乌司他丁对肝缺血-再灌注损伤保护作用的研究进展

肝缺血-再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)是指肝脏组织在缺血一段时间后血流重新恢复,体内代谢急剧变化,从而使肝脏代谢功能及结构进一步遭到破坏,常见于肝移植、肝脏严重创伤性手术以及肝脏部分切除等情况[1].肝IRI不仅是肝移植术后移植肝功能不全或无功能和肝切除术后肝衰竭的主要原因,也是导致肝移植后发生急性和慢性排斥反应的重要因素之一.     

乌司他丁对大鼠全肝缺血-再灌注肺损伤的保护作用

目的 观察乌司他丁对大鼠全肝缺血-再灌注(I-R)肺损伤的保护作用.方法 24只SD大鼠随机分为全肝缺血-再灌注组(I-R组)、乌司他丁组(U组)及假手术对照组(C组),每组8只.检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白含量、肺组织干/湿质量比(D/W)、肺组织髓过氧化物酶(MPO)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,并以逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测三组大鼠肺组织基质金属蛋白酶(MMP)14 mRNA的相对表达量.结果 与U组和C组比较,I-R组大鼠肺组织BALF总蛋白和MPO含量明显增高,肺组织D/W和SOD显著降低.MMP14 mRNA相对表达量显著增高(P<0.05).结论 乌司他丁可减轻全肝I-R肺损伤;抑制肺组织MMP14 mRNA的表达可能是其机制之一.     

乌司他丁对肾缺血再灌注大鼠肾组织超微结构的影响

目的　探讨乌司他丁在大鼠肾缺血再灌注损伤时肾功能和肾组织超微结构改变中的作用。方法　 30只雄性SD大鼠随机分为 3组 :假手术对照组 (双肾未缺血 ,静脉注射生理盐水 )、肾缺血再灌注组 (双肾缺血 ,静脉注射生理盐水 )、乌司他丁组 (双肾缺血 ,静脉注射乌司他丁 1 2 5万U/只 ) ,每组 10只。大鼠急性缺血性肾损伤模型为双肾缺血 4 5min、再灌注 2 4h ,观察缺血后肾功能和肾组织超微结构改变。结果　肾缺血再灌注组血肌酐 ( 16 7± 39) μmol/L、血尿素氮 ( 2 1± 7)mmol/L ,乌司他丁组血肌酐 ( 116± 13) μmol/L、血尿素氮 ( 14 1± 2 6 )mmol/L ,2组比较差异有显著性意义 (P<0 0 5 ) ;乌司他丁减轻肾组织超微结构损害。结论　乌司他丁对大鼠肾缺血再灌注损伤时肾功能和肾组织超微结构有明显保护作用     

乌司他丁对失血性休克大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的：探讨乌司他丁对失血性休克大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法：24只雄性Wista大鼠随机分为假手术组、生理盐水治疗组、乌司他丁治疗组,每组8只。建立大鼠失血性休克模型。乌司他丁治疗组,予以乌司他丁25000U·kg-1加入2mL生理盐水静脉推注,并完成液体复苏;生理盐水治疗组予以2mL生理盐水静脉推注,并完成复苏;假手术组,除不放血和输液外,其他处理与模型相同。观察3h后处死大鼠,取血液离心分离血浆检测肝功能指标、血清肿瘤坏死因子（TNF-α）;取肝右叶2块肝组织,1块用于肝组织病理改变和肝细胞凋亡观察;1块用于肝组织匀浆,离心取上清液进行肝组织MDA、SOD、髓过氧化物酶（MPO）检测。结果：失血性休克大鼠肝脏再灌注3h后,生理盐水治疗组肝组织发生了严重缺血再灌注损伤,肝细胞水样变,肝窦淤血变窄,间质大量炎性细胞浸润,而乌司他丁治疗组仅有轻度再灌注损伤。乌司他丁治疗组肝细胞凋亡、肝功能指标ALT、AST、血清TNF-α水平、肝组织MDA含量、MPO活性较生理盐水治疗组均有不同程度的减少（P〈0.05）,SOD活性较生理盐水治疗组升高（P〈0.05）。结论：乌司他丁对大鼠失血性休克再灌注后肝脏损伤具有保护作用,其机制可能与抑制中性粒细胞浸润、抑制氧自由基的形成、抗肝细胞凋亡相关。     

