吗啡成瘾和正常大鼠的前额叶皮质表达蛋白质组变化的初步研究

目的建立和比较吗啡成瘾与正常大鼠前额叶皮质(PFC)蛋白质双向电泳图谱,寻找和鉴定吗啡成瘾大鼠PFC中的差异蛋白表达谱。方法以固相pH梯度等电聚焦为第一向和垂直SDS-PAGE为第二向,分别对正常对照大鼠和吗啡成瘾大鼠的PFC蛋白质样品进行二维分离,2-DE图谱经ImageMaster 2D Platinumv5.0软件分析,选取4个差异蛋白点用基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果通过对2-DE图谱蛋白斑点的匹配及对比分析,与吗啡成瘾相关的差异表达蛋白斑点为87个;经质谱鉴定出2个有意义的差异表达的蛋白斑点:Snap25亚型β-Snap25突触相关蛋白25、β-肌动蛋白。结论吗啡成瘾组与正常对照组大鼠PFC蛋白表达存在差异;初步鉴定了大鼠前额叶皮质中与吗啡成瘾相关的差异蛋白,其表达的变化可能通过多种途经影响PFC神经元功能,为我们研究阿片类物质依赖作用机制提出了新的思路和方向。     

结核性胸腔积液蛋白质组学初步研究

目的本实验利用二维凝胶电泳-肽质量指纹谱的蛋白质组学方法,对结核性、恶性和漏出性胸腔积液的相关蛋白质二维凝胶电泳（2-DE）图谱识别、鉴定,寻求结核性胸腔积液的特异蛋白质及其对临床诊断的意义。方法收集我院2010年5月～2011年6月收治的符合要求的胸腔积液患者50例,其中结核性胸腔积液20例,恶性胸腔积液17例,漏出性胸腔积液13例。利用二维凝胶电泳分离技术,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析到相应的肽质量指纹谱（PMF）,最后借助Mascot软件结合NCBInr数据库进行检索鉴定相关结构蛋白质。结果通过对结核性、恶性和漏出性胸腔积液的蛋白质肽质量指纹图比较、分析发现3个存在明显差异蛋白,它们分别是：C1-抑制蛋白、甲状腺三级结构A链和补体C3b。C1-抑制蛋白在结核性胸腔积液高表达,在恶性胸腔积液中低表达。甲状腺素三级结构A链和补体C3b在恶性腔积液中高表达,在漏出液中低表达。结论利用二维凝胶电泳技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对胸腔积液进行蛋白质组学研究,得到结核性、恶性和漏出性胸腔积液的蛋白质图谱,获得差异蛋白质,为结核性胸腔积液的鉴别诊断提供新的思路和方法。     

银杏叶提取物对急性脑梗死大鼠凋亡基因的影响

目的:探讨了银杏叶提取物对急性脑梗死大鼠凋亡基因的影响。方法:运用线栓法构建66只大鼠急性脑梗死模型,并随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组22只,其中假手术组只分离血管不插线。治疗组大鼠给予尾静脉注射银杏叶提取物2.5 mg·kg^-1,假手术组和模型组均给予尾静脉注射等体积的PBS溶液。治疗72 h后处死大鼠,取脑组织,采用实时荧光定量PCR分析3组大鼠脑组织中Bcl-2、Bax和caspase-3 mRNA水平;采用免疫组化法测定脑组织凋亡基因相关蛋白Bcl-2、Bax和caspase-3的表达;采用TUNEL染色法分析脑细胞凋亡指数。并分析10 d内3组大鼠的生存曲线。结果:与假手术组比较,建模后模型组和治疗组大鼠脑组织中Bcl-2 mRNA Bax和caspase-3 mRNA和蛋白质水平显著升高(P<0.05)。经治疗后,治疗组大鼠脑组织中caspase-3和Bax mRNA和蛋白质水平较模型组明显下降(P<0.05),而Bcl-2 mRNA和蛋白质水平较模型组显著升高(P<0.05)。建模后,模型组和治疗组大鼠脑组织细胞凋亡指数较假手术组显著升高加(P<0.05),治疗组大鼠治疗后脑组织中细胞凋亡指数较模型组显著下调(P<0.05)。与假手术组比较,模型组和治疗组大鼠10 d内存活率明显下降,但治疗组存活率明显高于模型组(P<0.05)。结论:银杏叶提取物能够有效调节急性脑梗死大鼠凋亡基因及其相关蛋白的表达,从而降低脑组织细胞的凋亡,对脑组织具有一定的保护作用。     

