改构型酸性成纤维细胞生长因子干预慢性衰老模型大鼠脑及肝组织和血液ATP酶的活力

背景：有研究表明改构型酸性成纤维细胞生长因子是多功能生长因子,但其抗衰老作用至今尚未有报道。目的：观察改构型酸性成纤维细胞生长因子对D-半乳糖致衰老大鼠脑组织、肝组织及红细胞膜Na＋-K＋-ATP酶活力和Ca2＋-Mg2＋-ATP酶活力的影响。方法：将Wistar大鼠采用皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,建模成功后随机分为模型组、生理盐水对照组和改构型酸性成纤维细胞生长因子组,另设正常对照组。改构型酸性成纤维细胞生长因子组按12μg/kg剂量肌肉注射改构型酸性成纤维细胞生长因子,生理盐水对照组肌肉注射等量的生理盐水,模型组不干预。结果与结论：与正常对照组相比,模型组大鼠脑组织、肝组织及红细胞膜Na＋-K＋-ATP酶活力和Ca2＋-Mg2＋-ATP酶活力均明显著降低（P〈0.01）。改构型酸性成纤维细胞生长因子组脑组织、肝组织及红细胞膜Na＋-K＋-ATP酶活力和Ca2＋-Mg2＋-ATP酶活力均明显高于模型组和生理盐水对照组（P〈0.05）。结果提示,改构型酸性成纤维细胞生长因子能提高衰老大鼠脑组织、肝组织及红细胞膜Na＋-K＋-ATP酶活力和Ca2＋-Mg2＋-ATP酶活力,具有延缓衰老作用。     

maFGF对慢性衰老大鼠肝组织中ATP酶活力的影响

目的观察改构型酸性成纤维细胞生长因子(maFGF)对D-半乳糖致衰老大鼠肝组织中Na+-K+-ATP酶活力及Ca2+-Mg2+-ATP酶活力的影响,探讨maFGF抗衰老的机制。方法选择成年Wistar大鼠40只,采用皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,衰老模型成功后随机分为衰老对照组、NS对照组和maFGF治疗组各10只。另10只不注射D-半乳糖作为正常对照组。maFGF治疗组按12μg/kg剂量肌肉注射ma FGF,1次/d,共14 d,NS对照组肌肉注射与maFGF治疗组相同容量的生理盐水,1次/d;衰老对照组不作任何干预。各组大鼠到相对应的时间点取出各组大鼠肝组织,测定肝组织匀浆中Na+-K+-ATP酶活力及Ca2+-Mg2+-ATP酶活力。结果与正常对照组相比,衰老对照组大鼠肝组织中Na+-K+-ATP酶活力及Ca2+-Mg2+-ATP酶活力均明显降低(P<0.01);maFGF治疗组肝组织中Na+-K+-ATP酶活力和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力均明显高于衰老对照组、NS对照组(P<0.05)。结论 maFGF能升高衰老大鼠肝组织中Na+-K+-ATP酶活力及Ca2+-Mg2+-ATP酶活力,对衰老大鼠肝损伤有一定保护作用。     

改构型酸性成纤维细胞生长因子对衰老模型大鼠自由基与脂质过氧化物的影响

背景：有研究表明改构型酸性成纤维细胞生长因子是多功能生长因子,但其抗衰老作用至今尚未见报道。目的：观察改构型酸性成纤维细胞生长因子对D-半乳糖致衰老大鼠脑组织、肝组织及血清中超氧化物歧化酶活力、丙二醛含量和抑制羟自由基能力的影响。方法：选择成年Wistar大鼠皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,建模成功后随机分为模型组、生理盐水对照组和改构型酸性成纤维细胞生长因子治疗组,另设正常对照组。改构型酸性成纤维细胞生长因子组按12μg/kg剂量肌肉注射改构型酸性成纤维细胞生长因子,生理盐水对照组肌肉注射等量的生理盐水,模型组不作干预。结果与结论：与模型组和生理盐水对照组相比,改构型酸性成纤维细胞生长因子治疗组脑组织、肝组织及血清中超氧化物歧化酶活力和抑制羟自由基能力均显著升高（P〈0.01或P〈0.05）,丙二醛含量均显著降低（P〈0.01或P〈0.05）。结果证实,改构型酸性成纤维细胞生长因子可通过降低自由基,提高机体的抗氧化能力来发挥延缓衰老的作用。     

