钙及钙调蛋白依赖性激酶在神经元缺氧损伤中的作用

目的：探讨钙及钙调蛋白依赖性激酶（calmodulin dependent kinase,CaMK）在神经元缺氧损伤中的作用及机制。方法：体外培养大鼠胚脑皮质神经元,随机分为单纯缺氧组及钙阻滞剂干预组,其中钙阻滞剂干预组采用尼莫地平（nimodipine）、MK-801分别阻断L-VSCC受体、NMDA受体的传导,采用MTT法测定各组神经元缺氧前后细胞活性,用Fluo-4AM荧光探针测定各组细胞内钙离子浓度的变化,Western blot检测CaMKⅡ及CaMKⅣ的表达。结果：尼莫地平及MK-801组细胞活性较单纯缺氧的对照组高;尼莫地平可迅速降低缺氧神经元的细胞内钙, MK-801可长时间降低缺氧神经元的细胞内钙。尼莫地平可抑制CaMKⅡ的表达,MK-801对CaMKⅡ的表达无明显影响,但可抑制CaMK Ⅳ的表达。结论：尼莫地平和MK-801可分别通过抑制CaMKⅡ和CaMKⅣ表达实现对缺氧神经元的保护作用。［中国当代儿科杂志,2007,9（4）：324-326］     

P77PMC大鼠惊厥后脑内N—甲基—D—门冬氨酸受体功能的研究

目的 探讨惊厥后大脑皮质N－甲基－D－门冬氨酸（NMDA）受体兴奋性的改变与癫Xian发病机制的关系。方法 利用配基结合实验观察听源性惊厥大鼠P77PMC惊厥前后大脑皮质突触膜对^3H-MK 801的结合改变以及不同激动剂组合对其结合的影响。结果 反应体系中无任何NMDA受活动剂时,惊厥后大脑皮质突触膜对^3H-MK 801的结合有增加趋势,但无统计学意义;当反应液中加入NMDA受体激动剂时,惊厥后大脑皮质突触膜对^3H-MK 801的结合明显增加,除惊厥后4h与正常对照组相比无统计学差异外,其他惊厥后各时间点与正常对比均有统计学差异（P＜0．01）。结论 听源性惊厥大鼠P77PMC惊厥后,大脑皮质NMDA受体活性增高,对其激动剂的敏感性增加,受体通道更易被打开。     

MK-801对围生期缺氧缺血性损伤后脑细胞线粒体膜电势的影响

目的了解围生期缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后脑细胞线粒体膜电势(△ψm)的变化及NMDA型谷氨酸受体拮抗剂MK-801对这一变化的影响.方法应用7日龄新生SD大鼠HIBD动物模型,将实验动物分为正常对照组(n=6),HIBD组(n=10)和HIBD+MK-801组(n=10)(MK-801于低氧处理前按0.3mg/kg剂量腹腔注射).于缺氧缺血后立即断头处死动物,制成脑细胞悬液后,以罗丹明123(Rho123)标记、以流式细胞仪测定△ψm的变化.结果围产期HIBD时双侧脑细胞△ψm值均显著降低,差异具有显著性(P＜0.05),以损伤侧(右侧)为甚,右侧脑细胞△ψm由正常状态下的(18.93±0.74)MFL降至损伤后的(7.59±0.32)MFL,右左△ψm比值由正常状态下的1.06±0.05降至损伤后的0.80±0.06(降低了24.5%),差异具有显著性(P＜0.05).结论HIBD后脑细胞△ψm明显降低,提示线粒体功能明显受损;MK-801可减轻这一变化,提示NMDA型谷氨酸受体拮抗剂可通过减轻线粒体功能受损程度治疗围产期缺氧缺血性脑损伤.     