异烟肼致肝脏毒性的蛋白质组学分析

目的:应用蛋白质组学技术研究异烟肼致大鼠肝脏损伤时肝脏蛋白质表达谱的变化,为从分子水平上寻找毒性损伤标志物以及阐明异烟肼毒性机制奠定基础。方法:将Wistar大鼠随机分为生理盐水正常对照组和异烟肼组(400 mg.kg-1),分别连续灌胃14 d后处死大鼠,提取肝脏总蛋白,双向凝胶电泳分离蛋白质组成分,采用考马斯亮蓝R-250染色,经ImageMaster2D Platinum5.0软件分析比较两组图谱,并对差异蛋白斑点进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALD-TOF-MS)分析鉴定。结果:发现11个差异有统计学意义的蛋白质点,鉴定出8个蛋白,其中,异烟肼处理组比对照组表达升高的蛋白质有鸟氨酸转氨酶、葡萄糖调节蛋白、乙醛脱氢酶和3α-羟甾类脱氢酶,比对照组表达降低的蛋白质有抗氧化酶B166、谷胱苷肽转硫酶、醛铜还原酶和碳酸酐酶。结论:异烟肼可能造成肝脏抗氧化系统和氧化应激异常,这对阐明异烟肼的肝损伤机制具有十分重要的作用。     

异烟肼致肝脏毒性的蛋白质组学分析

 目的：应用蛋白质组学技术研究异烟肼致大鼠肝脏损伤时肝脏蛋白质表达谱的变化,为从分子水平上寻找毒性损伤标志物以及阐明异烟肼毒性机制奠定基础。方法：将Wistar大鼠随机分为生理盐水正常对照组和异烟肼组（400 mg?kg-1）,分别连续灌胃14 d后处死大鼠,提取肝脏总蛋白,双向凝胶电泳分离蛋白质组成分,采用考马斯亮蓝R-250染色,经ImageMaster 2D Platinum 5.0软件分析比较两组图谱,并对差异蛋白斑点进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALD-TOF-MS)分析鉴定。结果：发现11个差异有统计学意义的蛋白质点,鉴定出8个蛋白,其中,异烟肼处理组比对照组表达升高的蛋白质有鸟氨酸转氨酶、葡萄糖调节蛋白、乙醛脱氢酶和3α-羟甾类脱氢酶,比对照组表达降低的蛋白质有抗氧化酶B166、谷胱苷肽转硫酶、醛铜还原酶和碳酸酐酶。结论：异烟肼可能造成肝脏抗氧化系统和氧化应激异常,这对阐明异烟肼的肝损伤机制具有十分重要的作用。     

细粒棘球蚴囊液蛋白质组学的分析研究

目的分析细粒棘球绦虫幼虫生长环境即囊液的蛋白质构成情况,为深入了解棘球蚴的发育、代谢奠定基础。方法采用双向凝胶电泳分离蛋白质,经过图像分析标记,通过自动切胶仪切胶、回收,胶内酶解、纯化以及质谱分析技术分析蛋白样点的数据,最后结合生物信息学方法进行注解。结果在囊液二维电泳图谱上提取约30个蛋白斑点,成功获取21种蛋白的肽指纹图谱,利用生物信息学检索工具MASCOT进行了蛋白鉴定。结论通过建立细粒棘球蚴囊液的二维电泳图谱,初步鉴定出囊液中含人血清铁传递蛋白、人白蛋白、人β-血红蛋白3种蛋白,为从外界干扰囊液中蛋白质构成比方面寻找包虫病治疗的新方法提供了参考依据。     

1型糖尿病大鼠肾脏皮质的蛋白质组学研究

通过研究1型糖尿病(T1DM)大鼠肾皮质和正常大鼠肾皮质蛋白质表达的差异,进一步探讨T1DM引起肾脏病变的可能机制。实验采用链脲佐菌素(STZ)诱发SD大鼠产生高血糖,建立T1DM模型,应用双向凝胶电泳技术分离大鼠肾皮质蛋白。电泳图谱结果:正常组分辨出蛋白斑点468±34个;DM组分辨出蛋白斑点423±23个,其中差异显著的蛋白斑点43个,与正常组比较,DM组有15个蛋白斑点表达上调,24个表达下调,2个失表达,2个蛋白斑点只在DM组表达。本实验证明了T1DM大鼠肾皮质蛋白质表达发生了显著变化,差异蛋白质点的进一步鉴别研究将有助于探讨T1DM肾病的发病机制。     

