Wnt/β-catenin信号通路相关分子在肝癌靶向治疗中的研究进展

肝癌发病率及病死率均较高Wnt/β环连蛋白(β-catenin)信号通路中多个环节发生异常改变都可能与肝癌发生、发展密切相关,着力于该信号通路的靶向治疗成为研究的热点。目前,在肝癌中开展了以Wnt/β-catenin信号通路激活起始分子Wnt蛋白、胞膜Wnt受体和辅助受体、胞膜胞内信号传递衔接子、胞内复合体、核内转录复合体及信号通路抑制子为靶点的实验研究,应用前景广阔,但真正运用于临床尚需时日。     

基于Wnt/β-catenin信号通路的中医药调控骨代谢研究进展

骨组织生命活动周期包括骨吸收和骨形成,这一过程被称为骨重塑,其中间充质干细胞(MSCs)分化为成骨细胞起主导作用〔1,2〕,对维持人体骨量和体液中钙离子浓度十分重要。在骨重塑中,骨吸收与骨形成的协调失衡会导致骨质减少甚至骨质疏松,许多与骨代谢异常相关的疾病如骨质疏松、类风湿关节炎等的发生与骨质流失密切相关。Wnt/β-catenin通路是骨骼发育和骨骼内稳态的重要调节通路〔3~6〕,能调节Wnt途径相关因子的表达,激活细胞向成骨细胞分化或使正常骨细胞代谢受抑制。其调控骨细胞生命过程具有双面性,例如Wnt联合受体低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)5功能缺失使骨量下降,其激活突变则引起高骨量的发生;细胞厚体(DKK)1的高表达抑制骨形成,使用DKK1拮抗剂后可促进成骨分化。研究中医药调控Wnt/β-catenin信号通路与骨代谢相关机制已逐渐成为热点,已有较多学者取得了一定成果,这对于发挥中医药潜在治疗优势具有重要意义〔7~10〕。     

Wnt/β-catenin信号通路与致心律失常性右室心肌病关系的研究进展

炎症、免疫、退行性变、细胞凋亡、基因突变等多种因素未能解释致心律失常性右室心肌病(ARVC)独特的病理学特点——心肌组织脂肪浸润的发生机制。晚近研究表明桥粒斑珠蛋白(Plakoglobin,PG)核移位、Wnt/β-catenin信号通路的抑制、脂肪形成因子的增加,引起心外膜的心脏祖细胞向脂肪细胞分化,是ARVC心肌脂肪浸润的主要分子机制。     

胃泌素对胃癌细胞EMT和Wnt/β-catenin信号通路相关基因表达的影响

目的探讨高表达胃泌素(gastrin)对胃癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响及可能机制。方法用gastrin过表达质粒pcDNA3-gastrin及空载体pcDNA3.1转染胃癌细胞SGC-7901、MKN45,48 h后收集细胞蛋白,Western印迹检测鉴定gastrin表达,检测EMT相关标志物E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin、Snail及wnt/β-连环蛋白(catenin)信号通路相关基因wnt3α、β-catenin、c-myc的蛋白表达变化。结果在SGC-7901、MKN45细胞中成功过表达gastrin。与pcDNA3.1空载体转染组相比,pcDNA3.1-gastrin转染SGC-7901、MKN45细胞中上皮标志蛋白E-cadherin表达下调,间质标志蛋白N-cadherin、Snail表达上调,差异有统计学意义(P<0.05);同时Wnt/β-catenin通路蛋白相关蛋白wnt3α、β-catenin及其下游基因c-myc的表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论过表达gastrin能够激活Wnt/β-catenin信号通路和促进胃癌细胞SGC-7901和MKN45发生EMT。     

西红花苷基于Wnt/β-catenin信号通路改善阿尔茨海默病大鼠的空间记忆

目的 观察西红花苷对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马突触小泡蛋白(SYP)和Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法 SD大鼠随机分为正常对照组、AD模型组、西红花苷组.侧脑室注射 β 淀粉样蛋白(Aβ25～35)建立AD大鼠模型,西红花苷组从次日开始腹腔注射西红花苷(40 mg/kg),连续注射14 d.Morri...     

基于Wnt1/β-catenin信号通路观察白藜芦醇对小鼠炎症相关结直肠癌的作用机制

目的 基于无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点1(Wnt1)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路观察白藜芦醇对炎症相关性结肠癌(CAC)小鼠的抑制机制.方法 采用氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导构建CAC小鼠,实验分为正常组、模型组、实验组、对照组,自造模开始,实验组每日定点腹腔注射100 mg/k...     