孕早期人巨细胞病毒感染对仔鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基表达的影响

目的探讨孕早期人巨细胞病毒(HCMV)感染对子代SD大鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚基的影响及对仔鼠学习记忆的影响。方法取8周龄SPF级SD雌鼠18只。按雌雄31合笼交配,将受精大鼠随机分为实验组和对照组,每组9只,于妊娠第5天分别腹腔内注射5×107L-1半数组织培养感染量(TCID50)HCMV悬液0.8 mL和等量的人胚成纤维细胞上清液。出生后1个月分别从每组随机抽取10只子代大鼠,取仔鼠脑组织,采用HE染色观察仔鼠海马形态学变化;使用Morris水迷宫评价子代大鼠的学习记忆功能;应用免疫组织化学方法检测大鼠海马组织NMDA受体表达变化。采用SPSS 16.0软件进行统计学处理。结果对照组子代大鼠海马未见神经元缺失,排列紧密,均匀整齐,胞核呈圆形或椭圆形,核仁明显,染色质均匀;与对照组比较,实验组子代大鼠海马有神经细胞坏死、减少、水肿、细胞核消失现象,部分细胞呈巨细胞变;在Morris水迷宫实验中,实验组子代大鼠的学习记忆成绩较对照组明显下降(Pa<0.01);免疫组织化学结果显示实验组子代大鼠海马组织NR1、NR2A及NR2B平均吸光度均较对照组低(Pa<0.01)。结论孕早期HCMV感染可导致仔鼠学习记忆能力受损,可能与其海马区NMDA受体的表达减少有关。     

MK-801对围生期缺氧缺血性损伤后脑细胞线粒体膜电势的影响

目的了解围生期缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后脑细胞线粒体膜电势(△Ψm)的变化及NMDA型谷氨酸受体拮抗剂MK-801对这一变化的影响。方法应用7日龄新生SD大鼠HIBD动物模型,将实验动物分为正常对照组(n=6),HIBD组(n=10)和HIBD+MK-801组(n=10)(MK-801于低氧处理前按0.3mg/kg剂量腹腔注射)。于缺氧缺血后立即断头处死动物,制成脑细胞悬液后,以罗丹明123(Rho123)标记、以流式细胞仪测定△Ψm的变化。结果围产期HIBD时双侧脑细胞△Ψm值均显著降低,差异具有显著性(P<0.05),以损伤侧(右侧)为甚,右侧脑细胞△Ψm由正常状态下的(18.93±0.74)MFL降至损伤后的(7.59±0.32)MFL,右:左△Ψm比值由正常状态下的1.06±0.05降至损伤后的0.80±0.06(降低了24.5%),差异具有显著性(P<0.05)。结论HIBD后脑细胞△Ψm明显降低,提示线粒体功能明显受损;MK-801可减轻这一变化,提示NMDA型谷氨酸受体拮抗剂可通过减轻线粒体功能受损程度治疗围产期缺氧缺血性脑损伤。     

母孕期慢性应激与NMDA诱导的幼鼠痉挛模型的关系

目的 探讨母孕期慢性应激与子代N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDA)诱导的痉挛发作的关系.方法 孕鼠分为母孕期慢性应激组(PS组n=6只)和对照组(PC组n=5只),应用母孕期强迫游泳,水温4℃,5 min,建立母孕期慢性应激模型;生后13 d幼鼠,腹腔注射NMDA 7 mg/kg建立幼鼠痉挛模型,观察幼鼠痉挛样发作次数的变化;应用HE染色方法和扫描电镜观察神经细胞大体形态和细胞线粒体超微结构的改变,应用免疫组织化学方法检测幼鼠脑内海马结构、大脑皮层、下丘脑和脑干部脊髓核团神经元NMDA受体表达,比较PS组和PC组幼鼠NMDA受体阳性细胞的差异.结果 PS组幼鼠NMDA致(癎)评分高于PC组(7.84±1.01比5.90±1.12,P=0.000).PS组幼鼠与PC组幼鼠脑切片HE染色均有细胞水肿.电镜下,PS组幼鼠较PC组幼鼠海马和脑干处神经细胞线粒体破坏增多,线粒体直径PS组为(692.9±119.0)μm,而PC组海马和脑于处神经细胞线粒体直径为(817.1±210)μm.免疫组织化学染色显示:NR1、NR2A、NR2B抗体均主要表达在细胞膜,细胞质和细胞核也有表达.PS组幼鼠NR1、NR2B阳性细胞在海马、皮层、下丘脑及脑干较PC组表达量均高,NR1两组比较P均<0.05;NR2B两组比较P均<0.01.PS组幼鼠NR2A阳性细胞数在海马处较PC组增高(P=0.006),在皮层、下丘脑室旁核和脑干脊核处两组差异无统计学意义(P均>0.05).结论 母孕期慢性应激可损伤子代幼鼠脑内神经细胞的线粒体,从而改变细胞的能景代谢,同时增加神经细胞NR1、NR2A、NR2B的表达,增加子代幼鼠痉挛的发生率.     

