化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型ADPN/PI3K/AKT通路关键蛋白的影响

目的探讨化痰祛湿活血方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠模型ADPN/PI3K/AKT信号通路关键蛋白的影响。方法72只SD雄性大鼠,适应性喂养1周,随机分为空白组、模型组、多烯组、化痰祛湿活血方高、中、低剂量组,共6组,每组12只。空白组予普通饲料,其余各组予高脂饲料造模。除空白组以外,其余各组大鼠均进行灌胃,模型组灌胃生理盐水(1 ml·100 g~(-1)·d~(-1)),多烯对照组灌胃多烯磷脂酰胆碱胶囊混悬液(0. 028 5 g·100 g~(-1)·d~(-1)),化痰祛湿活血方高、中、低剂量组分别按5. 04 g·100 g~(-1)·d~(-1)、2. 52 g·100 g~(-1)·d~(-1)、1. 26 g·100 g~(-1)·d~(-1)剂量灌胃。10周后取材,化学发光法检测血清ALT、AST、GGT、ALP、TG、TC水平; Western-Blot检测肝组织ADPN、AdipoR2、PI3K、Akt、pAkt、NF-κB、p-NF-κB蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与空白组比较,模型组肝组织呈现脂肪变,血清ALT、AST、ALP、GGT、TG、TC水平均显著升高(P值均0. 05),肝组织ADPN、AdipoR2、PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达均降低(P值均0. 05),NF-κB、p-NF-κB蛋白表达均升高(P值均0. 05)。与模型组相比,各治疗组血清ALT、AST、ALP、GGT、TG、TC水平均降低(P值均0. 05),肝组织ADPN、AdipoR2、pAkt蛋白表达均升高(P值均0. 05),NF-κB、p-NF-κB蛋白表达均降低(P值均0. 05)。与多烯组比较,高剂量组血清ALT、AST、ALP、GGT、TG、TC水平均降低(P值均0. 05),肝组织ADPN、AdipoR2、PI3K、p Akt蛋白表达均升高(P值均0. 05),NF-κB、p-NF-κB蛋白表达均降低(P值均0. 05)。结论化痰祛湿活血方可能通过调控ADPN/PI3K/AKT信号通路,上调ADPN、AdipoR2、PI3K、pAkt蛋白表达,下调NF-κB、p-NF-κB蛋白表达,达到治疗NASH的作用。     

冠脉介入治疗术后血脂联素和血红素加氧酶1水平的变化

目的:观察冠心病(CHD)患者冠状动脉介入治疗(PCI)术后血脂联素(ADPN)和血红素加氧酶1(HO-1)水平的变化及其与氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)水平的相关性。方法:选择我院心内科行PCI的住院CHD患者60例作为CHD组,另选择健康体检的56例健康体检者作为健康对照组。比较两组术前,CHD组术前、术后8周ADPN、HO-1和ox-LDL水平变化,并分析CHD患者ADPN、HO-1与ox-LDL水平的相关性。结果:与健康对照组比较,冠心病组术前ADPN[(18.41±5.74)mg/L比(5.62±2.16)mg/L]和HO-1[(38.71±6.95)μg/L比(23.87±5.28μg/L)]水平明显降低,ox-LDL[(12.56±5.94)μg/L比(31.25±3.95)μg/L]水平明显升高,P均=0.001。与术前比较,术后8周CHD组ADPN[(8.49±1.95)mg/L]和HO-1[(35.29±2.28)μg/L]水平明显升高,ox-LDL[(16.74±2.71)μg/L]水平明显降低(P均=0.001)。术前、术后CHD患者ADPN和HO-1水平均与ox-LDL均呈显著负相关(r=-0.648~-0.325,P均0.05)。结论:通过冠状动脉介入治疗可改善冠心病的冠脉血供,从而升高患者保护性因子脂联素和血红素加氧酶1水平。     

苦参碱治疗非酒精性脂肪性肝炎大鼠的效果观察

目的研究苦参碱的抗氧化作用,并观察其治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的疗效。方法 30只大鼠随机分为3组:对照组、NASH组和苦参碱组,每组10只。采用高脂饮食诱导建立NASH大鼠模型,并给予苦参碱36 mg·kg-1·d-1灌胃治疗。观察所有大鼠体质量、肝重变化,并采用HE染色观察各组大鼠肝组织病理学改变,测定血清ALT、AST水平及肝组织还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)活性。多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果与对照组比较,NASH组、苦参碱组的大鼠体质量均明显增加(P值均0.001),肝重均明显减轻(P值均0.001)。苦参碱组大鼠肝组织病理学改变较NASH组亦明显减轻。苦参碱组大鼠ALT、AST水平与NASH组比较均有所降低,差异均有统计学意义[(52.0±3.0)U/L vs(41.8±3.7)U/L;(233.6±9.4)U/L vs(170.1±1.8)U/L,P值均0.001)]。苦参碱组与NASH组比较,大鼠肝组织SOD、GSH水平明显升高[(17.7±2.0)μg/mg vs(27.0±3.6)μg/mg;(16.5±1.6)U/mg vs(28.5±2.1)U/mg],MDA水平明显降低[(22.9±1.9)nmol/mg vs(17.8±1.8)nmol/mg],差异均有统计学意义(P值均0.001)。结论苦参碱在治疗NASH大鼠中具有抗氧化的作用,对NASH大鼠的治疗作用显著。     

