外周血T细胞亚群及细胞因子对外源性哮喘IgE生成的作用

对３０例哮喘患者及３０例健康成年人的外周血，采用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）间接免疫荧光法测定Ｔ细胞亚群；ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法测定ＩｇＥ、ＩＬ－４；ＦＩ２细胞株，生物学方法测定ＩＬ－２；ＩＬ－６依赖细胞株７ＴＤ１，掺入法测定ＩＬ－６；用抗人ＣＤ２３的ＭｃＡｂ测定ＣＤ２３。为研究Ｔ细胞、细胞因子对哮喘ＩｇＥ生成调节机理及细胞因子在哮喘发病过程中的作用。结果显示：发作期ＩｇＥ、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＣＤ２３、ＣＤ８~＋、ＣＤ４／ＣＤ８~＋比值较对照组及缓解期有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。缓解期ＩｇＥ与对照组之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；ＣＤ８＋、ＣＤ４／ＣＤ８比值，ＣＤ２３与对照组之间有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。ＣＤ２３、ＣＤ４、ＩＬ－６三组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结果表明，ＩｇＥ合成增加是哮喘发作的关键，Ｔ细胞对日细胞合成ＩｇＥ的调节是通过细胞因子实现的，细胞因子又参与气道炎症过程。     

分泌抗rHuIL—6McAb杂交瘤细胞系的建立及其应用研究

应用常规方法建立了４株稳定分泌抗重组人ＩＬ－６（ｒＨｕＩＬ－６）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）小鼠杂交瘤细胞系１Ｈ３、２Ａ１０、３Ａ３和４Ｂ１。其中，１Ｈ３为ＩｇＧ２ｂ（Ｋ），２Ａ１０为ＩｇＧ１（Ｋ），３Ａ３和４Ｂ１为ＩｇＧ２ａ（Ｋ）。４株ＭｃＡｂ特异性强，与细胞因子ＩＬ－１β、ＩＬ－３、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＧＭ－ＳＣＦ、ＩＣＡＭ－１，以及受体菌菌体蛋白成分均无交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水ＭｃＡ     

分泌抗rHuIL－6McAb杂交瘤细胞系的建立及其应用研究

应用常规方法建立了４株稳定分泌抗重组人ＩＬ－６（ｒＨｕＩＬ－６）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系１Ｈ３、２Ａ１０、３Ａ３和４Ｂ１。其中，１Ｈ３为ＩｇＧ２ｂ（ｋ），２Ａ１０为ＩｇＧ１（ｋ），３Ａ３和４Ｂ１为ＩｇＧ２ａ（ｋ）。４株ＭｃＡｂ特异性强，与细胞因子ＩＬ－１β、ＩＬ－３、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＧＭ－ＳＣＦ、ＩＣＡＭ－１，以及受体菌菌体蛋白成分均无交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水ＭｃＡｂ效价为１０（－６）～１０（－８）。应用识别不同表位的ＭｃＡｂ建立了双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＩＬ－６，敏感性为１００ｐｇ／ｍｌ。初步应用表明可用于临床标本的检测。     

重组人红细胞生成素单克隆抗体的制备

本文应用常规淋巴细胞杂交瘤技术制备了４株能稳定分泌抗人重组红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系ＢⅡ１Ｂ５、ＤⅡ６Ｂ９、ＭⅡ１Ｈ４和ＧＩ３Ｅ７。用鼠单克隆抗体分型试剂盒鉴定，其分泌的ＭｃＡｂ的类分别是ＩｇＭ、ＩｇＭ、ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ。间接ＥＬＩＳＡ法测定细胞上清的效价为１×１０－２～１．２５×１０－４，腹水效价为１×１０－２～１×１０－８。培养上清经ＥＬＩＳＡ鉴定，与ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－α等细胞因子均无交叉反应，只与ｒＨｕＥＰＯ特异性结合。     

体外培养的人胸腺上皮细胞与胸腺细胞的相互作用

人胸腺上皮细胞（ＴＥｃ）的体外培养和传代，使研究人ＴＥｃ的特性和功能成为可能。人ＴＥｃ体外培养成功的关键是抑制成纤维细胞的生长。体外培养的人ＴＥｃ除表达角蛋白外，还表达ＨＬＡ－Ｉ类抗原、ＬＦＡ－３，ＩＣＡＭ－１和ＣＤ４０等表面抗原；可分泌ＩＬ－１，ＩＬ－６，ＩＬ－８，ＧＭ－ＣＳＦ，Ｇ－ＣＳＦ和Ｍ－ＣＳＦ等多种细胞因子和胸腺素；静息的胸腺细胞与ＴＥＳ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３介导，激活的胸腺细胞与ＴＥＣ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３和ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１共同介导；ＴＥＣ对成熟的胸腺细胞有辅助增殖的作用，对不成熟的胸腺细胞有直接激活作用：胸腺细胞可通过直接作用和分泌细胞因子的间接作用来调节ＴＥＣ的细胞因子分泌和表面抗原表达。     

