转化生长因子β1注射退变椎间盘内软骨终板的组织形态变化

背景：椎间失稳能导致软骨终板的退变,是椎间盘退变发病机制中的基础环节。目的：观察退变椎间盘内注射转化生长因子β1后,椎间盘软骨终板的组织形态学变化。方法：将日本大耳白兔随机分为对照组、预防组和治疗组。所有兔均建立L5～6,L6～7椎间失稳模型。预防组在完成椎间失稳建模后立即于损伤侧L5～6,L6～7椎间盘内注射转化生长因子β1,治疗组于椎间失稳建模后3个月行相同方法注射转化生长因子β1。结果与结论：建模后3,6个月,预防组较对照组软骨终板软骨细胞分布均匀,潮线清晰。Mankin评分降低（P〈0.05）。建模后第6个月治疗组较对照组软骨终板表层光滑,细胞排列均匀,潮线清晰,染色均匀,Mankin评分降低（P〈0.05）。结果证实,在兔椎间盘内注射转化生长因子β1可延缓椎间盘软骨终板的退变。     

转化生长因子β3对椎间盘退变大鼠软骨终板的作用研究

目的:通过研究转化生长因子β3(transforming growth factor-β3,TGF-β3)对椎间盘退变大鼠的软骨终板凋亡的影响,探讨TGF-β3在椎间盘退变性疾病中的作用,探索治疗椎间盘退变性疾病的新思路。方法:取87只新生SD大鼠,采用双后肢直立法建立大鼠椎间盘退变模型。饲养18个月后,处死5只SD大鼠,行HE染色,光镜下见椎间盘髓核和纤维环退变,证实造模成功。随机选取存活大鼠中的60只随机分成对照组、0.9%氯化钠液组及TGF-β3组,每组20只。对照组不作任何处理;0.9%氯化钠液组及TGF-β3组分别于腰3、4节段间软骨终板处注射0.9%氯化钠液和TGF-β3,每周1次,共3次。3周后处死所有大鼠,取腰3、4节段椎间盘制成切片,行Tunel染色,计算软骨终板细胞凋亡指数,并进行统计学分析。结果:双后肢直立法成功建立大鼠椎间盘退变模型;0.9%氯化钠液组的凋亡指数较对照组明显升高,差异有统计学意义(P0.05);TGF-β3组的软骨终板细胞凋亡指数低于0.9%氯化钠组(P0.05)而高于对照组(P0.05)。结论:TGF-β3可以抑制椎间盘退变大鼠的软骨终板细胞的凋亡,具有治疗椎间盘退变性疾病的潜在价值。     

兔侧后方入路髓核内注射TGF-β1预防软骨终板退变实验研究

目的探讨经侧后方入路髓核内注射转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)预防椎间失稳后软骨终板退变的作用。方法选择6月龄日本大耳白兔36只,随机分为对照组和观察组各18只。两组均通过椎间失稳手术制备成腰5~6、腰6~7椎间失稳模型。观察组在术后立即经侧后方入路髓核内注射TGF-β1 25~30μl。于术后3个月、6个月各取8只动物,分别切取腰5~6、腰6~7椎间盘的软骨终板,对标本进行HE染色组织形态学观察及Mankin评分,测定Ⅱ型胶原,进行组间比较。结果术后3个月、6个月组织形态学显示观察组较对照组软骨终板退变明显减缓,Mankin评分显著低于对照组(P<0.01);观察组软骨终板内Ⅱ型胶原表达灰度值显著低于对照组(P<0.01)。结论髓核内注射TGF-β1对椎间失稳手术后软骨终板退变具有明显的预防作用。     

碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1在退变椎间盘组织中的表达和意义

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)在椎间盘退变组织中的表达情况和意义.方法 选取2004年至2006年手术切除的50例腰椎间盘突出症患者的退变椎间盘组织(病变组)及10例因外伤手术切除椎间盘的正常间盘组织(对照组).采用免疫组化方法、酶联免疫吸附法(ELISA)检测标本中bFGF、TGF-β1的表达.结果 病变组椎间盘组织bFGF、TGF-β1的表达明显高于对照组(P＜0.05).结论 bFGF、TGF-β1在椎间盘的退变过程中可能发挥重要作用.     

