钾通道开放剂对哮喘豚鼠支气管平滑肌电压依赖性钾通道的作用

采用膜片钳技术探讨哮喘豚鼠支气管平滑肌细胞(ＢＳＭＣｓ)电压依赖性钾离子通道 (Ｉｋ)特性的变化和钾通道开放剂对哮喘豚鼠支气管平滑肌细胞膜Ｉｋ的作用。材料与方法　健康豚鼠 2 5只 ,雌雄不限 ,体重约 30 0～40 0ｇ ,分为 (1)哮喘组 5只 (2 5例细胞 ) ;正常对照组 7只 (2 8例细胞 ) ,行外向峰值钾电流测定 ;(2 )哮喘组 6只 (2 4例细胞) ;正常对照组 7只 (2 5例细胞 ) ,应用钾通道开放剂(Ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ)前后钾通道动力学特性变化测定。支气管平滑肌细胞分离 :将两肺组织中 3～ 4级支气管剪成碎块 ,加入 0 2 5 %胰蛋白酶 ,洗涤后…     

钾通道与支气管哮喘

钾通道在气道平滑肌的收缩和松弛反应中起介导作用。本文总结了气道平滑肌上钾通道的分布和功能,各种收缩和松弛激动剂对钾通道的影响,钾通道在哮喘发病中的意义以及钾通道开放剂对支气管的作用及应用前景。     

气道平滑肌钙激活钾通道与支气管哮喘研究进展

钙激活钾通道是气道平滑肌细胞上重要的离子通道之一,它与气道张力调控,气道平滑肌的增殖迁移有一定联系,深入的了解它们的结构功能以及调控因素,有助于揭示哮喘的发病机制,并为临床治疗提供依据。     

气道平滑肌钙激活钾通道与支气管哮喘研究进展

钙激活钾通道是气道平滑肌细胞上重要的离子通道之一,它与气道张力调控,气道平滑肌的增殖迁移有一定联系,深入的了解它们的结构功能以及调控因素,有助于揭示哮喘的发病机制,并为临床治疗提供依据.     

一氧化氮对哮喘大鼠支气管平滑肌细胞钾通道的作用

目的　观察一氧化氮 (NO)供体硝普钠 (SNP)作用前、后哮喘大鼠支气管平滑肌细胞(BSMC)静息膜电位和钾电流的改变 ,为阐明NO松弛气道平滑肌的机制提供实验资料。方法　雄性SD大鼠 16只 ,按随机数字表法分为正常对照组和哮喘模型组 ,每组 8只。采用急性酶消化法分离单个BSMC ,用常规全细胞膜片钳技术记录正常对照组和哮喘模型组的静息膜电位 (Em)、钙激活剂钾通道 (BKCa)和电压依赖性钾通道 (Kv)电流 ,以及SNP作用后哮喘模型组Em和两种电流的变化。结果　 ( 1)哮喘模型组BSMC的Em为 ( -2 9± 6)mV(n =12 ) ,正常对照组为 ( -3 5± 6)mV(n =15) ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 5) ;SNP作用后哮喘模型组BSMC的Em为 ( -3 8± 7)mV(n =12 ) ,与作用前比较差异有非常显著性 (P <0 0 1) ,与正常对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5)。 ( 2 )方波刺激模式下哮喘模型组BKCa电流密度 (IKCa)为 ( 4 4± 17)pA/pF(n =8) ,正常对照组为 ( 73± 2 0 )pA/pF(n =10 ) ,两组比较差异有非常显著性 (P <0 0 1) ,SNP作用后哮喘模型组IkCa为 ( 79± 16)pA/pF(n =10 ) ,与作用前比较差异有非常显著性 (P <0 0 1) ,与正常对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5) ;斜坡刺激模式下正常对照组和SNP作用前、后哮喘模型组的IkCa分别为     

低氧夏氧对豚鼠心肌细胞钾通道电流及钙通道电流的影响

目的：建立豚鼠心肌细胞低氧复氧模型，研究低氧复氧对心肌细胞ＡＴＰ敏感性钾通道及Ｌ型钙通道电流（Ｌｃａ－ｉ．）的影响，以探讨心肌低氧时动作电位时程（ＡＰＤ）缩短的机制，方法，采用膜片钳技术记录豚鼠心肌细胞动作电位，钾通道电流及钙通道电流，结果，发现低氧５～２０分钟后豚鼠心肌细胞ＡＰＤ明显缩短（由３８４±６５ｍｓ降至１８８±４６ｍｓ，Ｐ〈０．０５），外向性钾电流明显增加，电流－电压曲线随去极化增加呈线     