川芎嗪联合乌司他丁对断肢再植缺血再灌注损伤的保护作用

目的：评价川芎嗪和乌司他丁对断肢再植缺血再灌注损伤的保护作用。方法：40例上肢离断再植病人,随机分为4组,A组为对照组,围手术期不接受川芎嗪和乌司他丁。B组为乌司他丁组,于再植后动脉开放前给予乌司他丁0.5万U/kg。C组为川芎嗪组,于再植后动脉开放前给予川芎嗪2.5 mg/kg。D组为联合组,于再植后动脉开放前分别给予乌司他丁0.5万U/kg、川芎嗪2.5 mg/kg。分别于术前（T1）、术中再灌注后30 min（T2）,术后3 h（T3）、24 h（T4）、72 h（T5）共5个时点采集中心静脉血,测定患者血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）和超氧化歧化酶（SOD）的含量在该过程中的变化。结果：血清AST、CK、MDA的含量在A组、B组、C组有升高趋势,与A组比较,B、C组的AST、CK在不同时点上升幅度较小,有显著性差异（P〈0.05）。D组无明显上升,有非常显著性差异（P〈0.01）。血清LDH的含量在A组有上升趋势,B、C、D组无明显上升,与A组比较在T2时点有显著性差异（P〈0.05）。血清SOD的含量在A、B、C组有降低趋势,B、C组下降幅度较小,与A组比较有显著性差异（P〈0.05）。D组无明显下降,与A组比较有非常显著性差异（P〈0.01）。结论：川芎嗪和乌司他丁对断肢再植缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,联合使用效果更佳。     

乌司他丁对大鼠肾缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁对大鼠肾缺血/再灌注(I/R)损伤的作用及其机制.方法雄性SD大鼠75只,随机分为三组假手术对照组(C组)、肾I/R组(I组)、乌司他丁组(U组),每组25只.I组和U组大鼠夹闭双侧肾蒂45min后重新开放肾脏血供,制作肾脏I/R模型,C组不夹闭双侧肾蒂.U组缺血前30min及再灌注开始时静脉注射乌司他丁1.25万单位,I组分别静脉注射生理盐水1ml.各组在再灌注后0、2、6、12、24h时取标本,测定血尿素氮(BUN)和血肌酐(Cr)浓度,并制备肾脏病理切片,采用免疫组化方法测定热休克蛋白70(HSP70)和bcl-2蛋白的表达.结果与I组比较,C组在再灌注后各时点血清BUN和Cr浓度均降低(P＜0.05),U组在再灌注后12、24h时血清BUN和Cr浓度也降低(P＜0.05).C组肾脏未发现明显的形态学改变;I组近曲小管上皮细胞空泡变性和坏死,肾小管腔扩张,内可见管型和坏死脱落细胞,可见管周血管明显扩张淤血;U组近曲小管上皮细胞肿胀、颗粒变性,罕见管型,管周稍有淤血.与I组比较,C组在再灌注后0、6、12、24h时Paller评分降低(P＜0.05),U组在再灌注后0、6、24h时Paller评分也降低(P＜0.05),C组再灌注后12、24h时HSP70表达降低(P＜0.05),U组在再灌注后6、24h时bcl-2蛋白表达增强(P＜0.05).结论乌司他丁对肾脏I/R损伤有保护作用,其机理可能与上调肾脏bcl-2蛋白表达有关.     

