后处理对缺血-再灌注心肌细胞自噬的影响

正自噬(autophagy)指机体通过合成自噬溶酶体清理体内衰老及受损的蛋白质或细胞器,对分解物质再利用、对维持细胞内稳态起到重要作用,是细胞的一种自我更新途径[1]。机体正常生理状态下,细胞自噬水平较低,对机体产生保护性效应。病理状态下,如心肌缺血-再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury, MIRI)、内质网应激及氧化应激时,自噬被过度激活而产生损伤性效应。     

糖尿病肾病足细胞自噬与药物干预的研究

正糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病常见的微血管并发症。蛋白尿是DN进行性加重的重要因素,越来越多的研究[1]发现足细胞损伤与DN蛋白尿的发生密切相关。细胞自噬是细胞的自我保护机制,足细胞具有较高的自噬活性,近年来研究证实[2]足细胞自噬在DN发病过程中起到重要作用。本文就近年来DN足细胞自噬与药物干预的研究进展进行一下综述。1足细胞自噬     

细胞自噬在脊髓损伤中作用的研究进展

近年来,细胞自噬在脊髓损伤中的研究逐渐成为热点,但脊髓损伤后早期自噬激活所起的作用尚有争议。其原因在于细胞自噬在脊髓损伤中的作用具有两面性:一方面自噬能诱导自噬性细胞死亡的发生并参与细胞凋亡的发生,另一方面自噬能促进受损变性蛋白的代谢以及抑制细胞凋亡。然而究其对脊髓损伤后修复的利弊作用,早期自噬激活的程度具有决定作用,脊髓损伤后适当地上调自噬水平可促进受损变性蛋白的代谢并抑制细胞凋亡,而过度激活自噬可能引发自噬性细胞死亡。     

HO-1对醋酸铅诱导肾小管上皮细胞氧化应激的保护机制

目的:探讨血红素氧合酶-1(HO-1)对醋酸铅(LA)诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护机制,为铅性肾病的治疗提供一定的理论依据。方法:采用醋酸铅孵育人肾小管上皮细胞48 h建立细胞损伤模型,原卟啉氯化钴(Co PP)诱导HO-1表达,自噬抑制剂(3-MA)抑制自噬,CCK-8方法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡率; Western blot检测自噬标志蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p62及氧化应激相关蛋白超氧化物歧化酶(SOD2)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)含量。结果:醋酸铅处理48 h后细胞活性、HO-1及自噬水平较Control组均明显下降,在补充Copp激活HO-1后细胞自噬水平上升,细胞活性明显恢复; Copp可明显改善细胞抗氧化酶CAT、SOD2表达,降低MDA,降低细胞凋亡率; 3-MA抑制自噬导致细胞CAT、SOD2表达进一步降低,MDA含量增加,细胞凋亡率升高,并且补充Copp后细胞CAT和MDA水平仅部分改善,SOD2表达未见明显恢复,提示抑制自噬减弱了HO-1的抗氧化作用。结论:HO-1可通过上调自噬减轻醋酸铅诱导的肾小管上皮细胞氧化应激损伤,减少细胞凋亡,HO-1可能可以作为治疗铅性肾病的一个干预靶点。     

雷帕霉素通过调节mTOR-ULK1信号通路减轻高糖诱导的足细胞损伤

目的探讨雷帕霉素对高糖环境下足细胞自噬和损伤作用的机制。 方法体外培养永生化小鼠肾小球足细胞(mouse podocyte cell 5,MPC5)并进行分组：甘露醇等渗组(mannitol isotonic group,MG组)、高糖组( high glucose group,HG组)、雷帕霉素组(rapamycin group,RG组)以及自噬相关蛋白5-siRNA组(SiG组)。PCR和Western印迹检测足细胞标志Synaptopodin、自噬相关的ULK1以及mTOR通路相关蛋白p70S6K的表达。 结果与MG组相比,HG组的Synaptopodin表达降低,自噬活性降低,p-ULK1以及p70S6K表达明显升高。与HG组相比,RG组的Synaptopodin表达升高,自噬活性较高,p-ULK1以及p70S6K表达较低。SiG组表现出与HG组相似的变化趋势。 结论雷帕霉素可能通过mTOR-ULK1信号通路调节足细胞内自噬反应、减轻高糖环境引起的足细胞损伤。     

疏利分消方调控自噬对补体攻膜复合物所致足细胞损伤的内在机制研究

目的:以补体攻膜复合物诱导足细胞损伤体外模拟特发性膜性肾病发病过程,探讨疏利分消方冻干粉对自噬通路的调控作用.方法:以酵母多糖活化血清(ZAS)体外组装C5b-9,并建立C5b-9损伤足细胞模型,设置正常组、模型组和模型+中药组,检测各组乳酸脱氢酶(LDH)释放率、自噬标记蛋白LC3及自噬底物蛋白P62荧光表达.结果:...     