非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型中小檗碱抗氧化效应的观察

目的利用大鼠NASH模型及H2O2诱导氧化应激体外模型观察小檗碱的抗氧化效果。方法建立高脂饮食诱导大鼠NASH模型,给予小檗碱18 mg·kg-1·d-1灌胃治疗3周后,HE染色观察肝组织病理学改变,测定肝组织超氧化物歧化酶(GSH)、还原型合胱甘肽(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平。建立H2O2诱导活性氧自由基(ROS)产生的氧化应激体外模型,流式细胞技术观察细胞内ROS水平,检测肝细胞内SOD、GSH、LDH和CAT的活性。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Bonferroni检验;2组间比较采用t检验。结果经小檗碱治疗后,NASH大鼠肝组织炎性细胞浸润范围、灶状坏死和肝细胞气球样变可得到明显改善。同时肝组织GSH和SOD活性治疗组较模型组明显升高[(29.8±2.4)U/mg vs(19.9±1.3)U/mg,(26.6±1.9)μg/mg vs(19.7±1.4)μg/mg,P值均0.001],MDA水平治疗组较模型组明显降低[(19.8±1.5)nmol/mg vs(24.0±2.0)nmol/mg,P0.001]。在H2O2诱导氧化应激的体外模型中,发现H2O2组细胞内的ROS水平较小檗碱+H2O2组明显升高[(69.8±1.9)%vs(50.4±6.5)%,t=24.42,P=0.008]。同时小檗碱+H2O2组肝细胞内SOD和GSH的活性较H2O2组明显增加[(25.5±1.3)μg/mg vs(18.8±1.0)μg/mg,(27.1±0.6)U/mg vs(16.79±3.8)U/mg,P值均0.001),LDH水平在小檗碱+H2O2组和H2O2组间变化不明显(P=0.103),而CAT的活性在各组间的变化差异无统计学意义(F=3.76,P=0.060)。结论从体内和体外模型同时证明小檗碱有明显的抗氧化作用,其作用机制可能与其增加抗氧化酶的活性有关。     

利拉鲁肽对高脂饲养大鼠骨骼肌脂质沉积及骨骼肌超微结构的影响

目的研究胰高血糖素样肽1类似物利拉鲁肽对高脂喂养胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌脂质沉积及骨骼肌细胞超微结构的影响。方法雄性Wistar大鼠54只,随机普通饲养16只、高脂饲养38只,饲养8周后,各取5只大鼠判定大鼠IR状态,造模成功后,将高脂饲养大鼠分为高脂组、干预组1[利拉鲁肽100μg/(kg·d)]、干预组2[利拉鲁肽200μg/(kg·d)],每组11只,另11只普通饲养为对照组。药物干预2周后,检测骨骼肌内甘油三酯(mTG)、长链脂肪酰辅酶A(LCACoA),透射电镜观察大鼠骨骼肌细胞超微结构改变。结果与对照组比较,高脂组mTG、LCACoA含量升高[(19.58±1.63)μmol/g vs(9.99±0.90)μmol/g;(6.70±0.18)nmol/g vs(2.51±0.18)nmol/g,P0.01];与高脂组比较,干预组1LCACoA含量下降[(6.10±0.37)nmol/g vs(6.70±0.18)nmol/g,P0.05],干预组2mTG、LCACoA含量明显下降[(13.57±0.66)nmol/g vs(19.58±1.63)nmol/g,(4.73±0.31)nmol/g vs(6.70±0.18)nmol/g,P0.01]。干预组1和干预组2较高脂组和对照组脂滴减少、线粒体肿胀减轻。结论利拉鲁肽可呈浓度依赖性减少高脂喂养大鼠mTG和LCACoA含量,可能是减轻IR的原因之一。     

泽参颗粒对脂肪变LO2细胞ADPN／AMPK信号通路的影响

目的：以细胞模型为基础，从 ADPN/AMPK/ACC 信号通路探讨中药复方治疗非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的作用机制。方法取对数生长期的细胞，分为6组：正常组，模型组，化泽参颗粒高、中、低剂量组和多烯磷脂酰胆碱组。待细胞贴壁后，除正常组外，将其余各组培养液更换为含有终浓度为40μg/mL油酸（以DMSO溶解）的培养液进行造模。24 h后，将正常组和模型组更换为正常培养液（10％胎牛血清＋90％ RPMI1640培养基），泽参颗粒高、中、低剂量组和多烯磷脂酰胆碱组则更换为含有10％对应药物血清的培养液，24 h 后，以荧光定量PCR 法检测各组细胞中AdipoR2、AMPKα、ACCα、CPT-1 mRNA 的表达情况。结果与模型组比较，泽参颗粒高、中、低剂量组中AMPKα、CPT-1mRNA的表达均有所升高（P＜0．05），而ACCαmRNA表达均下降（P＜0．05）。AMPKαmRNA表达最高的是泽参颗粒中剂量组，CPT-1 mRNA表达最高的是泽参颗粒低剂量组，而ACCαmRNA 表达最低的是泽参颗粒高剂量组。结论泽参颗粒调控Adipo/AMPK/ACC信号通路可能是其治疗NAFLD的作用机制。     

