Genistein对内皮细胞内皮型一氧化氮合酶和核因子κB表达的影响

目的探讨植物雌激素Genistein对氧化型低密度脂蛋白干预的内皮细胞内皮型一氧化氮合酶和核因子κB表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,在氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)干预内皮细胞的基础上,不同浓度的Genistein(10、50和100nmol/L)孵育,MTT法观察Genistein对细胞活力的影响,实时定量逆转录聚合酶链反应检测内皮型一氧化氮合酶mRNA的表达,Western blotting检测内皮型一氧化氮合酶和核因子κB蛋白的表达。结果与空白对照组相比,氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)明显抑制细胞活力,下调内皮型一氧化氮合酶mRNA和蛋白表达,上调核因子κB蛋白表达(P0.05);Genistein明显增高细胞活力,上调内皮型一氧化氮合酶mRNA和蛋白表达,抑制核因子κB蛋白表达(P0.05),且呈浓度依赖性(P0.05)。结论 Genistein能够促进内皮型一氧化氮合酶的表达,抑制核因子κB的表达。     

高原肺水肿患者治疗前后抗氧化能力及内皮功能的改变

目的　观察高原肺水肿患者抗氧化能力及内皮功能的变化 ,探讨其变化对高原肺水肿发生、发展的影响。方法　对 34例高原肺水肿患者进行治疗前、治愈后超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)、还原型谷胱甘肽 (GSH)、一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)含量测定 ,并与 2 0名高原正常健康人作比较。结果　高原肺水肿患者血清SOD、GSH、NO及NOS含量在治疗前显著低于治愈后和对照组 (P <0 0 1) ,MDA及内皮素 1(ET 1)含量治疗前显著高于治愈后和对照组 (P <0 0 1) ,治愈后与对照组差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　高原肺水肿患者机体处于氧化胁迫状态 ,脂质过氧化损伤及内皮功能失衡是造成高原肺水肿的重要机制之一 ,对高原肺水肿的发生、发展及转归产生一定的影响     

氨氯地平对实验性兔动脉粥样硬化进程中一氧化氮合酶—一氧化氮和血红素氧合酶—一氧化碳系统的影响

目的探讨血红素氧合酶—一氧化碳和一氧化氮合酶—一氧化氮系统在动脉粥样硬化中的变化、相互关系及氨氯地平对动脉粥样硬化进程中血红素氧合酶—一氧化碳和一氧化氮合酶—一氧化氮的影响。方法家兔予以高胆固醇饮食8周,8周后停用高胆固醇饮食或另外给予喂饲氨氯地平进行药物干预8周。结果与对照组比较,模型组血脂水平明显升高,血清一氧化氮含量明显降低,血浆一氧化碳水平明显升高,血红素氧合酶1及诱导型一氧化氮合酶表达明显升高(P均<0.01)。与模型组比较,氨氯地平组血浆胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇差异无显著性(P>0.05);血清一氧化氮含量差异亦无显著性(P>0.05),血浆一氧化碳水平明显降低(P<0.01),血红素氧合酶1及诱导型一氧化氮合酶表达明显减少(P<0.01)。结论动脉粥样硬化进程中,血红素氧合酶—一氧化碳和一氧化氮合酶—一氧化氮系统显示出互补及代偿性调节作用,氨氯地平可以通过下调血红素氧合酶—一氧化碳和一氧化氮合酶—一氧化氮系统而延缓动脉粥样硬化的进程。     

大鼠慢性缺氧性肺动脉高压中肺小动脉血红素氧合酶-1与内皮型一氧化氮合酶的变化

目的观察慢性缺氧对大鼠肺小动脉血红素氧合酶(HO)-1和内皮型一氧化氮合酶表达的影响.方法观察正常(10只,正常组)和常压问断缺氧6周大鼠(10只,模型组)的血液循环内皮细胞数、肺小动脉光镜和电镜下的改变,免疫组化法测定肺组织HO-1和内皮型一氧化氮合酶表达的变化.结果模型组血液循环内皮细胞数较正常组显著增加,血液循环内皮细胞数与右心室收缩压及肺小动脉中膜厚度呈正相关.HO-1在肺小动脉内皮细胞表达显著增多,内皮型一氧化氮合酶表达明显减少.均有显著性差异(P＜0.05～0.01).结论血液循环内皮细胞数可作为间接反映缺氧性肺动脉高压血管结构重塑的参考指标.缺氧导致肺小动脉HO-1增加和内皮型一氧化氮合酶减少,对肺动脉高压的发生发展可能有一定影响.     

