生肌玉红胶原海绵修复创面损伤

背景：生肌玉红胶原海绵能显著促进创面愈合。目的：观察生肌玉红胶原海绵对兔皮肤创面愈合的影响。方法：在新西兰白兔背部制造3处全层皮肤缺损创面,分别以生肌玉红胶原海绵、贝复剂（重组碱性成纤维细胞生长因子外用溶液）、生理盐水修复。观察各组创面愈合时间、创面愈合率,检测创面修复组织内成纤维细胞数、血红素氧化酶1、转化生长因子β1 mRNA与蛋白及增殖细胞核抗原蛋白表达。结果与结论：与贝复剂、生理盐水比较,生肌玉红胶原海绵可显著促进成纤维细胞增殖（P〈0.05）,增加创面血红素氧化酶1、转化生子因子β1及增殖细胞核抗原的表达（P〈0.05）,提高创面愈合率（P〈0.05）,缩短创面愈合时间（P〈0.05）。证实生肌玉红胶原海绵能够促进创面修复,其作用机制可能是通过提高创面血红素氧化酶1、转化生长因子β1表达促进细胞增殖,增加成纤维细胞等创面修复细胞。     

生肌玉红胶原海绵对促进体表慢性创面愈合的作用

目的:探讨生肌玉红胶原海绵治疗体表慢性创面的临床疗效。方法:对80例患者随机分为对照组和实验组各40例,对照组采用常规清创后外敷生肌玉红膏,实验组在清创后外敷生肌玉红胶原海绵,14 d为1个疗程,2个疗程后比较两组疗效。结果:实验组治疗效果优于对照组(P0.01);实验组皮肤愈合时间显著短于对照组,肉芽组织开始生长时间显著早于对照组(P0.05)。结论:生肌玉红胶原海绵治疗体表慢性创面具有确切的临床疗效,无明显不良反应,值得临床推广应用。     

皮下植入生肌玉红胶原后的血管新生与瘢痕抑制

背景：前期研究显示生肌玉红胶原促进血管新生与组织愈合的疗效显著好于生肌玉红膏及单纯胶原或明胶。目的：探察兔皮下植入生肌玉红胶原促进血管新生与修复的疗效与机制。方法：在新西兰兔背部两侧对称制作皮下口袋模型,并对称植入生肌玉红胶原（实验组）与胶原（对照组）,于术后3,7,14,28,56d取植入标本及标本周围组织,制作病理切片观察标本周围组织修复状况,测定胶原内血红蛋白水平,免疫荧光与CD34染色标记法观察周围组织微血管新生情况,WesternBlot法检测血管内皮生长因子、血管生成素1的表达,免疫组织化学法观察周围组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的分泌及两者的比例。结果与结论：实验组标本周围皮下血管增多,胶原周围组织随着时间推移炎性渗出减少,肉芽组织增生,到28d时已形成成熟的纤维结缔组织,并且促进微血管新生作用及血红蛋白水平高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,术后3,7d血管内皮生长因子、血管生成素1表达高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）;实验组Ⅰ型胶原分泌与对照组相当,但术后28,56dⅢ型胶原的分泌高于对照组（P〈0.05）,且术后28,56dⅠ、Ⅲ型胶原的比例低于对照组（P〈0.01）。表明生肌玉红胶原可显著促进周围组织微血管新生,提高血管内皮生长因子与血管生成素1的表达,同时协同调节胶原形成及Ⅰ、Ⅲ型胶原的比例达到减少瘢痕愈合的作用。     