戊二酰辅酶A脱氢酶基因沉默及高浓度赖氨酸对BRL肝细胞活性的影响

目的探讨戊二酰辅酶A脱氢酶(GCDH)基因沉默和赖氨酸代谢物蓄积对肝细胞活性的影响。方法将BRL肝细胞分为正常对照组、阴性对照组和GCDH沉默组。构建含靶向沉默GCDH基因的sh RNA慢病毒载体,分别用该病毒和阴性对照病毒感染GCDH沉默组和阴性对照组BRL肝细胞。感染后细胞再用含5 mmol/L赖氨酸培养基培养。免疫荧光技术检测慢病毒感染效率;Western blot法检测GCDH蛋白表达水平;MTT法检测细胞活性,Hoechest 33342染色检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞凋亡的经典指标Caspase3水平。结果构建的慢病毒可有效沉默肝细胞GCDH表达(P0.01)。MTT及Hoechest 33342染色检测各组间细胞活性及细胞凋亡比较差异无统计学意义(P0.05)。Caspase3蛋白表达在各组间比较差异亦无统计学意义(P0.05)。结论 GCDH基因沉默和赖氨酸代谢物蓄积对肝细胞无明显损伤作用。     

神经系统及精神疾病

3叮3 972274反义寡聚核若酸对神经元兴奋性毒性的拮抗作用/单巍松…//中华儿科杂志一1997,35(1)一17一20 在大鼠大脑皮层神经元原代培养中,将细胞分为反义、正义NRI寡聚核昔酸、脂质体及正常对照组(每组n=5),分别给药,通过细胞计数、扫描电镜、放射性受体分析技术观察神经元形态及功能。发现反义NRI寡聚核昔酸可抑制N一甲基一D一天门冬氨酸(NMDA)诱导的神经兴奋性毒性造成的神经元死亡,拮抗NMDA造成的神经元结构破坏,对神经细胞的保护率为52%;并使神经细胞对〔3H〕MK一801结合降低50%。提示反义NRI寡聚核昔酸具有拮抗兴奋性毒性作…     

MK-801诱导的精神分裂症大鼠脑组织PV、GAD67和KCC2的表达变化

目的：通过对地佐环平（MK-801）诱导的精神分裂症（SZ）大鼠脑组织小清蛋白(PV)、谷氨酸脱羧酶67(GAD67)以及K+-Cl-协同转运蛋白2(KCC2)表达的比较研究,探讨围产期NMDA受体阻断剂致SZ的γ-氨基丁酸(GABA) 机制。方法：36只新生雄性Sprague-Dawley 大鼠于出生后（postnatal, P）6 d随机分为2批,每批又随机分为正常对照组、SZ发育模型组和SZ慢性给药模型组。SZ发育模型组于P7~10 d皮下注射0.1 mg/kg MK-801,每日2次;SZ慢性给药模型组于P47~60 d腹腔注射0.2 mg/kg MK-801,每日1次;对照组和各模型组大鼠于相应时段注射0.9 %的生理盐水。P63 d,第1批大鼠断头取脑,多聚甲醛固定后行组织切片,以免疫组化方法检测内侧前额叶皮质（mPFC）和海马CA1区PV及GAD67的表达情况;第2批大鼠处死后取mPFC和海马组织匀浆,以免疫印记方法检测mPFC和海马组织KCC2的表达水平。结果：两模型组mPFC和海马CA1区PV以及GAD67的表达水平显著低于对照组（P<0.05）;SZ发育模型大鼠mPFC和海马CA1区的KCC2表达水平显著低于慢性给药模型组和对照组（P<0.05）。结论：MK-801诱导的SZ发育模型可模拟SZ患者大脑PV和GAD67的表达改变,并可能通过下调KCC2的表达影响mPFC和海马GABA递质系统的发育。     

戊四氮诱导发育鼠癫癎持续状态后海马神经发生及MK-801的影响

目的：探讨戊四氮诱导发育期大鼠癫癎持续状态(SE)后对海马内齿状回颗粒细胞神经发生的影响以及N-甲基D-天冬氨酸受体(NMDAR)拮抗剂MK-801对此结果的抑制作用,从而研究癫癎发作后发育脑海马内神经发生及NMDAR在神经发生中的作用。方法：SD大鼠7,14,21,28d4个日龄组共216只,每组均为54只,每个日龄组大鼠随机分SE组、MK-801组和正常对照组,每组18只。采用5-溴脱氧尿核苷(BrdU)标记新生细胞,再以β微管蛋白Ⅲ(TuJ1)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)分别标记早期神经元和胶质细胞的单、双标免疫组织化学方法,检测PTZ诱导癫癎持续状态后发育鼠海马齿状回(dentategyrus,DG)神经发生,并用MK-801治疗后观察对其的影响。结果：BrdU注射后第7天和第14天,SE组各日龄幼鼠齿状回BrdU阳性细胞数明显高于同日龄的正常对照组,其中约有80%同时表达TuJ1;MK-801组BrdU阳性细胞数较SE组明显减少(P<0.01),而在第28天三组之间BrdU阳性细胞数无明显差异(P>0.05)。结论：癫癎发作可增加幼鼠齿状回颗粒细胞的神经发生,而NMDAR在癫癎后的神经发生中起着促进作用。     