血浆N末端B型钠尿肽前体和D-二聚体对急性脑梗死患者预后影响的研究

目的研究血浆N末端B型钠尿肽前体(NT-proBNP)和D-二聚体水平对急性脑梗死患者预后的影响。方法选择2015年10月~2016年10月就诊于郑州市第三人民医院的急性脑梗死患者104例作为脑梗死组,根据脑梗死面积、是否合并意识障碍、是否合并高血压、是否死亡分别进行分析。同期选择健康体检者100例为对照组。检测血浆NT-proBNP和D-二聚体水平,并分析其对急性脑梗死患者预后的影响。结果脑梗死组血浆NT-proBNP及D-二聚体水平显著高于对照组,差异有显著意义[(2564.8±125.2)ng/L vs(124.6±52.1)ng/L,P=0.00;(375.9±121.2)ng/L vs(129.6±64.9)ng/L,P=0.01]。大面积脑梗死患者、合并意识障碍患者、合并高血压患者及死亡患者血浆NT-proBNP和D-二聚体水平分别显著高于非大面积脑梗死患者[(4168.5±412.9)ng/L vs(394.3±164.5)ng/L,(522.6±164.3)μg/L vs(146.8±46.9)μg/L]、无意识障碍患者[(5136.8±515.6)ng/L vs(649.2±109.7)ng/L,(649.2±109.7)μg/Lvs(155.9±56.9)μg/L]、无高血压患者[(4296.4±168.7)ng/L vs(302.9±132.2)ng/L,(565.3±104.6)μg/L vs(132.5±76.9)μg/L]及存活患者[(7649.5±542.6)ng/L vs(559.7±124.5)ng/L,(997.4±213.4)μg/L vs(206.9±104.6)μg/L],差异有统计学意义(P0.05)。结论血浆NT-proBNP和D-二聚体水平对于急性脑梗死患者的预后有着较高的临床价值。     

天津地区595例老年人外周血磷酸腺苷酸活化蛋白激酶浓度变化及其与代谢综合征的关系

目的通过对老年人外周血磷酸腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的测定,探讨外周血AMPK浓度与老年代谢综合征患者的关系。方法按照代谢综合征的诊断标准将595例入选者分为代谢综合征组(试验组)和非代谢综合征组(对照组),又按年龄分为60~69岁、70~79岁、≥80岁3个年龄段。2组均空腹8h抽取静脉血检测AMPK浓度,对试验组患者给予降压、降糖、调脂治疗及生活指导,1年后再次进行AMPK的测定,了解干预治疗前后AMPK浓度的变化。结果试验组体质量指数、空腹血糖、收缩压、舒张压和TG高于对照组,HDL-C和AMPK浓度低于对照组(P<0.01);试验组与对照组3个年龄段之间AMPK浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。试验组干预治疗1年后FPG[(6.3±1.1)mmol/Lvs(6.8±1.2)mmol/L]、收缩压[(136.3±12.3)mm Hg vs(145.3±13.6)mm Hg]、舒张压[(80.3±8.6)mm Hg vs(89.9±9.1)mm Hg]和TG[(2.2±0.4)mmol/L vs(2.5±0.3)mmol/L]较治疗前下降,HDL-C[(1.0±0.3)mmol/L vs(0.8±0.1)mmol/L]和AMPK浓度[(4.7±0.2)nmol/L vs(4.1±0.2)nmol/L]较治疗前增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论患有代谢综合征的老年患者外周血AMPK浓度下降,经干预治疗后血压、血糖、血脂有改善,AMPK浓度增加,AMPK与代谢综合征相关。     

硫辛酰胺对db/db小鼠肝损伤的保护作用研究

目的观察硫辛酰胺(ALM)对db/db小鼠肝损伤的保护作用及可能机制。方法db/db小鼠随机分为糖尿病组(DM)和ALM组,C57BL/6J小鼠为正常对照组(NC),每组各6只。ALM组于第9周时予ALM[100 mg/(kg·d)]进行灌胃干预,干预8周后处死小鼠,检测生化指标及肝组织谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醇(MDA)表达量,油红O、HE染色观察肝脏病理学改变,Western blot法检测肝组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白水平。结果与NC组比较,DM组体重、TG、TC、FBG升高,MDA含量升高[(0.73±0.04)vs(0.92±0.17)nmol/mg,P<0.05],CAT活性降低[(1.08±0.18)vs(0.52±0.14)U/mg,P<0.05],ALT、AST活性升高[(16.85±3.84)vs(22.42±4.56)U/g,(6.07±1.91)vs(8.19±1.51)U/g,P<0.05],Nrf2、HO-1的表达升高[(0.33±0.25)vs(1.81±0.34),(0.29±0.13)vs(1.25±0.19),P<0.05]。与DM组比较,ALM组体重、TG、TC降低,MDA降低[(0.92±0.17)vs(0.56±0.11)nmol/mg,P<0.05],CAT活性升高[(0.52±0.14)vs(0.91±0.20)U/mg,P<0.05],ALT、AST活性降低[(22.42±4.56)vs(17.08±5.08)U/g,(8.19±1.51)vs(5.10±0.46)U/g,P<0.05],Nrf2、HO-1表达降低[(1.81±0.34)vs(1.01±0.30),(1.25±0.19)vs(0.52±0.17),P<0.05]。结论ALM可抑制T2DM小鼠肝损伤的发生发展,其机制可能是通过改善肝组织脂质沉积、抑制氧化应激,调节Nrf2、HO-1蛋白表达以实现。     