乌司他丁对兔在体肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的　探讨乌司他丁对活体肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法　将 2 0只新西兰大白兔随机分成缺血再灌注损伤组 (A组 )和乌司他丁组 (B组 ) ,B组阻断前给乌司他丁 (1 0 0 0 0U/kg体重 )。两组阻断 2h和再灌注 1h后采血检测血气、白细胞介素 6(IL 6)和肿瘤坏死因子 α(TNF α)。摘取左肺测定湿干重比 (W/B)和病理学检查。结果　阻断 2h后 ,两组血氧分压 (PO2 )接近 ;恢复灌注 1h后 ,B组PO2 高于A组 (77.61± 5 .0 4 )mmHg(1mmHg =0 .1 33kPa)和 (1 0 0 .85± 6 .73)mmHg ;TNF α值 (A值 ) ,A组各时段均显著高于B组 (2 54 .0 2± 1 4 .31和 50 4 .0 2± 33 .52比 1 4 8.63± 2 1 .0 6)和 1 60 .54± 1 6 .93) ;A组肺湿干重比高于B组 ;肺外观苍白肿胀 ,病理检查见组织结构损伤。结论　乌司他丁能保护在体肺缺血再灌注中肺组织结构的损伤     

乌司他丁对幼猪胰肾联合移植胰腺再灌注损伤的保护作用

目的 探讨乌司他丁对幼猪胰肾联合移植术胰腺再灌注损伤的保护机制.方法 复制胰肾联合移植模型,随机将配成12对的幼猪分为两组:乌司他丁组(U组),乌司他丁15 000IU.kg-1·h-1持续静脉泵注,直至手术结束;对照组(C组),持续泵注等量生理盐水.分别于术前(T0)、受体动-静脉吻合完毕开放时(T1)、开放后1 h(T2.)、2 h(T3)、术毕(T4)采集外周动脉血3 ml测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)的浓度;术后取胰腺组织检测移植胰组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性及观察其组织病理学改变.结果 与T0时比较,C组T2～L4时血浆TNF-α水平升高(P<0.05).与C组相比,U组T1、T2及T4时血浆IL-8浓度降低(P<0.05),胰腺组织中MPO活性降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.01),MDA含量降低(P<0.05).且胰腺组织损害较轻.结论 乌司他丁可能减轻嗜中性粒细胞(PMNs)黏附与聚集功能,减少氧自由基,下调TNF-α和IL-8,从而减轻移植胰腺组织再灌注的损伤.     

缺血预处理对大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的研究

目的：探讨缺血预处理对大鼠移植胰腺冷缺血再灌注损伤和细胞凋亡的保护作用及其机制。方法：24只糖尿病SD大鼠随机分为缺血再灌注组（I/R组,n=6）和缺血预处理组（IPO组,n=18）,IPO组又根据不同方法分为3个亚组：IPO1组（再灌注30s,缺血30s1次,n=6）、IPO2组（再灌注30s,缺血30s3次,n=6）和IPO3组（再灌注30s,缺血30s6次,n=6）。24只SD大鼠为供体,I/R组和IPO组均行同种胰腺移植。另取6只SD大鼠为对照组。检测各组再灌注前、后血糖及再灌注后2h移植胰腺组织中SOD和MDA含量;TUNEL法观察移植胰腺组织细胞凋亡情况,WesternBlot检测移植胰腺组织Bax和Bcl-2蛋白表达情况。结果：1）再灌注后IPO各组相对于I/R组血糖低（P〈0.05,P〈0.01,P〈0.05）;IPO2组较IPO1组和IPO3组血糖低（P均〈0.05）;2）再灌注后IPO组较I/R组移植胰腺组织中SOD含量高（P均〈0.01）,MDA含量低（P均〈0.01）,IPO2组相对于IPO1组和IPO3组SOD含量高（P均〈0.05）、MDA含量低（P均〈0.05）。3）再灌注后IPO组较I/R组移植胰组织中AI值低（P均〈0.01）,IPO2组相对于IPO1组和IPO3组AI值低（P均〈0.05）;4）I/R组胰组织Bax蛋白高表达,Bcl-2蛋白低表达,IPO各组再灌注后移植胰组织Bax蛋白低表达,Bcl-2蛋白高表达,而IPO2组Bcl-2蛋白表达最高,Bax蛋白表达最低。结论：缺血预处理对大鼠移植胰腺的缺血再灌注损伤具有保护作用,并可以减少移植胰腺缺血再灌注后的细胞凋亡,机制与减少氧自由基、上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白有关。再灌注30s缺血30s重复3次是最佳的大鼠移植胰缺血预处理诱导办法。     