缺氧性肺动脉高压大鼠肺iNOS mRNA及蛋白表达的实验研究

目的 :通过观察慢性缺氧大鼠肺组织诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)表达的变化 ,探讨iNOS在肺动脉高压发病中的作用。方法 :运用血清学检验及免疫组织化学斑点杂交等方法观察血一氧化氮(NO)、肺组织iNOSmRNA及蛋白表达的变化。结果 :正常组大鼠NOS表达呈弱阳性 ,慢性缺氧后肺组织iNOSmRNA升高、蛋白NOS表达呈强阳性 ,血一氧化氮水平升高 (P <0 0 1)。结论 :诱生型一氧化氮合酶、一氧化氮的增加与慢性缺氧性肺动脉高压发病有关。     

苯扎贝特对脐静脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶表达的影响及机制

目的 观察苯扎贝特对氧化型低密度脂蛋白所诱导的人脐静脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶表达的影响及是否与血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达相关.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,逆转录聚合酶链反应检测内皮型一氧化氮合酶及血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1mRNA表达,Western Blot检测内皮型一氧化氮合酶及血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1蛋白含量表达.结果 与氧化型低密度脂蛋白组比较,苯扎贝特组和多聚肌苷酸(血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1阻断剂)组内皮型一氧化氮合酶mRNA和蛋白表达均增加,血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1mRNA和蛋白表达均减少(P＜0.05);与苯扎贝特组比较,苯扎贝特组+多聚肌苷酸组内皮型一氧化氮合酶mRNA和蛋白表达均明显增加,血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1mRNA和蛋白表达均明显减少(P＜0.01).结论 血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1可能介导苯扎贝特上调内皮细胞内皮型一氧化氮合酶基因和蛋白的表达.     

C反应蛋白诱导外周血内皮祖细胞衰老及非诺贝特的保护作用

目的研究非诺贝特对C反应蛋白诱导的外周血内皮祖细胞衰老的影响及可能机制。方法随机将分离培养的内皮祖细胞分为4组:①对照组;②C反应蛋白各浓度组(1.0、2.5、5.0 mg/L);③C反应蛋白(5.0 mg/L)+非诺贝特(10.0μmol/L)组;④非诺贝特组(10.0μmol/L)。加入不同浓度的C反应蛋白干预,或预先加入非诺贝特作用4 h,再加入5 mg/L C反应蛋白,培养7天后行SA-β-半乳糖苷酶染色,检测细胞衰老并计数每组衰老细胞数。逆转录-聚合酶链反应检测人端粒酶逆转录酶mRNA表达。免疫印迹杂交法半定量测定内皮型一氧化氮合酶蛋白表达。结果 (1)不同浓度的C反应蛋白与内皮祖细胞培养后,C反应蛋白促进内皮祖细胞的衰老,且C反应蛋白对内皮祖细胞衰老的影响随着C反应蛋白浓度的增加而增加,5 mg/L C反应蛋白组对内皮祖细胞衰老的影响最显著(P<0.01)。加入10μmol/L非诺贝特后能减少C反应蛋白诱导的衰老细胞数量(P<0.01)。(2)C反应蛋白作用内皮祖细胞后人端粒酶逆转录酶mRNA表达随着C反应蛋白作用浓度的增加而下降,加入非诺贝特10μmol/L后可以明显逆转C反应蛋白诱导的人端粒酶逆转录酶mRNA表达下调(P<0.01)。(3)C反应蛋白抑制内皮型一氧化氮合酶蛋白表达,但在加入10μmol/L非诺贝特后能明显上调内皮型一氧化氮合酶蛋白表达(P<0.01)。结论 (1)C反应蛋白削弱内皮祖细胞的内皮型一氧化氮合酶表达,引起人端粒酶逆转录酶的逆转录下降,从而使端粒酶活性下降,最后加速内皮祖细胞的衰老,从而影响内皮祖细胞的功能。(2)非诺贝特活化人端粒酶逆转录酶,抑制C反应蛋白诱导的细胞衰老,可能与内皮型一氧化氮合酶表达上调有关,从而起到保护内皮祖细胞的作用。     

