IL-17A对肝细胞癌可溶性MICA表达的影响

目的:探讨患者外周血清白介素-17A(serum Interleukin-17A,IL-17A)对肝癌细胞可溶性MICA(soluble major histocompatibility complex class Ichain-related gene A,sMICA)的调控作用及可能机制.方法:收集慢性肝炎(chronic hepatitis,CH)、肝硬化(liver cirrhosis,LC)、HCC、健康对照者(healthcontrol,HC)各30例,采用ELISA方法分别检测血清sMICA及IL-17A的表达水平;HepG2和PLC/PRF/5细胞加入0、10、50ng/mL的重组人IL-17A(RhIL-17A)作用24h后,分别采用ELISA检测sMICA的表达;并在50ng/mL的RhIL-17A作用24h后,采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测膜型MICA的表达、荧光定量RT-PCR检测MICA mRNA的表达、Western blot检测ADAM9,p65和磷酸化p65(P-p65)的表达.结果:HCC组血清IL-17A与sMICA水平明显高于CH、LC、HC组(IL-17AF=46.321,sMICAF=24.144,P<0.01),且二者呈正相关(r=0.28,P<0.01);RhIL-17A显著增加HCC细胞sMICA、膜MICA mRNA的表达(P<0.05),且可增加HCC细胞ADAM9和P-p65蛋白的表达.结论:IL-17A能上调肝癌细胞MICA mRNA表达,可能与其活化NF-B-ADAM9信号通路,从而增加HCC sMICA的表达有关.     

肺结核患者血清IL-17A和IL-17F检测及临床意义

目的研究肺结核（PTB）患者血清IL-17A和IL-17F含量并分析其临床意义。方法ELISA检测47例PTB患者和26名健康志愿者外周血血清IL-17A和IL-17F含量,并分析其相关性。结果PTB患者血清IL-17A含量显著高于健康志愿者。PTB患者和健康志愿者两组之间血清IL-17F含量无显著性差异。常规化疗药物治疗前PTB患者血清IL-17A含量显著高于治疗后。痰涂结核菌反应阳性PTB患者血清IL-17A和IL-17F含量显著高于阴性PTB患者。PTB患者血清IL-17A含量与患者性别、年龄均无关。血清IL-17F含量与患者治疗情况、患者性别及年龄均无明显相关。Pearson相关性分析显示,血清IL-17A和IL-17F含量之间无显著相关性。结论IL-17A和IL-17F均在抗结核免疫过程中发挥重要作用。     

光动力治疗对宫颈尖锐湿疣患者外周血IL-17A IL-2 IFN-γ的影响

目的探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)对宫颈尖锐湿疣(CA)患者外周血白细胞介素(IL)-17A、IL-2、干扰素(IFN)-γ表达的影响及其作用机制。方法入选84例宫颈CA患者分成两组,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测入选者治疗前及治疗后3个月外周血中的IL-17A、IL-2、IFN-γ水平。结果 ALA-PDT治疗(A)组54例、CO_2激光治疗(B)组30例,正常对照(C)组30例健康体检者。①治疗后3个月A组患者治愈率96.30%、HPV清除率83.33%,B组患者治愈率76.67%、HPV清除率26.67%,两组比较差异有统计学意义(χ~2=7.77,26.60,P 0.05)。②治疗前三组入选者外周血中IL-17A、IL-2、IFN-γ水平比较,差异有统计学意义(F=13.02,16.82,6.81,P 0.05);宫颈CA患者治疗前外周血IL-17A、IL-2、IFN-γ水平低于正常对照组,差异有统计学意义(P 0.05)。③治疗后3个月,三组入选者外周血中IL-17A、IL-2、IFN-γ水平比较,差异有统计学意义(F=17.25,18.86,14.91,P 0.05);A、B两组患者外周血中IL-17A水平比较差异无统计学意义(P 0.05),但IL-2、IFN-γ水平比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 ALA-PDT治疗通过正向调节宫颈CA患者外周血IL-2、IFN-γ水平,参与机体特异性免疫应答;IL-17A也参与了宫颈CA外周血的细胞免疫应答过程。     

