乙型肝炎病毒感染性疾病患者肠道菌群结构和多样性分析

目的 探究乙型肝炎病毒(HBV)感染性疾病患者肠道菌群间的差异性。方法 收集2020年2—9月新疆医科大学第一附属医院肝病专科收治的133例肝病患者粪便,包括HBV携带者(HBV组)23例、乙型肝炎肝硬化(LC组)25例、肝细胞癌(HCC组)38例、慢加急性肝衰竭(ACLF组)16例、自身免疫性肝炎(AIH组)13例和原发性胆汁性肝硬化(PBC组)18例。提取粪便样本基因组DNA,特定性引物扩增DNA样本中16S rRNA基因的V3～V4可变区。Usparse软件分析扩增序列,并依据分析结果(相似度≥97%)划分OTU,Silva数据库对OTU进行分类信息标注;QIIME软件进行肠道菌群物种多样性和组间菌群差异性分析。结果 6组样本中门水平上丰度前4的菌门依次为Firmicutes、Proteobacteria、Bacteroidota、Actinobacteria, HBV组、LC组、HCC组、ACLF组、AIH组和PBC组样本中4大菌门总占比分布为88.76%、97.22%、96.15%、92.88%、95.91%和93.36%。HBV组和HCC组Actinobacteria丰度显...     

主动脉夹层手术前后患者肠道菌群结构特征变化的研究

目的:初步探讨主动脉夹层手术前后患者胃肠道症状与肠道菌群结构特征间的关系。方法:收集北京安贞医院心脏外科,行主动脉夹层手术患者的粪便标本,提取细菌DNA,采用16S rDNA基因扩增和Illumina测序技术将细菌归类。结果:术前组(17例)和术后组(11例)胃肠道症状评分分别为[(35.5±2.2)vs.(40.6±3.5)分,P0.001]。术前组和术后组门水平肠道菌群结构中位数分别为:厚壁菌门(66.1%vs.45.0%,P=0.086);拟杆菌门(20.6%vs.40.4%,P=0.041);放线菌门(0.7%vs.1.5%,P=0.359);变形菌门(3.6%vs.5.4%,P=0.312)。Spearman相关性分析结果显示,胃肠道症状评分与拟杆菌门比例呈正相关,(r=0.386,P=0.042)。结论:主动脉夹层手术治疗前后患者胃肠道症状的发生与肠道菌群结构改变有一定相关性,这可能为患者益生菌治疗胃肠道症状提供理论依据。     

应用瑞舒伐他汀降血脂后的不同疗效人群肠道微生态菌群差异分析

目的分析瑞舒伐他汀治疗高脂血症后不同疗效的患者肠道微生态菌群的差异。方法将本院68例行瑞舒伐他汀治疗的高脂血症患者作为研究对象,根据患者治疗后2个月降脂效果的不同,分为降脂良好组(A组,n=49)与降脂欠佳组(B组,n=19)。比较两组患者治疗前后血脂水平的差异,并收集患者粪便提取肠道微生态菌群DNA,采用DNA测序技术分析患者肠道微生态菌群的差异。结果 A组治疗后总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)的含量较治疗前均明显下降,高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)含量较治疗前明显升高,且治疗后A组与B组比较TC、TG、LDL-C的含量均明显下降,HDL-C含量明显升高(P 0. 05)。A组疣微菌门、厚壁菌门、梭杆菌门及柔壁菌门丰度较B组显著升高,而互养菌门、蓝细菌门、放线菌门及拟杆菌门丰度较B组显著下降(P 0. 05)。A组拟杆菌门中的拟杆菌科的相对丰度较B组明显减少(P 0. 05);厚壁菌门中的乳酸杆菌科、毛螺菌科、瘤胃菌科和梭菌科的相对丰度较B组均明显增多(P 0. 05)。结论采用瑞舒伐他汀治疗高脂血症后,不同疗效差异的患者在肠道微生态菌群门丰度和科数量方面存在较大差异。     

