扶正化瘀胶囊对肝纤维化大鼠的防治作用及对结缔组织生长因子表达的影响

目的 研究扶正化瘀胶囊在实验性肝纤维化形成中的预防作用及肝纤维化形成后的治疗作用,分析扶正化瘀胶囊对肝纤维化大鼠结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法 选取Wistar大鼠40只随机分为正常组（8只）、预防组（预防实验组8只和预防对照组8只）和治疗组（治疗实验组8只和治疗对照组8只）;除正常组外,其余各组均采用皮下注射CCl4联合饮用乙醇的方法制备肝纤维模型;预防实验组和治疗实验组分别在造模第4周和造模结束后（第8周）予扶正化瘀方生药0.46 g/kg体质量灌胃。每日1次,共4周;预防对照组和治疗对照组分别于上述时点予生理盐水10 mL/kg体质量灌胃,实验结束后分别采血测定肝功能、肝纤维化指标,对肝组织进行病理学观察,并对肝组织内的CTGF蛋白进行免疫组织化学染色分析。结果 造模结束后（第8周）,预防实验组较预防对照组的总胆红素（TB）、谷丙转氨酶（ALT）降低,差异有统计学意义（ P均<0.05）。第12周,治疗实验组较治疗对照组的ALT降低,差异有统计学意义（ P<0.01）,而其余项差异均没有统计学意义。预防实验组较预防对照组的肝纤维化指标透明质酸（HA）降低,差异有统计学意义（ P<0.01）。治疗实验组较治疗对照组的肝纤维化指标层粘连蛋白（LN）降低,差异有统计学意义（P<0.05）,其余项差异没有统计学意义。治疗实验组较治疗对照组的肝组织病理显示其炎症及肝纤维化均明显减轻,治疗实验组肝组织CTGF表达低于治疗对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 扶正化瘀胶囊在实验性肝纤维化造模过程中有预防肝纤维化形成的作用,在实验性肝纤维化形成后具有逆转肝纤维化的治疗作用。肝纤维化大鼠肝组织中CTGF表达明显增加,而扶正化瘀胶囊可抑制CTGF表达,可能是其作用机制之一。     

结缔组织生长因子与肝纤维化的研究进展

结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)是近年来新发现的一种间质细胞的生长因子,具有明显的丝裂原性和趋化性,可以启动一系列介导组织创伤修复和再生的生物学过程.     

人纤维化肝组织中结缔组织生长因子的表达及其意义

目的观察结缔组织生长因子（connective tissue growth factor, CTGF）在人纤维化肝组织中的表达，探讨CTGF及其介导的生物学信号在肝纤维化发生中的作用机制。方法44例人肝组织（其中包括12例正常肝组织、32例慢性病毒性肝炎和肝硬化组织）来自诊断明确的病理存档标本。采用免疫组化方法对肝组织中CTGF的表达及分布进行检测。结果免疫组化显示，CTGF主要表达于人肝星状细胞胞质中。在人纤维化肝组织中，CTGF表达水平显著高于正常人肝组织（P〈0．01）。结论CTGF作为一种促纤维化因子，其过度表达可促进肝星状细胞的增殖活化，促进细胞外基质的形成，从而促进肝纤维化的发生、发展。     

三甲益肝冲剂对肝纤维化大鼠肝组织结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨复方中药三甲益肝冲剂(Sanjia-yigan granule,S-JG)对肝纤维化的预防机制和效果。方法雄性SD大鼠40只,随机分为模型组、复方丹参组、S-JG组和正常对照组各10只。模型组、复方丹参组、S-JG组均以二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型;模型组造模同时给予生理盐水灌胃,复方丹参组造模同时给予复方丹参口服液灌胃,S-JG组造模同时给予S-JG灌胃;正常对照组腹腔注射生理盐水并用自来水灌胃,共4周。4周后取肝组织标本,行HE和Masson染色,免疫组织化学法检测肝组织结缔组织生长因子(CTGF)。结果(1)肝脏病理学改变:模型组可见较粗的纤维间隔;复方丹参组、S-JG组可见稍细的纤维间隔。(2)Masson染色胶原纤维面积比较:模型组胶原面积较正常对照组显著增加(P<0.05),复方丹参组和S-JG组胶原面积均较模型组减轻(P<0.05);(3)免疫组织化学检测结果:模型组CTGF强阳性表达,S-JG组和复方丹参组组表达少于模型组。结论三甲益肝冲剂抗纤维化作用与其抑制肝组织中CTGF的表达有关。     