胆汁淤积性肝病患儿脂溶性维生素水平分析

目的分析婴儿胆汁淤积性肝病(infantile cholestatic hepatopathy,ICH)脂溶性维生素(fat-soluble vitamin,FSV)水平。方法选取2017年1月至2019年2月收治的42例ICH患儿为病例组,选取同期在本院出生的44例健康婴儿为对照组,根据孕妇孕后期及婴儿早期是否补充FSV,将病例组分为病例一组(18例)和病例二组(24例),其中病例一组孕妇孕后期及婴儿均未补充FSV,病例二组孕妇孕后期及婴儿均补充FSV,对照组根据以上标准分为对照一组(22例)和对照二组(22例)。采用随机数字表法将病例组分为母乳喂养组、人工喂养组和混合喂养组,每组14例。采用AU5811全自动生化分析仪检测肝功能指标,包括丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、总胆红素(total bilirubin,TBil)、直接胆红素(direct bilirubin,DBil)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)。采用血凝仪透射比浊测定法检测凝血功能,包括凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)。使用高效液相色谱串联质谱法进行血清FSV测定,包括维生素A、维生素D_3、维生素E、维生素K。两组间上述指标的比较采用独立样本t检验或秩和检验。FSV与ALT、AST、TBil和DBil的相关性采用Spearman秩相关分析。结果病例组和对照组婴儿年龄分别为(96.53±9.21)d和(93.84±8.67)d,差异无统计学意义(t=1.395,P=0.083)。病例组婴儿维生素A [(244.521±124.213)μg/L vs(380.705±133.289)μg/L]、维生素D_3 [(17.459±6.399)μg/L vs(31.962±7.348)μg/L]、维生素E [(6.020±2.302)μg/L vs(18.735±4.326)μg/L]及维生素K [(10.945±3.447)μg/L vs(22.375±5.655)μg/L]水平均显著低于对照组,差异均有统计学意义(P均0.05)。病例一组与病例二组婴儿维生素A [(242.155±106.981)μg/L vs(246.296±157.712)μg/L]、维生素D_3 [(16.401±4.319)μg/L vs(18.001±8.179)μg/L]、维生素E [(5.678±2.436)mg/L vs(6.276±3.110)mg/L]及维生素K [(10.249±3.141)μg/L vs(11.467±4.073)μg/L]水平差异均无统计学意义(P均 0.05)。对照一组维生素A [(408.875±115.493)μg/L vs(352.535±97.732)μg/L]、维生素D_3 [(34.185±8.379)μg/L vs(26.835±6.983)μg/L]、维生素E [(24.152±4.089)mg/L vs(13.318±2.544)mg/L]及维生素K [(26.341±6.376)μg/L vs(18.409±4.205)μg/L]水平均显著高于对照二组,差异均有统计学意义(P均0.05)。病例组PT (中位数:11.7 s vs 11.2 s)、ALT(中位数:99.58 U/L vs 60.23 U/L)、AST(中位数:178.45 U/L vs 140.80 U/L)、TBil(中位数:173.86μmol/L vs139.68μmol/L)、DBil(中位数:103.66μmol/L vs 77.84μmol/L)及TBA(中位数:104.30μmol/L vs 85.59μmol/L)水平均显著高于对照组(P均0.05),APTT(中位数:36 s vs 36 s)水平差异无统计学意义(z=-0.379,P=0.705)。母乳喂养组、人工喂养组和混合喂养组ICH患儿维生素A [(244.312±54.480)μg/L vs(241.646±59.462)μg/Lvs(163.438±33.153)μg/L]、维生素D_3[(9.655±2.941)μg/Lvs(18.192±4.078)μg/L vs(9.148±2.564)μg/L]、维生素E [(7.053±2.756)mg/L vs(10.118±3.798)mg/L vs(10.134±5.699)mg/L]和维生素K [(9.267±2.173)μg/L vs(4.750±1.637)μg/L vs(7.013±2.809)μg/L]水平均差异无统计学意义(P均0.05)。病例组FSV水平与ALT、AST、TBil和DBil均无相关性(P均0.05),维生素D_3与TBA呈负相关(r_s=-0.506,P=0.042),维生素A、维生素E和维生素K与TBA无显著相关性(P均 0.05)。结论 ICH患儿普遍存在FSV缺乏,婴儿补充正常剂量的维生素A和维生素D不能满足机体对FSV的需求。患儿常伴凝血功能障碍,表现为PT延长。不同喂养方式ICH患儿的FSV水平无显著差异。ALT、AST、TBil和DBil水平与FSV无显著相关性,TBA水平与维生素D_3呈负相关。     