神经生长因子促进烫伤创面释放内源性生长因子

背景：研究证实神经生长因子促进创面组织释放内源性各类生长因子及生长因子受体,起到正性调节作用,促进修复细胞增殖,加速创面愈合,使创面愈合由以往的被动等待自愈发展到主动调控愈合。目的：观察局部应用神经生长因子对大鼠烫伤创面转化生长因子β1和碱性成纤维细胞因子表达的影响。方法：取24只成年 SD 大鼠,于背部制成深Ⅱ度烫伤创面,随机分为4组,烧伤创面清创后,分别予以两层浸湿有1,2.5,5 mg/L 神经生长因子溶液及等渗盐水纱布覆盖。治疗后3,5,9,14 d 观察创面愈合时间和创面残留率,切取创面组织进行组织学观察,检测创面转化生长因子β1,碱性成纤维细胞因子的表达及细胞 DNA 周期的变化。结果与结论：各治疗组创面愈合时间较对照组提前,尤以5 mg/L 神经生长因子治疗组最为明显(P <0.01),各治疗组创面残留率较对照组明显减小;创面组织学显示治疗组真皮浅层有核细胞数较对照组明显增多;各治疗组给药时间点转化生长因子β1,碱性成纤维细胞因子表达均强于对照组,第5天和第9天表达强于第3天和第14天;各治疗组细胞在 S 期的百分比较对照组明显增加,其中5 mg/L 神经生长因子组增加最为显著(P <0.01)。结果显示局部应用神经生长因子可通过促进创面转化生长因子β1及碱性成纤维细胞因子表达,刺激细胞有丝分裂,促使细胞增殖,加速大鼠烫伤创面愈合。     

转化生长因子β1对小鼠巩膜成纤维细胞DNA和胶原合成的影响及其在近视形成中的作用

目的:巩膜成纤维细胞和胶原合成参与巩膜重塑和近视发生中的巩膜变薄,观察转化生长因子β1对其的干预作用。方法:实验于2004-05/10在中山大学中山眼科中心和基础医学院完成。采用3H-胸腺嘧啶核苷掺入试验测定细胞DNA合成,采用3H-脯氨酸掺入法测定细胞胶原合成,观察转化生长因子β1对巩膜成纤维细胞DNA及胶原合成的影响。并通过电镜观察巩膜成纤维细胞的细胞超微结构改变。结果:①除0.1μg/L组外,转化生长因子β1各浓度组均能明显促进巩膜成纤维细胞3H-胸腺嘧啶摄入(P<0.05),呈一定范围内的剂量依赖性,浓度为100μg/L时达到最大效应。除0.1μg/L浓度组外,其他各组均能明显促进巩膜成纤维细胞3H-脯氨酸摄入(P<0.05),并呈剂量依赖性,在浓度为100μg/L时达到最大效应。②电镜下显示巩膜成纤维细胞核仁明显、边移,内质网增多、轻度扩张。结论:转化生长因子β1可以在一定范围内呈剂量依赖性地促进体外培养的巩膜成纤维细胞DNA合成和胶原合成,当转化生长因子β1表达下调时可使巩膜成纤维细胞成分减少胶原含量下降,形成了巩膜变薄的组织学基础。     

碱性成纤维细胞生长因子对增生性瘢痕与正常皮肤成纤维细胞胶原、纤维连接蛋白表达的影响

背景:碱性成纤维细胞生长因子能促进愈合伤口产生胶原蛋白、纤维连接蛋白和基质酶的基质成分.然而,细胞增殖、细胞外基质及新生血管的形成或伤口基质重塑过程失调,会导致瘢痕组织过度增殖.目的:观察碱性成纤维细胞生长因子在正常皮肤创面愈合和增生性瘢痕形成中的作用.方法:从5例进行瘢痕修复手术患者身上同时取正常皮肤和增生性瘢痕组织,分离培养正常人皮肤成纤维细胞和增生性瘢痕成纤维细胞.应用RT-PCR和酶联免疫吸附法检测两种成纤维细胞胶原、纤维连接蛋白基因表达和蛋白合成.采用JC-1染色和流式细胞术测定成纤维细胞线粒体膜电位改变,采用化学发光法检测细胞内ATP水平改变.观察碱性成纤维细胞生长因子对两种细胞的上述指标的影响.结果与结论:不同浓度碱性成纤维细胞生长因子可减慢增生性瘢痕成纤维细胞生长,抑制增生性瘢痕成纤维细胞Ⅰ型胶原表达和合成(P<0.05).碱性成纤维细胞生长因子对正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞Ⅲ型胶原表达和合成均无影响.然而可上调正常皮肤成纤维细胞表达纤维连接蛋白(P<0.05).此外,10,100 μg/L碱性成纤维细胞生长因子处理后增生性瘢痕成纤维细胞线粒体膜电位呈去极化趋势,正常皮肤成纤维细胞中ATP水平显著增高(P<0.05).结果表明,碱性成纤维细胞生长因子在正常皮肤创面愈合和增生性瘢痕形成中可能有不同的作用和机制.     