膀胱癌BIU-87细胞羟基喜树碱耐药的蛋白质组学研究

目的研究与膀胱癌BIU-87细胞羟基喜树碱（HCPT）耐药相关的蛋白质。方法应用二维凝胶电泳（two-dimensionalelectrophoresis，2-DE）和基质辅助激光解吸电离一串行飞行时间质谱（matrix-assistedlaserdesorption-ionizationtimeofflighttandemmassspectrometry，MALDI-TOF-TOF）寻找羟基喜树碱耐药的膀胱癌BIU-87细胞与非耐药细胞的差异表达蛋白质。结果通过对2组细胞总蛋白质二维凝胶电脉图谱进行分析，找到差异蛋白质点12个；通过质谱分析，12个蛋白质均得到鉴定。这些蛋白质包括热休克蛋白27、细胞角蛋白8、nm23蛋白等。结论通过蛋白质组学技术，发现了膀胱癌羟基喜树碱耐药细胞和非耐药细胞之间差异表达蛋白质12个，这些差异蛋白质可能参与膀胱癌细胞羟基喜树碱耐药的过程。     

应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱源后衰变技术鉴定蛋白质

目的应用源后衰变(PSD)技术结合数据库检索鉴定二维蛋白质电泳(2DE)胶上的蛋白质斑点。方法 用已知多肽(ACTH)18~39肽段和TPA被胰酶降解后的1个肽段建立了PSD-MALDI-TOF-MS方法。结果应用已建立的PSD-MALDI-TOF-MS法分别将2DE分离后胶上的2个未知蛋白质斑点鉴定为40S核糖体蛋白S12和dnaK抑制蛋白。结论PSD技术在蛋白质组学研究中有较大的应用前景。     

商陆皂苷甲作用于子宫内膜异位症大鼠腹腔巨噬细胞蛋白质组的差异分析

目的研究商陆皂苷甲作用于子宫内膜异位症大鼠腹腔巨噬细胞蛋白质组的差异,鉴定差异表达的蛋白质。方法采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型。造模成功后取腹腔巨噬细胞,商陆皂苷甲作用24 h后,采用双向凝胶电泳技术分离巨噬细胞总蛋白,并获得药物组、模型组和空白对照组蛋白质组图谱,PDQuest软件分析确认三组细胞的差异蛋白质,最后运用串联飞行时间质谱（MALDI-TOF-TOF MS）鉴定差异蛋白点。结果 M2型丙酮酸激酶、磷酸酰肌醇转移蛋白和热休克蛋白8在子宫内膜异位症大鼠腹腔巨噬细胞中高表达,而磷酸甘油醛脱氢酶表达减少。商陆皂苷甲能抑制造模引起的M2型丙酮酸激酶等四种蛋白的表达变化。结论利用蛋白质组学技术,研究商陆皂苷甲作用于子宫内膜异位症大鼠腹腔巨噬细胞后蛋白表达差异,为探索子宫内膜异位症的发病机制和商陆皂苷甲的作用机制提供新的线索和依据。     

颅脑损伤患者并发肺部感染的护理体会

目的：为了使并发肺部感染的病人更多、更好、更早的痊愈。方法：通过对32例颅脑外伤并发肺部感染病人的严密观察,采取更换体位、超声雾化、有效排痰训练等有效的护理措施干预,从而控制了肺部感染。结果：痊愈17例,占53.1%;显效12例,占37.5%,无效2例,占6.2%;死亡1例,占3.1%;实践证明,有效的护理干预对提高患者治疗成功率有着重要意义。     