2型糖尿病患者骨骼肌丙二酰CoA脱羧酶表达及活性的研究

目的探讨T2DM患者骨骼肌丙二酰COA脱羧酶(MCD)表达和活性的变化,及其在骨骼肌脂质堆积和IR中的作用。方法 选择拟骨科手术的T2DM患者10例(T2DM组)和性别、年龄、BMI匹配的非糖尿病受试者10例(Con组)。测量两组血压、FPG、FIns、TG、TC、FFA。IR稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。术中留取骨骼肌标本,测定骨骼肌TG和长链脂酰CoA含量,以及MCD mRNA表达和活性结果(1)T2DM组HbA_1c、FPG、FIns、TG、FFA、HOMA-IR高于Con组(P0.05)。(2)T2DM组骨骼肌TG及长链脂酰CoA含量高于Con组[骨骼肌TG(6.03±1.62)讲(4.49±1.63)μmol/g;长链脂酰CoA(3.12±1.12)vs(2.13±0.96)μmol/g,P0.05].(3)T2DM组骨骼肌MCD mRNA表达和MCD活性均低于Con组[(1.52±0.22)vs(1.27±0.31)×10~6,(2.21±0.36)vs(1.82±0.30)nmol/min/mg·Pr,P0.05]。结论与Con组比较,T2DM组MCD表达和活性降低,可能在T2DM患者骨骼肌脂质堆积和IR发生中起一定作用。     

普罗布考对动脉粥样硬化兔的高密度脂蛋白逆转运功能中酶蛋白和受体的影响

目的:探讨普罗布考对动脉粥样硬化(AS)兔的高密度脂蛋白逆转运功能中酶蛋白和受体的影响。方法:新西兰大白兔(共24只)随机分为3组:对照组(n=8):用普通饲料饲养;高脂组(n=8):用高脂饲料喂养;普罗布考组(n=8):在高脂饲料的基础上给予普罗布考喂养。饲养12周通过比色法测定血脂,通过酶联免疫吸附法检测血清磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)和胆固醇酯转移蛋白(CETP),并采用免疫组化方法检测主动脉壁斑块内三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)和清道夫受体-BI(SR-BI)表达水平。结果:实验后第12周(1)血脂指标:与高脂组比较,普罗布考组血清总胆固醇[TC,(15.95±1.51)mmol/L vs(21.95±3.71)mmol/L]、低密度脂蛋白胆固醇[LDL-C,(13.01±2.28)mmol/L vs(17.90±3.51)mmol/L]、高密度脂蛋白胆固醇[HDL-C,(0.56±0.10)mmol/L vs(1.13±0.12)mmol/L]水平明显下降,差异均有统计学意义(P0.01)。(2)LCAT和CETP:与对照组[CETP(2.07±0.64)μg/ml和LCAT(27.01±8.26)μg/ml]比较,高脂组[CETP(1.24±0.54)μg/ml和LCAT(15.02±3.81)μg/ml]明显降低,差异均有统计学意义(P0.05);与高脂组比较,普罗布考组[CETP(3.43±1.01)μg/ml和LCAT(38.10±7.96)μg/ml]明显升高,差异均有统计学意义(P0.05)。(3)主动脉壁斑块ABCA1和SR-BI受体表达:与高脂组比较,普罗布考组ABCA1阳性表达的面积(%)显著增加[(46.81±10.01)%vs(24.10±8.48)%,P0.01];SR-B1阳性表达面积(%)亦显著增加[(48.04±10.90)%vs(18.61±6.77)%,P0.01],两组比较差异均有统计学意义。结论:普罗布考通过增加高密度脂蛋白外周动脉受体ABCA1和SR-BI表达,增加LCAT和CETP的量,促进HDL的RCT功能,从而改善HDL的功能。     

脂氧素A4对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾小管上皮细胞Smad7/3、转化生长因子β1及Notch-1表达的调节