干细胞来源外泌体对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

[摘 要] 目的 研究大鼠脂肪间充质干细胞来源的外泌体（exosomes,Exo）对肝脏缺血再灌注损伤（hepatic ischemia-reperfusion injury,HIRI）的保护作用。方法 胶原酶法提取SD大鼠原代脂肪间充质干细胞,超速离心法提取干细胞来源的外泌体。SD大鼠随机分为假手术组（Sham）、缺血再灌注损伤组（IR）、缺血再灌注损伤外泌体治疗组（IR+Exo）。Sham组腹部正中切口,离断肝脏周围韧带,不做其他处理;IR组用动脉夹阻断70%肝脏血流60 min;IR+Exo组70%肝脏血流阻断60 min后,尾静脉注射外泌体观察其对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。检测血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）含量。检测肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）与丙二醛（MDA）含量。Western blotting法检测氧化应激指标醌氧化还原酶（NQO-1）、血红素氧合酶1（HO-1）,凋亡相关指标Bcl-2、Bax,HE染色观察肝组织病理变化。结果 相比IR组,IR+Exo组血清中ALT、AST、TNF-α、IL-1β水平显著下降（P<0.05）,SOD活性显著升高（P<0.05）,MDA含量明显下降（P<0.05）。 NQO1、HO-1、Bcl-2表达量显著升高,Bax显著下降（P<0.05）,肝组织病理损伤明显改善。结论 外泌体能够减轻肝脏缺血再灌注损伤,其可能通过缓解氧化应激、抑制炎症反应、抗凋亡而发挥作用。     

乌司他丁联合异甘草酸镁对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁联合异甘草酸镁对人肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法选取60例需行肝叶切除手术的患者,随机分为对照组(单用乌司他丁)28例和试验组(乌司他丁联用异甘草酸镁)32例。观察术前及术后1 d、3 d、7 d两组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血浆丙二醛(MDA)和超氧化物岐化酶(SOD)水平。结果术后l d、3 d、7 d,联用组与对照组在ALT、AST、MDA、SOD水平上差异均具有统计学差异(P0.05)。结论乌司他丁联合异甘草酸镁对人肝脏缺血再灌注损伤具有明显的协同保护作用。     

Protective effect of estrogen on intestinal ischemia-reperfusion injury in pubertal rats

Purpose

This study investigated the role of 17β-estradiol (E₂) in intestinal ischemia-reperfusion (I/R) injury and its possible mechanism.

Methods

Rats of pubertal age were ovariectomized and injected subcutaneously with vehicle (vehicle group) or E₂ (100 or 500 μg/kg/every other day, E₂ or 5E₂ group) for 4 weeks. Other rats of the same age underwent sham ovariectomy as a control group. The rats in each group (n = 15) were subjected to superior mesenteric artery occlusion followed by 1 hour (n = 5), 6 hours (n = 5), or 24 hours (n = 5) reperfusion. Intestine specimens then were obtained for the determination of histopathologic score, inducible nitric oxide synthase (iNOS) mRNA expression, and iNOS activity.

Results

In vehicle, control, E₂, and 5E₂ groups, the histopathologic scores were 3.31 ± 0.12, 3.00 ± 0.09, 2.57 ± 0.12, and 2.98 ± 0.08, respectively. The expression levels of iNOS mRNA were 3.85 ± 0.42, 4.86 ± 0.76, 5.17 ± 0.34, and 4.25 ± 0.41 log copies, respectively. Lower histopathologic score but higher iNOS mRNA expression were found in E₂ group than in the other groups (P < .01). The level of iNOS activity paralleled the expression of iNOS mRNA.

Conclusions

Estrogen may exert a protective effect on intestinal I/R injury in pubertal rats, probably by enhancing iNOS expression.     