可注射型纤维蛋白凝胶转化生长因子β1复合骨髓间充质干细胞移植治疗椎间盘退变

背景:纤维蛋白凝胶主体胶与催化剂未混合前为液态,具有可注射的优点,注射混合后凝固成凝胶状,与髓核相似,并且凝固时间可控性强,作为间充质干细胞的载体植入到椎间盘内有诸多优点。目的:观察可注射型纤维蛋白凝胶转化生长因子β1复合骨髓间充质干细胞移植抑制椎间盘退变的可行性。方法:将新西兰大白兔随机分为退变模型组、纤维蛋白凝胶组,骨髓干细胞+纤维蛋白凝胶组。3组采用针刺法诱导建立退变模型后,纤维蛋白凝胶组及干细胞+纤维蛋白凝胶组分别移植入纤维蛋白凝胶转化生长因子β1复合物及骨髓间充质干细胞纤维蛋白凝胶转化生长因子β1复合物,于植入后2,6,10周行CR、MRI及病理检查。结果与结论:退变模型组与纤维蛋白凝胶组椎间隙高度下降明显,并与时间呈正相关,干细胞+纤维蛋白凝胶组下降较缓慢(P<0.01)。免疫组织化学及组织学检查显示,退变模型组髓核细胞的数量及Ⅱ型胶原含量进行性减少,细胞凋亡率明显增加,纤维蛋白凝胶组与退变模型组相似,干细胞+纤维蛋白凝胶组髓核细胞数量及Ⅱ型胶原含量较退变模型组及纤维蛋白凝胶组明显增多,细胞凋亡率下降。说明骨髓间充质干细胞联合纤维蛋白凝胶转化生长因子β1能很好抑制椎间盘退变,而单纯纤维蛋白凝胶转化生长因子β1移植不能抑制椎间盘退变。     

可注射型纤维蛋白凝胶转化生长因子β1复合骨髓间充质干细胞移植治疗椎间盘退变

背景：纤维蛋白凝胶主体胶与催化剂未混合前为液态,具有可注射的优点,注射混合后凝固成凝胶状,与髓核相似,并且凝固时间可控性强,作为间充质干细胞的载体植入到椎间盘内有诸多优点。目的：观察可注射型纤维蛋白凝胶转化生长因子β1复合骨髓间充质干细胞移植抑制椎间盘退变的可行性。方法：将新西兰大白兔随机分为退变模型组、纤维蛋白凝胶组,骨髓干细胞＋纤维蛋白凝胶组。3组采用针刺法诱导建立退变模型后,纤维蛋白凝胶组及干细胞＋纤维蛋白凝胶组分别移植入纤维蛋白凝胶转化生长因子β1复合物及骨髓间充质干细胞纤维蛋白凝胶转化生长因子β1复合物,于植入后2,6,10周行CR、MRI及病理检查。结果与结论：退变模型组与纤维蛋白凝胶组椎间隙高度下降明显,并与时间呈正相关,干细胞＋纤维蛋白凝胶组下降较缓慢（P〈0.01）。免疫组织化学及组织学检查显示,退变模型组髓核细胞的数量及Ⅱ型胶原含量进行性减少,细胞凋亡率明显增加,纤维蛋白凝胶组与退变模型组相似,干细胞＋纤维蛋白凝胶组髓核细胞数量及Ⅱ型胶原含量较退变模型组及纤维蛋白凝胶组明显增多,细胞凋亡率下降。说明骨髓间充质干细胞联合纤维蛋白凝胶转化生长因子β1能很好抑制椎间盘退变,而单纯纤维蛋白凝胶转化生长因子β1移植不能抑制椎间盘退变。     