目的通过观察脂氧素A4(LXA4)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾小管上皮细胞Smad7/3、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白水平,及其对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞Smad7/3、Notch-1蛋白水平的影响,探讨LXA4对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞纤维化的潜在保护作用。方法雄性SD大鼠随机分为对照组(Con,n=10)、糖尿病组(DM,n=10)、糖尿病+LXA4组(DM+LXA4,n=10),DM+LXA4组以1mg/kg体质量的LXA4隔日1次尾静脉注射,连续8周;肾小管上皮细胞分为Con组、TGF-β1诱导组、LXA4组以及TGF-β1+LXA4组。免疫组织化学法及Western blot法观察STZ诱导的糖尿病大鼠肾小管上皮细胞Smad7/磷酸化Smad3(p-Smad3)及TGF-β1的蛋白水平,并观察LXA4对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞Smad7、p-Smad3及Notch-1的蛋白水平。结果DM+LXA4组Smad7阳性面积率高于DM组及Con组[(24.18±1.38)%vs(18.56±1.13)%,(24.18±1.38)%vs(21.80±1.82)%,P0.001]。p-Smad3及TGF-β1阳性面积率率低于DM组[(14.17±1.18)%vs(17.89±2.62)%,(20.53±0.83)%vs(24.91±1.82)%,P0.05或P0.001],但高于Con组[(14.17±1.18)%vs(12.68±1.33)%,(20.53±0.83)%vs(18.14±1.48)%,P0.001]。LXA4组尿白蛋白、Ⅳ型胶原(TⅣC)及TGF-β1排泄率低于DM组[(46.90±17.65)vs(70.60±14.99)mg/g,(87.40±16.25)vs(149.30±15.13)μg/ml,(53.60±14.74)vs(125.70±32.22)pg/ml,P0.001],但高于Con组[(46.90±17.65)vs(16.70±3.34)mg/g,(87.40±16.25)vs(32.00±10.58)μg/ml,(53.60±14.74)vs(27.10±3.38)pg/ml,P0.001]。LXA4抑制TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞p-Smad3、和Notch-1的蛋白水平,上调Smad7的表达(P0.01)。结论LXA4可以通过上调Smad7、下调p-Smad3、TGF-β1及Notch-1的蛋白水平,预防肾小管上皮细胞纤维化,具有潜在防治TIDM肾病的作用。     

甘草酸二铵脂质配位体对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织AMPK信号通路的影响

目的研究甘草酸二铵脂质配位体(DGLL)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法以高脂饲料喂养建立NAFLD大鼠模型,在造模成功后分别给予DGLL或多烯磷脂酰胆碱(PPC)灌胃16周。采用免疫组化法检测肝组织磷酸化的磷酸腺苷激活蛋白激酶α(P-AMPKα)蛋白表达,采用Real-time PCR法检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(CPT-1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)、酰基辅酶A氧化酶(ACO)、肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)m RNA。结果 DGLL组血清瘦素为(3.87±0.38)ng/ml,显著低于模型组【(4.68±0.39)ng/ml,P0.01】或PPC组【(4.55±0.24)ng/ml,P0.01】;DGLL组脂联素为(12.27±0.64)μg/ml,显著高于模型组【(10.46±0.28)μg/ml,P0.01】,但与PPC组【(12.13±0.56)μg/ml,P0.05】比,无统计学差异;DGLL组大鼠肝组织P-AMPKα蛋白阳性表达面积为(8.38±3.27)%,显著高于模型组【(1.81±0.90)%,P0.01】或PPC组【(5.50±0.73)%,P0.05】;DGLL组肝组织PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 m RNA水平分别为(1.07±0.14、0.91±0.05、1.61±0.54),显著高于模型组【分别为(0.26±0.12、0.14±0.01、0.10±0.03,P0.05】,但ACO m RNA水平(0.23±0.09)与模型组比,无统计学差异【(0.24±0.02),P0.05】;PPC组PPAR-γ和CPT-1 m RNA水平分别为(0.65±0.16)和(0.22±0.05),显著低于DGLL组(P0.05),而GLUT-4和ACO m RNA水平(1.32±0.12和0.14±0.05)与DGLL组比,无统计学差异(P0.05);DGLL组肝组织ACC m RNA水平为(1.67±0.23),显著低于模型组【(3.31±0.02),P0.05】或PPC组【(2.69±0.14),P0.05】;DGLL组L-FABP m RNA水平为(1.06±0.04),显著低于模型组【(1.26±0.02),P0.05】,而与PPC组【(1.06±0.09),P0.05】比,无统计学差异。结论 DGLL能降低NAFLD大鼠血脂、血糖、胰岛素、HOMA-IR、瘦素水平,升高脂联素,并增加肝组织P-AMPKα蛋白表达,上调PPAR-γ、CPT-1、GLUT-4 m RNA水平、下调L-FABP和ACC m RNA水平,这些作用可能与其激活AMPK通路和改善NAFLD糖脂代谢紊乱有关。     