蛇床子素干预人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及转化生长因子β1的表达

背景:蛇床子素对体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和细胞分泌的转化生长因子β1有抑制作用,但其具体作用机制尚待进一步研究。目的:体外观察蛇床子素对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖以及对细胞转化生长因子β1的影响。方法:体外原代培养人增生性瘢痕成纤维细胞,以不同浓度的蛇床子素作用于成纤维细胞,观察细胞形态的变化,应用MTT法和生长曲线法检测蛇床子素对细胞增殖活性的影响。免疫组织化学检测细胞转化生长因子β1的表达。结果与结论:蛇床子素能明显抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的生长。MTT法检测的IC50为(15.2±2.0)μmol/L,可以明显下调细胞转化生长因子β1的表达(P<0.05)。说明蛇床子素对人增生性瘢痕成纤维细胞有很强的生长抑制作用并可以下调转化生长因子β1的表达。     

重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵的制备及其在齿槽外科的应用

目的观察重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵对牙科创面止血及伤口修复愈合的影响。方法实验于2003-01／2004-03在暨南大学医学院附属广州市红十字会医院创伤研究所和口腔科完成。首先用Ⅰ型胶原蛋白、碱性成纤维细胞生长因子与壳聚糖配制成混合物，冷冻干燥成复合胶原海绵备用。收治60例错he畸型患者需行牙齿对称减数进行正畸治疗。共计对称拔除双尖牙212颗、磨牙14颗。左侧为实验组牙槽窝置入复合胶原海绵，右侧为对照组置入医用明胶海绵。记录拔牙创面止血时间，观察术后2，7d拔牙面创愈合情况。结果60例236颗牙拔除后的止血时间，实验组(45.9&;#177;12．8)s，对照组(89．0&;#177;16．4)s。实验组2d拔牙创面愈合78例(66％)、7d拔牙创面愈合117例(98％)；对照组2d拔牙创面愈合25例(2l％)、7d拔牙创面愈合95例(79％)。实验组创面愈合均好于对照组。结论重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵的止血效果和促进创面愈合作用明显优于明胶海绵。     

重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵的制备及其在齿槽外科的应用

目的观察重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵对牙科创面止血及伤口修复愈合的影响。方法实验于2003-01/2004-03在暨南大学医学院附属广州市红十字会医院创伤研究所和口腔科完成。首先用Ⅰ型胶原蛋白、碱性成纤维细胞生长因子与壳聚糖配制成混合物,冷冻干燥成复合胶原海绵备用。收治60例错牙合畸型患者需行牙齿对称减数进行正畸治疗,共计对称拔除双尖牙212颗、磨牙14颗。左侧为实验组牙槽窝置入复合胶原海绵,右侧为对照组置入医用明胶海绵。记录拔牙创面止血时间,观察术后2,7d拔牙面创愈合情况。结果60例236颗牙拔除后的止血时间,实验组(45.9±12.8)s,对照组(89.0±16.4)s。实验组2d拔牙创面愈合78例(66%)、7d拔牙创面愈合117例(98%);对照组2d拔牙创面愈合25例(21%)、7d拔牙创面愈合95例(79%)。实验组创面愈合均好于对照组。结论重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵的止血效果和促进创面愈合作用明显优于明胶海绵。     

原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞自分泌转化生长因子β1浓度检测及对转化生长因子β1增殖的调节