水飞蓟素对大鼠肝纤维化转化生长因子β1及结缔组织生长因子表达的影响

目的 观察水飞蓟素在胆总管结扎诱导的大鼠肝纤维化模型的治疗效果及其作用机制.方法 60只雄性SD大鼠,随机分为假手术对照组、纤维化模型组及水飞蓟素治疗组.采用胆总管结扎法造模.4周后处死全部大鼠,采用放射免疫法(RIA)检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)及Ⅲ型前胶原(PCⅢ)的水平;HE染色和Masson染色观察大鼠肝组织病理改变;免疫组织化学检测结缔组织生长因子(CTGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)在肝组织内的表达.结果 与模型组大鼠比较,水飞蓟素治疗后大鼠血清中HA、LN和PCⅢ的水平显著降低;肝组织内纤维化程度降低,肝小叶结构趋于正常;治疗后大鼠肝组织CTGF及TGF-β1表达明显降低(P<0.01),免疫反应阳性信号主要位于纤维间隔细胞的胞浆中.结论 水飞蓟素能有效地减轻胆总管结扎诱导的肝纤维化大鼠的肝损伤及纤维化程度,其机制可能与抑制肝内CTGF和TGF-β1表达有关.     

加味小柴胡汤含药血清对大鼠肝星状细胞增殖和结缔组织生长因子表达的影响

目的：探讨加味小柴胡汤含药血清对大鼠肝星状细胞（HSC）增殖和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法：①含药血清的制备：将Wistar大鼠随机分为大剂量组、中剂量组、小剂量组、对照组,各10只。各组分别给予蒸馏水或相应剂量的加味小柴胡汤灌胃,1次/d,共5 d。于末次给药2 h后经腹主动脉采血,制备相应剂量的含药血清。②含药血清对rHSC-99细胞增殖和CTGF表达的影响：用0.1%胰蛋白酶消化生长接近汇合的rHSC-99细胞,接种于培养板中,分为大剂量组、中剂量组、小剂量组和对照组。培养24 h和48 h后,采用MTT法检测含药血清对rHSC-99细胞系增殖的影响、免疫细胞化学染色检测细胞因子CTGF的表达、RT-PCR检测CTGF mRNA的表达。结果：不同浓度的加味小柴胡汤含药血清对HSC的增殖有明显的抑制作用,并可显著抑制CTGF蛋白和CTGF mRNA的表达。结论：加味小柴胡汤通过抑制HSC的增殖、抑制CTGF的表达而发挥其抗肝纤维化的作用。     

肝组织纤维化及炎症坏死与大鼠肝组织结缔组织生长因子表达的关系

目的 观察肝组织纤维化及炎症坏死与大鼠肝组织结缔组织生长因子(CTGF)表达的关系,探讨CTGF在肝纤维化形成中的作用.方法 采用尾静脉注射人血白蛋白法复制免疫性肝纤维化模型,应用免疫组织化学及RT-PCR方法观察肝组织中CTGF的表达及其与肝纤维化和炎症活动的关系.结果 ①肝组织CTGF阳性细胞主要分布于汇管区、纤维间隔及近纤维间隔的肝窦细胞中,肝细胞始终为阴性.②随着肝纤维化的进展,从S0到S4肝组织CTGF及其mRNA表达逐渐增高,与S0组比较及4组之间两两比较差异均有显著性(P<0.05).③随着肝组织炎症坏死的加重,从G0到G4肝组织CTGF及其mRNA表达逐渐增高,与G0组比较,G1组与G2组之间比较差异有显著性(P<0.05),而G3与G2组之间及G4与G3组之间则差异无显著性(P>0.05).结论 CTGF在肝纤维化形成过程中起重要作用.     