一氧化氮对气道平滑肌细胞钾通道的影响

一氧化氮可通过cGMP途径和cGMP非依赖性途径，作用于气道平滑肌上高电导钙依赖性钾通道的α亚单位，使通道蛋白磷酸化或共价修饰，开放概率增加。一氧化氮（NO）对其它钾通道也有类似作用。钾通道开放可使钾离子外流，细胞膜趋于复极化或超极化，从而降低平滑肌张力。 深入了解NO开放钾通道的机制可能为哮喘的治疗提供新的途径。     

主动脉平滑肌钙激活钾通道的增龄变化

目的研究不同月龄大鼠主动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的活性,探讨老化过程中血管平滑肌细胞钙激活钾通道的变化。方法取三组Wistar大鼠(分别为1月龄、6月龄、20月龄各20只)主动脉用酶消化法获得单个平滑肌细胞。以膜片钳技术检测细胞钙激活钾通道的活性,记录不同钳制电压下单通道电流的平均开放时间、平均关闭时间、平均开放概率、电流幅值,并绘制成电流—电压关系曲线。对比各月龄组Wistar大鼠主动脉平滑肌细胞钙激活钾通道活性。结果(1)各月龄组大鼠主动脉平滑肌细胞随着膜电位从+10 mV向+60 mV方向去极化,钙激活钾通道的电流强度逐渐加大,但加大幅度随月龄增加而降低。1月龄、6月龄和20月龄大鼠主动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的电导值分别为192±47 ps、177±56 ps和163±35 ps,但差异无统计学意义(P>0.05)。(2)在内面向外式膜片上,20月龄和1月龄大鼠主动脉平滑肌细胞钙激活钾通道平均开放概率分别为0.009±0.001和0.015±0.004,两组比较具有显著性差异(P<0.01)。20月龄和1月龄大鼠主动脉平滑肌细胞钙激活钾通道平均关闭时间分别为2 260±653和2 512±185*,两组比较具有显著性差异(P<0.01)。(3)在同样的对称性高钾浴液中,加入不同浓度钙后,发现钙对各月龄组大鼠主动脉平滑肌细胞钙激活钾通道均有明显的激活作用,表现为平均开放概率逐渐加大,平均关闭时间逐渐缩短。但对各月龄相同钙浓度间比较发现,6月龄组平均开放概率比1月龄加大,而20月龄组平均开放概率和平均开放时间比6月龄和1月龄组均显著降低。结论大鼠主动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的活性随着年龄增大而下降。     

低氧复氧对豚鼠心肌细胞钾通道电流及钙通道电流的影响

目的：建立豚鼠心肌细胞低氧复氧模型，研究低氧复氧对心肌细胞ＡＴＰ敏感性钾通道及Ｌ型钙通道电流（ＩＣａ－Ｌ）的影响，以探讨心肌低氧时动作电位时程（ＡＰＤ）缩短的机制。方法：采用膜片钳技术记录豚鼠心肌细胞动作电位、钾通道电流及钙通道电流。结果：发现低氧５～２０分钟后豚鼠心肌细胞ＡＰＤ明显缩短（由３８４±６５ｍｓ降至１８８±４６ｍｓ，Ｐ＜０．０５），外向性钾电流明显增加，电流－电压曲线随去极化增加呈线性变化，且能被优降糖所抑制，显示ＡＴＰ敏感性钾通道开放。低氧可抑制ＩＣａ－Ｌ，ＩＣａ－Ｌ峰值降低（由１．３５±０．１８ｎＡ降至０．７６±０．２１ｎＡ，Ｐ＜０．０５），电流－电压曲线上移，复氧后ＡＰＤ可很快恢复，ＩＣａ－Ｌ则不能恢复。结论：本研究提示低氧时豚鼠心肌细胞ＡＰＤ缩短不仅为ＡＴＰ敏感性钾通道开放所致，而且尚有内向性钙电流抑制过程参与。     

肺动脉平滑肌细胞膜钾通道的细胞内调控

肺动脉平滑肌细胞上主要有3种钾通道(K~+通道),分别是电压依赖性K~+通道(K_v通道)、Ca~(2+)激活的K~+通道(K_(Ca)通道)和ATP激活的K~+通道(K_(ATP)通道)。一些细胞内的信息物质(如cAMP、cGMP、PKA、PKG、PKC、NO等)调节着K~+通道的活性,对肺动脉产生收缩或舒张作用,从而在低氧性肺动脉高压的发病机制中发挥着重要的作用。本文对近年来肺动脉平滑肌细胞膜K~+通道细胞内调控因素的研究动态作一总结。     

