四角蛤蜊、菲律宾蛤仔及文蛤水提醇沉上清液中相关核苷类物质的含量测定

目的建立四角蛤蜊、菲律宾蛤仔及文蛤软体水提醇沉上清液中主要核苷类成分尿苷、黄嘌呤、胸腺嘧啶、次黄嘌呤、肌苷、鸟苷、2-脱氧鸟苷、2-脱氧肌苷、胸苷、腺苷的测定方法。方法采用xBridge C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;以水和甲醇作为流动相梯度洗脱,以254nm为检测波长,体积流量0.5mL/min,柱温:25℃。结果四角蛤蜊、文蛤、菲律宾蛤仔的水提醇沉上清液中含有尿苷、黄嘌呤、胸腺嘧啶、次黄嘌呤、肌苷、鸟苷、2-脱氧鸟苷、2-脱氧肌苷、胸苷、腺苷。结论本检验方法简便、准确、重现性好,可作为相关蛤蜊软体水提醇沉上清液中主要核苷类成分含量的常规检测方法。     

长座虫草子实体和菌丝体中碱基和核苷类物质的HPLC分析

建立高效液相色谱法同时测定长座虫草中13种核苷和碱基类物质,色谱条件为：TSKgel ODS-100V色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.01 mol/L KH2PO4水溶液系统为流动相,梯度洗脱,流速1 ml/min,检测波长260 nm,柱温20℃。13种成分在50 min内均达到基线分离,线性关系良好(r≥0.9990,n=8);平均回收率在98.4%~107.5%(RSD<2.0%,n=5)。结果表明长座虫草子实体中胞嘧啶、次黄嘌呤含量相对较高;菌丝体中尿嘧啶、鸟苷、腺苷含量较高,尿苷在菌丝体和子实体中含量均较高。     

RP—HPLC法测定不同贮存年限半夏饮片中腺苷和鸟苷的含量

目的-以反相高效液相色谱法比较不同贮存年限半夏饮品中核苷类成分含量的差异。方法：采用色谱柱为Diamonsil—C18（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-水（15：85）,流速O．7ml／min,柱温25℃,检测波长260nm。结果：半夏药材中腺苷和鸟苷含量随贮存时间的延长略有下降,但没有呈现明显变化。结论：建立的分析方法简便易行,重复性好,可用于半夏饮片质量控制研究。     

西藏冬虫夏草水提液HPLC指纹图谱研究及核苷类成分测定

目的建立西藏不同产区27批冬虫夏草水提液的高效液相色谱指纹图谱,并定量测定其6种主要核苷类成分（尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷、2＇-脱氧腺苷）的质量分数。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB—C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,检测波长260nm,以甲醇．水为流动相进行梯度洗脱,柱温25℃,流速O．8mL·min^-1。结果建立了冬虫夏草水提液的HPLC指纹图谱,包含11个共有峰,各峰分离良好,指认出尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷、2’-脱氧腺苷6个特征成分．同时测定了其质量分数;6种特征成分质量浓度分别在10．71-96．4（r=0．9999）,8．50～76．41（r：0．9999）。7．838-70．54（r=0．9999）,1．120-10．08（r=0．9998）,5．715-51．44（1-=0．9999）,0．2625～2．363μg·mL^-1（r=0．9997）范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率依次为96．5％、97．7％、97．5％、95．2％、96．8％、101．5％,RSD分别为2．3％、2．7％、2．0％、2．6％、3．0％、2．7％（n=6）。结论本试验建立的指纹图谱可同时对冬虫夏草的6种主要核苷类成分进行分析,对评价藏产冬虫夏草的质量具有重要意义。     