转化生长因子β1与椎间盘退变的相关研究

学术背景:转化生长因子β1是蛋白多糖及胶原代谢等椎间盘细胞外基质的重要调节物质之一,有可能在腰椎间盘退变的病理过程及基因治疗中发挥作用.目的:分析转化生长因子β1的基因结构特点及其对椎间盘细胞的作用,认识转化生长因子β1在椎间盘退变的病理过程及基因治疗方面的作用.检索策略:应用计算机检索维普中文科技期刊数据库(VIP)、清华同方中文系列等数据库1995-01/2007-10的相关文章,并限定文章语言种类为中文和"English",检索词"间盘退变,转化生长因子β1,中医药"同时检索Medline数据库1995-01/2007-10期间的相关文章,检索词"ntervertebral disc degeneration, TGF-β1, Traditional Chinise Medicine"纳入标准:① 转化生长因子β1基因结构等特点文章.② 椎间盘退变、转化生长因子β1与中医药三者关联研究.排除标准:综述文献、重复研究、Meta分析类文章.文献评价:初检得到398篇文献,纳入37篇符合标准的文献.主要介绍转化生长因子β1基因的特点、转化生长因子β1对椎间盘细胞的影响、转化生长因子β1与椎间盘退变的生物治疗及中医药对转化生长因子β1表达的影响.资料综合:目前认为转化生长因子β1可通过改善退变的椎间盘细胞活性,刺激胶原基因表达来延缓椎间盘组织的退变,对退变早期的椎间盘尤其是髓核具有修复功能,可逆转椎间盘的退变.部分中药可促进椎间盘细胞转化生长因子β1的表达但机制未明.运用转基因疗法发挥转化生长因子β1对椎间盘退变性疾病的治疗在理论上可行,但现有技术还不能把转化生长因子β1安全、有效地注入人的椎间盘.结论:转化生长因子β1的结构及基因定位已明确,转化生长因子β1是转基因疗法治疗椎间盘疾病比较理想的目的基因,但真正应用于临床仍有待组织工程学等相关领域的深入研究.在中医药领域寻找促进转化生长因子β1表达的特异性效应物,有可能为椎间盘退变性疾病的治疗提供新的途径.     

软骨终板形态与椎间盘退变的相关性

背景:以往研究证明多种内环境因素共同作用引发椎间盘退变,最重要的机制为椎间盘软骨终板的退变。目的:分析椎间盘退变与终板形态的关系。方法:回顾性分析62例因椎间盘源性慢性下腰痛和79例因髓核脱出致神经根性症状患者的腰椎MRI正中矢状位图像资料。根据腰椎MRI正中矢状位T1W1图像确定终板形态,T2W1图像确定椎间盘退变程度分级。结果与结论:平坦型和不规则型终板最常见于椎间盘退变人群下腰椎,L5/S1平坦型最多见。髓核脱出组与椎间盘源性慢性下腰痛组中凹陷型终板椎间盘退变程度均较平坦型、不规则型低,平坦型终板椎间盘退变程度较不规则型低(P<0.01)。两组间凹陷型与不规则型终板椎间盘退变程度差异无显著性意义,髓核脱出组平坦型椎间盘退变程度较椎间盘源性慢性下腰痛组高(P<0.05)。提示随着椎间盘退变程度的加重,软骨终板形态有由凹陷型向平坦型、不规则型依次转变的趋势。     

磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶与转化生长因子β1在正常和腰椎间盘退变组织中的表达

背景：研究表明p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与椎间盘退变过程中炎症反应密切相关。目的：检测腰退变椎间盘组织和正常腰椎间盘组织中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1的表达。方法：选取经手术切除的36例退变椎间盘组织和10例正常椎间盘组织为对象,应用免疫组织化学法检测两组中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1的表达,并应用真彩色病理图像分析系统进行分析。结果与结论：腰退变椎间盘组织中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1的阳性表达率均高于正常椎间盘组织（P〈0.05）,证实磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1在退变椎间盘组织中呈高表达。     

磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶与转化生长因子β1在正常和腰椎间盘退变组织中的表达

背景:研究表明p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与椎间盘退变过程中炎症反应密切相关。目的:检测腰退变椎间盘组织和正常腰椎间盘组织中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1的表达。方法:选取经手术切除的36例退变椎间盘组织和10例正常椎间盘组织为对象,应用免疫组织化学法检测两组中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1的表达,并应用真彩色病理图像分析系统进行分析。结果与结论:腰退变椎间盘组织中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1的阳性表达率均高于正常椎间盘组织(P<0.05),证实磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和转化生长因子β1在退变椎间盘组织中呈高表达。     

椎间注射转化生长因子β1对免退变腰椎间盘蛋白多糖表达的影响

背景：体外研究证实转化生长因子β1可以促进蛋白多糖合成,延缓椎间盘退变,但体内实验鲜见报道。目的：观察局部应用转化生长凶子β1对兔退变腰卡傩间盘髓核蛋白多糖表达的影响。方法：取30只新西兰人白兔建立兔腰椎间盘退变模型,造模12周,经x射线证实退变后,随机选择6只模型兔及6只未造模正常兔,处死取材。分刖向剩余24只模型兔L4．5椎间隙注射转化生子因子β1和生理盐水。末次给药2,4周取材,间苯三酚法测定兔椎间盘髓核内蛋白多糖的水平。结果与结论：造模12周,兔退变椎间盘髓核中蛋白多糖水甲明显降低（P〈0.01）。绎局部注射转化生子因子β1后,兔退变椎间盘髓核中蛋白多精表达明显增多（P〈0.01）。说明在兔椎间注射转化生子因子β1可以促进髓核蛋白多糖的合成,延缓椎间盘退变。     

椎间注射转化生长因子β1对兔退变腰椎间盘蛋白多糖表达的影响

背景:体外研究证实转化生长因子β1可以促进蛋白多糖合成,延缓椎间盘退变,但体内实验鲜见报道。目的:观察局部应用转化生长因子β1对兔退变腰椎间盘髓核蛋白多糖表达的影响。方法:取30只新西兰大白兔建立兔腰椎间盘退变模型,造模12周,经X射线证实退变后,随机选择6只模型兔及6只未造模正常兔,处死取材。分别向剩余24只模型兔L4~5椎间隙注射转化生子因子β1和生理盐水。末次给药2,4周取材,间苯三酚法测定兔椎间盘髓核内蛋白多糖的水平。结果与结论:造模12周,兔退变椎间盘髓核中蛋白多糖水平明显降低(P<0.01)。经局部注射转化生子因子β1后,兔退变椎间盘髓核中蛋白多糖表达明显增多(P<0.01)。说明在兔椎间注射转化生子因子β1可以促进髓核蛋白多糖的合成,延缓椎间盘退变。     