鼻咽癌患者外周血Th1细胞的变化及其与病程的关系

利用细胞因子诱生及ＥＬＩＳＡ等技术，研究了３８例不同分期的鼻咽癌（ＮＰＣ）患者、２３例正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）分泌的细胞因子模式，较系统地研究了ＣＤ４＾＋Ｔ淋巴细胞亚群Ｔｈ１和Ｔｈ２所分泌的代表性的细胞因子类型ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ，ＩＬ－４，ＩＬ－６，ＩＬ－１０等的变化，同时检测了ＮＰＣ患者血清中ＩＬ－２和ＩＬ－４水平。发现ＮＰＣ患者ＰＢＭＣ体外分泌ＩＬ－２的水平下降，ＩＬ－４的水平增高     

肿瘤碱性蛋白单克隆抗体免疫学特性的研究及其应用

应用淋巴细胞杂交瘤技术，建立了４株抗人血清肿瘤碱性蛋白（Ｔｕｍｏｕｒｂａｓｉｃｐｒｏ－ｔｅｉｎ，ＴＢＰ）杂交瘤细胞株（１Ｃ３、４Ｆ４、５Ｆ４、３Ｇ９），并以制备的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）对其抗原决定簇及免疫学特性进行了分析。Ｉｇ亚类测定：均为ＩｇＧ２ａ，腹水效价为１×１０－６～１×１０－８。特异性测定：ＴＢＰＭｃＡｂ与ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ和Ａｌｂ无交叉反应。单抗相加试验证实：５Ｆ４、４Ｆ４和１Ｃ３为识别ＴＢＰ上同一抗原决定簇，３Ｇ９则为识别ＴＢＰ上另一抗原决定簇。分别利用单株和混合株ＭｃＡｂ标酶建立了可应用于人血清ＴＢＰ含量测定的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法，并用于人血清ＴＢＰ含量测定。     

抗细菌核心糖脂域McAb对LPS体外诱导细胞释放TNF－α和IL－6及其mRNA表达的影响

用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞（ｈＰＢＭＣ）释放ＴＮＦ－α和ＩＬ－６及其ｍＲＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＴＮＦ－α和ＩＬ－６的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能分别降低细胞ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ可能通过与ＬＰＳ的结合而中和ＬＰＳ，从而降低或阻碍了效应细胞炎性细胞因子ｍＲＮＡ的表达，达到降低相应细胞因子的作用。     

FcεRⅡ／CD23在支气管哮喘发病中作用的研究

本文以急性发作期病人和缓解期病人及正常人各２０例为研究对象，探讨ＩＬ－４－ＦｃεＲⅡ／ＣＤ２３－ＩｇＥ在支气管哮喘中的调节作用。结果表明，急性发作期病人的ＩＬ－４分泌细胞、ＦｃεＲⅡ／ＣＤ２３阳性淋巴细胞和血清总ＩｇＥ水平均明显高于缓解期病人和正常对照组。在急性发作时，ＩＬ－４和ＣＤ２３之间存在着正相关。进一步表明病人体内ＩＬ－４水平升高可以诱导淋巴细胞表面ＦｃεＲⅡ／ＣＤ２３分子表达的增强，并在ＩｇＥ抗体形成中起着重要作用。     

儿童T细胞活化时细胞内钙离子的变化

本文用钙指示剂Ｆｌｕｏ－３标记正常儿童外周血单个核细胞，经流式细胞仪分析了几种激活剂对Ｔ细胞内钙离子浓度的影响。结果表明：（１）静止期Ｔ细胞内钙离子浓度为１６２±８７ｎＭ，抗ＣＤ３单克隆抗体交联ＧＡＭＩｇ刺激后，Ｔ细胞内钙离子浓度上升；（２）用抗ＣＤ３单克隆抗体和ＩＬ－２或ＰＭＡ和ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ作用Ｔ细胞，细胞内钙离子浓度上升，但其浓度低于用抗ＣＤ３单克隆抗体交联ＧＡＭＩｇ刺激时的浓度；（３）去除抗ＣＤ３单克隆抗体和ＩＬ－２或ＰＭＡ和ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ对Ｔ细胞的作用，培养后细胞内钙离子浓度又恢复到静止状态，再加入抗ＣＤ３单克隆抗体交联ＧＡＭＩｇ刺激发现细胞内钙离子显著地升高；（４）钙离子阻断测定提示早期钙离子升高是Ｔ细胞内钙离子池释放的，而细胞外钙离子的流入对于维持钙离子持续上升是必要的。     