支气管肺泡灌洗液肿瘤标志物检查诊断肺鳞状细胞癌价值分析

目的:探讨支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清中鳞状细胞癌相关抗原(SCC)、可溶性细胞角蛋白19片段(CYFRA 21-1)、癌胚抗原(CEA)浓度对肺鳞状细胞癌的诊断、TNM分期及预后的临床意义。方法:选择经组织病理学和(或)细胞学确诊的40例肺鳞状细胞癌患者作为观察组,40例肺部炎性病变患者作为对照组,采用日本Pentax EPS 3500型电子支气管镜,经气管镜收集BALF,应用酶联免疫吸附法测定两组患者BALF及血清中SCC浓度,应用化学发光法测定两组患者BALF及血清中CYFRA21-1及CEA的浓度。结果:(1)观察组BALF中SCC[(49.6±15.4)vs.(2.1±0.8)μg/L,P=0.000]、CYFRA 21-1[(245.6±95.5)vs.(2.0±0.9)μg/L,P=0.000]、CEA[(15.6±5.5)vs.(3.6±1.4)μg/L,P=0.000],血清中SCC[(13.1±6.0)vs.(1.8±0.7)μg/L,P=0.000]、CYFRA 21-1[(20.4±10.3)vs.(1.9±0.9)μg/L,P=0.000]、CEA[(5.7±2.2)vs.(3.2±1.2)μg/L,P=0.000]均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)观察组BALF中SCC[(49.6±15.4)vs.(13.1±6.0)μg/L,P=0.000]、CYFRA 21-1[(245.6±95.5)vs.(20.4±10.3)μg/L,P=0.000]、CEA[(15.6±5.5)vs.(5.7±2.2)μg/L,P=0.000]均高于血清,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)观察组Ⅲ~Ⅳ期BALF中SCC[(63.8±10.4)vs.(41.9±11.9)μg/L,P=0.000]、CYFRA 21-1[(328.3±61.0)vs.(201.1±80.0)μg/L,P=0.000]、CEA[(20.5±4.0)vs.(12.9±4.2)μg/L,P=0.000]均高于Ⅰ~Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:BALF中SCC、CYFRA 21-1及CEA的检测对肺鳞状细胞癌的早期诊断有较好的临床价值,同时对临床分期、监测病情、判断预后也有一定临床价值,值得在临床上推广应用。     

零下非结冰UW液、Celsior液和HTK液保存C3A细胞的效果比较

目的 比较UW液、Celsior液和HTK液零下非结冰(-0.8℃)保存生物人工肝用C3A细胞的效果.方法 制备好的C3A细胞悬液分以下3组:UW液保存组(UW液组);Celsior液保存组(CS液组);HTK液保存组(HTK液组).各组细胞于-0.8℃低温保存72 h后,分别测定细胞存活率及死亡率(流式细胞术)、LDH释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能.结果 UW液及Celsior液比HTK液显著提高了零下非结冰保存72 h的C3A细胞的存活率[(84.34±4.25)%,(83.53±3.73)% vs (75.65±3.01)%,P<0.001]和细胞内ATP含量[(5.54±1.44)μg/106 个细胞,(5.51±1.31)μg/106个细胞 vs (2.75±1.03)μg/106 个细胞,P<0.001];抑制了LDH释放(P<0.001);更好地维持了细胞尿素合成功能[(0.63±0.10)mmol/L,(0.62±0.06)mmol/L vs (0.39±0.04)mmol/L,P<0.001]和白蛋白分泌功能[(1.99±0.38)g/L,(1.96±0.24)g/L vs (1.50±0.18)g/L,P<0.05].UW液与Celsior液零下非结冰保存C3A细胞的效果无差异.结论 同HTK液相比,使用UW液或者Celsior液零下非结冰(-0.8℃)保存C3A细胞可以明显地提高复温后细胞存活率和细胞内ATP含量,降低低温损伤引起的LDH释放,有效地保护肝细胞尿素合成功能和白蛋白分泌功能.UW液同Celsior液零下非结冰保存C3A细胞的效果无差异,保存时间不宜超过72 h.     

急性冠状动脉综合征患者血清脂肪细胞因子的变化与冠状动脉病变程度的关系

目的观察急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者血清脂肪细胞因子:脂联素、瘦素、抵抗素水平变化及其对冠状动脉病变程度的影响。方法选择2009年1月~2011年10月在我院经冠状动脉造影确诊为ACS的患者95例作为ACS组,另选择冠状动脉造影正常的95例作为对照组。ACS组根据病变支数分为单支组(43例)、双支组(33例)、三支组(19例)。所有患者检查脂联素、瘦素、抵抗素水平及生化检查。结果 ACS组抵抗素[(4.63±1.44)μg/L vs(2.42±0.93)μg/L,P=0.017]、瘦素[(9.60±1.39)μg/L vs(6.70±1.38)μg/L,P=0.009]水平明显高于对照组,脂联素[(8.99±1.66)μg/L vs(12.11±1.97)μg/L,P=0.006]水平明显低于对照组。随着病变支数增多,脂联素水平明显降低,瘦素、抵抗素水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。logistic回归分析,ACS患者的脂联素OR=0.078,95%CI:0.017~0.364,P=0.001;抵抗素OR=16.56,95%CI:2.298~119.280,P=0.005;瘦素OR=7.17,95%CI:1.594~32.261,P=0.010。结论脂联素、瘦素、抵抗素在诊疗ACS方面具有重要价值。     