姜黄素对COPD大鼠IL-1β和IL-17的影响

目的 探讨姜黄素干预对COPD大鼠IL-1β和IL-17水平的影响.方法 将雄性SD大鼠38只随机分为正常对照组、COPD模型组、姜黄素干预组和溶剂对照组,采用香烟烟熏加气管内注射脂多糖方法建立COPD大鼠模型,并按照分组情况对大鼠进行干预.干预结束后计数BALF中的炎症细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞数量,HE染色观察大鼠气道炎症及肺气肿程度,酶联免疫吸附测定检测血清和BALF中IL-1β、IL-17含量,实时荧光定量聚合酶链式反应检测肺组织中IL-1β、IL-17mRNA表达水平.结果 与正常对照组比较,COPD模型组BALF中炎症细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞数量均显著升高(P＜0.05);姜黄素干预组大鼠BALF中炎症细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞数量较COPD模型组降低(P＜0.05).组织病理学显示COPD模型组大鼠小气道周围大量炎症细胞聚集、肺泡腔扩张,姜黄素干预可减轻小气道周围炎症细胞聚集及肺泡腔扩张.与正常对照组相比,COPD模型组大鼠血清和BALF中IL-1β、IL-17含量升高,肺组织中IL-1β、IL-17mRNA表达水平上调,差异有统计学意义(P＜0.05).姜黄素干预后COPD大鼠血清和BALF中IL-1β、IL-17含量下降,肺组织中IL-1β、IL-17mRNA表达水平降低,与COPD模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 姜黄素对COPD具有保护作用,其机制可能与抑制IL-1β、IL-17炎症因子释放有关.     

雄黄对肝癌细胞系BEL-7402增生的影响

雄黄辛温有毒,入肝胃经,其成分为硫化砷。近年来,雄黄在治疗急性早幼粒细胞白血病方面取得了令人著目的成就[1 ] ,而其诱导细胞凋亡的作用可能是疗效机制[2、3 ] 。本文采用人肝癌细胞系体外观察其对肝癌细胞的影响。材料与方法一、材料(一)药物　1%雄黄溶液按参考文献[2 ]配制,使用时用RPMI 164 0稀释。(二)细胞培养　人肝癌细胞系BEL 740 2常规接种于含10 %小牛血清的RPMI 164 0培养基中,置3 7°C ,5 %CO2 培养箱中培养,取指数生长期细胞进行实验。二、方法(一)细胞生长曲线测定　将细胞以2 .2×10 4接种于(实验组) 96孔板中,2 4h细…     

小剂量IL-17A对糖尿病肾病大鼠肾功能的保护作用

目的探讨小剂量白细胞介素(IL)-17A对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法雄性SD大鼠45只,随机分为正常对照组、糖尿病肾病(DN)组及IL-17A组。DN组及IL-17A组均以高脂高糖饮食联合腹腔注射链脲佐菌素建立DN大鼠模型。IL-17A组给予小剂量IL-17A重组蛋白,连续给药12 w后,下腔静脉取血,检测糖化血红蛋白(Hb A1c)、肌酐、尿素氮等;水平代谢笼收集各组大鼠24 h尿液,测定大鼠24 h尿蛋白;实时荧光定量PCR检测肾组织炎症因子表达;Western印迹测定IL-17A蛋白表达情况。结果 DN组及IL-17A组尿蛋白、Hb A1c、肌酐、尿素氮水平均显著高于正常对照组,IL-17A组均显著低于DN组(均P<0.05)。DN组在注射IL-17A后促炎因子表达显著减少,抑制性炎症因子表达显著降低。DN模型大鼠IL-17A蛋白显著减少。结论 IL-17A具有改善DN大鼠肾功能作用,并有可能逆转DN,是治疗DN的有效靶点。     