改构型酸性成纤维细胞生长因子对衰老模型大鼠自由基与脂质过氧化物的影响

背景:有研究表明改构型酸性成纤维细胞生长因子是多功能生长因子,但其抗衰老作用至今尚未见报道。目的:观察改构型酸性成纤维细胞生长因子对D-半乳糖致衰老大鼠脑组织、肝组织及血清中超氧化物歧化酶活力、丙二醛含量和抑制羟自由基能力的影响。方法:选择成年Wistar大鼠皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,建模成功后随机分为模型组、生理盐水对照组和改构型酸性成纤维细胞生长因子治疗组,另设正常对照组。改构型酸性成纤维细胞生长因子组按12μg/kg剂量肌肉注射改构型酸性成纤维细胞生长因子,生理盐水对照组肌肉注射等量的生理盐水,模型组不作干预。结果与结论:与模型组和生理盐水对照组相比,改构型酸性成纤维细胞生长因子治疗组脑组织、肝组织及血清中超氧化物歧化酶活力和抑制羟自由基能力均显著升高(P<0.01或P<0.05),丙二醛含量均显著降低(P<0.01或P<0.05)。结果证实,改构型酸性成纤维细胞生长因子可通过降低自由基,提高机体的抗氧化能力来发挥延缓衰老的作用。     

改构型和野生型酸性成纤维细胞生长因子对大鼠皮肤生长促进作用的比较

目的　比较改构型和野生型酸性成纤维细胞生长因子 ( a FGF)促进大鼠皮肤生长的作用。方法　将 2 mm× 2 mm的新生大鼠皮肤分别接种在含有 1、10和 10 0 μg/ L 3种不同浓度的改构型 a FGF和野生型 a FGF与体积分数为 10 %小牛血清的 Dulbecco改良 Eagle培养基中培养 4 d,然后测定生长后皮肤的面积。结果　空白对照组的皮肤面积为 ( 2 .96± 1.12 ) mm2 ,浓度为 1、10和 10 0 μg/ L 改构型 a FGF组的皮肤面积分别是空白对照组的 1.4、1.5和 1.3倍 ,而 3种不同浓度的野生型 a FGF组的皮肤面积分别是空白对照组的 1.5、3.2和 1.6倍。与其他组相比 ,只有浓度为 10μg/ L野生型 a FGF组的皮肤面积显著升高 ( P<0 .0 5 )。结论　改构型 a FGF对皮肤生长无显著刺激 ,其作用效果明显低于野生型 a FGF。     

改构型和野生型酸性成纤维细胞生长因子对肠缺血-再灌注损伤的保护作用及剂量-效应关系研究

目的评价改构型和野生型酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对肠缺血-再灌注损伤后肠道保护作用的机制及剂量-效应关系。方法以夹闭大鼠肠系膜上动脉(SMA)制备肠缺血-再灌注损伤模型，并将动物随机分为假手术组、生理盐水对照组、不同剂量(2、4和8μg)改构型aFGF治疗组和4μg野生型aFGF治疗组。除假手术组外，其余各组动物均于缺血45min后再灌注2、6、12和24h活杀，取血及小肠组织标本，检测血浆中D-乳酸含量及组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达特性，并检测肝、肾功能指标，观察不同剂量aFGF对肠缺血-再灌注损伤的影响。结果血浆D-乳酸变化及病理组织学观察显示，再灌注后12h肠屏障功能及肝、肾组织损伤最严重，而改构型aFGF 4μg治疗组在伤后24h损伤较生理盐水对照组和野生型aFGF治疗组有所减轻。PCNA的表达趋势与D-乳酸类似。结论改构型aFGF对肠缺血-再灌注损伤具有一定保护与促修复作用，其抗损伤修复作用呈剂量依赖性。     

碱性成纤维细胞生长因子对乙醇中毒大鼠ATP酶及抗氧化作用的影响

背景:碱性成纤维细胞生长因子具有多种生物活性,对组织创伤具有修复作用,但其对乙醇中毒的保护作用至今未见报道。目的:观察碱性成纤维细胞生长因子对乙醇中毒大鼠脑和肝组织中ATP酶、超氧化物歧化酶活力和丙二醛水平的影响。方法:选择成年Wistar雄性大鼠,采用白酒灌胃建立乙醇中毒模型,30只造模成功的大鼠分为3组,生理盐水组和碱性成纤维细胞生长因子治疗组分别于造模60d后肌肉注射生理盐水和碱性成纤维细胞生长因子;中毒模型组不作任何干预;另取10只不灌白酒作为正常对照组。结果与结论:与正常对照组相比,乙醇中毒后大鼠肝及脑组织ATP酶活力和超氧化物歧化酶活力显著降低,丙二醛水平明显升高(P<0.05);用碱性成纤维细胞生长因子治疗后ATP酶活力和超氧化物歧化酶活力均显著升高,丙二醛水平显著降低(P<0.05~0.01)。提示碱性成纤维细胞生长因子能提高ATP酶活力且有抗氧化作用,对乙醇中毒所致的脑和肝损伤具有保护作用。     