背景:体外实验常采用外源性转化生长因子β1刺激来观察细胞增殖变化,易忽略细胞本身自分泌转化生长因子β1的影响。目的:检测原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞(L929)自分泌转化生长因子β1的浓度和细胞增殖的变化。方法:Elisa试剂盒检测原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞各时相点细胞内和培养上清中生长转化因子β1水平。结果与结论:纤维肉瘤细胞内转化生长因子β1浓度随培养时间延长而升高,原代成纤维细胞内转化生长因子β1浓度随培养时间延长而降低;两种细胞培养上清转化生长因子β1浓度均随时间而上升,但纤维肉瘤细胞显著高于原代成纤维细胞(P<0.01),峰值时达到原代成纤维细胞的20倍;两种细胞增殖曲线在72h内均随时间而显著增高(P<0.01),同一时间点比较,纤维肉瘤细胞明显高于原代成纤维细胞。提示自分泌转化生长因子β1具有促进细胞增殖的作用,不同的自分泌水平可能是影响原代成纤维细胞这种正常细胞和纤维肉瘤细胞肿瘤细胞对于外源转化生长因子β1反应不同的重要原因。     

大鼠皮肤创伤修复过程中转化生长因子β1和β3的表达

背景：转化生长因子β在组织创伤修复中发挥核心和关键作用.目的：观察转化生长因子β1和转化生长因子β3在大鼠皮肤瘢痕性创伤愈合过程中表达量及表达部位的变化.方法：制备大鼠皮肤全层切伤模型,长度1.5-2.0 cm,深及筋膜层.于伤后0 h,12 h,1 d,2 d,3 d,4 d,5 d,6 d,7 d处死大鼠,取损伤部位皮肤,采用免疫组织化学染色检测各时间点转化生长因子β1和转化生长因子β3的表达,并进行定量分析.结果与结论：免疫组织化学染色显示,在创伤愈合的早期阶段（伤后1-5 d）,转化生长因子β1和转化生长因子β3免疫阳性颗粒主要出现在上皮细胞、上皮基底层细胞胞浆、巨噬细胞等免疫细胞胞浆及肉芽组织中;随着创伤修复时间的持续,免疫阳性颗粒主要出现在真皮层的成纤维细胞及细胞外基质中.其中转化生长因子β1的表达在创伤后1-5 d最强,而转化生长因子β3在创伤后六七天时开始明显表达.可见在大鼠皮肤瘢痕性创伤愈合过程中,转化生长因子β1的表达先于转化生长因子β3,提示转化生长因子β1与胶原形成及创伤修复关系密切,而转化生长因子β3在愈合后期表达量有升高趋势,其可能与创伤后期的组织改建密切相关.     

Effect of heparin on production of basic fibroblast growth factor and transforming growth factor-beta1 by human normal skin and hyperplastic scar fibroblasts.

Heparin affects both dermal fibroblast proliferation and collagen and may mediate these effects by altering the levels of basic fibroblast growth factor (bFGF) and transforming growth factor-beta1 (TGF-beta1) production as a wound healing modulator. The purpose of this study is to probe the effect of heparin on bFGF and TGF-beta1 production by human normal skin and hyperplastic scar fibroblasts. This research investigates the effect of heparin on bFGF and TGF-beta1 production by human normal skin and hyperplastic scar fibroblasts with exposure to 0, 100, 300, or 600 microg/ml heparin for 24, 48, 72, or 96 hours in a serum-free in vitro model. Levels of bFGF and TGF-beta1 in the supernatants were determined by enzyme-linked immunosorbant assay. All doses of heparin significantly stimulated production of bFGF by normal skin (393% to 1019% increase) and hyperplastic scar fibroblasts (405% to 899% increase) at all time points (P < .05). Heparin (300 and 600 microg/ml) also stimulated TGF-beta1 production by normal skin (26% to 83%) and hyperplastic scar fibroblasts (63% to 85%) with statistical significance (P < .05) at various time points. These effects of heparin on normal skin and hyperplastic scar fibroblasts may have implications for hyperplastic scar formation and wound healing in vivo.     