肝癌患者外周血Th17/Treg细胞和相关细胞因子的表达及IL-17对肝癌细胞侵袭的影响

目的探讨肝癌患者体内辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)比例和相关细胞因子的表达水平及白细胞介素(IL)-17影响肝癌细胞侵袭的机制。方法选取在该院就诊的40例肝癌患者为观察组,同期在医院进行体检的40例健康人为对照组。采用流式细胞术检测两组人群外周血Th17和Treg细胞比例,酶联免疫吸附(ELISA)法检测两组外周血中IL-17、IL-10、IL-6和转化生长因子(TGF)-β的表达水平。在人肝癌细胞系SMMC7721中瞬时转染IL-17 siRNA及阴性对照,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、ELISA及免疫印迹(Western blot)法检测沉默后IL-17 mRNA及蛋白水平的表达变化,然后采用Transwell法检测侵袭变化,qRT-PCR和Western印迹检测MMP-2、MMP-9表达水平。结果与对照组比较,观察组外周血中Th17细胞和Treg细胞上升,Th17/Treg比例下降(P<0.05);观察组外周血中IL-17、IL-10、IL-6和TGF-β表达水平均高于对照组(P<0.05)。与阴性对照比较,SMMC7721转染IL-17 siRNA后,IL-17表达水平显著下降(P<0.05),干扰IL-17后SMMC7721细胞侵袭能力显著下降(P<0.05),MMP-2和MMP-9表达水平明显降低(P<0.05)。结论 Th17/Treg在肝癌患者外周血中存在失衡现象,IL-17、IL-10、IL-6和TGF-β等细胞因子在肝癌患者外周血中高表达,沉默IL-17可抑制肝癌细胞侵袭并抑制MMP-2和MMP-9表达,IL-17可能通过调控MMP-2和MMP-9参与调节肝癌细胞的侵袭。     

IL-17研究进展

Rouvier等于1993年从活化的T细胞杂交瘤中克隆了一啮齿动物cDNA序列,命名为CTLA8,据推定的150个氨基酸序列预示CTLA8可能编码一个具有信号肽的低分子量蛋白质。其氨基酸序列与T-淋巴细胞疱疹病毒Herpesvirus Saimiri的第13开放阅读框架HVS13的氨基酸序列有57％相同。基于重组HVS13与mCTLA8对众多细胞类型     

诺帝对肺腺癌细胞系A549细胞增殖的影响

目的 探讨化学合成物诺帝对人肺腺癌细胞系A549细胞增殖的影响.方法 采用自行合成的化合物诺帝(终浓度为100 μmol/L)处理A549细胞,处理后12、24、48和72 h,用细胞培养、流式细胞仪检测、免疫组化及图像分析等方法检测诺帝对A549细胞的影响.结果 诺帝可使A549细胞增殖受抑制,对细胞周期抑制作用主要表现于G1→S期;诺帝处理后,A549细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达明显减弱.结论 诺帝对A549细胞的增殖有显著抑制作用,这种作用与其抑制PCNA有关.     

IL-17A抑制剂在类风湿关节炎中的作用

白细胞介素-17A(IL-17A)是一种炎症因子,参与炎症反应,具有调控破骨细胞功能等生物学作用,在类风湿关节炎(RA)患者体内高表达,与RA的发病密切相关.然而临床试验并没有证实IL-17A抑制剂在RA中的疗效.本文旨在探讨IL-17A抑制剂在RA中的临床应用进展,分析其疗效不佳的原因,并为未来研究方向提供思路.     

哮喘患者诱导痰中IL-17A、IL-8及MMP-9水平变化及糖皮质激素对其的影响

目的探讨哮喘患者气道炎症特点及糖皮质激素的作用机制。方法将33例哮喘患者（哮喘组）按病情程度分为轻、中度19例及重度14例,予规范吸入糖皮质激素治疗4周,行诱导痰炎性细胞分类并计数,采用ELISA法检测痰上清液炎性介质白细胞介素-17A（IL-17A）、IL-8、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平,并与15例查体健康者（对照组）进行比较。对诱导痰细胞分类、1秒钟用力呼气量占预计值百分比（FEVl％）及炎性介质水平进行相关分析。结果重度哮喘者诱导痰中性粒细胞、嗜酸性粒细胞比值及上清液IL-17A、IL-8、MMP-9水平显著高于对照组及轻、中度者;轻-中度者除MMP-9无显著升高外,余各指标均显著高于对照组（P均〈0．01）。诱导痰中性粒细胞及嗜酸性粒细胞比值与FEV1％呈显著负相关;中性粒细胞比值与IL-8、MMP-9呈正相关;IL-17A水平与中性粒细胞比值、IL-8呈正相关。糖皮质激素治疗后重度者中性粒细胞、嗜酸性粒细胞比值及MMP-9水平仍显著高于轻-中度者。结论中性粒细胞浸润性气道炎症是重度持续性哮喘的重要特征;IL-17A、IL-8与MMP-9可能在其中发挥重要作用。吸入糖皮质激素能抑制炎症细胞的趋化效应,阻止炎症释放,稳定细胞溶酶体膜,减轻组织损伤。     

