肝细胞肝癌组织中丙型肝炎病毒核心区基因及其表达 …

目的 采用多种方法检测丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心区基因和表达产物在肝细胞肝癌（ＨＣＣ）组织中的分布及其在ＨＣＣ发生和发展中的作用。方法 对３９例ＨＣＣ患者进行免疫组化和原位杂匀的检测。ＩＳ－ＲＴ－ＰＣＲ法用于检测并定位ＨＣＶ－ＲＮＡ。微切组织的ＲＴ－ＰＣＲ法分别检测癌与癌旁组织中的ＨＣＶ－ＲＮＡ,以便能够控制扩增产物的来源。同时还进行 血清学ＥＬＩＳＡ和ＲＴ－ＰＣＲ的检测。结果 血清ＥＬＩＳＡ的阳     

丙型肝炎病毒及其相关的肝细胞肝癌

丙型肝炎病毒在肝细胞肝癌中的作用是肯定的，但ＨＣＶ是以何种方式致肝细胞肝有在研究中。本文就ＨＣＶ的基本特性、基因组分型及ＨＣＶ相关的肝细胞肝癌中ＨＣＶ所起的作用作了些阐述。     

丙型肝炎病毒与肝细胞肝癌

丙型肝炎病毒与肝细胞肝癌北京协和医院内科学系感染科（１００７３０）林芳，王爱霞，吴梓涛综述肝细胞肝癌（ＨｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｃｉｎｏｍａＨＣＣ）是肝脏最常见的原发性肿瘤，每年发病例数约２５００００～１００００００［１，２］。流行病学调查及动...     

丙型肝炎病毒核心区多片段基因在大肠杆菌内表达

用融合蛋白表达质粒ｐＧｅｘ，在大肠杆菌中表达了丙型肝炎病毒核心区不同基因片段，共获得四个表达蛋白，用免疫印染和ＥＬＩＳＡ检测均与ＨＣＶ抗体阳性血清反应而不与正常人血清反应，证明有ＨＣＶ核心蛋白抗原活。本工作为进一步研究ＨＣＶ不同片段核心蛋白多肽功能及发展我国高质量ＨＣＶ临床诊断试剂提供了基础。     

肝细胞肝癌和肝硬化组织中丙型肝炎病毒各区段抗 …

目的 研究丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）在肝细胞肝癌（ＨＣＣ）和肝硬化（ＬＣ）中所起的作用。结合乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）进行分析，并初步探讨了ＨＣＶ与ＨＢＶ感染是否有相互促进作用。方法 采用ＨＣＶ－Ｃ，Ｅ，ＮＳ３，ＮＳ４区单克隆抗体，ＨＢｓＡｇ多克隆抗体用免疫组化方法检测了５９例ＨＣＣ及３５例ＬＣ组织标本。结果 ＨＣＶ阳性反应主要分布在肝细胞及癌细胞的胞浆内，呈细颗粒状。ＨＣＣ中，ＨＣＶ感染率；北京（２９例     

P53基因蛋白产物在肝细胞肝癌及其癌周肝组织中的表达

Ｐ５３基因蛋白产物在肝细胞肝癌及其癌周肝组织中的表达张松平，戴益民，王能进，倪灿荣一、材料和方法从启东肝癌研究所１９７４～１９８５年间手术切除标本中，随机收集病理诊断为ＨＣＣ的存档蜡块病例６５例。所有病例均随访７年以上，其中术后生存１０年以上２０例，...     

丙型肝炎病毒核心区的分子免疫学进展

丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心工是对ＨＣＶ进行基因和血清分型的靶基因区，核心区存在ｑｕａｓｉｓｐｅｃｉｅｓ，这可能是ＨＣＶ逃避宿主的免疫应答而选择性突变的结果，在ＨＣＶ致病机理中，细胞免疫反应的损伤机理可能比病毒的直接作用更重要，核心区也是从基因水平上治疗ＨＣＶ感染和进行疫苗研究的重要区域。     

