赤芍药提取物对兔颈动脉介入术后增殖内膜相关基因表达的影响

目的:探讨赤芍药提取物对高脂喂养兔颈动脉球囊损伤后血管内膜增殖与还原型炯酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚单位p22phox及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响.方法:采用Clowes方法建立兔颈总动脉球囊损伤模型,并给予赤芍药提取物.免疫组化染色测定兔颈动脉新生内膜成分、增殖细胞核抗原(proliferat ingcellnuclearantigen,PCNA)及巨噬细胞表达,血管特殊染色观察1型胶原增生,图像分析系统测定新生内膜面积;原位杂交染色及逆转录聚合酶链反应检测增殖血管内膜的NADPH Oxidase p22phox及MCP-1 mRNA水平.结果:赤芍药提取物可减少PCNA阳性细胞数,抑制型胶原增生,减轻新生内膜形成;显著降低NADPH Oxidase p22phox及MCP-1mRNA表达.结论:赤芍药抑制血管内膜增殖程度,其机制可能与抗氧化应激及抗血管内皮炎症反应有关.     

赤芍提取物对高脂家兔颈动脉实验性血管重塑的干预作用

目的:探讨高脂喂养兔颈动脉球囊损伤术后增殖的血管内膜丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1(mkp-1)、单核细胞趋化蛋白-1(mpc-1)表达及赤芍提取物的干预效果.方法:采用Clwes方法建立兔颈总动脉球囊损伤模型,并给予赤芍提取物.免疫组化染色测定兔颈动脉新生内腔内增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达,图像分析系统测定新生内膜面积;逆转录聚合酶链反应检测增殖血管内膜的mkp-1及mop-1mRNA水平.结果:赤芍提取物可减少PCNA阳性细胞数,减少新生内膜形成;上调高脂喂养兔颈动脉球囊损伤后mkp-1mRNA表达,显著降低mcp-1mRNA表达.结论:赤芍可抑制血管内膜增殖,其机制可能与赤芍阻断MAPK信号通路及抗血管内皮炎症反应有关.     

赤芍对家兔血管内膜平滑肌细胞增生的影响

目的观察赤芍对兔颈动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原 (PCNA)表达作用,以了解赤芍对动脉损伤后内膜增生的影响.方法新西兰大白兔随机分为对照组、高脂饲料组、赤芍高剂量组及赤芍低剂量组,高脂喂养 8周后行兔颈总动脉球囊损伤术, 10周取材,用免疫组化法检测平滑肌细胞中 PCNA表达.结果各组内皮增生成分主要为平滑肌细胞.与高脂饲料组比较,赤芍高剂量组内膜、中膜、外膜 PCNA阳性着色及内膜增生面积均显著减少.结论赤芍有抑制平滑肌细胞增殖的作用.     

赤芍对兔颈动脉球囊损伤后血管紧张素Ⅱ激活的影响

目的：观察赤芍对高脂喂养兔颈动脉球囊损伤后内膜增殖及血管紧张素Ⅱ(AgⅡ)激活的影响。方法：家兔饲喂高脂饲料，赤芍组服用赤芍提取物，相当于生药3g/kg、2g/kg或1g／kg。于6周末球囊损伤颈总动脉内膜建立再狭窄(RS)模型，于8周末取血放射免疫测定血浆AgⅡ，取血管作血管张力测试，血管切片后形态学测定增生内膜面积，免疫组组织化学染色计算增殖细胞核指数。结果：赤芍组血浆AgⅡ水平降低，血管对AgⅡ的收缩反应减弱，增生内膜面积、增生内膜面积／中膜面积显减少。结论：赤芍降低内膜增殖程度与抑制肾素．血管紧张素系统(RAS)激活有关。     

赤芍对家兔颈动脉损伤后血管NADPH氧化酶亚单位p22phox表达影响

目的:观察赤芍对血管内膜损伤后还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)(NADPH Oxidase)亚单位p22phox mRNA表达的影响。方法:采用Clowes方法建立兔颈总动脉球囊损伤模型,并给予赤芍提取物。图像分析系统测定新生内膜面积,原位杂交及RT-PCR检测NADPH Oxidase P22Phox mRNA表达。结果:赤芍可显著减低NADPH Oxidase P22Phox mRNA表达,并减轻内膜增殖程度。结论:赤芍抑制高脂喂养兔颈动脉球囊损伤后NADPH Oxidase P22Phox mRNA表达及内膜增殖程度可能与赤芍的抗氧化活性有关。     

赤芍对实验性血管成形术后胶原纤维分布种类及含量的影响

目的:研究赤芍对血管成形术后管壁胶原的影响.方法:家兔饲喂高脂饲料,6周末球囊损伤颈总动脉内膜建立再狭窄(RS)模型,于8周末血管取材,行天狼猩红染色及血管特殊染色.结果:血管成形术后血管壁Ⅰ型胶原纤维增生明显,赤芍组Ⅰ型胶原增生显著减少.结论:赤芍对防止管壁胶原沉积具有一定作用.     