高原低氧性肺动脉高压与肺血管内皮功能的相关性研究

目的探讨高原低氧性肺动脉高压(HPH)与肺血管内皮功能的关系。方法选择由平原进驻高原的健康男性官兵80例,年龄18~25岁。进入高原前和进入高原后2 d、30 d、60 d、90 d,分别测定平均肺动脉压(m PAP)、血清低氧诱导促有丝分裂因子(HIMF)、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、血浆内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)含量。结果入高原后2 d,m PAP、血清HIMF、HIF-1α、VEGF、血浆ET-1水平明显高于入高原前,NO含量水平明显低于入高原前,(均P0.01);但入高原后2 d的m PAP、血清HIMF、HIF-1α、VEGF、血浆ET-1水平明显低于入高原后30 d,60 d和90 d,NO水平则明显高于入高原后30、60、90 d(均P0.01);入高原后各指标30 d与60 d和60 d与90 d比较无统计学意义(均P0.05)。入高原后2 d,m PAP与HIMF、HIF-1α、VEGF、ET-1呈显著正相关(r=0.568、0.664、0.616、0.598),与NO呈显著负相关(r=-0.608),(均P0.01)。结论 HIMF、HIF-1α、VEGF、ET-1和NO可能共同参与了HPH的发生发展,高原HPH的发生与肺血管内皮功能受损有密切关系。     

抗氧化剂PZ51对卒中易感型自发性高血压大鼠脑保护作用的探讨

目的探讨抗氧化剂PZ51对卒中易感型自发性高血压大鼠(SHRsp)高血压发展的慢性过程中的脑保护作用。方法22只SHRsp大鼠随机分为PZ51组和对照组,每组各11只,灌胃治疗6周。用分光光度计测大脑皮质匀浆丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)浓度;Westernblot检测大脑皮质内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的蛋白表达;光镜检测颈动脉内膜中层厚度(IMT)。结果与对照组比较,PZ51组显著降低了大脑皮质匀浆MDA浓度[(2.09±0.62)nmolmg蛋白vs(4.11±0.45)nmolmg蛋白,P<0.001]和NO浓度[(0.82±0.19)μmolmg蛋白vs(1.24±0.28)μmolmg蛋白,P<0.001];PZ51抑制大脑皮质iNOS蛋白表达(P<0.01),对eNOS和nNOS无影响;光镜检查示PZ51组颈动脉IMT显著降低。结论PZ51显著降低了SHRsp大脑皮质MDA和NO浓度;抑制iNOS蛋白表达;降低了颈动脉IMT,从而发挥对SHRsp的脑保护作用。     

v糖基化终末产物对大鼠肾脏微血管内皮细胞的损伤及普罗布考的保护作用

目的探讨糖基化终末产物对大鼠肾脏微血管内皮细胞功能的损伤以及抗氧化剂普罗布考的保护作用及分子机制。方法体外分离培养大鼠肾脏微血管内皮细胞,将其分为正常对照组、糖基化终末产物损伤组和普罗布考干预组;应用TBA法、硝酸还原酶法检测各组细胞丙二醛和一氧化氮浓度;采用逆转录聚合酶链反应法及Western-blot检测细胞内皮型一氧化氮合酶mRNA水平和NADPH氧化酶蛋白表达;应用荧光显微镜观察核因子κB活化。结果与正常对照组相比,损伤组内皮细胞丙二醛浓度上升、内皮型一氧化氮合酶mRNA水平降低、细胞质NADPH氧化酶蛋白表达减少(P<0.05)。糖基化终末产物作用时间在30min和6h时培养基中一氧化氮浓度升高(P<0.05或P<0.01),而12h后一氧化氮浓度随着糖基化终末产物作用时间延长而降低(P<0.05或P<0.01)。普罗布考在10、20、50、100μmol/L范围内降低细胞丙二醛水平,抑制NADPH氧化酶蛋白活化,上调一氧化氮和内皮型一氧化氮合酶mRNA水平(P<0.05或P<0.01)。糖基化终末产物刺激微血管内皮细胞后核因子κB表达部位由细胞质移到核内,作用30min时核内表达达高峰,而后持续高表达。结论糖基化终末产物导致的大鼠肾脏微血管内皮细胞损伤和功能下降的机制可能包括:①引发脂质过氧化;②活化NADPH氧化酶,增加活性氧的生成;③内皮型一氧化氮合酶mRNA水平异常,影响一氧化氮生成;④激活核因子κB。普罗布考的作用机制可能是通过拮抗糖基化终末产物导致的脂质过氧化,核因子κB、NADPH氧化酶活化和内皮型一氧化氮合酶mRNA表达异常来保护肾脏微血管内皮细胞功能。     