基于金花葵核苷类成分的质量表征关联分析研究

目的建立同时测定金花葵药材中7种核苷类成分(尿嘧啶、胞苷、尿苷、腺嘌呤、鸟苷、腺苷、2’-脱氧腺苷)含量的高效液相色谱法(HPLC),并对金花葵药材进行质量关联分析与评价。方法采用HPLC-光电二级管阵列(PDA)法测定金花葵药材中7种核苷类成分,基于7个指标性成分含量及指标性成分加和含量对11批金花葵进行质量表征,并对表征结果进行关联性分析。结果7种核苷类成分线性关系良好,精密度、稳定性、重复性、加样回收率均符合方法学测定要求,并应用所建立的方法测定了11批金花葵药材中7种核苷类成分的含量;以批号1为基准药材,批号2、6、9、10、4各指标成分总体含量高于基准药材,批号6、9、8、4、3、11与基准药材关联性最高,综合评价得出批号1、2、6、9、4优良度居前。结论所建立的金花葵药材中核苷类成分的含量测定方法及质量表征关联分析模式能分析金花葵质量整体关联性与应用有效性,为金花葵药材的质量控制及评价提供了可靠依据。     

HPLC法测定毛竹笋中核苷类成分的含量

目的:建立HPLC法测定毛竹笋中尿嘧啶、尿苷、胸腺嘧啶、腺苷的含量.方法:采用HPLC法,色谱柱为Hypersil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速0.5 mL/min,检测波长为254 nm,柱温30℃.结果:尿嘧啶、尿苷、胸腺嘧啶、腺苷分别在5.1～102.0μg/...     

金边土鳖中3种核苷类成分质量控制方法研究

目的:建立不同产地金边土鳖中3种核苷类成分定性鉴别与含量测定方法,为金边土鳖质量标准的制订提供实验参考。方法:采用薄层色谱法(TLC)对金边土鳖中尿嘧啶和次黄嘌呤进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定金边土鳖中尿嘧啶、尿囊素和次黄嘌呤3种核苷类成分,以Waters Spherisorb?STAR NH2(5μm,4.6 mm×250 mm)为色谱柱,以乙腈-水(95∶5)为流动相,等度洗脱,在柱温为30℃、波长为205 nm条件下,以0.8 m L·min-1的流速进行测定。结果:14批金边土鳖TLC色谱中尿嘧啶和次黄嘌呤斑点清晰、分离度好,可用于金边土鳖的定性鉴别;尿嘧啶、尿囊素和次黄嘌呤分别在0.1014~0.5410μg(r=0.9995)、0.0365~0.2920μg(r=0.9997)、0.0429~0.2385μg(r=0.9996)线性范围内线性关系良好;平均回收率分别为101.20%(RSD=1.60%)、101.47%(RSD=2.10%)、101.92%(RSD=3.40%)(n=9)。结论:所建立的3种核苷类成分定性定量分析方法操作简便、重复性好。     

毛细管电泳-质谱联用法测定灵芝药材中核苷类成分

建立一种用于测定赤芝和紫芝中的核苷类成分的毛细管电泳-质谱联用法(CE-MS)。CE条件为：熔融石英毛细管柱(120 cm×50 μm),缓冲液体系100 mmol/L甲酸-10%甲醇水溶液。运行电压25 kV;毛细管温度25 ℃。MS条件为：0.3%甲酸-75%甲醇水溶液为鞘液,流速3 μL/min;干燥气体流速6 L/min,干燥温度350 ℃;采用电喷雾离子化源(ESI),正离子模式检测,全扫描范围m/z 50～350。以5-氯胞嘧啶阿拉伯糖苷为内标物。结果表明,胞嘧啶、鸟嘌呤、胞苷、腺苷、次黄嘌呤、鸟苷、肌苷和尿嘧啶在线性范围内具有较好的线性关系(除鸟苷外,其他成分R²>0.990)。加样回收率在95.3%～104.6%之间。各待测化合物的最低检测限(LOD)和最低定量限(LOQ)分别分布在0.13～9.85 μg/mL和0.42～20.83 μg/mL之间。测定结果显示赤芝的核苷类成分的含量上高于紫芝。CE-MS适合用于中药中核苷类成分的分析检测。     