哮喘豚鼠模型支气管平滑肌钙通道特性的变化

目的探讨钙离子通道变化与支气管哮喘豚鼠模型气道高反应性的关系.方法利用膜片钳技术细胞贴附式方法测定哮喘A组(4只,22个细胞)和正常对照A组(5只,25个细胞)支气管平滑肌细胞(BSMCs)电压依赖性钙离子通道动力学变化,全细胞式测定哮喘B组(5只,25个细胞)和正常对照B组(6只,24个细胞)BSMCs内向峰值钙电流.结果(1)BSMCs钙通道开放时间哮喘A组为(1.70±0.40)ms,正常对照A组为(0.70±0.10)ms,两组开放时间比较差异有显著性(P＜0.01);哮喘A组BSMCs钙通道关闭时间为(5.7±0.6)ms,正常对照A组为(7.9±0.4)ms,两组比较差异有显著性(P＜0.01);开放概率哮喘A组为(0.40±0.10)%,正常对照A组为(0.20±0.20)%,哮喘A组较正常对照A组增加了46%,两者比较差异有显著性(P＜0.01);(2)哮喘B组BSMCs平均内向峰值钙电流为(-54±23)PA(微微安培),正常对照B组为(-25±8)PA,哮喘B组较正常对照B组增加了1.17倍,两组比较差异有显著性(P＜0.01).结论哮喘豚鼠BSMCs钙离子通道活性增加,可能是气道高反应性主要原因之一.     

高血压病患者动脉平滑肌细胞钙激活钾通道变化及意义

目的　研究高血压病 (essential hypertension,EH )患者肠系膜动脉平滑肌 (mesenteric arterial sm oothmuscle,MASM)细胞钙激活钾通道 (Ca2 + activated K+ channel,KCa)改变及意义。方法　利用膜片钳单通道记录技术记录胞内和胞外 Ca2 +对无 EH家族史的正常血压者 (Nn 组 ) ,有 EH家族史的正常血压者 (Nf组 ) ,无 EH家族史的 EH患者 (En 组 ) ,有 EH家族史的 EH患者 (Ef组 )肠系膜动脉平滑肌 (MASM)细胞 KCa开放概率 (Po) ,平均开放时间 (To) ,平均关闭时间 (Tc)及电流幅值 (Am)的影响。结果　 (1)人动脉平滑肌 KCa开放具有明显的电压和 Ca2 +依赖性 ,其电导值大。 (2 )胞内 Ca2 + 浓度≥ 5× 10 - 7m ol/ L时 ,En 组、Ef 组 MASM细胞 KCa的 Po 分别低于 Nn 组、Nf组 ,To 缩短。(3)胞外 Ca2 +浓度≥ 1.8× 10 - 3m ol/ L 时 ,En 组、Ef 组 MASM细胞 KCa的 Po 分别高于 Nn 组、Nf组 ,To延长 ,Tc缩短。结论　 (1) EH患者 MASM细胞 KCa对胞内 Ca2 + 敏感性降低 ,这可能是促进高血压发生的机制之一。(2 ) EH患者 MASM细胞对胞外 Ca2 +敏感性增加 ,可能与胞外 Ca2 +内流增加导致胞内 Ca2 +增加有关     

钾通道在一氧化氮对支气管哮喘大鼠平滑肌张力调控中的作用

一氧化氮(NO)可松弛气道平滑肌(ASM)，降低气道高反应性，但其作用机制尚不清楚。我们测定NO供体硝普钠(SNP)、钾通道阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)、四乙铵(TEA)对支气管哮喘大鼠支气管环张力的影响，探讨钾通道在NO对哮喘大鼠支气管平滑肌张力调控中的作用。     

肺动脉平滑肌细胞膜钾通道的细胞内高控

肺动脉平滑肌细胞上主要有3种钾通道（K^ 通道）,分别是电压依赖性K^ 通道（KV通道）、Ca^2 激活的K^ 通道（KCa通道）和ATP激活的K^ 通道（KATP通道）。一些细胞内的信息物质（如cAMP、cGMP、PKA、PKG、PKC、NO等）调节着K^ 通道的活性,对肺动脉产生收缩或舒张作用,从而在低氧性肺动脉高压的发病机制中发挥着重要的作用。本文对近年来肺动脉平滑肌细胞膜K^ 通道细胞内调控因素的研究动态作一总结。     

血管平滑肌钙激活钾通道及其调控

血管平滑肌钙激活钾通道及其调控桂培春（中国协和医科大学基础医学院生理研究室，北京１００００５）ＭｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆＣａｌｃｉｕｍＡｃｔｉｖａｔｅｄＰｏｔａｓｓｉｕｍＣｈａｎｎｅｌｉｎＶａｓｃｕｌａｒＳｍｏｏｔｈＭｕｓｃｌｅＧｕｉＰｅｉｃｈｕｎ（Ｄ...     