胰岛素样生长因子Ⅰ在正常与退行性变腰椎间盘中表达的差异

目的:观察胰岛素样生长因子Ⅰ在正常与突出椎间盘中的含量并分析其与病程、患者年龄的关系。方法:于2003-08/2005-01在安徽省立医院骨科收集腰椎间盘标本50例,自椎间盘突出症患者术中取出椎间盘组织,包括纤维环和髓核(L3～S1),分为椎间盘退行性变组和正常对照组。椎间盘退行性变组42例,年龄:≤30岁,12例;31～50岁,16例;>50岁,14例。病程:3～6个月,16例;7～12个月,15例;>12个月,11例。正常对照组,8例,年龄19～31岁。所有标本用苏木精-伊红染色观察椎间盘组织有无血管组织,软骨细胞是否增生和退行性变,纤维板状结构有无破坏,基质是否有增生,用来确定椎间盘软骨细胞是否有退行性变。采用胰岛素样生长因子Ⅰ的免疫组化染色,进行免疫图像分析。观察胰岛素样生长因子Ⅰ表达情况及其在不同病程、年龄患者中的阳性表达比较。结果:实验标本50例全部进入结果分析。①正常对照组软骨细胞呈纺锤形,位于软骨陷窝内,胞膜完整,胞质均匀,胞质内少见空泡,基质少见。椎间盘退行性变组软骨细胞增生,胞膜不清,胞质内有较多空泡,部分细胞核消失,细胞外基质增多。②所有标本胰岛素样生长因子Ⅰ均有阳性表达,阳性表达主要位于椎间盘软骨细胞的胞核,呈棕黄色。③椎间盘退行性变组≤30,31～50,>51岁3个年龄段的胰岛素样生长因子Ⅰ含量均显著低于正常对照组[(0.031±0.009)%,(0.029±0.009)%,(0.029±0.010)%,(0.045±0.007)%,P<0.01～0.05],退行性变的腰椎间盘中的胰岛素样生长因子Ⅰ含量在3个年龄段中差异无显著性意义(P>0.05)。④椎间盘退行性变组病程3～6,7～12,≥12个月3个时间段,随着病程延长,胰岛素样生长因子Ⅰ含量有明显减少趋势[(0.037±0.008)%,(0.029±0.007)%,(0.020±0.003)%,P<0.05]。结论:退行性变与正常的腰椎间盘中均有胰岛素样生长因子Ⅰ,但在退行性变腰椎间盘中含量较低。退行性变的腰椎间盘中的胰岛素样生长因子Ⅰ量与患者年龄无相关性,而病程越长其中胰岛素样生长因子Ⅰ的含量越低。提示胰岛素样生长因子Ⅰ可能与椎间盘细胞及基质正常的代谢、椎间盘细胞凋亡、椎间盘细胞外基质代谢有关。     

软骨形成过程中的转化生长因子

背景:转化生长因子β2 是一族多肽类生长因子,具有多重生物学效应,对骨髓间充质干细胞增殖分化功能有一定促进作用,是调节骨髓间充质干细胞增殖和向软骨细胞方向分化的最主要因子之一.目的:探讨转化生长因子β2 的分子结构特点及其在软骨形成方面的作用.方法:应用计算机检索中国期刊全文数据CNKI、中国期刊全文数据维普中文科技期刊数据库(VIP)和PubMed 数据库(1995-01/2011-08)与骨组织工程中转化生长因子β2 诱导软骨形成有关的文章,检索词分别为"转化生长因子β2;软骨细胞分化;骨组织工程"和"TGF-β2;cartilage formation;tissue engineering".纳入所述内容与转化生长因子β2 分子结构特点,转化生长因子β2 信号转导通路,软骨细胞的诱导性分化,软骨性疾病的生物性治疗进展有关.排除综述文献、重复研究、观点陈旧的文章.结果与结论:初检得到302 篇文献,排除262 篇不符合标准的文献,共纳入40 篇符合标准的文献.经分析得出转化生长因子β2 通过促进骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞促进软骨特异性基质如Ⅱ型胶原及蛋白多糖的合成,从而发挥软骨诱导作用.转化生长因子β2 与其他因子共同作用调节软骨细胞生长分化,使临床上永久性修复软骨组织缺损的治疗变为可能.     

软骨形成过程中的转化生长因子β2

背景：转化生长因子β2是一族多肽类生长因子,具有多重生物学效应,对骨髓间充质干细胞增殖分化功能有一定促进作用,是调节骨髓间充质干细胞增殖和向软骨细胞方向分化的最主要因子之一。目的：探讨转化生长因子β2的分子结构特点及其在软骨形成方面的作用。方法：应用计算机检索中国期刊全文数据CNKI、中国期刊全文数据维普中文科技期刊数据库（VIP）和PubMed数据库（1995-01/2011-08）与骨组织工程中转化生长因子β2诱导软骨形成有关的文章,检索词分别为＂转化生长因子β2;软骨细胞分化;骨组织工程＂和＂TGF-β2;cartilage formation;tissue engineering＂。纳入所述内容与转化生长因子β2分子结构特点,转化生长因子β2信号转导通路,软骨细胞的诱导性分化,软骨性疾病的生物性治疗进展有关。排除综述文献、重复研究、观点陈旧的文章。结果与结论：初检得到302篇文献,排除262篇不符合标准的文献,共纳入40篇符合标准的文献。经分析得出转化生长因子β2通过促进骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞促进软骨特异性基质如Ⅱ型胶原及蛋白多糖的合成,从而发挥软骨诱导作用。转化生长因子β2与其他因子共同作用调节软骨细胞生长分化,使临床上永久性修复软骨组织缺损的治疗变为可能。     