尿系列酶测定对新生儿硬肿症肾功能的评价

目的　探讨新生儿硬肿症尿系列酶的改变作为评价肾小管功能的指标。方法　检测新生儿硬肿症尿系列酶NAG、GAL、GGT、ALP、LDH活性 ,与正常组进行对照 ,同时检测血BUN ,Bcr作为肾小球功能的指标 ,中、重度硬肿者与尿酶值进行相关性分析。结果　尿酶NAG、GAL、ALP、LDH酶活性在新生儿硬肿症组与对照组比较明显增高 ,有显著差异 (P <0 0 1) ,GGT酶无显著差异 (P >0 0 5 ) ;三种不同程度新生儿硬肿症时尿酶NAG、GAL、ALP、LDH均出现统计学差异 ;肾功能血BUN、Bcr值增高与尿酶间存在正的直线相关关系。结论　尿酶NAG、GAL、ALP、LDH活性不同程度升高 ,表明不同程度新生儿硬肿症肾小管功能受累 ,当肾小球功能受损时 ,其与肾小球功能受损成正比     

戊二酸致原代培养纹状体神经元神经毒性的体外研究

目的 探讨戊二酸(GA)干预体外培养纹状体神经元致神经元损伤的浓度和时间及其损伤机制.方法 体外培养新生大鼠纹状体神经元,于体外培养7 d行神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学染色鉴定神经元纯度.纯度达90%以上,用不同浓度GA(1～50 mmol·L-1)孵育体外培养10 d的纹状体神经元24～96 h.倒置显微镜及赫斯特荧光染料33342(-/+)荧光活细胞染色后荧光显微镜观察神经元形态变化;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测细胞线粒体功能变化;膜联蛋白-V/碘化丙啶双染流式细胞仪检测判断GA诱导纹状体神经元凋亡率及死亡率;实时定量反转录(RT)-PCR及Western blot法检测半胱氨酸天冬氨酸酶(Caspase)-3、Caspase-9表达.结果 GA处理组细胞线粒体功能受损程度呈浓度及时间依赖性改变:随着GA浓度升高,干预时间延长,神经元损伤加重.与正常对照组比较,10 mmol·L-1、25 mmol·L-1、50 mmol·L-1组GA干预24～72 h纹状体神经元活力均比正常对照组显著增高(P<0.05);1 mmol·L-1组干预72 h、96 h与正常对照组比较均明显升高(Pa<0.01).50 mmol·L-1组孵育72 h较孵育48 h细胞凋亡显著增加[(87.63±9.17)% vs (40.90±4.10)%,P<0.01];25 mmol·L-1组孵育72 h凋亡率为(24.73±2.95)%.10 mmol·L-1、25 mmol·L-1、50 mmol·L-1 GA作用神经元1 h、6 h,Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达明显增加,25 mmol·L-1、50 mmol·L-1 GA处理24 h后神经元Caspase-9、Caspase-3蛋白活化片段增加.结论 GA致纹状体神经元损伤呈浓度-时间依赖性,通过Caspase-9/Caspase-3途径诱导纹状体神经元凋亡,该机制可能与GA血症Ⅰ型大鼠纹状体退行性变有关.     

神经营养素-3体外诱导新生鼠海马神经干细胞定向分化

目的探讨神经营养素-3（NT-3）对神经干细胞（NSCs）定向分化的影响。方法取24h龄新生鼠海马组织，以无血清培养基获得NSCs，随即分为实验和对照组。实验组用基础培养液加50g／L胎牛血清（FBS）和20μg／LNT-3诱导其分化；对照组用基础培养液加50g／LFBS。用免疫荧光及流式细胞仪法检测分化得到神经元特异性烯醇化酶（NSE）神经元及阳性神经元比例。结果随着分化培养时间延长，二组NSE阳性神经元渐增加；实验组NSE阳性神经元的比例在分化培养第3天达到高峰，约63％，对照组仅29％，二组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论NT-3体外促进NSCs向神经元定向分化，并可提高其分化比例。     