乙型肝炎肝硬化积证与臌胀肝肾阴虚证肠道菌群特征比较分析

目的比较分析乙型肝炎肝硬化积证与臌胀肝肾阴虚证患者肠道菌群的分布差异。方法选取2016年10月-12月上海中医药大学附属曙光医院肝硬化科病房住院的乙型肝炎肝硬化积证(无腹水)肝肾阴虚证患者21例和臌胀(伴有腹水)肝肾阴虚证患者15例,收集患者粪便样本,提取DNA,采用16S rRNA测序技术测序,比较两者肠道菌群的分布差异。计数资料2组间比较采用Wilcoxon秩和检验;计量资料2组间比较采用Mann-Whitney U检验。主成分分析采用R软件包(v.2.15.3)的ADE 4软件包,根据每个样本中的操作分类单元丰度,确定是否可以区分积证肝肾阴虚证和臌胀肝肾阴虚证。组间各物种相对丰度差异的比较采用多重假设检验,采用Benjamini和Hochberg错误发现率(FDR)进行调整,P_(fdr)0.05为差异有统计学意义。结果在门的水平上,与积证肝肾阴虚证组比较,臌胀肝肾阴虚证组的变形菌门的丰度显著增加(P_(fdr)=0.009);拟杆菌门细菌的丰度显著减少(P_(fdr)=0.048),放线菌门和硬壁菌门的丰度均有所减少,但2组间差异无统计学意义(P_(fdr)值均0.05)。在属的水平上,与积证肝肾阴虚证组比较,臌胀肝肾阴虚证组变形菌门的肠杆菌属(P_(fdr)=0.035)和大肠杆菌-志贺菌属(P_(fdr)=0.007)丰度均显著增加;放线菌门的双歧杆菌属(P_(fdr)=0.009)和放线菌属(P_(fdr)=0.04),硬壁菌门的毛螺菌属(P_(fdr)=0.003)、丁酸弧菌属(P_(fdr)=0.009)、假丁酸弧菌属(P_(fdr)=0.041)、罗氏菌属(P_(fdr)=0.049)、柔嫩梭菌属(P_(fdr)=0.021)的丰度均显著减少。结论与积证肝肾阴虚证比较,臌胀肝肾阴虚证肠道菌群的特征为有益菌显著减少,条件致病菌显著增加。提示对臌胀肝肾阴虚证,在滋养肝肾的同时,也要重视涤荡胃肠,调节肠道菌群的失衡状态。     

慢性乙型肝炎、肝硬化和肝衰竭患者肠道菌群变化研究

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)和肝衰竭(LF)患者肠道菌群的结构差异。方法纳入CHB患者23例,失代偿期LC患者20例,LF患者6例和成年健康人9例,采用粪便细菌基因组DNA提取试剂盒提取粪便肠道菌群DNA,应用16SrDNA测序技术检测肠道菌群。应用相关生物学软件和统计学软件对测序结果进行分析。结果肠道菌群门分类水平分析显示,每个样本均以拟杆菌门为主,其次为变形菌门;CHB组拟杆菌门丰度(617.83)显著高于LC组(343.16)、LF组(182.15)和健康组(236.66),差异有统计学意义(P0.05);LC组变形菌门丰度(183.16)多于CHB组(35.86)、LF组(18.87)和健康组(53.40,P0.05);属分类水平显示,CHB组、LC组和LF组均以拟杆菌属为主,其次为普氏菌属、梭菌属;CHB组普氏菌属丰度(345.28)较LC组(46.75)、LF组(5.63)和健康组(20.14)明显增多,LC组拟杆菌属丰度最少(150.28,P0.05)。结论 CHB、LC和LF患者肠道菌群结构有显著性差异。拟杆菌为肠道优势菌群,在各样本中菌群丰度发生了变化,了解这些变化可能有助于对疾病发生和处理的认识。     