自噬与软骨及其损伤相关性

自噬是存在于真核细胞,与细胞生长、增殖、凋亡发生过程相关的普遍而特有的生命现象。自噬可能是正常软骨细胞的一种保护或平衡机制,自噬妥协、细胞凋亡活跃、骨关节炎形成和发展三者之间密切相关。全面认识自噬在软骨细胞中的分子基础和调控机制,对各种原因引起的软骨损伤、退变的治疗具有重要意义。该文就细胞自噬与软骨及其损伤相关性研究作一综述。     

微管相关蛋白1轻链3在乳腺癌组织中的表达及意义

<正>1微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)的发现自噬是普遍存在于真核细胞的一种生物现象,是细胞在某些刺激因素(如DNA损伤、营养缺乏和缺氧等)作用下,细胞内膜性结构包绕损伤的蛋白或细胞器,并通过与溶酶体融合降解损伤的蛋白或细胞器的过程,降解产物可被循环利用[1]。过去十年的相关研究表明,细胞的自噬存在于肿瘤发展的不同     

细胞自噬对肝纤维化的影响

肝纤维化是肝脏对各种慢性刺激损伤进行自我修复的复杂病变过程,是多种慢性肝病进展的共同病理阶段。肝纤维化是由多种细胞、细胞因子、酶等参与的代谢过程共同控制,细胞自噬作为真核细胞中广泛存在的一种降解途径,在肝纤维化中有重要作用。细胞自噬可以通过激活肝星状细胞促进肝纤维化,通过保护肝细胞减少细胞外基质的产生,通过降解异常突变蛋白(α1-antitrypsin Z,ATZ)减轻肝纤维化。深入研究细胞自噬与肝纤维化的关系有望为肝纤维化的治疗提供新方向。本文就细胞自噬对肝纤维化的影响做一综述。     

中医药调控自噬减轻肾纤维化

正肾纤维化是慢性肾脏病进入到终末期肾衰竭的共同病理改变。自噬是细胞的自我保护机制。正常情况下,细胞均具有一定的自噬活性,然而当自噬平衡被打破,即自噬被过度激活或自噬活性下降均将加速肾纤维化的形成,造成肾脏损伤。因此,自噬对肾纤维化起双向调节作用。本文集中探讨自噬与肾纤维化,特别是中医药调控自噬抗肾纤维化的作用机制研究。1 慢性肾脏病、肾纤维化与细胞自噬目前,     

狼疮肾炎患者自噬水平及其对足细胞相关蛋白表达水平的影响

目的探讨狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)患者自噬水平及其对足细胞相关蛋白表达水平的影响。方法选择2017年5月至2019年5月于榆林市第一医院收治的69例LN患者为LN组,50例系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者为SLE组,50例肾切除手术患者为对照组,观察3组肾脏足细胞内自噬体数量,比较3组肾脏组织中自噬相关蛋白、微管相关蛋白轻链3(LC3)、B淋巴细胞瘤蛋白质-2-相互作用蛋白(Beclin1)的表达,以及足细胞相关蛋白,肾病蛋白(Nephrin)、足突蛋白(Podocin)的表达。分离狼疮肾炎患者肾脏足细胞,将足细胞分为自噬抑制组和自噬诱导组,自噬抑制组加入100 nmol/L 3-甲基腺嘌呤(3-MA),自噬诱导组加入100 nmol/L雷帕霉素(RAPA),比较3组足细胞内自噬体数量及LC3、Beclin-1、Podocin、Nephrin等蛋白的表达。结果LN组、SLE组肾脏足细胞内自噬体数量及LC3、Beclin-1、Podocin、Nephrin蛋白表达量显著高于对照组(P<0.05);SLE组肾脏足细胞内自噬体数量及LC3、Beclin-1、Podocin、Nephrin蛋白表达量显著高于LN组(P<0.05);自噬诱导组足细胞内自噬体数量及LC3、Beclin-1、Podocin、Nephrin蛋白表达量显著高于正常对照组、自噬抑制组(P<0.05);正常对照组足细胞内自噬体数量及LC3、Beclin-1、Podocin、Nephrin蛋白表达量显著高于自噬抑制组(P<0.05)。结论LN患者自噬水平呈升高状态,自噬水平升高可能通过上调足细胞相关蛋白Podocin、Nephrin水平而减轻足细胞损伤,抑制LN病情进展。     