应用非同位素原位杂交检测肝组织中丙型肝炎病毒基因的分布

为了研究丙型肝炎患者肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因的分布，我们应用地高辛标记的ＨＣＶ基因５＇端非翻译区的探针（长度为３２个寡核苷酸），对２４例急、慢性丙型肝炎患者活检的肝组织石蜡包埋切片进行了原位核酸杂交检测。结果显示：ＨＣＶ基因阳性的肝组织标本有１１例，检出率是４５．８％（１１／２４）。ＨＣＶ基因主要分布于肝细胞浆，偶见于肝细胞核内。此外在肝血窦的ｋｕｐｆｆｅｒ细胞、小血管内皮细胞和汇管区附近均有明显的ＨＣＶ基因阳性染色，而对照组均未发现ＨＣＶ基因阳性信号。     

丙型肝炎病毒与肝细胞肝癌发病关系的研究及展望

丙型肝炎病毒与肝细胞肝癌发病关系的研究及展望王文亮近２０年来对乙肝病毒（ＨＢＶ）与肝癌发病关系的研究取得长足的进展。现普遍认为ＨＢＶ慢性感染与原发性肝癌的发生有密切关系，并在流行病学、免疫病理学及分子病理学等方面得到证实。近几年来对丙型肝炎病毒（ＨＣ...     

丙型肝炎病毒核心区抗体分型方法的研究

用丙型肝炎病毒核心区２个型特异性俣成肽作为包被抗原，建立了ＥＬＩＳＡ法，对血清中抗－ＨＣＶ进行分型。在１２１份抗－ＨＣＶ阳性血清中检出ＣＰ９阳性率为８３．４７％，在１０１份ＣＰ９阳性血清中进行核心区抗体分型，其中血清１型１７．８２％，血清２型２５．７４％、１．２混合型７．９２％。     

杆状病毒表面展示丙型肝炎病毒结构蛋白及其对丙型肝炎病毒的检测

目的: 利用杆状病毒表面展示系统对丙型肝炎病毒(HCV)进行早期检测。方法: 利用杆状病毒表面展示(baculovirus surface display) 技术,构建展示HCV结构蛋白的重组杆状病毒vAc-Flag-HCV C-GP64、vAc-Flag-HCV E-GP64和vAc-Flag-CE-GP64。结果: (1)Western blotting 分析结果表明重组杆状病毒表达了C(HCV核心蛋白)、E(HCV包膜蛋白)和CE蛋白。(2)激光共聚焦显微镜检测结果表明,重组杆状病毒感染昆虫细胞Sf9后在昆虫细胞膜上表达了C、E和CE蛋白。(3)免疫金电子显微镜观察表明重组蛋白展示在杆状病毒囊膜上。(4)重组病毒进行浓缩纯化后,利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术对HCV样本进行检测,vAc-Flag-CE-GP64的检测阳性率可达80.2%。结论: vAc-Flag-CE-GP64可用于对HCV进行早期检测。     

尿中丙型肝炎病毒抗体的检测

尿中丙型肝炎病毒抗体的检测孟庆松王玫王民玉抗丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）抗体是丙型肝炎病毒感染的血清学指征。我们用第二代酶联免疫试剂（ＥＬＩＳＡ）对８２份献血员血清抗－ＨＣＶ阳性的献血员尿标本用同一批试剂盒同时检测抗－ＨＣＶ。８２份血清标本抗－ＨＣＶ全部阳...     

丙型肝炎病毒基因结构与实验室检测技术

丙型肝炎是一种血源性病毒病.发病率高,病期长,可引发慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌,对人类健康构成重大威协.HCV容易变异,型别和亚型多.随着对病毒病防控力量加强,丙型肝炎的危害性日益显露出来,应引起社会广泛关注,呼吁主管部门对疫苗研制增加投入.加速诊断试剂标准化,探索新的献血员筛查模式,制订完善献血员筛选程序,阻断病毒经血传播.寻找有效价廉的抗病毒药物,提高治愈率.聚乙二醇干扰素应作为目前治疗丙型肝炎首选药物.树突状细胞是一种很有前途的治疗性疫苗.疫苗的研究已显露出可喜的端倪,人们热切期待疫苗问世.丙型肝炎疫情没有得到有效控制,还有那么多病人在等待治疗.防治检三管齐下,将丙型肝炎危害降至最低,任重而道远.     