Regeneration of hyaline cartilage by cell-mediated gene therapy using transforming growth factor beta 1-producing fibroblasts

Transforming growth factor beta (TGF-beta) has been considered as a candidate for gene therapy of orthopedic diseases. The possible application of cell-mediated TGF-beta gene therapy as a new treatment regimen for degenerative arthritis was investigated. In this study, fibroblasts expressing active TGF-beta 1 were injected into the knee joints of rabbits with artificially made cartilage defects to evaluate the feasibility of this therapy for orthopedic diseases. Two to 3 weeks after the injection there was evidence of cartilage regeneration, and at 4 to 6 weeks the cartilage defect was completely filled with newly grown hyaline cartilage. Histological analyses of the regenerated cartilage suggested that it was well integrated with the adjacent normal cartilage at the sides of the defect and that the newly formed tissue was indeed hyaline cartilage. Our findings suggest that cell-mediated TGF-beta 1 gene therapy may be a novel treatment for orthopedic diseases in which hyaline cartilage damage has occurred.     

转化生长因子β3重组腺病毒载体转染退变髓核细胞后的增殖活性

背景:通过基因干扰促进某些基因的表达,调控细胞生物学活性刺激有利于椎间盘组织再生的基质合成来达到治疗目的。目的:构建含有转化生长因子β3的腺病毒表达载体,观察其对退变髓核细胞增殖的影响。方法:制作椎间盘突变模型,从而获取原代退变椎间盘髓核细胞,提取总RNA,调取转化生长因子β3cDNA克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV,采用pAdEasy系统进行细菌内同源重组得到含目的基因的腺病毒载体,脂质体转染293A细胞进行包装并扩增病毒。结果与结论:成功构建有较强感染能力的含转化生长因子β3基因重组腺病毒表达载体,滴度达1010pfu/L,MTT法检测表明Ad-TGF-β3可改善退变髓核细胞生物学特性,为研究转化生长因子β3的作用机制及将其用于椎间盘退变的基因治疗提供实验和理论依据。     

Plasma transforming growth factor beta1 in breast cancer patients treated with CMF chemotherapy

BACKGROUND: In early breast cancer patients the transformed epithelial cells are thought to be sensitive to transforming growth factor beta1 (TGFbeta1)-mediated growth arrest. TGFbeta1 may therefore act as an anti-tumour promoter. However, in advanced breast cancer resistance to such TGFbeta1 action develops. Neoplastic cells produce TGFbeta1, which may enhance tumour invasion and metastasis, mainly by intensifying angiogenesis, which is an immunosuppressive action. In the light of the potential role of TGFbeta1 in breast cancer pathogenesis, an understanding of the effect of applied therapeutic methods on plasma TGFbeta1 concentration is essential. OBJECTIVE: To investigate the effect of adjuvant chemotherapy on plasma transforming growth factor beta1 (TGFbeta1) concentration in breast cancer patients with metastases to axillary lymph nodes. METHOD: Fifteen stage II breast cancer patients on adjuvant chemotherapy with cyclophosphamide, methotrexate and 5-fluorouracil (CMF) were studied along with 15 healthy premenopausal women. RESULTS: Plasma TGFbeta1 concentration (determined by the ELISA method) in the breast cancer patients did not differ significantly from that of the healthy women. Adjuvant CMF chemotherapy significantly decreased plasma TGFbeta1 concentration in those pre-menopausal breast cancer women with metastases to axillary lymph nodes. CONCLUSION: The possible pathogenic action of this growth factor in stage II breast cancer disease warrants further investigation to elucidate whether the induced decrease of blood TGFbeta1 concentration is essential to successful chemotherapy.