细胞自噬在肾脏疾病中的研究进展

细胞自噬是指细胞向溶酶体运送胞内过多、衰老或异常的蛋白质和细胞器,并进行降解的过程.细胞自噬主要有3种类型:巨自噬、微自噬和分子伴侣介导的自噬.自噬体的形成可以大体归纳为4步:起始、成核、延伸、包裹.全过程均不可缺少自噬相关蛋白Atg的参与.正常状态下细胞自噬维持在低水平状态,当某些应激情况发生时,细胞自噬会大量增加.参与调节细胞自噬的分子机制非常复杂.近年来大量研究提示,细胞自噬在肾脏生理病理上具有重要作用,具有肾保护及损伤的“双刃剑”效用.本文就细胞自噬在肾脏疾病中的研究进展作一综述.     

二氢欧山芹通过调节自噬保护高糖诱导的足细胞损伤

目的 探讨二氢欧山芹(columbianetin,CBT)对高糖诱导的足细胞损伤保护作用及其机制研究.方法 体外培养永生化小鼠足细胞系MPC-5,给予高浓度的葡萄糖刺激,观察CBT对高糖诱导的足细胞损伤及自噬的影响;采用蛋白质印迹法检测足细胞自噬相关蛋白;荧光显微镜观察GFP-LC3-Ⅱ转染后足细胞绿色荧光颗粒.结果 ...     

细胞自噬影响ATG5-ATG12信号通路调节距骨软骨损伤修复的机制

本研究旨在探讨细胞自噬影响人自噬相关蛋白5(autophagy related protein 5, ATG5)-ATG12信号通路调节距骨软骨修复的机制, 以期为临床距骨软骨损伤(osteochondral lesion of talus, OLT)的治疗提供参考依据, 现将结果报道如下。     

黄酮醇化合物对自噬的作用研究进展

自噬(Autophagy)是细胞内的一种调节机制,在能量或营养缺乏的情况下促进细胞存活,并对各种细胞毒性损伤做出反应,在严重和持续的应激下自噬还可能导致细胞死亡。自噬的异常是引起许多疾病的原因,而靶向自噬的调节对于治疗疾病可能是一种有效的策略,使用天然存在的和合成的药物对自噬的调节已经引起了很多关注。黄酮醇化合物包括一大类天然存在的化合物,山奈酚、槲皮素、杨梅素、高良姜素、桑色素等都属于黄酮醇类化合物,它们广泛存在于自然的植物中,在抗氧化、抗炎、抗糖尿病、保肝和抗肿瘤活性方面都显示出良好的特性,本文将介绍这几种黄酮醇化合物对自噬的调节作用。     

线粒体自噬在肾缺血-再灌注损伤中的作用

线粒体自噬是机体选择性清除受损线粒体的防御性过程,对维持细胞生存有重要意义。一般情况下线粒体自噬阈值较低,当处在能量耗竭、缺血、缺氧等环境中时,线粒体自噬可被激活。肾脏的缺血-再灌注损伤(IRI)是临床中较为常见的病理生理过程,是导致急性肾损伤的主要原因。目前认为IRI与氧化应激、线粒体功能紊乱、自噬和凋亡等密切相关。本文就线粒体自噬的概述、线粒体自噬在肾IRI中的作用以及线粒体自噬的调控进行综述,为临床中防治肾IRI提供新的研究思路。     