不同剂量甲醛对人脐静脉内皮细胞一氧化氮含量的影响

目的观察不同剂量甲醛对人脐静脉内皮细胞一氧化氮含量的影响,分析甲醛诱导内皮细胞损伤在心血管疾病发病中的意义。方法将人脐静脉内皮细胞株分别与不同浓度甲醛(分别为0、5、10、20、40和80μmol/L)的DMEM培养基孵育,同时以过氧化氢(100μmol/L)为阳性对照组,抗氧化剂维生素C(100mg/L)为保护组。共培养24h后,分光光度法检测乳酸脱氢酶漏出量;硫代巴比妥法检测细胞上清液中丙二醛浓度;硝酸还原酶法测定培养液中一氧化氮浓度;生化分析法测定内皮细胞一氧化氮合酶活性;免疫细胞化学法测定内皮型一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶的蛋白表达;RT-PCR法测定内皮型一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达。结果不同浓度甲醛呈剂量依赖性地促进细胞乳酸脱氢酶漏出,促进内皮细胞上清液丙二醛和一氧化氮的产生;降低内皮型一氧化氮合酶的活性,抑制内皮型一氧化氮合酶在蛋白和基因水平的表达;增加诱导型一氧化氮合酶活性,促进诱导型一氧化氮合酶在蛋白和基因水平的表达。结论甲醛诱导人脐静脉内皮细胞损伤,机制可能与其抑制内皮型一氧化氮合酶的活性及表达,诱导诱导型一氧化氮合酶的活性及表达,从而诱导内皮细胞产生过多的一氧化氮有关;维生素C通过降低一氧化氮产生,减轻甲醛诱导的内皮细胞损伤。     

血红素氧合酶1—一氧化碳和一氧化氮合酶1—一氧化氮系统在动脉粥样硬化中的作用及其相关性研究

目的探讨血红素氧合酶1-一氧化碳和诱生型一氧化氮合酶-一氧化氮在动脉粥样硬化中的变化、相互关系及对动脉粥样硬化进程的影响. 方法家兔予以高胆固醇饮食(n=8)以及在高胆固醇饮食的同时经饮水给予L-精氨酸(n=8)或L-亚硝基精氨酸甲酯(n=8),或经腹腔注射血红素-L-赖氨酸盐(n=8)或锌原卟啉-9(n=8),共10周.结果与对照组比较,胆固醇组主动脉一氧化氮生成量显著减少,一氧化碳生成量则明显增加,一氧化氮合酶活性显著降低(P均<0.01),而血红素氧合酶1表达升高,主动脉斑块面积达40.2%±8.9%.与胆固醇组比较,外源性血红素-L-赖氨酸盐干预组的主动脉内膜斑块面积(26.6%±9.2%)明显缩小,主动脉一氧化碳的生成量和血红素氧合酶1的表达明显升高(P<0.01),但一氧化氮合酶活性和一氧化氮生成量较正常对照组显著降低(P<0.01),与胆固醇组比较则无显著性差异(P>0.05);与胆固醇组比较,外源性L-精氨酸组主动脉一氧化氮合酶活性显著升高, 一氧化氮生成量增加,主动脉斑块面积(28.1%±7.7%)明显缩小(P均<0.01),而血红素氧合酶1的表达和一氧化碳的生成较正常对照组明显升高,与胆固醇组比较则无显著性差异(P>0.05).与胆固醇组比较,血红素-L-赖氨酸盐干预组、L-精氨酸组的主动脉组织内c-myc及c-fos的mRNA和蛋白表达均显著降低(P均<0.01),而锌原卟啉组和L-亚硝基精氨酸甲酯组则无明显差异.结论动脉粥样硬化进程中,血红素氧合酶/一氧化碳和一氧化氮合酶/一氧化氮系统显示出互补及代偿性调节作用,血红素氧合酶系统通过对一氧化氮和一氧化氮合酶的调节和代偿机制抑制动脉粥样硬化病变的发展.     