改构型酸性成纤维细胞生长因子抑制新生大鼠心肌缺氧/复氧模型细胞的凋亡

背景:酸性成纤维细胞生长因子对缺血及再灌注心肌具有较好的保护作用,删去N端第21～27位的氨基酸序列后的改构型酸性成纤维细胞生长因子诱导的细胞增殖能力明显降低。目的:观察改构型酸性成纤维细胞生长因子对心肌缺氧/复氧后细胞凋亡的影响。方法:利用原代培养的SD新生大鼠心肌细胞建立体外心肌缺氧/复氧模型,分别用酸性成纤维细胞生长因子和改构型酸性成纤维细胞生长因子对此细胞模型进行干预。锥虫蓝拒染法检测心肌细胞存活率,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率。结果与结论:改构型酸性成纤维细胞生长因子及酸性成纤维细胞生长因子均能显著降低缺氧/复氧后心肌细胞存活率及凋亡率(P<0.01)。证实,改构型酸性成纤维细胞生长因子能有效抑制缺氧/复氧后心肌细胞凋亡。     

改构型酸性成纤维细胞生长因子对肠缺血-再灌注的保护作用

目的 观察改构型酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对大鼠肠缺血-再灌注所致肠道损伤的 保护作用。方法 用夹闭肠系膜上动脉(SMA)造成肠缺血45 min、松夹形成缺血-再灌注的方法制备肠缺 血-再灌注损伤模型。生理盐水对照组和rhaFGF治疗组于再灌注即刻分别经静脉注射生理盐水0.1 ml和 rhaFGF 4 μg。缺血一再灌注后2、6、12和24 h取血及小肠组织,分别测定D一乳酸含量,观察小肠组织学改变; 用末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术(TUNEL)检测肠道细胞凋亡率,并与假手 术组比较。结果 缺血-再灌注6 h生理盐水对照组D-乳酸含量较假手术组明显升高,达到(0.34± 0.09)mg／L.rhaFGF治疗组为(0.23±0.07)mg／L(P均<0.05)。组织学检查显示,缺血-再灌注2~24 h生 理盐水对照组肠道损伤严重,rhaFGF治疗组肠道损伤有所减轻。细胞凋亡检测显示,假手术组肠道细胞凋亡 率很低;随着缺血-再灌注损伤时间的延长,生理盐水对照组和rhaFGF治疗组细胞凋亡率均明显升高,于缺 血-再灌注12 h达峰值[生理盐水对照组细胞凋亡率高达(62.8±1.7)％,而rhaFGF治疗组为(42.5± 2.6)％]后均呈下降趋势,两者各时间点均有统计学差异(P均<0.05)。结论rhaFGF能降低大鼠肠缺血-再 灌注所致的血浆D-乳酸含量和肠道细胞凋亡率,提     

体外培养不同代次人成纤维细胞的衰老程度

目的：探讨体外培养不同代次人成纤维细胞的衰老程度，为组织工程化皮肤提供合适的种子细胞。方法：实验于2000-09／2002—06在潍坊医学院整形外科研究所完成。取6—8岁正常男性儿童20例包皮环切术切除的健康包皮组织，将包皮二倍体成纤维细胞进行传代培养，以不同代次（P0，R5，P10，…，P65）的细胞为实验对象，通过倒置相差显微镜、透射电镜、衰老相关β-半乳糖苷酶染色一系列检测方法，对不同代次成纤维细胞的衰老程度进行观察。结果：①成纤维细胞的形态学：P45以内成纤维细胞生长迅速，两三天即呈汇合状态，细胞排列紧密，多呈放射状、编织状或漩涡状走行，有的交叉重叠生长。P46以后细胞排列不规则，体积较大，形状扁平，胞浆区域增大，胞质突起多而大，胞内出现颗粒和空泡，边界不清，形态不规则；成批的细胞出现固缩、脱落，有离壁漂起的现象。②透射电镜结果：P0-P40：成纤维细胞胞质内有丰富的粗面内质网；细胞核大，核仁明显；细胞表面有许多短小突起，可见微绒毛和胞浆皱褶。P41～P65：细胞核／浆比例减小，细胞表面突起和微绒毛减少；核膜内折，有凋亡现象。③细胞生物学行为的改变：P60增殖速度较P10明显减慢。P10最大增殖数为47．3&;#215;10^5，对数生长期在3～6d，细胞倍增时间为2．18d；P60最大增殖数为8．5&;#215;10^4，对数生长期在4．0—7．5d，群体倍增时间为3．86d。④衰老相关β-半乳糖苷酶染色结果：与P10相比，P60中阳性细胞率大为增强（阳性细胞率为4％和60％）；直线相关分析结果显示，β-半乳糖苷酶染色的阳性率和细胞代龄之间呈显著正相关（r=-0．92，P〈0．01）。结论：各代成纤维细胞老化程度不同，46代后的细胞老化明显，不适合作为组织工程化皮肤的种子细胞。     