雷公藤甲素对PAN致足细胞损伤中自噬作用的影响

目的:通过观察雷公藤甲素对氨基核苷嘌呤霉素(puromycin amino nucleotide,PAN)损伤足细胞的m TOR通路及自噬水平的影响,探讨雷公藤甲素(triptolide,TP)对m TOR-自噬通路的影响及其保护足细胞的可能机制。方法:体外培养的小鼠足细胞系(MPC5)为研究对象,PAN分别不同时间(0 h、1 h、3 h、4 h、6 h、24 h)刺激小鼠足细胞,检测p-m TOR、Beclin1、synaptopodin表达含量的变化,成功构建PAN致足细胞损伤模型。后将足细胞随机分为以下4组:(1)对照组(Con组);(2)PAN组(PAN组,PNA 50μg/ml);(3)雷帕霉素(rapamycin,Rap)组(Rap组,PNA 50μg/ml+RAP 200 ng/ml);(4)PAN+TP组(TP组,PNA 50μg/ml+TP 10 ng/ml)。各组培养时间均为4 h;采用western blot检测足细胞p-m TOR、p-Akt、p-ULK1、LC3、Beclin-1、Synaptopodin蛋白表达量。结果:PAN处理不同的时间梯度,与Con组相比,PAN处理4 h后,诱导p-m TOR的表达、减少Beclin1、synaptopodin表达(P0.05),成功建立PAN作用致体外足细胞损伤模型。与PAN组比较,雷公藤甲素可使p-m TOR、p-ULK1及p-Akt的表达明显上调(P0.05),而LC3、Beclin1及Synaptopodin的表达明显下降(P0.05)。结论:实验表明足细胞损伤可能与足细胞内自噬水平的变化有关,PAN刺激可能呈时间依赖性通过m TOR通路降低足细胞自噬水平,诱导足细胞损伤;雷公藤甲素可能通过作用m TOR通路调节足细胞自噬水平,从而对足细胞起保护作用。     

胰岛素降糖治疗对糖尿病肾病大鼠自噬的影响

目的了解自噬在糖尿病肾病大鼠肾小球的表达情况,观察胰岛素降糖治疗对糖尿病肾病大鼠足细胞自噬的影响,探讨自噬在糖尿病肾病进程中的作用。方法选择50只雄性wistar大鼠,适应性喂养1周后随机选10只作为空白对照组(A组),另外40只大鼠进行链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导,腹腔注射STZ制备糖尿病动物模型。造模成功后将40只糖尿病大鼠随机分为2组(B组和C组),每组各20只;B组给予等量柠檬酸缓冲液皮下注射,C组每天根据血糖水平给予胰岛素1.5 U/kg皮下注射,连续注射4周。4周后收集24 h血、尿标本查尿素氮、肌酐、血糖,肾脏组织送病理PAS染色观察肾组织病理改变,透射电镜观察肾小球足细胞足突改变,Western blot检测自噬标志物LC3I/H表达。结果与A组相比,B、C组大鼠24 h尿白蛋白、血糖均升高明显(P0.01),PAS染色发现肾小球基膜增厚,系膜区增宽,基质增多,电镜下足细胞足突增宽、融合,自噬活化标志物LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值明显下降(P0.01)。与B组比,C组大鼠肾小球病理变化有所改善,足细胞和自噬体数量增多,细胞器损伤减轻,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值上调(P0.01)。结论糖尿病肾病大鼠肾小球自噬水平降低,胰岛素处理糖尿病肾病大鼠可上调自噬水平,并可减轻肾小球病理改变和足细胞损伤,提示自噬水平增强可能有益于延缓糖尿病肾病进展。     

MGRN1对小鼠睾丸支持细胞自噬的影响

目的:研究MGRN1对小鼠睾丸支持细胞自噬的影响。方法:体外培养小鼠睾丸支持细胞株(TM4细胞)利用RNAi下调TM4细胞中MGRN1的表达,然后利用Western印迹(WB)检测自噬相关蛋白(LC3-II/I、ATG-5和ATG-7)的表达,免疫荧光及电镜检测MGRN1下调后TM4细胞的自噬小体。结果:MGRN1下调后,WB发现TM4细胞中自噬相关蛋白(LC3-II/I、ATG-5和ATG-7)表达增加,荧光显微镜可观察到TM4细胞中自噬小体增加,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),电镜可观察到TM4细胞中自噬小体增加。结论:MGRN1影响睾丸支持细胞的自噬,具体分子机制有待进一步研究。     

自噬相关哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路在脊髓损伤中的作用研究进展

<正>脊髓损伤(SCI)可导致严重且不可逆的神经功能缺损甚至终身瘫痪,其常见病因包括交通事故、坠落伤及重物砸伤等。SCI造成的神经系统创伤至今仍是脊柱外科的治疗难题。自噬是一种主要依赖溶酶体介导的分解代谢途径,可使功能失调的细胞成分降解以应对各种形式的压力^[1]。微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、Beclin-1和p62被认为是自噬的3种标志物,自噬通量的高低可以通过自噬标志物的水平来评估,LC3Ⅱ或LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1增加以及p62蛋白表达减少都可以表明自噬水平上升^[2]。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是信号网络的核心和细胞生长的中央控制器,它在调节细胞代谢、死亡、存活和增殖方面发挥着重要作用,被认为是自噬的主要负调节因子^[3]。