经rIL-2及CD3 McAb激活的脐血单个核细胞免疫表型及细胞因子的比较研究(简报)

用间接玫瑰花结法测定脐血单个核细胞免疫表型,试验分３组,Ⅰ组为２３例未活化的脐血单个核细胞,Ⅱ组为单个核细胞中加入ｒＩＬ－２,Ⅲ组为加入ｒＩＬ－２＋ＣＤ３ＭｃＡｂ。用ＥＬＩＳＡ双抗夹心法测定肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）、白介素－６（ＩＬ－６）、白介...     

烟曲霉鼻变态反应性病人细胞因子活性水平观察

对８６例烟曲霉变态反应性鼻炎病人血清Ｔ细胞亚群、ＩＬ－２、ＩＬ－６和Ｂ细胞生长因子（ＢＣＧＦｓ）活性水平进行了检测，结果显示烟曲霉鼻变态反应病人血清ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＢＣＧＦｓ活性水平升高，与对照组比较差异显著；血清Ｔ细胞亚群ＣＤ４／ＣＤ８比值大大高于对照组，存在显著差异。提示：Ｔ细胞及其分泌的细胞因子和Ｂ细胞分化对ＩｇＥ的生成具有调节作用，它们可能参与了Ⅰ型变态反应病的发生     

163体外培养的人胸原上皮细胞与胸腺细胞的相互作用

人胸腺上皮细胞（ＴＥＣ）的体外培养和传代。使研究人ＴＥＣ的特性和功能成为可能。人ＴＥＣ体外培养成功的关键是抑制成纤维细胞的生长。体外培养的ＴＥＣ除表达角蛋外，还表达ＨＬＡ－Ｉ类抗原，ＬＦＡ－３，ＩＣＡＭ－１和ＣＤ４０等表面抗原；可分泌ＩＬ－１，ＩＬ－６，ＩＬ－８，ＧＭ＿ＣＳＦ，Ｇ＿ＣＳＦ和Ｍ＿ＣＳＦ等多种细胞因子和胸腺素；静息的胸腺细胞与ＴＥＣ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３介导，激活的胸腺细胞与ＴＥＣ     

人巨细胞病毒单克隆抗体的研制检定和应用

采用人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＡＤ１６９株作为免疫原，制备出１３株鼠－鼠杂交瘤细胞系。对其中的６株进行了检定．免疫印迹试验结果表明：单克隆抗体（ＭｃＡｂ）７Ｂ４、７Ｄ７、７Ｅ１１、８Ｅ８和８Ｄ６相对应的ＨＣＭＶ多肽分子量分别为４６、１５０、３８、５１７２和６５ｋＤ．ＨＣＭＶ感染人胚肺二倍体细胞（２ＢＳ）后不同时间制成抗原片，与ＭｃＡｂ作间接免疫荧光试验。结果表明：ＭｃＡｂ８Ｂ８相应的病毒多肽为即刻早期抗原，其它５株ＭｃＡｂ相应的病毒多肽均为晚期抗原，６株ＭｃＡｂ等量混合后，标上辣根过氧化物酶，用于ＩｇＭ抗体捕获法ＥＬＩＳＡ（ＭａｃＥＬＩＳＡ）中，并与间接ＥＬＩＳＡ（ＩＥＬＩＳＡ）同时检测ＨＣＭＶ－ＩｇＭ．在未经选择的１００份脐带血中，两法均为阳性的３份，两法均为阴性的９４份；ＭａｃＥＬＩＳＡ阳性而ＩＥＬＩＳＡ阴性的２份血清的特异性试验证明，ＨＣＭＶ－ＩｇＭ确为阳性．ＩＥＬＩＳＡ阳性而ＭａｃＥＬＩＳＡ阴性的１份血清的特异性试验证明，它是由ＲＦ引起的假阳性。     

抗凝血酶受体单克隆抗体的制备与鉴定

采用杂交瘤技术，获得了４株稳定分泌抗凝血酶受体单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株。４株ＭｃＡｂ均为ＩｇＧ１κ链。ＥＬＩＳＡ交叉试验结果表明，该ＭｃＡｂ不与人凝血酶、凝血酶原和ＨＣＶ多肽反应。４株杂交瘤细胞培养上清液效价为３．２×１０－２～１．２８×１０－３，腹水效价为１．６×１０－６～５．１２×１０－７。     