尿系列酶测定对高胆红素血症新生儿肾小管功能的评价

目的探讨尿系列酶的改变作为评价高胆红素血症(高胆)新生儿肾小管功能的指标.方法检测38例高胆新生儿尿系列酶(NAG、GAL、GGT、ALP、LDH)活性与50例正常对照;其中32例不同程度高胆患儿进行治疗前后尿系列酶对照分析.结果高胆新生儿尿酶NAG、GAL、ALP、LDH活性与对照组比较明显增高,出现显著性差异(P＜0.01);三组不同程度高胆新生儿NAG、ALP、LDH活性比较均出现统计学差异(P＜0.01),治疗后轻、中度黄疸ANG、ALP、LDH活性与治疗前比较明显减低,出现显著性差异(P均＜0.05),重度黄疸NAG、ALP、LDH与治疗前比较无明显差异,P＞0.05;血清总胆红素水平与NAG、ALP、LDH呈正相关关系.结论尿系列酶改变可以反映高胆新生儿时肾小管功能不同程度的受损;轻、中度高胆新生儿肾小管功能受损是可逆的,重度肾损害恢复慢.     

尿系列酶检测对新生儿肺炎肾功能的评价

目的　 探讨新生儿肺炎时尿系列酶的改变作为评价肾小管功能的指标。 方法 　检测早产、足月新生儿肺炎尿系列酶NAG、GAL、GGT、ALP、LDH活性 ,与正常组进行对照。同时检测血BUN ,SCr作为肾小球功能的指标 ,GAL/NAG比值动态观察作为肾功能恢复的指标。 结果 　早产儿组尿酶NAG、GAL、GGT、ALP、LDH活性与对照组比较明显增高 ,有显著差异 (P <0 0 0 1) ,足月儿组尿酶NAG、ALP、LDH活性与对照组比较明显增高 ,有显著差异 (P <0 0 0 1)。尿酶GAL/NAG比值恢复期与对照组比较有统计学差异 (P <0 0 5 )。 结论 　尿酶NAG、GAL、GGT、ALP、LDH活性增高可作为新生儿肺炎时肾小管功能受累的指标 ,GAL/NAG比值升高提示新生儿肺炎肾功能的恢复     

佝偻病维生素D受体基因多态性与25-羟维生素D3相关性

目的：研究1~3岁佝偻病患儿中维生素D受体基因多态性FokⅠ位点与佝偻病相关性,初步探讨维生素D受体基因多态性FokⅠ位点在佝偻病发病中的作用。方法：病例组（佝偻病患儿）62例与对照组（正常健康儿童）60例,用ELISA方法检测血清25-羟维生素D3水平,比较两组之间血清25-羟维生素D3水平。用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）检测病例组和对照组维生素D受体基因多态性FokⅠ位点,比较两组之间基因型和等位基因分布频率。结果病例组血清25-羟维生素D3水平较对照组明显降低,差异有统计学意义（9.1±4.1 ng/mL vs 16.1±6.9 ng/mL;P＜0.05）。维生素D受体基因多态性FokⅠ位点病例组FF基因型明显高于对照组（53% vs 25%）,基因型分布频率差异有统计学意义（χ2=10.221,P＜0.05）,病例组F等位基因频率明显高于对照组（73% vs 57%）,等位基因分布频率差异有统计学意义（χ2=7.511,P＜0.05）。结论维生素D受体基因多态性FokⅠ位点与佝偻病有相关性,提示其在佝偻病遗传易感性方面起重要作用。［中国当代儿科杂志,2010,12（7）：544-546］     