HPLC法测定各沪产地龙和广地龙中次黄嘌呤、黄嘌呤、尿嘧啶和尿苷的含量

目的 测定各种沪产地龙与广地龙中次黄嘌呤、黄嘌呤、尿嘧啶、尿苷的含量,建立地龙药材质量评价的方法.方法 用0.9％生理盐水超声提取地龙,SORBAX SB-Aq色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm,Aglient Co.,Ltd),流动相:5 mmol/L磷酸二氢钾(pH 2.9),流速1 mL/min,检测波长254 nm,柱温30℃,进样量10μL,采用HPLC法,同时测定次黄嘌呤、黄嘌呤、尿嘧啶、尿苷4种核苷类成分的含量.结果 次黄嘌呤的线性范围为0.500 0～100.00 μg (r=0.999 9),平均回收率99.37％,RSD=1.36％(n=6);黄嘌呤的线性范围为0.500 0～100.00 μg(r=0.993 1),平均回收率91.57％,RSD=1.40％(n=6);尿嘧啶的线性范围为0.500 0～100.00 μg (r=0.999 9),平均回收率95.31％,RSD=1.64％(n=6);尿苷的线性范围为0.500 0～100.00 μg(r=0.999 9),平均回收率100.21％,RSD=1.98％(n=6).结论 该方法重复性、回收率好,可用于测定地龙与广地龙中次黄嘌呤等4种核苷类成分的含量.     

高效液相色谱法检测金线莲中核苷类成分

目的对不同产地、不同种类、不同生长方式的金线莲中的核苷及碱基类成分进行分析。方法对金线莲提取物采用HPLC|UV法进行含量测定,采用LC|MS法进行鉴别。色谱条件是采用Agilent TC|C18(250 mm×4. 6 mm,5 μm)作为色谱柱;甲醇（B）-0.05%乙酸铵水溶液（A）为流动相梯度洗脱条件;流速为0.8 mL/min;检测波长为260 nm。结果在所检测的金线莲中均含有胞苷、次黄嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶、腺嘌呤、胸苷,各成分的含量存在差异。结论本研究建立的方法处理样品简便,分析灵敏,能为金线莲的质量评价提供参考。     

土鳖虫超微粉体中尿嘧啶、次黄嘌呤的含量测定

目的建立HPLC同时测定土鳖虫超微粉体中核苷类成分尿嘧啶、次黄嘌呤含量的方法。方法色谱柱为Hypersil C18 BDS柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.05 mol/L磷酸氢二铵水溶液,检测波长为254 nm,流速为0.4 mL/min,柱温为25℃。结果尿嘧啶、次黄嘌呤分别在0.044～0.22μg、0.042～0.21μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为95.93%、97.32%,RSD分别为2.9%、3.0%。结论建立的方法简单、重复性好、准确可靠,可用于土鳖虫中尿嘧啶、次黄嘌呤的含量测定。     

不同居属地半夏核苷类有效成分的比较研究

目的：对全国不同居群半夏进行初步的质量评价,为充分利用和开发半夏资源提供科学依据。方法：收集不同居群的半夏品种,以其有效成分（核苷类成分）含量为评价指标,进行品种质量评价,以遴选出优良半夏品种。总核苷类成分含量（以鸟苷计）采用高效液相色谱法（HPLC）测定。结果：不同居群半夏药材的总核苷类成分存在显著性差异,江苏泰半夏的核苷类成分含量显著高于其他居群。结论：我国半夏种质参差不齐,要培育出优质半夏,需要通过各种人工方法对品质优良的半夏进行品种选育。     

北虫草废料酶解液中核苷和虫草素HPLC分析

目的:用HPLC测定人工北虫草及废料酶解液中核苷和虫草素的含量,判断酶解过程对核苷和虫草素的影响。方法:以AgilentC18色谱柱,甲醇-水为流动相,采用梯度洗脱,流速0.8mL·min-1,检测波长260nm,柱温28℃。结果:样品中尿苷、鸟苷、腺苷和虫草素的加标回收率为92.14%~103.23%,相对标准偏差为0.31%~5.41%。结论:该法简单、快速、准确地测定酶解液中3种核苷和虫草素的含量,人工北虫草废料酶解液中核苷和虫草素含量较高,有进一步开发和利用的价值。     