地震相关挤压综合征急性肾损伤患者尿中肾损伤标志物的变化及意义

目的:评估地震相关挤压综合征(crush syndrome,CS)急性肾损伤透析患者尿中中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)、IL-18及肾损伤分子(kidney injury molecule-1,KIM-1)的变化,以及这些指标与血肌酐、尿肌红蛋白等指标的关系,研究治疗前后肾损伤标志物的改变. 方法:研究纳入16例CS急性肾损伤透析患者,12名正常对照,对10例CS患者随访14d,用ELISA方法分别测定两组尿IL-18、NGAL及KIM-1;同时测定患者尿肌酐、血肌酐、血肌红蛋白等生化指标.使用ATN-ISI'评估CS患者病情严重程度及转归. 结果:与对照组比较,CS患者:血肌酐明显升高[(324.0±189.7)μmol/L vs (72.1±15.7)μmol/L,P<0.01]、尿肌红蛋白明显升高[(593.5±381.4)ng/ml vs (8.7±1.7)ng/ml,P<0.01].肾损伤标志物尿IL-18[(59.54±41.31)μg/g vs (22.62±17.40)μg/g,P<0.01]、尿NGAL[(1.06±1.07)μg/g vs (0.39±0.30)μg/g,P<0.05]、尿KIM-1[(1.87±1.47)μg/g vs (0.92±0.62)μg/g,P<0.05)均明显升高.Pearson分析提示尿KIM-1、尿NGAL、尿IL-18之间存在正相关,P值均小于0.05;NGAL与ATN-ISI呈正相关(r=0.65,P<0.01).病程前后(n=10)NGAL含量分别为(0.86±0.51)μg/g、(0.78±0.64)μg/g,P>0.05,IL-18含量分别为(57.33±36.97)μg/g、(97.14±118.72)μg/g,(P>0.05),KIM-1含量分别为(1.78±1.61)μg/g、(1.77±1.55)μg/g,(P>0.05).其中有3例患者脱离透析治疗,病程第14d其尿NGAL(1.14±0.54)μg/g,(0.37±0.23)μg/g、KIM-1(3.01±1.54)μg/g,(0.75±0.52)μg/g、IL-18(71.73±30.34)μg/g,(24.13±12.23)μg/g,均明显下降. 结论:CS接受透析的患者肾损伤标志物IL-18、NGAL、KIM-1均明显升高,其中NGAL与肾脏损伤程度正相关,上述指标可随CS患者肾功能的恢复而下降.     

1,25二羟基维生素D_3对HepG_2细胞内甘油三酯含量及其机制的研究

目的观察1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)_2D_3]对HepG_2细胞内TG含量及其代谢途径中相关基因脂联素受体2(AdipoR2)、p38丝分裂素激活蛋白激酶(p38MAPK)、脂蛋白脂(LPL)表达的影响,揭示1,25(OH)_2D_3在调控HepG_2细胞内TG代谢中的作用,并探讨1,25(OH)_2D_3调控TG代谢的可能机制。方法将HepG_2细胞分为Con组、溶剂组、MK886组、VitD组及VitD+MK886组。检测各组肝细胞内AdipoR2、p38MAPK、LPL基因、蛋白表达水平及肝细胞内TG含量。结果 Con组、溶剂组、VitD+MK886组比较,3种目标基因及蛋白含量、TG含量差异均无统计学意义(P0.05);MK886组与Con组、溶剂组、VitD+MK886组比较,3种目标基因及蛋白含量降低(P0.05),而TG含量升高[(841.26±60.1)vs(432.17±58.23)vs(427.18±57.85)vs(429.36±57.96)mg/g,P0.05];VitD组与Con组、溶剂组、VitD+MK886组比较,3种目的基因及蛋白含量升高(P0.05),而TG含量降低[(231.72±40.83)vs(432.17±58.23)vs(427.18±57.85)vs(429.36±57.96)mg/g,P0.05];VitD组与MK886组比较,3种目的基因及蛋白含量升高(P0.05),而TG含量降低[(231.72±40.83)vs(841.26±60.13)mg/g,P0.05]。结论 1,25(OH)_2D_3可能是通过上调AdipoR2、p38MAPK、LPL的表达来降低肝细胞内TG含量。     

急性缺血性脑卒中患者血清铁调素25及铁代谢指标变化及临床意义

目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清铁调素25及铁代谢指标的变化及其与病情严重程度和早期预后的关系。方法选择AIS患者178例作为病例组,神经功能缺损程度按美国国立卫生研究院卒中量表评分评定,并分为轻型57例、中型62例和重型59例,检测发病后24h、3、7、14和28d时血清铁调素25和铁蛋白水平。另选同期健康体检者150例作为对照组。结果病例组发病24h、3、7、14和28d血清铁调素25[(34.99±10.85)μg/L,(42.63±8.12)μg/L,(47.67±5.29)μg/L,(32.28±5.49)μg/L,(28.64±1.53)μg/L vs(22.65±4.88)μg/L,P=0.000]、铁蛋白[(208.38±22.35)μg/L,(280.56±18.11)μg/L,(299.44±18.07)μg/L,(97.88±15.19)μg/L和(90.67±10.92)μg/L vs(77.51±21.22)μg/L,P=0.000]高于对照组。病例组在不同时间点以及轻、中、重型患者血清铁调素25、铁蛋白水平比较,差异有统计学意义(P<0.01)。血清铁调素25水平与铁蛋白及白细胞介素6呈正相关(r=0.992,0.809,P<0.01)。结论血清铁调素25和铁蛋白水平可作为判断AIS病情严重程度及预后的生物学指标,提示铁代谢可能参与了脑梗死的全过程。