HBx 基因转染对人肝癌细胞系 HepG2细胞增殖的影响

目的探讨HBx基因转染对人肝癌细胞系Hep G2细胞增殖的影响。方法用脂质体转染法将HBx真核表达载体pc DNA3/HBx瞬时转入Hep G2细胞(转染HBx细胞组);以转染空载体细胞组和未转染Hep G2细胞组作为对照。以流式细胞仪及荧光显微镜观察各组肝癌细胞增殖情况。结果转染HBx细胞组的Hep G2肝癌细胞生长较其他两组密集。流式细胞仪检测显示转染HBx细胞组的Hep G2细胞较多处于增殖期(G2期细胞占5.68%)。荧光显微镜图像显示转染HBx细胞组处于增殖期的Hep G2细胞比率为47%,转染空载体细胞组为28%,未转染Hep G2细胞组为25%;转染HBx细胞组Hep G2细胞处于增殖期的比率与其他两组比较有统计学差异(P均<0.05)。结论 HBx基因转染能促进人肝癌细胞系Hep G2细胞增殖。     

肝细胞生长因子对肝癌细胞系SMMC-7721失巢凋亡的影响

目的:探讨HGF对SMMC-7721失巢凋亡的影响以及P13K在该过程中的作用.方法:悬浮培养SMMC-772l,建立失巢凋亡模型.应用TUNEL染色观察凋亡率.分别悬浮培养SMMC-7721、HGF处理后SMMC-721及LY294002预处理后的HGF处理细胞,用台盼蓝染色观察细胞失巢凋亡后存活率,用MTT检测细胞的增殖能力的变化,流式细胞仪检测失巢凋亡细胞的早、晚期凋亡率,Hoechst染色观察不同处理细胞的凋亡情况.应用免疫印迹技术检测失巢凋亡后Akt、p-Akt、FAK、p-FAK的表达.结果:TUNEL染色显示,悬浮培养的SMMC-7721失巢凋亡率远大于贴壁培养的SMMC-7721(21.72%±6.85% vs 66.67%±7.66%,P<0.05);台盼蓝染色显示,HGF处理后的SMMC-7721存活率明显高于悬浮培养细胞(P<0.05),而HGF不能提高经LY294002预处理后细胞的存活率:MTT实验显示HGF处理细胞A值明显大于悬浮培养细胞(P<0.05),LY294002预处理细胞与悬浮培养细胞相似.流式细胞仪和Hoechst 33258染色均显示HGF处理后细胞的失巢凋亡明显低于悬浮培养细胞(P<0.05),而经LY294002处理后细胞的失巢凋亡率明显升高.蛋白印迹结果显示HGF处理后细胞Akt、FAK、p-Akt、p-FAK的表达均升高,而经LY294002预处理后,其表达与悬浮培养SMMC-7721一致.结论:在肝细胞癌SMMC-7721失巢凋亡过程中,HGF通过活化Akt和FAK来增强细胞的抗失巢凋亡能力,该作用受P13K的调节.     

谷氨酰胺对人肝癌细胞系SMMC-7721 增殖影响的体外研究

背景谷氨酰胺与肿瘤的发生密切相关,但其促体外培养肿瘤细胞增殖的机制目前尚不明确。目的探讨谷氨酰胺在体外影响人肝癌细胞系SMMC鄄7721增殖的可能机制。方法人肝癌细胞系SMMC鄄7721与不同浓度(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0mmol/L)的谷氨酰胺共培养24h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化,逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测热休克蛋白(HSP)70的表达。结果谷氨酰胺能显著促进人肝癌细胞系SMMC鄄7721的增殖,谷氨酰胺浓度为2.0mmol/L时其促肿瘤生长的作用最强,而后又逐步下降。添加谷氨酰胺的肿瘤细胞,S期细胞比(SPF)和细胞增殖指数(PI)以及HSP70的表达较无谷氨酰胺者显著增加,且其作用随谷氨酰胺浓度的增加而增强,至浓度为2.0mmol/L时其作用最强,而后逐渐下降。结论谷氨酰胺可诱导体外培养的人肝癌细胞系SMMC鄄7721HSP70表达增高,可能是其促肿瘤生长的作用机制之一。     