肝动脉化疗栓塞术后原发性肝癌患者的肠道菌群变化

目的对比分析原发性肝癌患者及经肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗前后肠道菌群的多样性变化及菌群结构差异。方法选取2018年9月-2019年1月广西医科大学附属肿瘤医院原发性肝癌患者65例(其中接受TACE治疗20例),健康体检者27例。高通量16S rDNA测序方法分析患者便菌群结构,Anosim、LEf Se软件与R语言stats包分析菌群组间物种相对丰度、组间物种多样性、群落差异、进化分支等差异。符合正态性及方差齐的计量资料两组间比较采用t检验;不符合正态分布计量资料组间比较采用Kruskal-WallisU检验;计数资料组间比较采用χ~2检验。相关性分析采取Spearman秩相关性分析。结果在门水平,各组的最大优势菌均为拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes),两者占比之和在健康组 90%,在原发性肝癌组及TACE治疗组中占比均 80%。拟杆菌门在健康组、原发性肝癌组、TACE治疗组占比分别为48. 44%、44. 96%、48. 60%,厚壁菌门在各组占比分别为47. 09%、38. 15%、33. 93%,拟杆菌门、厚壁菌门相对丰度在肝癌组均低于健康组;此外,变形菌门(Proteobacteria)及梭杆菌门(Fusobacteria)相对丰度在肝癌组及TACE治疗组中占比均高于健康组;其余菌门虽有所变化,但占比均0. 5%。健康组物种丰富度Observed species(264±47 vs 230±64, t=2.499,P=0. 014)及ACE值(284. 11±50. 82 vs 252. 96±67. 58, t=2.158,P=0034)均大于原发性肝癌组。Between组(原发性肝癌组+健康组)的秩较原发性肝癌组及健康组高,R 0,健康组及原发性肝癌组肠道菌群组间结构差异大于组内差异(P0. 05);Between组(TACE术前+术后)的秩低于TACE术前组,R 0,TACE治疗前与治疗后组内结构差异大于组间结构差异(P 0. 05)。原发性肝癌患者肠内机会致病菌与Child-Turcotte-Pugh评分、TBil、ALT、AST存在相关性(r值分别为0.245、0.421、0.327、0.446,P值分别为0. 049、0. 001、0. 008、0. 001),潜在益生菌与Child-Turcotte-Pugh评分、TBil、Alb、ALT、AST存在相关性(r值分别为-0.314、-0.490、0.285、-0.374、-0.528,P值分别为0. 011、0. 001、0. 022、0002、0. 001)。差异菌中的机会致病菌相对丰度随着肝功能Child-Pugh分级递增而增加,C级高于A级(Z=4.301,P=0038)与B级(Z=4.063,P=0044)。而潜在益生作用菌的相对丰度随着肝功能Child-Pugh分级的增加呈现减少趋势,C级低于A级(Z=3.882,P=0. 049)。结论原发性肝癌患者与健康者肠道菌群多样性及结构不同,而原发性肝癌患者TACE治疗前后肠道菌群相近,TACE治疗对肠道菌群影响较小。肠道菌群失调与原发性肝癌临床分级存在关联,随着肝功能Child-Pugh等级的递增,菌群失调程度更为明显,潜在益生作用菌减少,而机会性致病菌增加。     

维吾尔族糖调节受损患者肠道菌群高通量测序初步探讨

目的比较维吾尔族糖调节受损(impaired glucose regulation,IGR)患者和健康人的肠道菌群分布,分析维吾尔族IGR患者肠道菌群结构及其多样性,探讨IGR患者肠道菌群多样性的改变与糖尿病发生发展的关系。方法选取20例糖调节受损维吾尔族患者为IGR组,20例健康人为NGT组,通过Illumia Miseq平台对受试者粪便中的细菌进行16SrRNA V3-V6区高通量测序,并进行操作分类单元(OTU)聚类分析、多样性及结构分析,比较两组人群肠道菌群的结构、丰度及多样性。结果对IGR组和NGT组粪便细菌总DNA的16SrRNA V3-V6区进行高通量测序,获得3269 951条优化有效序列,优化序列平均长度为436.82bp;分析两组肠道菌群α多样性分析,Sobs指数、Shannon指数、Simpson指数差异均有统计学意义(t=2.173、2.193和2.041,P0.05);物种差异分析显示,菌群结构两组在门水平上Saccharibacteria菌门的差异有统计学意义(P0.05),在属水平上巨单胞菌属(Megamonas)、瘤胃菌属(Ruminococcaceae)、Barnesiella菌属、萨特氏菌属(Sutterella)、Ruminiclostridium菌属、嗜血杆菌属(Haemophilus)、梭菌属(Clostridiales)、红蝽菌属(Coriobacteriaceae)、Flavonifractor菌属和Saccharibacteria菌属等10个菌属差异有统计学意义(P0.05)。韦荣氏球菌属(Veillonella)、巴斯德氏菌属(Pasteurellaceae)、嗜血杆菌属(Haemophilus)为IGR组区别于NGT的与IGR相关性大的物种;拟杆菌门(Bacteroidetes)与LDL-C呈负相关;软壁菌门(Tenericutes)与臀围和TC呈负相关;软壁菌门与HDL-C呈正相关;放线菌门(Actinobacteria)与BMI呈正相关。结论相比NGT组,IGR组的肠道菌群多样性和丰度明显下降,说明拟杆菌门和Saccharibacteria菌门可能与维吾尔族人2型糖尿病的发生、发展有关。     