SP600125对1型糖尿病小鼠颈动脉内皮功能及单核细胞趋化蛋白1表达的影响

目的探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)特异性抑制剂SP600125对1型糖尿病小鼠颈动脉内皮功能及单核细胞趋化蛋白1表达的影响。方法本研究分5组。第1组为C57BL/6野生型雄性小鼠,喂养8周;第2组为INS2AK ITA雄性小鼠,每日腹腔注射生理盐水50μL,共8周;第3、4、5组为INS2AK ITA雄性小鼠,每日各腹腔注射SP600125 10、20和30 mg/kg;连续8周。8周后麻醉处死动物,取静脉血检测血清髓过氧化物酶、丙二醛、一氧化氮、一氧化氮合酶;取双侧颈总动脉分别行凝胶迁移或电泳迁移率实验检测颈动脉信号转导子和转录激活子1活性,行W estern b lot检测p-JNK、JNK、单核细胞趋化蛋白1蛋白表达,行免疫组化检测颈动脉内皮单核细胞趋化蛋白1表达。结果与野生型雄性小鼠相比,1型糖尿病小鼠血清髓过氧化物酶、丙二醛明显增高,而血清一氧化氮合酶、一氧化氮明显减低(P<0.01)。给予1型糖尿病小鼠SP600125不同剂量干预后,髓过氧化物酶浓度较1型糖尿病组明显减低,而一氧化氮、一氧化氮合酶浓度明显增高,且SP600125剂量越高,一氧化氮、一氧化氮合酶浓度增加越明显(P<0.05)。...     

诱导型一氧化氮合酶和血红素氧合酶-1在反流性食管炎患者食管黏膜中的表达

目的:研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和血红素氧合酶(HO-1)在反流性食管炎(RE)患者食管黏膜中的表达及两者之间的关系,以探讨气体信使分子NO和CO在RE的发病机制中的作用.方法:以免疫组化SP法结合诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和血红素氧合酶(HO-1)的免疫反应阳性产物的平均吸光度图像分析法检测77例RE患者(分4级组)及20例对照组的食管黏膜中iNOS和HO-1蛋白的表达强度,并分析两者的关系.结果:iNOS和HO-1主要在食管黏膜上皮细胞中表达,RE患者食管黏膜中iNOs与HO-1的表达明显强于对照组(0.2473±0.0548vs 0.1616±0.0169,0.2334±0.0511vs 0.1776±0.0164,均P＜0.01).且RE组食管黏膜上皮细胞iNOS和HO-1蛋白表达呈显著正相关(r=0.513,P=0.000);而正常组中iNOS和HO-1蛋白表达之间无相关性(r=-0.073,P=0.758).结论:RE患者食管黏膜中iNOS和HO-1表达异常,表明NO扣CO在RE的发病机制中可能起重要作用.     

雌激素受体介导Genistein对内皮型一氧化氮合酶表达的诱导作用

目的 研究雌激素受体介导的基因组效应在Genistein促进内皮型一氧化氮合酶表达过程中的作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,在氧化型低密度脂蛋白(100 mg/L)干预内皮细胞的基础上,经雌激素受体拮抗剂ICI182780(1 μmol/L)或经基因转录阻断剂放线菌素D(5 mg/L)作用30 min后,再加入Genistein(100 nmol/L)作用24 h,实时定量PCR检测内皮型一氧化氮合酶mRNA表达,Western Blotting检测内皮型一氧化氮合酶蛋白的表达.结果 与空白对照组相比,氧化型低密度脂蛋白(100 mg/L)明显下调内皮型一氧化氮合酶 mRNA和蛋白表达(P<0.05);Genistein明显上调内皮型一氧化氮合酶 mRNA和蛋白表达(P<0.05),而且Genistein对内皮型一氧化氮合酶的诱导作用被雌激素受体拮抗剂ICI182780和基因转录阻断剂放线菌素D明显抑制(P<0.05 ).结论 Genistein促进内皮型一氧化氮合酶的表达与雌激素受体介导的基因组效应密切相关.     

慢性阻塞性肺疾病急性加重期并肺动脉高压患者呼出气一氧化氮浓度变化及其临床意义

目的分析慢性阻塞性肺疾病急性加重期并肺动脉高压患者呼出气一氧化氮(Fe NO)浓度变化及其临床意义。方法选取2015年5月—2016年5月咸阳市第一人民医院收治的慢性阻塞性肺疾病急性加重期并肺动脉高压患者30例作为A组,慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者30例作为B组;另选取同期在本院体检健康者30例作为C组。比较3组受试者及不同严重程度肺动脉高压患者Fe NO浓度及血清一氧化氮合酶(NOS)水平。结果 A组患者Fe NO浓度及血清NOS水平低于B、C组,B组患者Fe NO浓度及血清NOS水平低于C组(P0.05)。重度肺动脉高压患者Fe NO浓度及血清NOS水平低于轻、中度肺动脉高压患者,中度肺动脉高压患者Fe NO浓度及血清NOS水平低于轻度肺动脉高压患者(P0.05)。结论慢性阻塞性肺疾病急性加重期并肺动脉高压患者Fe NO浓度明显降低,且其与肺动脉高压严重程度相关。     