急性低氧对家兔心室肌细胞钙、钾通道电流的影响

目的:研究急性低氧对单个家兔心室肌细胞L-型钙通道电流(L-Ica)、ATP敏感性钾通道电流(Ik(ATP)以及短暂外向钾电流(Ito)的影响,以探讨急性低氧导致动作电位时程(APD)缩短的机制。方法:应用膜片钳全细胞记录方法。结果:低氧15分钟后心室肌细胞APD明显缩短(由491±57ms降至287±53ms,P<0.01);L-Ica峰值降低(由1.57±0.29 nA降至0.83士0.15 nA,P<0.01),电流-电压曲线上移;IK(ATP)通道开放,短暂外向钾电流(Ito)峰值增大(由4.76士0.43nA升至5.41±0.53hA,P<0.05);复氧2分钟后,IK(ATP)受到抑制(由2.98±0.37nA降至610.9±42.IPA,P<0.01)。结论:急性低氧时APD的缩短是L-Ica、IK(ATP)以及Ito变化综合作用的结果。     

一氧化氮对气道平滑肌细胞钾通道的影响

一氧化氮可通过cGMP途径和cGMP非依赖性途径,作用于气道平滑肌上高电导钙依赖性钾通道的α亚单位,使通道蛋白磷酸化或共价修饰,开放概率增加。一氧化氮(NO)对其它钾通道也有类似作用。钾通道开放可使钾离子外流,细胞膜趋于复极化或超极化,从而降低平滑肌张力。深入了解NO开放钾通道的机制可能为哮喘的治疗提供新的途径。     

二十二碳六烯酸对大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活性钾通道的影响

目的探讨二十二碳六烯酸(DHA)对大鼠冠状动脉平滑肌细胞(CASMCs)上大电导钙激活性钾通道(BKCa)的影响。方法采用酶消化法获得大鼠CASMCs,用膜片钳技术分别记录0,10,20,40,60和80μmol/LDHA对大鼠CASMCs上BKCa通道动力学的影响。结果在不同浓度DHA作用下,IBKCa和BKCa尾电流均呈浓度依赖性增加。IBKCa和BKCa尾电流I-V曲线均上移,对IBKCa稳态激活曲线无影响。在指令电压+150 mV,不同浓度DHA作用下,IBKCa电流密度分别为68.24±22.75,72.40±24.49,120.44±37.96,237.48±53.22,323.60±74.83和370.61±88.16pA/pF(P<0.05,n=20)。DHA对IBKCa激活的药物半效浓度为36.22±2.17μmol/L。在测试电压+90 mV,不同浓度DHA作用下,BKCa尾电流密度分别为91.02±13.52,100.23±17.34,224.02±38.76,369.19±65.39,511.39±82.77和700.14±96.64 pA/pF(P<0.05,n=20)。结论 DHA对全细胞BKCa有激活作用,对稳态激活曲线无影响。DHA对BKCa通道的激活作用可能是其舒张血管机制之一。     

灯盏花素对鼠主动脉平滑肌钙激活钾通道的激活作用

目的:观察灯盏花素对大鼠主动脉平滑肌钙激活钾通道(KCa)的影响,揭示灯盏花素在分子水平的作用机制。方法:采用Wistar大鼠20只,应用膜片钳技术,研究灯盏花素对大鼠主动脉平滑肌KCa的作用。结果:细胞贴附式膜片上,应用浓度分别为5×10-4、10-3、1.85×10-3mol/L的灯盏花素后,大鼠的通道开放概率(Po)及通道电导明显增大:Po分别由用药前的0.012±0.047增加至0.427±0.364,0.609±0.312(P<0.05),0.839±0.192(P<0.01);通道电导分别由用药前的(124±59)pS增大至(174±83)pS,(199±41)pS(P<0.05),(269±85)pS(P<0.01)。结论:灯盏花素可激活KCa,从而起到舒张血管的作用。