基于高通量测序技术的藏族肝硬化患者肠道菌群多样性研究

背景大量研究已证实肝硬化患者存在肠道菌群失调的现象,这为临床防治肝硬化及并发症提供了新的线索与思路.藏族人群生活环境和饮食习惯有别于汉族人群,因而藏族肝硬化患者肠道菌群结构及多样性亦可能存在差异.目的 探讨藏族肝硬化患者肠道菌群结构、丰度与多样性,并对比汉族肝硬化患者肠道菌群的差异及特点.方法 前瞻性纳入2017-10/2018-10四川大学华西医院成办分院消化内科36例肝硬化患者,其中20例藏族设为实验组, 16例汉族肝硬化患者设为对照组;收集患者基本信息、血常规、生化、凝血功能、影像学等,并采集大便标本,提取基因组DNA并对细菌16S rRNA基因V4区进行PCR扩增,应用Illumina Miseq平台进行高通量测序,测序原始结果进行Reads拼接、操作分类单元(operational taxonomic units, OTUs)聚类、物种注释、Alpha多样性分析等,最终得到样品的生物信息学结果.结果对照组和实验组分别获得15006和36872条有效序列,在实验组中Chao1指数显著降低(P0.01),实验组的物种丰富度较对照组显著降低.基于97%的相似性进行物种注释,对实验组和对照组进行微生物物种丰度比较.结果显示,相较于对照组,在门水平上,实验组中拟杆菌门显著减少(P0.001),厚壁菌门和放线菌门在实验组中增加(P0.01和P0.05);在属水平上,葡萄球菌属、放线菌属在实验组中显著减少(P0.01),乳杆菌属显著增加(P0.01).结论藏族肝硬化患者的肠道微生物丰度明显低于汉族肝硬化患者,肠道微生物组成存在着差异.本研究首次展现了藏族肝硬化患者的肠道微生物组成特点,为肝硬化的个性化治疗奠定了基础.     

肠易激综合征患者肠道黏膜菌群和催产素受体表达变化分析

背景:研究表明肠道菌群、催产素受体(OTR)变化在肠易激综合征(IBS)的发病中起有重要作用,但其潜在机制尚未完全阐明。目的:探讨IBS患者肠道黏膜菌群特征和结肠黏膜OTR表达,以及两者之间的相关性。方法:收集2017年7月—2017年12月长治医学院附属和平医院收治的符合罗马Ⅳ标准的IBS-D、IBS-U患者结肠黏膜标本,以13名健康体检者作为对照。利用高通量测序平台对肠道黏膜菌群组成、物种多样性和丰度进行评估。免疫组化法测定结肠黏膜OTR表达。结果:IBS-D组、IBS-U组和对照组肠道黏膜菌群以变形菌门、厚壁菌门、拟杆菌门为主。三组chao1指数、shannon指数相比差异无统计学意义(P 0. 05)。与对照组相比,IBS组Granulicatella丰度显著减少(H=6. 212,P 0. 05),Tissierella丰度显著增加(H=6. 688,P 0. 05)。IBS-D组Syntrophaceae、Porphyromonas、Marmoricola、Cardiobacteriales、Cardiobacterium、Cardiobacteriaceae丰度均显著高于IBS-U组和对照组(P均0. 05)。IBS-D组、IBS-U组OTR表达均显著高于对照组(P 0. 01)。Tissierella丰度与结肠黏膜OTR表达呈正相关(r=0. 542,P 0. 01)。Tissierella、Granulicatella丰度、结肠黏膜OTR表达与IBS严重程度无明显相关性(P 0. 05)。结论:IBS患者肠道黏膜菌群多样性无明显变化,部分菌群丰度发生改变,且不同亚型肠道黏膜菌群丰度变化不同。IBS患者结肠黏膜OTR表达上调,且与Tissierella丰度存在一定相关性。     