血清缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子水平与高原肺水肿患者肺动脉压的关系

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）与高原肺水肿患者肺动脉压的关系。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELSIA）检测22例高原肺水肿（HAPE）患者治疗前及治愈后血清HIF-1α、VEGF含量、动脉血氧分压（PaO2）,使用彩色多普勒超声心动仪测定肺动脉血流频谱,计算平均肺动脉压（mPAP）,与30例当地健康人比较。结果治疗前,HAPE组血清HIF-1α、VEGF、mPAP显著高于健康对照组,（均P〈0.01）,PaO2显著低于健康对照组（均P〈0.01）。HAPE组血清HIF-1α、VEGF水平与mPAP均呈显著正相关（r=0.826、0.831,均P〈0.01）,PaO2水平与mPAP呈显著负相关（r=-0.796,P〈0.01）。治疗后,HAPE组血清HIF-1α、VEGF和mPAP较治疗前显著降低（均P〈0.01）,PaO2显著升高（P〈0.01）,并与对照组比较差异无显著性（均P〉0.05）。结论 HAPE患者血清中HIF-1α、VEGF水平显著升高,其增高与HAPE患者PAH的形成有密切关系。     

肺癌患者血浆中cofilin蛋白的表达情况分析

分析不同阶段肺癌患者血浆中cofilin蛋白的表达情况。方法选取我院不同阶段肺癌患者45例,采用间接酶联免疫吸附法(Elisa)检测患者血浆中cofilin蛋白的浓度,分析cofilin蛋白在不同分期肺癌患者的表达差异性。结果中晚期(T3和T4)肺癌患者血浆中cofilin蛋白的平均表达水平为0.809±0.280 ng/ml,早期(T1和T2)肺癌患者cofilin蛋白的平均表达水平为0.225±0.118 ng/ml,两者具有显著性差异(P0.01)。结论血浆中cofilin蛋白在不同阶段肺癌患者的表达具有显著性差异,中晚期肺癌患者血浆中cofilin蛋白的含量显著高于早期肺癌患者,表明血浆中cofilin蛋白的表达与肺癌分期具有相关性。     

糖基化终产物对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶活性和表达的影响及二甲双胍的保护作用

目的 探讨糖基化终产物及二甲双胍对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶活性和表达的影响.方法 用胶原酶法分离人脐静脉内皮细胞并加以培养.将内皮细胞与不同浓度的糖基化终产物和二甲双胍分别孵育3、6、12、24 h,CCK-8法测定人脐静脉内皮细胞增殖活性.硝酸还原酶法测定一氧化氮含量,分光光度法测定一氧化氮合酶活性,蛋白免疫印迹法检测内皮型一氧化氮合酶蛋白表达水平.结果 糖基化终产物抑制人脐静脉内皮细胞增殖,二甲双胍促进人脐静脉内皮细胞增殖.糖基化终产物抑制人脐静脉内皮细胞的一氧化氮生成和一氧化氮合酶活性(P<0.01),呈剂量、时间依赖关系.二甲双胍(与对照组相比)或与糖基化终产物共同干预(与糖基化终产物组相比)均增加人脐静脉内皮细胞一氧化氮生成和一氧化氮合酶活性(P<0.01).糖基化终产物与人脐静脉内皮细胞共同孵育24 h后,内皮型一氧化氮合酶表达水平明显下降;二甲双胍上调内皮型一氧化氮合酶的表达;与糖基化终产物组相比,糖基化终产物与二甲双胍共同干预组内皮型一氧化氮合酶表达上调(P<0.01).结论 二甲双胍能够改善糖基化终产物导致的人脐静脉内皮细胞损伤.     

肝炎患者血清一氧化氮和一氧化氮合酶水平变化及其临床意义

目的 探讨血清一氧化氮水平、总一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶活力与病毒性肝炎的关系.方法 用生化方法 检测对照组、中度慢性乙型肝炎、肝硬化、慢性重症肝炎及乙戊肝重叠感染患者血清一氧化氮、总一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶水平.结果 中度慢性乙型肝炎、肝硬化及乙戊肝重叠感染患者血清一氧化氮水平、总一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶活力与对照组比较明显升高,慢性重症肝炎患者血清一氧化氮水平、总一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶活力与对照组比较明显降低(P＜0.05).结论 一氧化氮、总一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶在病毒性肝炎发病中具有重要作用,并在一定程度上与肝损害程度相关.