RP-HPLC法同时测定清开灵注射液、板蓝根药材中尿苷、鸟苷、（R,S）-告依春和腺苷的含量

目的：建立RP-HPLC法同时测定清开灵注射液、板蓝根药材中尿苷、鸟苷、告依春、腺苷的含量。方法：采用Phenomenex C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,以甲醇（A）-水（B）为流动相进行梯度洗脱,柱温40℃,流速1.0mL·min-1,检测波长254nm,进样量1μL。结果：尿苷、鸟苷、（R,S）-告依春和腺苷4个成分质量浓度分别在6.54~261.6μg·mL-1（r=0.9999）、9.42~376.8μg·mL-1（r=0.9999）、7.9~316.0μg·mL-1（r=0.9999）、8.74~349.6μg·mL-1（r=0.9999）的范围内与峰面积呈良好的线性关系;方法的平均回收率（n=6）分别为102.9%、97.2%、103.1%、98.2%。结论：所建立的高效液相色谱测定法简便、准确、重复性好、专属性强,可用于清开灵注射液和板蓝根药材含量测定质量控制。     

不同产地半夏指纹图谱的建立及化学模式识别研究

[目的]建立半夏药材超高效液相色谱（UPLC）指纹图谱,结合化学模式识别筛选差异性标志成分。[方法]采用ACQUITY UPLC HSS T3柱（2.1 mm×100 mm,1.8μm）,流动相为0.1%磷酸水-乙腈,梯度洗脱,流速为0.2 m L/min,进样体积为10μL,柱温为32°C,检测波长为260 nm。采用相似度评价和化学模式识别相结合的方法对其进行分析。[结果]在18批半夏UPLC指纹图谱中指认出15个共有峰,其中16批样品相似度均大于0.877,其余2批分别为0.606、0.778。聚类分析结果显示不同产地的半夏分为两大类,主成分分析和聚类分析结果一致,采用正交偏最小二乘-判别分析筛选出6个差异性标志成分,通过对照品指认出3个成分（胞苷、次黄嘌呤、鸟苷）。[结论]建立的指纹图谱方法稳定、可靠、重复性好,结合化学模式识别,可为半夏质量评价提供参考。     

大青叶中药饮片与配方颗粒的质量研究

目的 对比研究不同产地大青叶中药饮片与配方颗粒的质量和价格,为临床医生及患者用药提供参考依据.方法 采用HPLC测定大青叶中药饮片与配方颗粒中水溶性有效成分尿苷、鸟苷的含量;并进行不同产地大青叶中药饮片水溶性浸出物比较以及与大青叶配方颗粒价格的比较.结果 5种不同产地大青叶中药饮片的尿苷、鸟苷含量及水溶性浸出物均存在差异,大青叶饮片以安徽、河北产地为最高;4种大青叶配方颗粒水溶性成分尿苷、鸟苷含量无显著差异,且与安徽、河北两地大青叶中药饮片中尿苷、鸟苷含量基本一致;相同剂量的配方颗粒的价格为传统中药饮片价格的1.5~2.5倍.结论 大青叶传统饮片质量以安徽、河北的为佳,与大青叶配方颗粒质量基本一致而价格较低.临床中可以综合考虑患者用药方便及经济承受能力,酌情选用大青叶传统中药饮片或配方颗粒.     

超高效液相色谱法同时测定抗病毒口服液中3种核苷的含量

目的：建立以超高效液相色谱法（ultra performance liquid chromatography,UPLC）测定抗病毒口服液中尿苷、鸟苷和腺苷含量的方法。方法：色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18（1.7 μm,2.1 mm×50 mm）,流动相为水-甲醇不同比例梯度洗脱,柱温30 ℃,流速0.5 ml/min,检测波长为254 nm。结果：尿苷在2.033～20.33 μg/ml浓度范围内线性关系良好,回归方程为：Y=80 664X-1 046（r=0.999 9）;平均回收率为98.56%,相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）=1.21%,鸟苷在1.248～12.48 μg/ml浓度范围内线性关系良好,回归方程为：Y=55 261X-742（r=0.999 9）;平均回收率为98.77%,RSD=1.09%,腺苷在1.254～12.54 μg/ml浓度范围内线性关系良好,回归方程为：Y=52 155X-480（r=0.999 9）;平均回收率为98.88%,RSD=1.22%。结论：该方法准确、快速、可靠,能有效地测定抗病毒口服液中3种核苷的含量。     