乙型肝炎肝硬化患者伴或不伴腹水对肠道菌群的影响

目的探讨乙型肝炎肝硬化(HBLC)伴有或不伴有腹水患者肠道菌群的差异。方法收集2016年10月-12月于上海中医药大学附属曙光医院肝硬化科就诊的HBLC患者57例,其中无腹水30例(HBLC-WOA),有腹水但无SBP 27例(HBLCWA),并纳入28例健康志愿者(HC),采用16S rRNA测序技术,比较两组肝硬化患者间肠道菌群的分布差异。计数资料2组间比较采用Wilcoxon秩和检验;计量资料2组间比较采用Mann-Whitney U检验,3组比较采用Kruskal-Wallis H检验。组间各物种相对丰度差异的比较采用多重假设检验,采用Benjamini和Hochberg错误发现率(fdr)进行调整,Pfdr0. 05为差异有统计学意义。相关分析采用Spearman秩相关检验。不同条件下组间的差异比较采用相似性分析(ANOSIM)和非参数多元方差分析(Adonis)。结果伴随腹水的出现,HBLC患者粪便微生物群的多样性降低(P=0. 042)。PCo A结果显示,HBLC-WOA组、HBLC-WA组与HC组间比较差异有统计学意义(HBLC-WOA vs HC,ANOSIM:R=0. 159,P=0. 001,Adonis:R2=0. 067,P=0. 001; HBLC-WA vs HC,ANOSIM:R=0. 323,P=0. 001,Adonis:R2=0. 107,P=0. 001)。在属水平上,与HC组比较,HBLC-WA组罕见小球菌属和假丁弧菌属的丰度显著降低(P值分别为0. 01、0. 001),肠杆菌属、大肠埃希菌属和韦荣球菌属的丰度显著增加(P值分别为0. 05、0. 001、0. 01)。大肠埃希菌属和韦荣球菌属均与CTP评分、凝血酶原时间和国际标准化比率(INR)均呈正相关,与血清Alb水平均呈负相关(P值均0. 05)。假丁弧菌属、norank_f_毛螺菌科、unclassified_f_毛螺菌科、布劳特氏菌属与Alb水平均呈正相关,与CTP评分和C反应蛋白水平均呈负相关(P值均0. 05)。KEGG通路分析显示,伴随腹水的出现,与转录相关蛋白、α-亚油酸代谢、金黄色葡萄球菌感染、细菌侵袭上皮细胞和胆汁分泌通路相关的菌群丰度逐渐上升(Pfdr值均0. 05),而与黄酮类生物合成通路相关的菌群丰度逐渐下降(Pfdr0. 05)。且细菌侵袭上皮细胞通路与大肠埃希菌属的丰度呈正相关(P 0. 001),肠杆菌属丰度与胆汁分泌通路呈正相关(P 0. 001)。结论 HBLC-WA患者肠道菌群紊乱以硬壁菌门的罕见小球菌属和假丁弧菌属丰度降低,变形菌门的肠杆菌属和大肠埃希菌属丰度增加为特征,肠杆菌可能参与胆汁分泌通路,大肠埃希菌可能参与上皮细胞的细菌侵袭通路,提示对于无SBP的HBLC-WA患者,调节肠道菌群的同时,可能也要考虑SBP的预防性治疗。     

肝硬化患者肠道菌群失调的特征及驱动因子分析

目的研究肝硬化患者肠道菌群分布特征,并分析影响群落变异的驱动因子,评价其与肝硬化严重程度的相关性。方法收集2017年8月-2019年8月山西省中医院招募的10例健康志愿者与70例肝硬化患者的血液和粪便标本进行检验。根据细菌16S r DNA高通量测序获得肝硬化患者肠道菌群的差异菌属。符合正态分布的计量资料组间比较采用单因素方差分析;非正态分布的计量资料组间比较采用Kruskal-Wallis H检验。计数资料组间比较采用χ2检验。相关性分析采用Spearman检验。并用CANOCO5. 0软件进行RDA分析临床指标与肠道群落变异的相关性。结果肝硬化患者肠道菌群的种类发生了特异性变化,与健康对照组相比,有81个OTU是肝硬化患者肠道菌群宏基因组中特有的,其中ALBI 1级、2级、3级分别独有39、34、8个OTU。随着肝硬化疾病发展,Chao1、ACE指数明显减少(H值分别为8. 111、9. 112,P值分别为0. 044、0. 028),且与ALBI分级呈显著负相关(r值分别为-0. 287、-0. 297,P值分别为0. 016、0. 012)。与健康对照组相比,肝硬化患者中的肠道菌群失调以罗斯氏菌属、韦荣球菌属、链球菌属和嗜血杆菌属4种致病菌增多,粪球菌属和梭菌属2种有益菌减少为特征(H值分别为15. 96、13. 01、8. 94、11. 09、13. 07、16. 27,P值均0. 05)。2种有益菌间呈正相关(P 0. 05),四种致病菌间呈正相关(P 0. 001),有益菌粪球菌属与四种致病菌之间呈显著负相关(P 0. 001)。差异菌属与临床指标进行相关性分析,有益菌粪球菌属与Alb呈正相关(r=0. 273,P=0. 022),与PT、ALBI评分呈负相关(r值分别为-0. 300、-0. 263,P值分别为0. 011、0. 028);致病菌罗斯氏菌属、韦荣球菌属、链球菌属、嗜血杆菌属均与Alb呈负相关,与PT、TBil、ALBI评分呈正相关(P值均0. 05)。RDA分析显示PT、TBil、AST与肠道菌群分布相关性较大,其中PT对群落变异的影响最具有显著性(P=0. 002)。健康对照组、ALBI 1级、ALBI 2级、ALBI 3级的CDIG分别为2. 58、0. 76、0. 24、0. 04,差异具有统计学意义(H=16. 750,P 0. 001),CDIG与TBil、PT及ALBI呈显著负相关(r值分别为-0. 313、-0. 323、-0. 366,P值分别为0. 008、0. 006、0. 002)。结论肝硬化患者存在菌群失调的主要特征为致病菌的过度增长协同有益菌的缺乏及各菌属之间的比例失调; PT是驱动肠道菌群落变异的主要因子; CDIG可反映肝硬化患者肠道菌群失衡程度,CDIG越小,肝硬化程度越严重。     