丙型肝炎病毒基因结构与实验室检测技术

丙型肝炎是一种血源性病毒病.发病率高,病期长,可引发慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌,对人类健康构成重大威协.HCV容易变异,型别和亚型多.随着对病毒病防控力量加强,丙型肝炎的危害性日益显露出来,应引起社会广泛关注,呼吁主管部门对疫苗研制增加投入.加速诊断试剂标准化,探索新的献血员筛查模式,制订完善献血员筛选程序,阻断病毒经血传播.寻找有效价廉的抗病毒药物,提高治愈率.聚乙二醇干扰素应作为目前治疗丙型肝炎首选药物.树突状细胞是一种很有前途的治疗性疫苗.疫苗的研究已显露出可喜的端倪,人们热切期待疫苗问世.丙型肝炎疫情没有得到有效控制,还有那么多病人在等待治疗.防治检三管齐下,将丙型肝炎危害降至最低,任重而道远.     

石蜡包埋肝组织中丙型肝炎病毒的原位PCR检测

以丙型肝炎病毒（HCV）为研究对象探讨原位PCR这一新技术。用原位PCR和原位杂交检测石蜡包理肝组织中的HCV。7例肝硬变及8例肝细胞癌痛旁组织HCV的检出率分别为86％（6／7例）和50％（4／8例），明显高于同组原位杂交的42％（3／7例）和12．5％（1／8例），并且显示了良好的特异性。研究发现HCV主要分布于肝细胞浆中，并且在胆小管上皮细胞及单核细胞中也出现阳性信号。我们的研究表明原位PCR是一项敏感、特异的方法，它的广泛应用不仅可以提高丙型肝炎的诊断率，同时有助于其分子病理学的研究。     

丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶基因的克隆和表达

目的 从感染ＨＣＶ的中国患者血清中扩增编码ＨＣＶ丝氨酸蛋白酶的ｃＤＮＡ,在大肠杆菌中进行表达。方法 从血清中提取ＨＣＶ ＲＮＡ,应用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增ＨＣＶ丝氨酸蛋白酶ｃＤＮＡ,Ｓａｎｇｅｒ双脱氧链终引法测定其序列,与ｐＢＶ２２０载体构建重组粒,在大肠杆菌中表达,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ分析重组蛋白。结果 用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增得到了ＨＣＶ丝氨酸蛋白酶基因,序列分析表明其读码框架     

丙型肝炎病毒武威地方株核心区全基因片段的克隆与分析

丙型肝炎病毒 (ＨｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ)是一种高度异质性的单股正链ＲＮＡ病毒 ,不同地区所克隆的ＨＣＶ株 ,无论是核苷酸序列 ,还是氨基酸序列都有很大不同。对各地ＨＣＶ流行株核苷酸序列的克隆 ,可为开展ＨＣＶ的分子流行病学研究、ＨＣＶ的基础研究工作及其疫苗的研制提供资料。本文克隆了武威地方株ＨＣＶ核心区基因全片段 ,对其进行了序列测定 ,并与河北株、美国株进行了比较。现将结果简报如下。用兰州生物制品研究所诊断用品二室提供的抗 ＨＣＶＥＬＩＳＡ诊断试剂盒 ,从武威地区献血员供血中筛选出抗 ＨＣＶ阳性血清 ,…     

肝细胞肝癌组织浸润性淋巴细胞及其因子的表达

目的:分析原发性肝细胞癌(HCC)组织中浸润淋巴细胞的分类及细胞因子表达,探讨肝癌组织免疫微环境改变的意义.方法:收集76例原发性HCC的癌组织及非癌组织标本,应用流式细胞术及免疫组化的方法分别检测组织中免疫细胞的比例;运用流式微球阵列法(CBA)检测HCC组织和非癌组织中Th1/Th2类细胞因子,ELISA法检测TGF-1、VEGF的表达.结果:HCC患者中CD3+T细胞、CD4+ Th细胞、Treg细胞及CD455RO+记忆性T细胞在癌组织中的比例均高于相应的非癌组织,而CD8+ CTL细胞在癌组织中的比例较低;Treg细胞与Th细胞或CTL细胞水平呈负相关;癌组织中早期活化因子CD69在CD3+T淋巴细胞及NK细胞上的表达均低于非癌组织,而癌组织中晚期活化因子HLA-DR在CD3+T细胞表达的水平高于非癌组织.细胞因子IL-10、TGF-1及VEGF在癌组织中表达高于非癌组织.结论:肝癌组织微环境中,抗肿瘤效应性细胞比例下降,而抑制性细胞及其相关因子增加,引发肿瘤浸润淋巴细胞的免疫无能,导致肿瘤发生.