中药赤芍对损伤介导的内膜增殖及MKP-1基因表达的影响

目的:观察赤芍对高脂喂养兔颈动脉球囊损伤后丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)mRNA表达、血管紧张素Ⅱ(AgⅡ)激活及内膜增殖的影响。方法:新西兰白兔随机分为对照及赤芍组,各组均饲喂高脂饲料(普通饲料+2%胆固醇+5%猪油)。赤芍组按剂量给予赤芍提取物,高、中、低剂量组相当于生药75、50、25g.kg-1.d-1。球囊损伤颈总动脉内膜建立模型,放射免疫测定血浆AgⅡ水平、测定血管张力、免疫组化染色及形态学测定、RT-PCR检测MKP-1 mRNA表达。结果:与对照组比较,赤芍组AgⅡ水平降低(P<0.05);血管对AgⅡ的收缩反应减弱(P<0.05);增生内膜面积、增生内膜面积/中膜面积显著减少(P<0.05或P<0.01);MKP-1 mRNA表达显著增高(P<0.05或P<0.01)。结论:赤芍降低血浆中的AgⅡ水平,减低血管环对AgⅡ的收缩反应性,增加高脂喂养兔颈动脉球囊损伤后MKP-1 mRNA表达,并减轻内膜增殖程度。表明内膜增殖程度的减低与赤芍抑制RAS激活,并阻断MAPK信号通路有关。     

益气活血方对高脂大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜增生的影响

目的观察益气活血方对高脂大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜增生的抑制作用。方法将90只雄性SD大鼠随机分为模型组、阿司匹林组及益气活血方大、中、小剂量组。大鼠给予高脂饲料喂养30 d,造成高脂血症;然后经右股动脉穿刺球囊扩张损伤大鼠左颈总动脉,造成颈总动脉管腔的狭窄。手术前1 d开始给药,每组动物于术后5、14、28 d处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色。结果术后5 d血管狭窄不明显,术后14 d和28 d血管内膜明显增厚,管腔狭窄,模型组尤为明显。益气活血方干预后,大剂量组内膜增生平均厚度,残余管腔面积/总管腔面积与模型组相比,P〈0.01,其余各用药组与模型组相比,P〈0.05,结论益气活血方可显著抑制高脂大鼠颈总动脉球囊扩张后所致的血管内膜增生,益气活血方大剂量作用更明显。     

冠心通络方对球囊损伤动脉粥样硬化兔的实验研究

目的:观察冠心通络方对球囊损伤动脉粥样硬化(AS)兔动脉斑块的干预作用。方法:采用高脂饮食喂养并加以球囊损伤的兔AS模型,实验结束后测量内膜增生面积及内膜增生指数,并观察动脉内膜病理学变化。结果:①术后模型组内膜明显增厚,血管腔狭窄;冠心通络组以上改变较同期模型组显著减轻。②模型组内膜增生面积和内膜增生指数均显著高于冠心通络组。结论:冠心通络方能明显抑制球囊损伤后内膜增生,防止血管狭窄等作用。     

冠心通络方对球囊损伤动脉粥样硬化兔的实验研究

目的：观察冠心通络方对球囊损伤动脉粥样硬化（AS）兔动脉斑块的干预作用。方法：采用高脂饮食喂养并加以球囊损伤的兔AS模型，实验结束后测量内膜增生面积及内膜增生指数，并观察动脉内膜病理学变化。结果：①术后模型组内膜明显增厚，血管腔狭窄；冠心通络组以上改变较同期模型组显著减轻。②模型组内膜增生面积和内膜增生指数均显著高于冠心通络组。结论：冠心通络方能明显抑制球囊损伤后内膜增生．防止血管狭窄等作用。     

丹参酮抑制大鼠颈动脉损伤后再狭窄的实验研究

目的:观察丹参酮对大鼠颈动脉损伤后再狭窄的防治作用,并探讨其作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为模型组、丹参酮高、中及低剂量组,每组10只。用自制2F球囊对大鼠右侧颈总动脉进行损伤造成颈动脉狭窄模型。术前2 d开始给药,高、中、低剂量组分别灌胃给予丹参酮120,40,13.3 mg.kg^-1.d^-1,给药体积为10 mL.kg^-1,模型组给予等体积的溶媒。给药2周后,取伤侧及对侧颈总动脉做HE染色,光镜下观察动脉形态并用计算机图像分析系统分析动脉内膜面积、中膜面积及内膜/中膜面积,用免疫组化测定增殖细胞核抗原(PCNA)、核因子(NF)-κB及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平并计算阳性率。结果:损伤动脉内膜面积和内膜/中膜面积显著增加,提示造模成功。与模型组比较,丹参酮低剂组内膜面积、内膜/中膜面积、PCNA阳性指数、NF-КB及iNOS阳性率有所降低,但差异不显著,中剂组和高剂组则效果明显,差异具有显著性(P<0.05)。结论:丹参酮可抑制大鼠颈动脉损伤后再狭窄,这种作用与其抑制平滑肌增殖和炎症作用有关。     