封闭负压引流技术对毁损创面恢复血管生成及创周组织血管通透性的影响

【目的】探讨封闭负压引流技术对毁损创面恢复血管新生及创周组织血管通透性的保护作用及机制。【方法】收集本院收治的58例皮肤软组织受损的患者,根据入院时间分为治疗组（30例）与对照组（28例）。治疗组患者采用封闭负压引流,对照组采用常规换药治疗,检测并比较两组治疗前1d及治疗后d3、d5、d7创面组织血小板转化因子（PDGF）、转化生长因子β（TGF-β）及血管内皮生长因子（VEDF）的表达水平。【结果】两组治疗前1dPDGF和TGF-β水平比较差异无统计学意义（P〉0．05）,治疗d3、d5、d7治疗组PDGF、TGF-β水平显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;两组前一天及治疗后d3 VEDF水平比较差异无统计学意义（P〉0．05）,治疗d5、d7治疗组VEDF水平显著低于对照组（P〈0．05）。【结论】封闭式负压引流技术可促进血管的新生,改善局部微循环,促进组织水肿消退,刺激肉芽组织的新生,加速创面的愈合。     

红花注射液保存人胎羊膜贴敷皮肤切口

背景：血管内皮生长因子参与创伤组织修复,可促进与创面愈合.目的：观察红花注射液保存人胎羊膜对大鼠皮肤切创愈合中感染率及血管内皮生长因子表达的影响.方法：建立大鼠皮肤切创模型,建模后随机分成4组,分别以纱布、羊膜、及红花注射液处理过的胎儿面羊膜贴敷在切口表面,于切创后2,3,5,7 d 取大鼠切口皮肤组织应用免疫组织化学染色,通过计算机图像分析系统检测大鼠切口皮肤组织中血管内皮生长因子的表达情况,同时观察切口感染率.结果与结论：切创后2,3 d,红花＋羊膜组的血管内皮生长因子的表达明显高于其他3组（P 〈0.05）.切创后5 d,红花＋羊膜组感染率（5%）较其他3组明显减少（P 〈0.05）.结果证实,经红花注射液保存后的人胎羊膜在大鼠皮肤切创愈合的早期阶段,可促进创缘周围血管内皮生长因子的表达,将其贴附创面能明显减少创口的感染率、促进创口的愈合.     

Extracorporeal shock wave treatment improves incisional wound healing in diabetic rats

Impaired wound healing in surgical patients with diabetes increases the incidence of infection, prolongs hospitalization, and even increases the rate of mortality. Low-energy extracorporeal shock wave treatment (ESWT) was reported to accelerate chronic wound healing by promoting revascularization and tissue regeneration; however, it is not known if ESWT could also improve healing of acute surgical incisional wounds in diabetes. In this study, using a rat model of diabetes, we investigated the effect of low-energy ESWT on collagen content in wound tissues and its efficacy in incisional wound healing. A single dorsal incisional wound was inflicted in streptozotocin-induced diabetic rats, and they received ESWT at different time post-wounding. Rats were sacrificed on days 7 and 14 post-wounding. Wound breaking strength, hydroxyproline content, histological characteristics and the expression of transforming growth factor beta 1 (TGF-β1) were analyzed. As a result, the wound breaking strength was significantly enhanced and the hydroxyproline content in wound tissues was increased at each time point examined. The number of fibroblasts was signicantly increased, and the new collagen fibers were more abundant at the wound site after ESWT. Furthermore, the expression of TGF-β1 was up-regulated after ESWT on day 7 post-wounding. These results suggest that low-energy ESWT can increase collagen content, enhance wound breaking strength and improve the healing of incisional wound in diabetic rats. The increased collagen content may be attributed, at least in part, to the up-regulation of TGF-β1 expression in wound tissues.     