结缔组织生长因子与转化生长因子β1在肝纤维化组织中的表达

目的:研究结缔组织生长因子与转化生长因子β1在肝纤维化组织中的表达及其相关性。方法:用CCl4皮下注射法制备肝纤维化模型,用免疫组化方法动态检测结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子β1(TGFβ1)、I、III型胶原在肝纤维化组织中的表达。将免疫组化结果行图像扫描半定量分析后进行统计学分析。结果:正常对照组CTGF不表达,TGFβ1微量表达,I、III型胶原主要分布在门静脉、中央静脉内皮下以及Disse间隙。随着CCl4注射时间的延长,肝纤维化程度的加深,上述4种蛋白质在肝纤维化组织中的表达逐渐增加,且CTGF与TGFβ1之间存在着显著的相关性。结论:结缔组织生长因子与转化生长因子β1相伴表达,且与肝纤维化的发生密切相关,可作为肝纤维化治疗的新靶点。     

抗肝纤方对大鼠肝纤维化防治作用的实验研究

目的：通过大鼠肝纤维化动物模型，研究抗肝纤方预防肝纤维化的作用，并探讨其作用机制。方法：采用二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠制备肝纤维化模型，以秋水仙碱为阳性对照，采用光镜观察组织学改变并测定血清谷丙氨酸转移酶(ALT)、谷草氨酸转移酶(AST)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、和Ⅳ型胶原(Ⅳ—C)，以反映肝细胞损伤及肝纤维化的程度。结果：抗肝纤方能显著降低大鼠血清中ALT、AST、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ—C的水平，升高ALB。病理组织学检查亦表明，抗肝纤方能明显减轻实验大鼠肝脏纤维化程度。结论：抗肝纤方对实验性肝纤维化有预防作用。     

升肝健脾颗粒对肝纤维化大鼠肝脏细胞因子含量的影响

目的：探讨升肝健脾颗粒对CCl4所致肝纤维化大鼠肝脏TNF—α和IL-1β、IL-8含量的影响。方法：建立大鼠CCl4肝纤维化模型，予以升肝健脾颗粒大、中、小剂量及秋水仙碱治疗，采用放免法检测肝脏中TNF—α和IL-1β、IL-8的含量。结果：升肝健脾颗粒大、中剂量组能显著降低受损肝脏中TNF-α和IL-1β、IL-8的含量，与阴性对照组相比有显著性差异。结论：升肝健脾颗粒通过降低细胞因子含量，而对损伤肝脏发生保护作用。     

罗格列酮对糖尿病肾病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨罗格列酮(RGZ)对糖尿病肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:大鼠随机分成治疗组、模型组、正常组(n=9)。治疗组、模型组大鼠用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病模型,均造模成功7只。治疗组大鼠于造模前24h行RGZ灌胃,模型组和正常组以等体积蒸馏水灌胃。12周后处死动物,观察肾小球病理学变化及细胞外基质(ECM)相对面积,用免疫组织化学法检测肾皮质CTGF的表达。结果:治疗组及模型组肾小球ECM相对面积及肾皮质CTGF表达水平均较正常组升高,但治疗组2指标均较模型组低(P<0.01);治疗组肾脏病理学改变较模型组减轻。结论:RGZ能改善糖尿病时肾脏的病理变化,延缓肾纤维化的发生,其作用可能与抑制肾组织中CTGF的表达有关。     

结缔组织生长因子与肝纤维化关系的研究进展

肝纤维化的形成是一个多因素、多细胞参与的复杂过程,近来研究发现,结缔组织生长因子对促进纤维化的发生发展起正调节作用。结缔组织生长因子是一种多功能的分泌性多肽,可以调节细胞增殖、分化以及黏附等生物学活性,在肝组织损伤修复、细胞外基质合成、临床上肝纤维化的诊断及治疗等方面发挥重要作用。     