酸性成纤维细胞生长因子非促分裂活性的研究进展

成纤维细胞生长因子( fibroblastgrowth factor,FGF)又称肝素结合因子,是一个多基因家族,至今已发现30个成员,分别命名为FGF1～30。FGF各成员之间具有一定的序列同源性和结构相似性。FGF1又称酸性成纤维细胞生长因子( acidic FGF,a FGF) ,是FGF家族中最早的成员之一,属于多肽类细胞因子,目前,国内利用基因工程技术已经能够大量生产,并作为一种外用药投入了临床应用。a FGF对来源于中胚层和神经外胚层的细胞具有广泛的生物学效应,主要包括在促血管生成和创伤修复中发挥重要作用的促分裂效应以及非促分裂效应,后者同样参与了体内一…     

外源性酸性成纤维细胞生长因子干预肠缺血-再灌注损伤中p38MAPK和成纤维细胞生长因子受体2的表达

背景:酸性成纤维细胞生长因子可以促进多种创面愈合,在内脏损伤修复中起重要促进作用。目的:观察外源性酸性成纤维细胞生长因子干预肠缺血-再灌注损伤大鼠后p38MAPK和成纤维细胞生长因子受体2的表达。方法:以大鼠肠系膜上动脉夹闭45min造成肠缺血-再灌注损伤模型,于再灌注即刻应用改构体酸性成纤维细胞生长因子进行干预。分别于再灌注2,6,12,24h取大鼠小肠组织标本,用于实验。结果与结论:在正常大鼠,成纤维细胞生长因子受体2主要分布在小肠绒毛上皮细胞的肠腔侧、侧壁和小肠隐窝朝向隐窝腔的一侧细胞膜上。缺血-再灌注初期,p38MAPK蛋白及成纤维细胞生长因子受体2蛋白和mRNA的表达未发生明显变化,随着再灌注时间的延长其逐渐增强,并于再灌注后6~12h达高峰。经酸性成纤维细胞生长因子治疗后,大鼠小肠组织p38MAPK蛋白及成纤维细胞生长因子受体2蛋白和mRNA的表达进一步增强,小肠黏膜损伤程度减轻。说明酸性成纤维细胞生长因子可通过上调成纤维细胞生长因子受体2和p38MAPK的表达促进肠缺血-再灌注损伤的修复。     

Protective effects of modified recombinant human acidic fibroblast growth factor on small intestine after ischemia/reperfusion injury in rats.]

OBJECTIVE: To explore the protective effect of modified recombinant human acidic fibroblast growth factor (rhaFGF) on small intestinal after ischemia/reperfusion (I/R) injury in rats. METHODS: The clamp on the superior mesenteric artery (SMA) was removed after clamping it for 45 minutes to replicate I/R injury of the intestine in the rat. Rats were then divided randomly into sham operation group, normal saline treatment group and rhaFGF treatment group, in which the rats of the normal saline treatment group were injected 0.1 ml of normal saline and that of the rhaFGF group were given 4 microg of rhaFGF immediately after reperfusion. The content of D-lactate in the plasma was determined and the changes in intestinal pathology were observed. At the same time, the rates of apoptosis of intestinal epithelial cells were assessed 2, 6, 12 and 24 hours after I/R, and compared to the sham operation group. RESULTS: The plasma content of D-lactate in the saline treatment group at 6 hours after I/R reached (0.34+/-0.09) mg/L and was significantly higher than that in the rhaFGF treatment group((0.23+/-0.07)mg/L, P<0.05). It was shown histologically that the intestinal structures were damaged more seriously in saline treatment group than in rhaFGF group. The apoptosis rates in the saline treatment group and rhaFGF group were elevated significantly, peaking at 12 hours after I/R injury((62.8+/-1.7)% in saline group and (42.5+/-2.6)% in rhaFGF treatment group), then the rate began to fall. There was statistically significant differone between the two groups at 12 hours after I/R injury. CONCLUSION: rhaFGF can reduce content of D-lactate in the plasma and rate of apoptosis of epithelial cells in the intestine after I/R injury, thus it seems to afford a protective effect on the small intestine after I/R injury in rats.