淫羊藿苷对大鼠颈总动脉损伤后基质 金属蛋白酶-2表达的影响

目的:研究淫羊藿苷对大鼠颈动脉损伤后基质金属蛋白酶(MMP-2)mRNA表达的影响。方法:取大鼠44只,随机分为正常对照组8只,淫羊藿苷高、低剂量组和模型组各12只。后3组建立鼠颈动脉球囊损伤术后狭窄模型,淫羊藿苷组术前6 d开始ig淫羊藿苷60,120 mg.kg-1至实验结束(14 d和28 d);模型对照组以等体积生理盐水ig。术后14 d和28 d分批处死动物。取各组实验动物颈动脉损伤段,常规制片,免疫组织化学S-ABC法检测MMP-2蛋白的表达;RT-PCR检测MMP-2 mRNA的表达。结果:在球囊损伤后14,28 d时,淫羊藿苷干预组的MMP-2 mRNA及蛋白表达量显著低于模型组(P<0.01)。各干预组之间无明显差异。结论:淫羊藿苷在动脉损伤后早期可通过下调MMP-2 mRNA的表达,抑制平滑肌细胞的迁移,从而减轻细胞外基质(ECM)的合成而抑制球囊损伤后新生内膜的增生。     

银杏黄酮苷元对兔颈动脉粥样硬化及NOX2、NOX4表达的影响

目的 探讨银杏黄酮苷元(GFA)对兔颈动脉粥样硬化及斑块处NOX2、NOX4表达的影响.方法 24只健康新西兰雄性大白兔随机分为对照组、假手术组、模型组、治疗组4组.对照组予普通饲料,其余各组均予高脂饲料,假手术组行颈外动脉结扎,模型组和治疗组行左颈总动脉内膜球囊损伤,治疗组每日予GFA(25mg· kg-1)干预4周,检测血脂水平;HE染色观察左颈总动脉形态,测定损伤处内膜面积及内膜中膜面积比值;免疫组化染色和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测颈动脉斑块处NOX2、NOX4表达.结果 与模型组比较,银杏黄酮苷元明显降低颈动脉内膜面积及内膜/中膜面积,下调斑块处NOX2、NOX4蛋白和mRNA表达(P＜0.05).结论 银杏黄酮苷元可干预动脉粥样硬化病变形成,其作用可能与抑制NOX2、NOX4表达有关.     

淫羊藿苷对大鼠颈总动脉内膜损伤后骨桥蛋白表达的影响

目的:研究淫羊藿苷对大鼠颈动脉内膜损伤后新生内膜内骨桥蛋白表达的影响.方法:取大鼠42只,随机分为正常对照组6只,模型组和淫羊藿苷高、低剂量组( 120,60 mg· kg -1)各12只.后3组建立鼠颈动脉球囊损伤术后狭窄模型,淫羊藿苷组术前6d开始给予淫羊藿苷灌胃至实验结束;模型对照组以等体积生理盐水灌胃.术后14d和28 d分批处死动物.取各组实验动物颈动脉损伤段,常规石蜡切片,免疫组织化学S-ABC法检测骨桥蛋白(OPN)的表达;RT-PCR检测OPN mRNA的表达.结果:在球囊损伤后14,28 d时,淫羊藿苷高、低剂量组OPN mRNA的表达14 d时为(0.58±0.01),(0.42±0.02),28 d时为(0.28±0.02),(0.33±0.03),明显低于模型组14 d(0.71 ±0.02),28 d(0.62±0.01);高、低剂量组之间无明显差异.淫羊藿苷高、低剂量OPN蛋白表达量14 d时为(20.21±3.67),(32.53±12.16),28 d时为(26.14±4.64),(24.16±11.35),明显低于模型组14 d(71.24±13.25),28 d(46.13±12.31),均P＜0.01.结论:淫羊藿苷在动脉损伤后可调控OPN的表达,抑制平滑肌细胞的迁移,从而减轻球囊损伤后新生内膜的增生.     