当归抗大鼠免疫性肝纤维化的实验研究

目的研究当归抗肝纤维化的作用及机理。方法采用牛血清白蛋白 (BSA)致大鼠免疫损伤性肝纤维化模型 ,观察当归大、小剂量对其肝功能、超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)及肝细胞膜功能的影响。结果当归尤其是小剂量当归具有明显提高肝细胞SOD、降低MDA的作用 (P <0 .0 5 ) ,并能提高肝细胞膜ATP酶 (ATPase)活性 (P <0 .0 5 )。结论提示当归具有明显的抗肝纤维化作用 ,且小剂量优于大剂量。     

结缔组织生长因子在大鼠肝纤维化发生中的作用机制初探

目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)在大鼠肝纤维化形成中的作用机制。方法:雄性SD大鼠32只,体重250~300g,皮下注射四氯化碳(CC l4)制备大鼠肝纤维化模型,分别于注射后1、4、8周处理动物,采用免疫组化、RT-PCR、W estern b lot等方法对肝组织中CTGF的表达进行检测。结果:免疫组化、W estern b lot结果显示,CC l4注射诱导后,大鼠肝组织中CTGF的表达较正常对照明显增强,且CC l4注射1、4、8周组肝组织中CTGF的表达强度呈明显递增趋势。CTGF主要表达于肝星状细胞胞质中。RT-PCR检测结果显示CTGF mRNA的表达与其蛋白质水平的改变相一致。结论:CTGF作为一种致纤维化因子,其过表达促进肝星状细胞的活化增殖及细胞外基质的形成,从而促进大鼠肝纤维化的发生、发展。     

肝纤溶颗粒抗肝纤维化的临床观察及实验研究

肝纤维化是肝细胞发生坏死及炎症刺激时 ,肝内纤维结缔组织异常增生的病理过程 ,是诸多慢性肝病向肝硬化甚至肝细胞畸变或癌变的必经阶段。其中 2 5 %～ 4 0 %最终发展为肝硬化乃至肝癌 ,严重影响着人们的生命健康及生活质量。然肝纤维化其病变有一定的可逆性 ,如能早期地及时诊断和处理 ,阻断其病理进展 ,则可望防止肝硬化及肝癌的形成。因此 ,阻断及逆转肝纤维化已成为目前医学研究的重要课题。1　临床观察1 1　一般资料　本研究共 12 0例 ,所有患者均符合中西医诊断标准及纳入标准 ,其中男 82例 ,女 38例 ,年龄 (4 3 5± 8 6 3)岁 ,病程…     

抗纤颗粒防治肝纤维化大鼠作用机理探讨

目的 :动态观察抗纤颗粒对大鼠肝纤维化模型细胞因子与肝组织胶原蛋白的影响 ,进而探讨抗纤颗粒防治肝纤维化的作用机制。方法 :将SD大鼠随机分为 10组 ,即正常对照 4W (W :Week周 )组、8W组、模型对照4W组、8W组、纤低预防 4W组、8W组、纤高预防 4W组、8W组、纤低治疗 8W组、纤高治疗 8W组。以二甲基亚硝胺(Dimethylnitrosamine ,DMN)腹腔注射建立肝纤维化模型 ,除正常对照组与模型对照组外 ,其余各组给予抗纤颗粒灌胃处理。各 4W组于实验第 30天、8W组于实验第 6 0天处死动物 ,取血作肝功能 ;TNF -α、IL - 1α、γ -IFN ;取肝组织作胶原蛋白测定。结果 :①抗纤颗粒能显著提高各期模型大鼠血清中γ -IFN含量和显著降低各期模型大鼠血清中TNF -α、IL - 1α活性及肝胶原蛋白含量 ;②TNF -α、IL - 1α与肝胶原蛋白呈显著正相关关系 (P <0 0 1,r>0 5 ) ,γ-IFN与肝胶原蛋白呈显著负相关关系 (P <0 0 1,r<- 0 5 )。结论 :抗纤颗粒预防和治疗肝纤维化的机理 ,可能与其能调节细胞因子网络有关     

