜NF-κB表达明显上调（均P=0.000）,实验第3天和实验第8天,两组肠黏膜细胞核NF-κB表达阳性率仍明显高于造模前（均P=0.000）,与造模后和应激组比较,实验第8天黏附素组肠黏膜NF-κB表达明显下调（P值分别为0.015、0.021）.（2） TNF-α、IFN-γ与IL-10的定量表达：与造模前比较,造模后应激组与黏附素组大鼠肠黏膜TNF-α[应激组：（154.63±17.52）、（198.72±26.59） pg/g,黏附素组：（154.63±17.52）、（201.45±28.16） pg/g]、IFN-γ[应激组：（39.47±5.76）、（55.32±5.93） pg/g,黏附素组：（39.47±5.76）、（60.75±7.68）pg/g]浓度量和血浆TNF-α[应激组：（83.31±9.78）、（117.64±15.37） ng/L,黏附素组：（83.31±9.78）、（114.82±13.78） ng/L]、IFN-γ[（应激组：（17.35±2.62）、（28.73±4.17） ng/L,黏附素组：（17.35±2.62）、（30.56±4.85） ng/L]浓度明显升高（均P＜0.05）;实验第3天和第8天,应激组大鼠肠黏膜IFN-γ[（58.16±7.38）、（56.37 ±7.29） pg/g]、TNF-α[（215.76±31.54）、（211.83±33.61） pg/g]浓度和血浆IFN-γ[（29.35±4.76）、（30.25±3.67） ng/L]、TNF-α浓度[（125.71±17.38）、（141.26±19.65） ng/L]明显高于造模前（P均＜0.05）;实验第3天和第8天,黏附素组大鼠肠黏膜TNF-α[（165.43±24.58）、（171.57±26.87） pg/g]、IFN-γ[（42.35±4.92）、（40.58±4.65） pg/g]和血浆TNF-α[（103.96±13.68）、（94.53±12.66） ng/L]、IFN-γ[（20.78±2.84）、（19.65±2.45） ng/L]水平明显低于造模后（P均＜0.05）,而IL-10[肠黏膜：（62.82±8.34）、（75.16±9.65） pg/g,血浆：（43.32±5.28）、（55.64±6.87） ng/L]水平明显高于造模后（P均＜0.05）;与应激组比较,实验第3天和第8天,黏附素组大鼠肠黏膜TNF-α、IFN-γ和血浆IFN-γ、TNF-tα水平明显降低（P均＜0.05）,而IL-10水平明显升高（P均＜0.05）.（3）组织形态学观察：实验第8天,在电镜下可见黏附素组较造模后和应激组回肠绒毛、隐窝结构显著恢复.应激组较造模后肠黏膜绒毛、隐窝结构有一定程度的损害,固有膜水肿,膜内有炎性细胞浸润.结论 双歧杆菌黏附素通过调节肠黏膜炎性递质和细胞因子释放,对应激后肠黏膜损伤修复有一定作用.     

核因子-κB在左卡尼汀抑制肝细胞氧化损伤中的作用

目的研究左卡尼汀(L-carnitine)抑制过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)诱导的肝细胞损伤作用是否与核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)有关。方法 CCK-8及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法测定核因子-κB抑制剂对过氧化氢诱导HL7702肝细胞损伤的影响;蛋白质印迹法检测左卡尼汀对过氧化氢损伤HL7702肝细胞核因子-κB表达的影响;细胞免疫荧光染色法测定核因子-κB的核易位情况;凝胶迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)分析核因子-κB的DNA结合活性。结果与过氧化氢损伤组相比,核因子-κB抑制剂组细胞活性明显升高,乳酸脱氢酶释放率降低(P0.05,P0.01);过氧化氢损伤后细胞核核因子-κB表达增加,左卡尼汀预孵育对过氧化氢诱导的核因子-κB核转位具有明显抑制作用(P0.01);左卡尼汀对过氧化氢诱导的核因子-κB DNA结合活性增加也有抑制作用。结论左卡尼汀通过抑制核因子-κB活性而抑制过氧化氢诱导的肝细胞损伤。     

儿茶素单体在治疗炎症性肠病作用中对NF-κB信号通路的影响

目的探索儿茶素单体表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在治疗炎症性肠病(IBD)模型大鼠作用中对NF-κB信号通路的影响。方法将36只健康SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、EGCG治疗组,每组12只,以三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠制作大鼠IBD模型。灌肠用药2周后,分别用ELISA检测肠组织中PGE2、NO含量;免疫组化检测肠粘膜COX-2、iNOS的蛋白表达;Western Blotting检测大鼠肠粘膜NF-κB p65蛋白水平的变化。结果①模型组肠组织内PGE2、NO含量显著增高。EGCG治疗组大鼠肠组织内PGE2、NO含量与模型组相比显著减少(P=0.000);②模型组肠粘膜组织中COX-2表达明显增强,正常结肠组织未见或少见COX-2蛋白表达。而EGCG灌肠后大鼠肠组织中COX-2的表达显著下降。③模型组肠粘膜组织中iNOS表达明显增强,正常结肠组织未见或少见iNOS蛋白表达。而EGCG灌肠后大鼠肠组织中iNOS的表达显著下降。④正常大鼠肠组织NF-κB p65蛋白水平较低,模型组肠组织内NF-κB p65蛋白水平显著增加。EGCG可显著抑制肠组织内NF-κB p65蛋白水平表达。结论 EGCG可通过降低NF-κB p65蛋白的表达,下调COX-2、iNOS的表达,使其产物PGE2、NO生成减少,从而达到减轻炎症的目的。因此NF-κB可作为EGCG治疗大鼠实验性结肠炎的一个有效的分子"靶点"。     

重组人白细胞介素-6的制备及其对豚鼠辐射损伤的保护作用

目的 利用工程菌E.coli DH5αPBV₂₂₀IL6制备重组人白细胞介素6,并探讨白细胞介素6对辐射豚鼠的生存期和血小板数的影响。方法 将IL-6工程菌诱导表达、纯化后应用于辐射豚鼠的治疗。结果 纯化的IL-6对辐射豚鼠的生存期和血小板数有明显的提高作用。结论 IL-6对辐射豚鼠具有明显的保护作用。