益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的干预

观察益气活血方对球囊损伤大鼠颈动脉狭窄的干预作用,初步探讨其作用机理。方法:SD大鼠48只,用2.0F球囊导管自右股动脉插管建立大鼠左颈动脉球囊损伤模型,中药各组自手术前一天灌胃给药。每组动物于相应时相点麻醉心脏放血处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和Masson染色。然后输入HMIAS-2000型全自动彩色图像分析系统,观察动脉球囊损伤后相关指标的变化,统计分析益气活血方对其的影响。结果:益气活血方各组大鼠术后28天内膜增生面积、内膜增生平均厚度、残余管腔面积/总管腔面积与模型组相比差别有极其显著的意义(P<0.01);益气活血方各组大鼠术后28天胶原增生情况与模型组相比差异有显著性(P<0.05)。结论:益气活血方可显著防止或减轻球囊扩张大鼠颈总动脉所致的管腔狭窄,而且大剂量益气活血方作用更明显。     

芎芍胶囊对兔实验性血管再狭窄血管胶原酶基因表达的影响

目的 观察芎芍胶囊对兔实验性血管再狭窄（RS）血管胶原酶基因表达的影响,探讨芎芍胶囊干预RS的机制。方法 采用球囊剥脱兔腹主动脉内皮结合高脂饲料方法建立实验性RS的模型,80只兔随机分层分组,分为8组,即正常对照组,单纯内皮损伤组,模型3天、2周、6周组,普罗布考对照组,芎芍胶囊小剂量、大剂量组,每只10只。采用RT-PCR方法、计算机图像分析仪,观察芎芍胶囊对再狭窄过程中血管胶原酶基因表达的影响,结合病理形态学和胶原的变化探讨芎芍胶囊改善血管重构预防RS的机理。结果 模型2周时管腔出现代偿性扩张,至6周时管腔却明显缩小,增殖指数明显升高。各用药组在抑制内膜增殖方面以芎芍大剂量组及普罗布考对照组尤为明显。模型2周时内膜胶原堆积不明显,但胶原总量增加,并达到高峰。6周时,内膜胶原逐渐堆积达到高峰。各用药组内膜胶原减少,中、外膜胶原总量减少,以芎芍大剂量组最明显。在正常对照及模型各组,基质金属蛋白酶-1（MMP-1） mRNA有弱表达,芎芍大剂量组与模型6周组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 芎芍胶囊可明显增强MMP 1mRNA在损伤血管部位的表达,提示芎芍胶囊预防RS可能与上调MMP-1mRNA的表达,增加胶原的降解,减少胶原在血管壁的沉积有关。     

丹参酮防治动脉再狭窄作用的实验研究

目的 :观察丹参酮对实验性动脉再狭窄的防治作用 ,并初步探讨其作用机制。方法 :雌性KM小鼠随机分为模型组、高剂量组、低剂量组 ,每组 12只。将小鼠左颈总动脉近动脉分叉处结扎 ,造成内膜增生、颈动脉狭窄模型。将模型组结扎动脉对侧血管作为正常组。术前两天开始给药 ,高、低剂量组分别灌胃给予丹参酮 6,3g·kg^-1·d^-1,模型组给予等体积的溶媒。给药 4周后 ,取颈动脉作HE染色 ,光镜下观察动脉形态并用图像分析系统分析动脉内膜面积、中膜面积、相对管腔面积及内膜 /中膜面积 ,用免疫组化测定增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达水平并计算阳性指数。结果 :与正常组比较 ,模型组管腔相对面积明显减小 (P<0 .0 1) ,内膜面积、中膜面积及内膜 /中膜面积增大 ,差异显著 (P<0 .0 1) ;与模型组比较 ,丹参酮低剂及高剂组的管腔相对面积均显著增大 (P<0 .0 1) ,内膜面积、中膜面积及内膜 /中膜面积均有减小 (P<0 .0 5) ,PCNA的表达明显减少 ,阳性指数显著降低 (P<0 .0 1)。结论 :丹参酮可抑制由于血流动力学改变而引起的以平滑肌细胞增殖迁移为主要病理特征的内膜增生 ,提示对经皮腔内冠状动脉血管成形术 (PTCA)术后血管再狭窄有积极防治作用。     

益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后PCNA表达的影响

目的观察损伤血管细胞核增殖抗原（PCNA）的表达情况,探讨益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉内膜平滑肌细胞（VSMCs）增殖的干预机制。方法随机将108只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、阿司匹林组及益气活血方大、中、小剂量组。球囊损伤大鼠颈总动脉前给予高脂饲料喂养30d,造成高脂血症;然后经右股动脉穿刺球囊扩张损伤大鼠左颈总动脉,造成颈总动脉管腔的狭窄。手术前1d开始给药,每组动物于术后（5d、14d、28d）处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和免疫组织化学SABC法检测PCNA的表达。结果各组PCNA均表达阳性,模型组明显增多,用益气活血方干预后14d和28dPCNA表达量与模型组比较有统计学意义（P〈0.05）。结论益气活血方对球囊损伤后动脉血管内膜VSMCs增生有明显的抑制作用,其机制可能与下调细胞核增殖抗原的表达,抑制血管内膜VSMCs的细胞分裂周期进程有关。