不同产地不同品系瓜蒌皮中多类型资源性化学成分分析与品质评价研究

目的?分析不同产地不同品系瓜蒌皮中多类型资源性成分差异,为其资源化利用提供数据支撑。方法?采用UPLC-MS/MS方法对8个产地9个品系22个批次瓜蒌皮中的糖类、核苷类、氨基酸类、黄酮类、三萜类等39种化学成分含量进行分析,利用主成分分析（PCA）法对瓜蒌皮产地及品系差异进行综合评价。结果?瓜蒌皮中果糖、葡萄糖的平均含量分别为14.78%、8.14%;检测出10种核苷类、18种游离氨基酸类成分,核苷类成分平均总量为0.57?mg/g,游离氨基酸类成分平均总量为37.71?mg/g;检测出黄酮类成分6种、三萜类成分3种,平均总量分别为0.58、0.01?mg/g。PCA结果表明,基于39种化学成分分析结果,不同产地不同品系瓜蒌皮品质存在明显差异。河北石家庄产“皖蒌7号”瓜蒌皮综合得分最高,河北产区与其他产区的瓜蒌皮差异明显,主要差异成分为药效成分氨基酸类和木犀草苷。结论?不同产地不同品系瓜蒌皮所含资源性成分种类基本一致,但从整体上分析评价,各类型资源性成分含量差异较大,传统药用瓜蒌产区所产部分品系瓜蒌皮中资源性成分总量及药效成分含量相比其他产区较高,研究结果可为瓜蒌皮临床用药选择和不同产地不同品系瓜蒌皮的综合利用提供参考。      

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS和网络药理学的半夏炮制前后差异性物质基础及功效分析

目的 基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)和多变量统计分析,筛选并鉴定半夏及其不同炮制品的差异性物质基础,并针对共有及差异性物质基础进行网络药理学分析,挖掘半夏炮制前后物质基础与功效变化的关系。方法 采用UPLC-Q-TOF-MS/MS检测半夏及其炮制品共42批样品的主要物质基础并筛选差异性成分,运用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),以VIP>1.5、P<0.01、FC>2或<0.5为筛选标准,通过数据库配对、文献比对鉴定得到差异性成分。进一步通过TCMIP数据库对差异性物质基础检索靶点,对靶点进行蛋白互作分析,最后通过GO富集和KEGG富集分析其代谢通路。结果 生半夏与法半夏有14个差异性成分,与生半夏相比,法半夏含量升高的成分主要有甘草酸、甘草次酸、甘草素等,含量降低的成分主要为酰胺类。生半夏与姜半夏有18个差异性成分,主要为核苷类、黄酮类、氨基酸类。鸟苷、黄嘌呤及酪氨酸等含量降低,磷酸腺苷含量升高。生半夏与清半夏有18个差异性成分,清半夏中多种成分相对含量均降低,如鞘氨醇。得到生半夏67个核心靶点,法半夏45...     

不同产地大血藤药材指纹图谱研究及红景天苷和绿原酸的含量测定

目的建立不同产地大血藤药材的高效液相色谱指纹图谱,同时测定红景天苷和绿原酸2种成分的含量。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Phenomenex-C18(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;检测波长:280nm;流速:1.0mL/min;进样量:15μL;柱温:30℃。结果 10个产地的大血藤药材指纹图谱相似度达0.9以上,共标定14个共有峰,可确认红景天苷和绿原酸两个峰。红景天苷和绿原酸含量在不同产地大血藤中差异很大,以安徽产大血藤药材中含量为最高。结论所建立的高效液相色谱指纹图谱测定方法准确可靠,重现性好,可作为大血藤药材的鉴别和内在质量评价的依据。