高血压超重人群肠道菌群的研究

目的探讨高血压超重/肥胖患者肠道菌群的变化及功能的改变。方法收集年龄段在45~60岁的健康人68例(血压正常组),高血压患者73例(高血压组)。再根据身高体质量指数值,进一步将高血压组分为高血压体质量正常组和高血压超重/肥胖组,采用宏基因组测序技术检测各组样本肠道菌群的种类及功能。结果高血压组的阴沟肠杆菌属细菌的丰度相对于正常血压组显著降低(P=0.018),而副杆菌属细菌的丰度在高血压组中略有增多(P=0.042)。在高血压人群中观察到克雷伯菌属细菌、固氮螺菌属细菌、阿克曼属细菌和小杆菌属细菌在高血压超重/肥胖组的丰度相对于高血压体质量正常组显著升高,P值分别为0.015、0.046、0.022和0.004;而高血压超重/肥胖组中副杆菌属细菌的丰度比高血压体质量正常组显著降低(P=0.046)。此外,与高血压体质量正常组相比,与序列特异性的DNA结合功能、转录调节功能相关的菌群丰度在高血压超重/肥胖组中显著增加(q0.05)。结论高血压超重/肥胖患者肠道菌群的种类及功能均有改变,提示我们可以通过有效的干预措施改变微生物菌群组成,从而影响其体质量和血压。     

非诺贝特对非酒精性脂肪性肝病小鼠模型肠道菌群多样性的影响

目的探讨非诺贝特对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠肠道菌群多样性的影响。方法将30只小鼠随机分为3组,正常组(n=10)、高脂组(n=10)、非诺贝特治疗组(n=10),高脂组与非诺贝特治疗组给予高脂饮食干预14周,正常组给予普通饮食14周。在满10周开始对非诺贝特治疗组给予非诺贝特灌胃治疗并继续给予高脂饮食4周,全程监测小鼠体质量变化; 14周后收集3组粪便用于高通量测序16S rRNA分析菌群的多样性及差异;并收集肝组织进行HE染色及油红O染色观察脂肪变性情况。多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果干预10周后,非诺贝特治疗组较高脂组体质量明显减轻(P 0. 05)。HE染色及油红O染色显示非诺贝特治疗组脂肪沉积较高脂组明显减少。非诺贝特治疗组与高脂组肠道菌群存在明显差异,而与正常组肠道菌群具有相似性,非诺贝特治疗组拟杆菌门、疣微菌门、Faecalibaculum、Muribaculaceae_norank、阿克曼菌属丰度明显升高,厚壁菌门、放线菌门、梭菌属、Turicibacter、双歧杆菌属丰度降低。结论拟杆菌门、疣微菌门丰度明显升高,厚壁菌门、放线菌门丰度降低在非诺贝特治疗NAFLD中可能存在积极意义。     

不同程度肝硬化门静脉血栓的临床特点及意义

目的探讨不同严重程度门静脉血栓(PVT)肝硬化患者的肝功能及门静脉高压并发症的临床特点,明确PVT的临床意义。方法回顾性收集2014年1月-2015年6月首都医科大学附属北京佑安医院收治的肝硬化合并PVT患者178例,根据血栓严重程度分为单支血栓组(n=109)和多支血栓组(n=69)。记录患者的病因、临床表现、实验室结果及胃镜检查结果。符合正态分布的计量资料组间比较采用t检验,不符合正态分布的计量资料组间比较采用Wilcoxon秩和检验,计数资料组间比较采用χ~2检验。结果单支血栓组中乙型肝炎肝硬化患者比例明显低于多支血栓组(50.5%vs 71.0%,χ~2=7.350,P=0.008),单支血栓组自身免疫性肝硬化比例明显高于多支血栓组(11.0%vs 0,χ~2=8.145,P=0.004);单支血栓组的PTA水平低于多支血栓组[(63.58±21.12)%vs(71.84±16.68)%,t=-2.701,P=0.008];单支血栓组食管静脉曲张重度比例显著低于多支血栓组(57.7%vs81.1%,χ~2=8.921,P=0.012);单支血栓组食管静脉曲张红色征阳性比例明显低于多支血栓组(64.1%vs 86.8%,χ~2=8.298,P=0.005)。结论门静脉多支血栓并未影响患者的肝功能,门静脉多支血栓患者较单支血栓患者食管静脉曲张更加显著。     