大鼠移植胰腺冷缺血再灌注后细胞凋亡的变化

目的　探讨移植胰腺冷缺血再灌注后胰腺细胞凋亡的变化过程。方法　 6 5只SD大鼠随机分成 7组 :假手术组 ,冷缺血 2h组 ,冷缺血 2h再灌注 1、3、6、9、12h组。通过HE染色后光镜及电镜观察各组的胰腺组织的病理变化 ;采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞的分布及计数。结果　胰腺移植后早期即可观察到细胞凋亡的典型改变 ,胰腺冷缺血再灌注后发生凋亡的高峰期为再灌注后 3h[AI为 (9.4 6± 2 .91) % ,P <0 .0 1) ,再灌注 6h较 3小时细胞凋亡有所减少 [AI为 (5 .74± 1.6 6 ) % ,P <0 .0 1],再灌注 9h及 12h细胞凋亡进一步减少 [AI分别为 (3.6 0± 1.6 4 ) %及 (3.2 6± 1.35 ) % ,P <0 .0 5 ]。结论　细胞凋亡是胰腺移植后的早期事件 ,移植胰腺冷缺血再灌注后早期主要的死亡方式是凋亡 ;移植胰腺冷缺血再灌注后的凋亡高峰发生在再灌注后 3h。     

葛根素对肝缺血再灌注损伤所致心功能障碍的保护作用及机制

目的：观察葛根素预处理在肝缺血再灌注损伤中对心功能的保护作用及机制。方法：建立肝缺血再灌注损伤动物模型,选健康雄性SD大鼠32只,随机分为对照组、缺血再灌注组（I/R组）、葛根素预处理组（PUE组）和生理盐水预处理组（N组）,每组8只。测定心功能指标（HR、LVSP、LVEDP、＋dp/dtmax、-dp/dtmax、血清内毒素、MPO）、血清内毒素含量及心肌MPO活力。结果：HR在I/R组与对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）,PUE组和N组HR较I/R组有所增加,但其差异无统计学意义（P〉0.05）,N组和PUE组相比差异亦无统计学意义（P〉0.05）。I/R组LVSP、＋dp/dtmax较对照组明显下降（P〈0.05）,PUE组较对照组和I/R组明显升高（P〈0.01）。LVEDP、-dp/dtmax在PUE组明显低于对照组和I/R组（P〈0.01）。血清内毒素的含量及心肌MPO活力I/R组与对照组比较明显增加,差异有统计学意义（P〈0.01）,PUE组与对照组、I/R组比较明显降低,差异有统计学意义（P〈0.01）,N组与PUE组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：肝缺血再灌注损伤可引起心功能障碍,葛根素通过降低血清内毒素含量及心肌MPO活力可改善心功能指标。     

帕立骨化醇预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的作用

目的探讨帕立骨化醇预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用及合理剂量。方法 300只健康雄性SD大鼠随机分为:假手术组、模型组、实验1组、实验2组、实验3组,每组60只,各实验组分别于肝缺血再灌注手术前24 h腹腔注射0.15、0.30、0.60μg/kg帕立骨化醇。每组取20只大鼠于术后3、6、12和24 h取尾静脉血,并观察各组此20只大鼠术后24、48、72 h的生存率。各组另40只大鼠分别于术后3、6、12、24 h每个时间点处死10只大鼠,取肝组织。比较各组大鼠存活率和术后谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及肝脏组织丙二醛(MDA)含量。结果模型组大鼠存活率低于假手术组(P0.05),实验各组大鼠存活率高于模型组;除实验1组与模型组相比无统计学意义外,其余各实验组在术后3、6、12、24 h与模型组相比ALT均有下降(P0.05);而术后3 h起实验1、2、3组AST水平均低于模型组(P0.05)。术后3、6、12、24 h,各实验组肝组织MDA均低于模型组,实验2组和3组与实验1组差异具有统计学意义(P0.05),实验2组与实验3组间差异无统计学意义(P0.05)。结论帕立骨化醇预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤具有保护作用,0.15μg/kg即可以明显改善模型肝功和肝脏MDA水平,但0.30μg/kg以上水平效果更佳。