内毒素对原代大鼠肝星状细胞表达结缔组织生长因子影响机制的研究

目的研究内毒素（LPS）与其刺激的Kupffer细胞（KCs）培养上清（KCCM）及NF—κB通路抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）对大鼠原代肝星状细胞（HSCs）表达结缔组织生长因子（CTGF）的影响,探讨LPS刺激HSCs表达CTGF的机制。方法分离培养原代大鼠HSCs、KCs。培养72h的KCs经1mg／LLPS刺激48h后收集上清标记为KCCM1。未经LPS刺激的上清标记为KCCM0。将培养72h的HSCs随机分为空白对照组、KC—CM0组、LPS组、KCCM1组、PDTC组、（PDTC＋LPS）组、（PDTC＋KCCM1）组。各组HSCs经相应的处理48h后,Westernblot检测各组HSCs表达CTGF水平,ELISA检测培养上清中I型胶原含量。结果各组HSCs中CTGF蛋白表达水平为：空白对照组（1．95-±0．67）、KCCM0组（2．15±1．10）、LPS组（4．56±4．16）、KCCM1组（5．21±3．23）、PDTC组（0．06±0．02）、（PDTC＋LPS）组（0．10±0．08）、（PDTC＋KCCM1）组（2．77±4．08）。LPS与KCCM1作用于HSCs后CTGF表达增加（P〈0．05）;PDTC几乎可以完全阻断正常及LPS刺激的HSCs表达CTGF（P〈0．01）,但只能降低KCCM1组CTGF的表达（P〈0．05）：KCCM1组HSCs上清中I型胶原的含量增加（P〈0．05）。结论LPS可直接通过HSCs内的NF—κB通路使其表达CTGF水平上调,LPS刺激的KCs还可能通过其他途经使HSCs表达CTGF水平上调。     

中药肝力克对实验性大鼠肝纤维化的影响

目的：观察中药肝力克对实验性肝纤维化大鼠肝组织炎症活动度和肝纤维化的影响。方法：大鼠随机分成正常对照组和遣模组。造模组大鼠予40％CCl4皮下注射。造模结束后，将造模组大鼠随机分为肝纤维化模型组，肝力克大、中、小剂量组及秋水仙碱组，并给予不同剂量的药物灌胃治疗，实验结束后处死大鼠，取肝组织常规HE染色，观察大鼠肝组织炎症活动度和肝纤维化程度。结果：肝纤维化模型组大鼠肝组织炎症活动度计分及肝纤维化程度计分均较正常对照组明显升高，差异有非常显著性意叉；用肝力克各剂量及秋水仙碱治疗后，大鼠肝组织炎症活动度及肝纤维化程度均明显降低，与肝纤维化模型组相比，差异有非常显著性和显著性意叉，其中尤以肝力克大剂量组炎症活动度降低最明显。结论：肝力克有明显减轻实验性肝维化大鼠肝组织炎症活动度及改善纤维化程度的作用。     

软肝升白颗粒对肝纤维化小鼠肝脏肝细胞生长因子及其C-Met mRNA表达的影响

目的通过观察软肝升白颗粒对肝纤维化小鼠肝脏肝细胞生长因子及其C-Met mRNA表达的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法 80只BABL/c小鼠给予0.03%硫代乙酰胺饮用水喂养20周,制备肝纤维化动物模型[1]。随机分为4组,每组20只。A组小鼠给予软肝升白颗粒11.2 g/(kg.d),B组小鼠给予软肝升白颗粒5.6 g/(kg.d),C组小鼠给予鳖甲软肝片1.12 g/(kg.d),D组分别给予等体积的生理盐水,每天灌胃1次,另外,20只小鼠作为正常对照组(E组),处理方法同D组。分别在4周和8周时,各处死小鼠10只,检测血清肝功能指标,各组取肝组织HE染色肝组织学观察,同时应用RT-PCR技术检测肝组织中肝细胞生长因子(HGF)及其受体C-Met mRNA的表达量。结果治疗前后肝功能和组织学均存在显著性差异。治疗组HGF/C-Met mRNA表达显著高于对照组(P0.05)。结论肝纤维化发生后,软肝升白颗粒能使HGF/C-Met mRNA高表达。