归脾汤加减治疗慢性心力衰竭的疗效及对肠道菌群的影响

目的:观察归脾汤加减治疗慢性心力衰竭(CHF)的临床疗效及其对肠道菌群的影响。方法:将60例CHF病人按照随机数字表法分为治疗组和对照组,各30例。对照组采用常规治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用归脾汤加减方,疗程均为4周。比较两组中医证候疗效,观察两组治疗前后血浆B型钠尿肽(BNP)、左心室射血分数(LVEF)、6 min步行试验(6MWT)变化,并采用高通量测序技术分析两组治疗前后肠道菌群的差异。结果:治疗组总有效率为96.43%,高于对照组的75.86%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组BNP、LVEF、6MWT均较治疗前明显改善(P<0.05),且治疗组改善程度优于对照组(P<0.05)。在门水平上,治疗组和对照组丰度较高的菌群为拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门和放线菌门。对照组治疗后与治疗前相比,拟杆菌门、厚壁菌门丰度无明显变化(P>0.05),变形菌门、放线菌门丰度下降(P<0.05)。治疗组治疗后拟杆菌门、变形菌门、放线菌门丰度较治疗前下降(P<0.05),厚壁菌门丰度较治疗前升高(P<0.05),且变形菌门的丰度下降...     

乙肝肝硬化与乙肝肝硬化合并糖尿病患者肠道菌群结构初步探讨

目的研究乙肝肝硬化与乙肝肝硬化合并糖尿病患者肠道菌群结构是否存在差异性.方法收集9例乙肝肝硬化和6例乙肝肝硬化合并糖尿病患者粪便标本,提取粪便DNA,进行PCR扩增(上游引物:5’CCATCTCATCCCTGCGTGTCTCCGACTCA GACACGACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3’,下游引物:5’CCTATCCCCTGTGTGCCTTGGCAGTCTC AGACGAGCTGACGACARCCATG-3’)并对产物进行纯化,利用Roche454高通量测序平台对两组患者的粪便菌群16SrDNA的V3-V6区域进行测序及生物信息学分析.结果乙肝肝硬化及乙肝肝硬化合并糖尿病两组间的多样性参数(OTU数、chao1指数、simpson指数、shannon指数)均无统计学差异.后者肠道中的变形菌门明显多于前者(P0.05),拟杆菌门与厚壁菌门的比例无明显差异;纲的水平上,γ-变形菌纲在后者明显较多(P0.05),其余纲水平未见差异;目的水平上,后者伯克氏菌目较前者明显增多(P0.05),而脱硫弧菌目明显减少(P0.05),其余无统计学差异;科的水平上,韦荣球菌科、产碱菌科在后者的肠道菌群中的比例明显增多(P0.05),而链球菌科、梭菌科在前者肠道中占优势(P0.05),其余的在科水平中无统计学差异;属的水平上,Parabacteroides、Roseburia、韦荣氏球菌属、萨特氏菌属在后者的肠道菌群中的比例较多(P0.05),而Faecalibacterium、链球菌属在前者肠道中更占优势(P0.05),其余未见明显差异.结论乙肝肝硬化与乙肝肝硬化合并糖尿病患者的肠道菌群结构具有相似性但又存在各自的特异性,某些菌群的差异有可能成为治疗乙肝肝硬化合并糖尿病的新靶点.     

大肠湿热型结直肠腺瘤肠道菌群分布规律研究

目的:观察大肠湿热型结直肠腺瘤患者肠道微生物菌群的变化规律。方法:通过结肠镜活检收集47例大肠湿热型结直肠腺瘤患者的腺瘤组织(观察组)以及20例大肠湿热型结直肠腺瘤的瘤旁黏膜组织(对照组),提取组织DNA,对细菌16S rDNA序列V3-V4高变区进行PCR扩增,定量检测PCR产物,纯化后的混合DNA产物在Illumina MiSeq平台上对2组样本的肠道菌群组成和丰度进行测定并分析组间的统计学差异。结果:在门水平上,2组样本的优势菌门均为变形菌门、厚壁菌门、拟杆菌门和放线菌门,差异无统计学意义(P>0.05)。其中排名前10种的菌门中,变形菌门的丰度比例观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);酸杆菌门的丰度比例观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。在属水平上,2组样本的前20种优势菌种所共有的菌种中,埃希菌-志贺菌属的丰度比例观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);假单胞菌属的丰度比例观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大肠湿热型结直肠腺瘤患者肠道菌群的多样性和构成与瘤旁黏膜存在明显差异,腺瘤患者黏膜菌群结构发生明显失衡,形成了易于肿瘤生长的肠道微生态环境。     