Platelet‐derived transforming growth factor‐β1 promotes keratinocyte proliferation in cutaneous wound healing

Platelets are a recognised potent source of transforming growth factor‐β1 (TGFβ1), a cytokine known to promote wound healing and regeneration by stimulating dermal fibroblast proliferation and extracellular matrix deposition. Platelet lysate has been advocated as a novel personalised therapeutic to treat persistent wounds, although the precise platelet‐derived growth factors responsible for these beneficial effects have not been fully elucidated. The aim of this study was to investigate the specific role of platelet‐derived TGFβ1 in cutaneous wound healing. Using a transgenic mouse with a targeted deletion of TGFβ1 in megakaryocytes and platelets (TGFβ1^fl/fl.PF4‐Cre), we show for the first time that platelet‐derived TGFβ1 contributes to epidermal and dermal thickening and cellular turnover after excisional skin wounding. In vitro studies demonstrate that human dermal fibroblasts stimulated with platelet lysate containing high levels of platelet‐derived TGFβ1 did not exhibit enhanced collagen deposition or proliferation, suggesting that platelet‐derived TGFβ1 is not a key promoter of these wound healing processes. Interestingly, human keratinocytes displayed enhanced TGFβ1‐driven proliferation in response to platelet lysate, reminiscent of our in vivo findings. In summary, our novel findings define and emphasise an important role of platelet‐derived TGFβ1 in epidermal remodelling and regeneration processes during cutaneous wound healing.     

烫伤创面愈合后的瘢痕形成与神经支配

背景:既往研究表明神经因素在创面愈合中具有重要调控作用,但有关神经调节与创面愈合后瘢痕形成之间的关系鲜有报道。目的:观察烧伤创面愈合过程中神经支配与创面愈合质量之间的关系。方法:将30只大鼠右侧T9~L1阶段脊神经根切断,制作失神经支配皮肤模型;然后在大鼠背部右侧失神经支配皮肤区域制作直径4cm的深Ⅱ度烫伤创面,设为模型组,左侧对称正常皮肤制作同样的创面,设为对照组,伤后连续观察创面变化,于7,14,21 d采用免疫组织化学法观察Ⅰ和Ⅲ胶原分泌情况,并计算Ⅰ/Ⅲ型胶原比例的变化,探讨创面愈合速度及愈合质量。结果与结论:模型组Ⅰ,Ⅲ型胶原分泌和Ⅰ/Ⅲ型胶原比值于伤后各时间点均显著低于对照组(P<0.05)。模型组Ⅰ型胶原分泌与伤后7,14,21 d逐渐增加(P<0.05),Ⅲ型胶原于伤后21 d时分泌明显增高(P<0.05),Ⅰ/Ⅲ型胶原比值与伤后21 d时明显降低(P<0.05)。结果证实,创面早期神经支配可以促进创面愈合,创面重塑期减轻神经支配可能会改善创面重塑质量。     

β射线照射皮肤损伤创面注射骨髓间充质干细胞后的创面愈合

背景：13射线皮肤损伤创面难愈,尚无有效的治疗方法。目的：观察骨髓间充质干细胞对13射线皮肤损伤创面愈合的影响。方法：①选用SD雌性大鼠3只分离培养骨髓间充质干细胞,传代细胞生长至第5代,DAPI标记细胞,制备骨髓间充质干细胞悬液。②选3月龄清洁级SD雌性大鼠47只,随机分为3组：治疗组应用直线加速器产生的β射线（45Gy）单次照射大鼠臀部皮肤40rnm×30mm,建立急性深Ⅱ度β射线皮肤损伤动物模型,创面出现后将骨髓间充质干细胞悬液注入大鼠创面皮下及真皮层;对照组13射线照射同治疗组,创面出现后注射安慰剂,用法同治疗组。正常组为正常大鼠。光镜下观察治疗后1,2,3,4周各组大鼠创面组织病理学变化,免疫组织化学方法检测CD31、CK4、成纤维细胞生长因子含量的动态变化。结果与结论：治疗组创面愈合时间比对照组明显加快（P〈0．05）。治疗组注射骨髓间充质干细胞细胞悬液后1-4周CD31、CK4、成纤维细胞生长因子阳性细胞值明显高于对照组（P〈0．05）。证实骨髓间充质干细胞能促进β射线皮肤损伤创面的愈合,缩短创面愈合的时间。