分泌抗金黄色葡萄球菌C1型肠毒素杂交瘤细胞系的建立及初步应用

应用常规方法建立了３株稳定分泌抗金黄色葡萄球菌Ｃ１型肠毒素（ＳＥＣ１）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系Ｂ３、Ｃ４和Ｇ８。其中Ｂ３和Ｃ４均为ＩｇＧ１（ｋ），Ｇ８为ＩｇＧ２ａ（ｋ）。Ｂ３和Ｇ８与ＳＥＡ，ＳＥＢ及ＳＥＤ均无交叉反应；Ｃ４虽与ＳＥＡ和ＳＥＤ无交叉反应，但与ＳＥＢ有交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水效价为１０＾－５～１０＾－８。应用识别不同表位的ＭｃＡｂ建立了双ＭｃＡｂ夹心ＥＬＩＳ     

IL—4在诱导CD4,45RA^＋和CD4,45RO^＋T细胞向IL—4产生细胞分化？…

应用ＥＬＩＳＰＯＴ（Ｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｐｏｔａｓｓａｙ）单细胞检测技术，研究了淋巴因子在诱导ＣＤ４，４５ＲＯ和ＣＤ４，４５ＲＡＴ细胞向ＩＬ－４产生细胞分化过程中的影响，在存在ＰＭＡ和ｉｏｎｍｙｃｉｎ的情况下，ＩＬ－２和ＩＬ－４均可以诱导ＣＤ４，４５ＲＯＴ细胞分化为ＩＬ－４产生细胞，但是只有ＩＬ－４可以诱导ＣＤ４，４５ＲＡＴ细胞向ＩＬ－４产生细胞分化，ＩＦＮγ既不能诱导ＣＤ４，４     

静脉注射活化B细胞诱导Mls特异性免疫耐受

在胸腺摘除的成年小鼠静脉内注射Ｍｌｓ＋的活化Ｂ细胞可诱导Ｍｌｓ特异性免疫耐受。来源于ＣＤＦ１小鼠（Ｍｌｓ－１ｂ／ａ）的脾脏Ｂ淋巴细胞用抗ＩｇＭ抗体加ＩＬ－４刺激后静脉注射给摘除胸腺的成年ＢＡＬＢ／ｃ小鼠（Ｍｌｓ－１ｂ），在注射后第７、１１、１５天淋巴结中ＣＤ４＋Ｖβ６＋Ｔ细胞显著减少，而ＣＤ８＋Ｖβ６＋Ｔ细胞数无明显改变；在注射后第３天，与对照组相比，ＣＤ４＋Ｖβ６＋Ｔ细胞增加，但这些细胞对Ｍｌｓ抗原的反应性明显低于对照组。这些结果清楚地表明，自反应Ｔ细胞不但在胸腺被排除或功能性“排除”，而且在外周通过同样的机制维持自身耐受。     

一个新的CD4单克隆抗体的研制

用基因工程重组人ＣＤ４分子免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制备了一个分泌抗ＣＤ４ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞株。该ＭｃＡｂ与ＣＤ４分子有强反应，其亲和力常数Ｋａｆｆ＝６．１２５×１０￣９Ｍ￣（－１）。竞争结合实验表明，它与ＡＴＣＣ克隆ＣＲＬ８００２（ＯＫＴ４）分泌的ＭｃＡｂ分别识别ＣＤ４分子中不同的表位，其腹水滴度较ＡＴＣＣ（ＯＫＴ４）ＭｃＡｂ腹水高约１０倍。     

CD23特异性配体对B细胞增殖及分化的影响

ＣＤ２３特异性配体（抗ＣＤ２３ＭｃＡｂ和ＩｇＥ免疫复合物）与表达ＣＤ２３分子的活化Ｂ细胞共育，然后分析其对Ｂ细胞增殖和分化的影响。结果表明，抗ＣＤ２３单抗及ＩｇＥ免疫复合物（ＩｇＥＩＣ）对Ｂ细胞增殖呈促进和抑制双向调节效应，即：在高浓度（ＣＤ２３单抗〉０．１６μｍ／ｍｌ，ＩｇＥＩＣ〉２．５μｇ／ｍｌ）时呈剂量依赖性抑制，而在某一适当浓度范围内ＣＤ２３ＭｃＡｂ在（０．００２５～０．０５μｇ／ｍｌ，Ｉ