大剂量甲泼尼龙对婴儿痉挛幼鼠脑组织的保护作用

目的 婴儿痉挛症(infantile spasms,IS)是婴儿期最常见的难治性癫痫性脑病,但相关动物实验缺乏,该研究通过构建IS动物模型,探讨大剂量甲泼尼龙对IS幼鼠脑组织的影响.方法 将生后10 d(P10)SD大鼠随机分为对照组、模型Ⅰ组和模型Ⅱ组,每组30只.模型Ⅰ组和模型Ⅱ组分别在P10、P13腹腔注射N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)诱发癫痫发作,模型Ⅱ组在P13应用NM-DA前连用3 d甲泼尼龙.观察幼鼠癫痫发作并评分,原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡情况,免疫组织化学法测Bax、Bcl-2蛋白表达、实时荧光定量PCR检测海马组织Bcl-2、Bax和caspase-3 mRNA的表达.结果 (1)P13模型Ⅰ组癫痫发作率83.3%(25/30),模型Ⅱ组均未出现发作,模型Ⅱ组较模型Ⅰ组癫痫发作率明显降低;(2)模型Ⅱ组凋亡细胞数(14.37±2.02)少于模型Ⅰ组(25.67±1.52),多于对照组(9.00±2.50),差异均有统计学意义(均P<0.05);(3)模型Ⅱ组Bax蛋白及mRNA表达量(44.55±3.58,2.35±1.01)明显低于模型Ⅰ组(58.05±4.62,3.27±0.95),高于对照组(28.90±5.14,1.68±0.50),差异均有统计学意义(均P<0.05);(4)模型Ⅱ组caspase-3mRNA表达量(5.99±1.75)低于模型Ⅰ组(7.88±1.60),高于对照组(3.60±1.70),差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 大剂量甲泼尼龙能减轻NMDA致IS幼鼠癫痫发作;大剂量甲泼尼龙对NMDA致IS幼鼠具有脑保护作用,这种保护作用可能与其减轻癫痫发作,减少细胞凋亡有关.     

尿系列酶测定对高胆红素血症新生儿肾小管功能的评价

目的 探讨尿系列酶的改变作为评价高胆红素血症(高胆)新生儿肾小管功能的指标。方法 检测38例高胆新生儿尿系列酶(NAG、GAL、GGT、ALP、LDH)活性与50例正常对照;其中32例不同程度高胆患儿进行治疗前后尿系列酶对照分析。结果 高胆新生儿尿酶NAG、GAL、ALP、LDH活性与对照组比较明显增高,出现显著性差异(P<0.01);三组不同程度高胆新生儿NAG、ALP、LDH活性比较均出现统计学差异(P<0.01),治疗后轻、中度黄疸ANG、ALP、LDH活性与治疗前比较明显减低,出现显著性差异(P均<0.05),重度黄疸NAC、ALP、LDH与治疗前比较无明显差异,P>0.05;血清总胆红素水平与NAG、ALP、LDH呈正相关关系。结论 尿系列酶改变可以反映高胆新生儿时肾小管功能不同程度的受损;轻、中度高胆新生儿肾小管功能受损是可逆的,重度肾损害恢复慢。     

在体微透析检测豚鼠胆红素脑病模型脑组织兴奋性氨基酸神经递质

目的　探讨胆红素脑病动物模型制作及其脑组织中兴奋性氨基酸 (EAA)神经递质变化。方法　豚鼠腹腔内给予胆红素 2 0 0 μg/g后 8h ,电镜观察脑组织形态结构 ,在体脑内微透析提取神经突触间细胞外液 ,HPLC检测分析天冬氨酸 (Asp) ,谷氨酸 (Glu)和甘氨酸 (Gly)。结果　胆红素毒性脑组织神经元及其线粒体肿胀 ,细胞外Gly含量为2 1 .35± 4.87μM ,明显高于对照组1 4 .0 2± 1 .5 6 μM (P <0 .0 1 ) ;胆红素毒性脑组织细胞外Asp ,Glu与对照组比较差异不显著 (P >0 .0 5 )。结论　胆红素毒性脑组织细胞外甘氨酸 (Gly)含量增加 ,可提高NMDA受体对EAA神经递质Asp及Glu敏感性 ,致NMDA受体过度活化。     

在体微透析检测豚鼠胆红素脑病模型脑组织兴奋性氨基酸神经递质

目的　探讨胆红素脑病动物模型制作及其脑组织中兴奋性氨基酸 (EAA)神经递质变化。方法　豚鼠腹腔内给予胆红素 2 0 0 μg/g后 8h ,电镜观察脑组织形态结构 ,在体脑内微透析提取神经突触间细胞外液 ,HPLC检测分析天冬氨酸 (Asp) ,谷氨酸 (Glu)和甘氨酸 (Gly)。结果　胆红素毒性脑组织神经元及其线粒体肿胀 ,细胞外Gly含量为2 1 .35± 4.87μM ,明显高于对照组1 4 .0 2± 1 .5 6 μM (P <0 .0 1 ) ;胆红素毒性脑组织细胞外Asp ,Glu与对照组比较差异不显著 (P >0 .0 5 )。结论　胆红素毒性脑组织细胞外甘氨酸 (Gly)含量增加 ,可提高NMDA受体对EAA神经递质Asp及Glu敏感性 ,致NMDA受体过度活化。