肠易激综合征患者肠道菌群特征和NOX1表达的研究

背景:研究表明肠道菌群、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)在慢性内脏痛形成中起有重要作用,但其在肠易激综合征(IBS)中的作用尚不明确。目的:探讨IBS患者肠道黏膜菌群特征与NOX1表达的相关性。方法:收集2017年7月—2017年12月长治医学院附属和平医院收治的符合罗马Ⅳ标准的IBS患者和健康受试者结肠黏膜标本,利用高通量测序方法检测肠道黏膜菌群,并分析菌群物种多样性和丰度。采用免疫组化法测定结肠黏膜NOX1表达。结果:IBS组和对照组肠道黏膜菌群以拟杆菌门、变形菌门和厚壁菌门为主。IBS-D组、IBS-U组和对照组之间菌群多样性相比差异无统计学意义(P 0. 05)。与对照组相比,IBS组Tissierella丰度明显增加(H=6. 688,P 0. 05),Granulicatella丰度明显降低(H=6. 212,P 0. 05)。与对照组和IBS-U组相比,IBS-D组Porphyromonas、Marmoricola、Cardiobacterium丰度明显增加(P均0. 05)。与对照组相比,IBS-U组、IBS-D组NOX1表达增加(P 0. 01)。肠黏膜NOX1表达与Tissierella丰度存在正相关性(r=0. 611,P 0. 05),但与Granulicatella丰度无明显相关性(r=0. 253,P=0. 376)。Tissierella、Granulicatella丰度、NOX1表达与IBS严重程度无明显相关性(P 0. 05)。结论:IBS患者与健康受试者的肠道黏膜菌群多样性无明显变化,部分菌群丰度发生改变,且不同亚型的菌群丰度变化不同。IBS患者结肠黏膜NOX1表达上调,且与Tissierella丰度存在一定的相关性。     

植物发酵液对肠易激综合征患者肠道菌群的调节

目的:通过高通量测序方法研究植物发酵液(plant fermented extract,PFE)对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)患者肠道菌群的影响.方法:分别收集PFE作用0 d和30 d的人体粪便样本,采用Illumima系统MiSeq平台对PFE作用前后的样本进行16SrRNA测序,分析肠道菌群的结构和丰度.结果:PFE作用后,IBS患者的肠道菌群多样性无显著变化.在门水平上,硬壁菌门(Firmicutes)丰度显著降低(P0.01),拟杆菌门(Bacteroidete)和变形菌门(Proteobacterias)的丰度以及Bacteroidetes/Firmicutes的比值增加.在最佳分类水平(科水平)上,P F E作用后的粪便肠道菌群中检测到弯曲菌科(Campylobacteraceae)、蟑螂杆状体科(Cryomorphaceae)、丹毒丝菌科(Erysipelotrichaceae)和纤维杆菌科(Fibrobacteraceae),且丰度变化具有显著差异(P0.05).结论:PFE能够改善IBS患者肠道菌群丰度,调节肠道菌群,可能在IBS疾病的诊断和治疗中具有重要作用.     

急性心肌梗死患者肠道菌群变化与甲状腺功能指标的关系

目的 分析不同促甲状腺素(thyroid stimulating hormone, TSH)水平的急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AMI)患者肠道菌群差异,探讨高水平TSH的AMI患者肠道菌群特征。方法 纳入2022年1月至2022年5月于华中科技大学协和深圳医院就诊的AMI患者,根据TSH水平,AMI患者被分为高TSH组和低TSH组,对所有参与对象进行常规临床生化指标检测。收集两组患者新鲜粪便标本,应用16S rDNA测序分析其肠道菌群结构特点。结果 高TSH组TT4、FT4水平较低TSH组明显降低(P<0.05),高TSH组的肠道菌群整体结构及多样性发生显著变化。对两组患者肠道菌群门水平分布研究显示,高TSH组变形菌门的比例减少,拟杆菌门、放线菌门的比例增加,但无统计学差异(P>0.05)。两组患者肠道菌群种水平分布显示,高TSH组砂眼披衣菌、双胞普氏菌等有害菌丰富度明显升高,而益生菌如鼠乳杆菌丰富度明显减少(P<0.05)。所有患者甲状腺功能指标与肠道菌群种水平的相关性分析发现,TT4、FT4与长双歧杆菌相对丰度显著正相关...