卡马西平联用尼美舒利相关粒细胞缺乏症

1例78岁男性患者因带状疱疹神经痛、慢性阻塞性肺疾病合并感染,给予头孢唑肟钠（2.25 g静脉滴注,1次/d）、卡马西平（0.2 g口服,2次/d）、尼美舒利（100 mg口服,2次/d）、二羟丙茶碱（0.5 g静脉滴注,1次/d）、甲钴胺（0.5 mg口服,3次/d）、地塞米松（5 mg,静脉滴注1次）、盐酸哌替啶（25 mg,肌内注射1次）和盐酸布桂嗪（100 mg,肌内注射3次）等药物治疗。第7天,停用头孢唑肟钠,改为磷霉素钠（8 g静脉滴注,1次/d）。第11天,血常规检查示白细胞计数1.6×10^9/L,中性粒细胞0.03,中性粒细胞绝对值0.1×10^9/L,淋巴细胞绝对值0.9×10^9/L。立即停用所有药物,给予对症支持治疗。第15天,外周血白细胞计数0.9×10^9/L,中性粒细胞0.02,中性粒细胞绝对值0.1×10^9/L,淋巴细胞绝对值0.7×10^9/L。行骨髓穿刺检查,诊断为粒细胞缺乏症。第17天患者出现右肺气胸、肺不张。第20天出现急性呼吸衰竭、多脏器衰竭合并重症感染,经抢救无效死亡。     

Satisfaction with information and its relationship with adherence in patients with chronic pain

□ Due to the nature of chronic pain it would be expected that patients are highly adherent to their pain medication. However, results from this study have shown that 23 per cent of patients often or always avoid using their pain medication, 13.4 per cent often or always alter dosages, and 10.3 per cent often or always stop taking their medication for a while. This suggests intentional non‐adherence to pain medication □ Less than 50 per cent of respondents were satisfied with information provided on side effects, what to do if side effects occur, and possible interactions with other medication □ Patients' satisfaction with information about their medication was related to self‐reported adherence; greater satisfaction was associated with higher self‐reported adherence     

Genomic profiling associated with recurrence in patients with rectal cancer treated with chemoradiation

PURPOSE: Stage II and III adenocarcinoma of the rectum has an overall 5-year survival rate of approximately 50%, and tumor recurrence remains a major problem despite an improvement in local control through chemotherapy and radiation. The efficacy of chemoradiation therapy may be significantly compromised as a result of interindividual variations in clinical response and host toxicity. Therefore, it is imperative to identify those patients who will benefit from chemoradiation therapy and those who will develop recurrent disease. In this study, we tested whether a specific pattern of 21 polymorphisms in 18 genes involved in the critical pathways of cancer progression (i.e., drug metabolism, tumor microenvironment, cell cycle regulation, and DNA repair) will predict the risk of tumor recurrence in rectal cancer patients treated with chemoradiation. PATIENTS AND METHODS: A total of 90 patients with Stage II or III rectal cancer treated with chemoradiation were genotyped using polymerase chain reaction (PCR)-based techniques for 21 polymorphisms. RESULTS: A polymorphism in interleukin (IL)-8 was individually associated with risk of recurrence. Classification and regression tree analysis of all polymorphisms and clinical variables developed a risk tree including the following variables: node status, IL-8, intracellular adhesion molecule-1, transforming growth factor-beta, and fibroblast growth factor receptor 4. CONCLUSION: Genomic profiling may help to identify patients who are at high risk for developing tumor recurrence, and those who are more likely to benefit from chemoradiation therapy. A larger prospective study is needed to validate these preliminary data using germline polymorphisms on tumor recurrences in rectal cancer patients treated with chemoradiation.     

甘草酸单铵结合氦-氖激光治疗银屑病62例

目的用甘草酸单铵结合低能量氦-氖激光,观察治疗银屑病患者。方法62例寻常型银屑病患者,分为两组,A组用低能量氦-氖激光血管内照射,同时用甘草酸单铵静脉滴注,共36例;B组仅用甘草酸单铵,共26例。通过30d治疗。结果总有效率82.2%,其中A组有效率88.9%,B组73.1%(经Ridit检验,U＝2.76,P＜0.01),两组差异有极显著性意义。结论甘草酸单铵结合氦-氖激光治疗银屑病,比单用甘草酸单铵效果好。     

类风湿关节炎合并肺间质纤维化的临床特征研究

目的 对类风湿关节炎合并肺间质纤维化患者的临床特征进行分析,为今后的临床诊治工作提供可靠的参考依据.方法 选取2010年1月-2013年3月我院收治的类风湿性关节炎患者102例,按照是否合并肺间质纤维化分成合并组和单纯组,而后对这两组的临床观察指标进行对比分析.结果 合并组患者的男性所占比例、吸烟者比例、患者年龄、发病年龄、抗环瓜氨酸抗体、类风湿因子、C反应蛋白水平以及骨破坏发生率均较单纯组高.结论 类风湿关节炎患者合并肺间质纤维化可能与诸多临床指标均存在较大的相关性,临床应给予关注,采取有效措施进行预防和治疗.