siRNA沉默AFP基因对肝癌细胞系EGHC-9901凋亡的影响

目的建立稳定表达针对AFP基因siRNA质粒的肝癌细胞模型并探讨对其凋亡的影响。方法构建针对AFP基因的siRNAs表达质粒,脂质体法将该质粒转染肝癌细胞系EGHC-9901,G418筛选4~5周后Western blot及RT-PCR检测靶基因抑制效果,细胞分组：实验组（siRNA-afp）,转染AFP-siRNA质粒组;载体对照组,转染空载体组;空白对照组,未做任何处理组。免疫荧光检测细胞在无血清状态下凋亡情况,Western blot及RT-PCR检测Caspase-3、Caspase-8等凋亡相关蛋白表达。结果在体外成功构建针对AFP的siRNA表达质粒并在体外建立稳定表达该质粒肝癌细胞系EGHC-9901,转染后细胞表达AFP近乎完全抑制;免疫荧光表明促进细胞在无血清状态下的实验组凋亡率为32%±4%,对照组凋亡率为17%±3%,差异有统计学意义（P〈0.05）;RT-PCR及Western blot检测凋亡相关蛋白表明实验组Caspase-3表达较对照组高,差异有统计学意义（P〈0.05）,而Caspase-8、Caspase-9、bcl-2表达无显著差异（P〉0.05）。结论在体外成功建立稳定表达针对AFP基因的siRNA肝癌细胞系,抑制AFP表达可能通过上调Caspase-3表达促进其凋亡。     

IL-17A治疗银屑病合并心血管疾病研究的进展

现有研究表明银屑病患者较正常人群更易合并心血管疾病及出现心血管疾病相关危险因素。银屑病的皮肤表现及合并的心血管疾病的发病机制中似乎都有白介素(IL)-17A的参与,因此,理论上抗IL-17A疗法不仅可以改善银屑病的皮肤症状,还可同时治疗心血管系统炎症。本文就IL-17A的生物学作用及其在合并心血管疾病的银屑病患者中作用的研究进行综述。     

IL-17A在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖、凋亡的影响~

背景:白细胞介素-17A(IL-17A)在炎症反应中发挥重要作用。既往研究发现IL-17A基因多态性与某些亚型胃癌的发生风险增加有关。目的:探讨IL-17A在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:以免疫组化法和RT-PCR法分别检测胃癌组织、相应癌旁非癌组织以及胃癌细胞株的IL-17A表达。以不同浓度重组人IL-17A处理胃癌细胞株SGC7901,以MTT法检测细胞增殖,以流式细胞术检测细胞凋亡,以real-time RT-PCR检测细胞中的IL-6、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)mRNA表达。结果:胃癌组织中IL-17A阳性细胞数较相应癌旁非癌组织显著增多(P0.05),且主要表达于炎性细胞和血管内皮细胞,在胃癌细胞株中无表达。重组人IL-17A可刺激SGC7901细胞增殖,抑制H_2O_2诱导的细胞凋亡,并上调其IL-6、MMP-13 mRNA表达。结论:IL-17A可直接或通过诱导炎症信号通路分子间接促进胃癌进展。     

幽门螺杆菌CagA对慢性胃炎患者血清IFN-γ、IL-4、TGF-β和IL-17A表达的影响

目的 探讨幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori） CagA蛋白对慢性胃炎患者外周血IFN-γ、IL-4、TGF-β和IL-17A表达的影响.方法 检测80例慢性胃炎患者血清中抗CagA抗体,取胃黏膜行病理检查,采用ELISA法检测血清中IFN-γ、IL-4、TGF-β和IL-17A的浓度.结果 CagA抗体阳性组中中性粒细胞的浸润程度显著高于阴性组,两组间H.pylori的菌密度差异无统计学意义,性别对上述因素无显著影响.CagA抗体阳性组血清IFN-γ、IL-17A的表达显著下降,而IL-4、TGF-β的表达显著上升.结论 慢性胃炎CagA 阳性患者的胃黏膜炎症程度更重,机体无法有效清除H.pylori在胃黏膜中的定植,其原因可能与CagA 阳性患者外周血中细胞因子IFN-γ、IL-17A表达水平下降,而IL-4、TGF-β表达水平上升有关.