微管相关蛋白1通过Wnt/β-catenin信号通路促进肝细胞癌的早期复发

正【据《Gut》2016年3月报道】题:微管相关蛋白1通过Wnt/β-catenin信号通路促进肝细胞癌的早期复发(作者Chen J等)肝细胞癌(HCC)是全球癌症死亡的第二大原因。HCC患者微管相关蛋白发生了变化。然而,这些变化背后的机制仍知之甚少。来自新加坡分子与细胞生物学研究所的Chen等研究了细胞分裂的调控者——微管相关蛋白(PRC)1在HCC发生和HCC早期复发中的作用。通过基因芯片、免疫印迹和免疫组化检测HCC样本中PRC1的表达。分子和细胞技术包括siRNA介导的和慢病毒载体介导的基因敲除,被用来阐明PRC1的功能和机制。PRC1的表达与HCC早期复发和较差的预后有关。在HCC中,PRC1通过增强癌     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨膝痹康方在兔膝骨性关节炎模型中的作用机制

目的 探讨膝痹康方治疗兔膝骨性关节炎(KOA)的作用机制。方法 将30只大白兔随机分成空白组、模型组、塞来昔布组、膝痹康方低剂量组和膝痹康方高剂量组,每组6只。除去空白组以外,其他4组采用膝关节内注射木瓜蛋白酶方法建立KOA兔模型,模型制备成功后各药物组分别进行干预,4 w后,取兔血清及膝关节软骨组织,使用苏木素-伊红(HE)染色法观察关节软骨,染色酶联免疫吸附试验(ELISA)检测兔血清中的白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,Western印迹检测关节软骨中Wnt3a、β-连环蛋白(catenin)、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。结果 与模型组比较,膝痹康方高、低剂量组、塞来昔布组明显改善膝关节软骨损伤,兔血清中IL-1β、IL-6和TNF-α表达、兔关节软骨组织中Wnt3a、β-catenin及Bax蛋白表达量显著降低,Bcl-2蛋白表达显著升高(均P<0.05)。结论 膝痹康方可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路及细胞凋亡延缓KOA炎性反应,减轻软骨破坏,从而缓解KOA兔模型的症状。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨阿魏酸对大强度力竭运动大鼠软骨细胞损伤的保护作用

目的探讨阿魏酸(FA)对大强度力竭运动大鼠软骨细胞损伤的保护作用及对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将5周龄的SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、力竭运动模型组(E组)、低剂量组、高剂量组,各组建模后,对软骨细胞进行染色鉴定,并采用透射电镜观察细胞超微结构的形态学变化;取软骨细胞体外培养后,CCK-8法检测细胞增殖情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胰岛素样生长因子(IGF)-1和前列腺素(PG)E2水平,Western印迹检测Wnt2、p-GSK-3β、β-catenin、基质金属蛋白酶(MMP)13、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达。结果模型组软骨细胞基质着色深,出现严重变形,细胞核均着色;而低剂量组及高剂量组着色较浅,部分细胞核着色,尤其是高剂量组改善明显。超微结构显示,模型组细胞大部分呈现肿胀状态,细胞核形态异常,线粒体数目明显减少,大部分粗面内质网高度扩张,部分溶解断裂;而高剂量组细胞变化明显,少部分细胞肿胀,细胞核基本正常,可见线粒体空泡化及轻度扩张的粗面内质网。与空白组相比,模型组细胞增殖率、IGF-1及Bcl-2水平均显著降低,而Bax、PGE2和MMP13水平均显著升高;与模型组相比,低剂量组、高剂量组细胞增殖率、IGF-1及Bcl-2水平均显著升高,而Bax、PGE2和MMP13水平均显著降低,且高剂量组升高及降低幅度更明显(均P<0.05)。与空白组相比,模型组Wnt2、p-GSK-3β、β-catenin水平明显升高,FA呈剂量依赖性抑制Wnt2、GSK-3β、β-catenin蛋白表达(P<0.05)。结论FA可以降低溶解蛋白表达,提高OA软骨细胞增殖,抑制OA软骨细胞凋亡,其作用机制可能与Wnt/β-catenin通路有关。     

肉苁蓉多糖通过激活Wnt/β-catenin信号通路对6-HODA致帕金森病大鼠的神经保护作用

目的探讨肉苁蓉多糖通过激活Wnt/β-catenin信号通路对6-羟多巴胺(6-HODA)所致帕金森病大鼠受损神经的保护作用。方法将45只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和肉苁蓉多糖治疗组,采用6-HODA立体定向微量注射制备帕金森病大鼠模型。第32天观察实验动物行为学改变,之后将大鼠处死,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)检测大鼠脑黑质内Wnt1、β-catenin蛋白表达;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组游泳静止时间缩短,自主活动站立次数下降,肉苁蓉多糖治疗后上述两种行为得到恢复;模型组脑黑质内Wnt1、β-catenin蛋白水平低于假手术组;肉苁蓉多糖治疗组脑黑质内Wnt1、β-catenin蛋白水平高于模型组(P0.05);模型组脑黑质内GSK-3βmRNA高于假手术组;肉苁蓉多糖治疗后,帕金森病大鼠脑黑质内GSK-3βmRNA水平下降(P0.05)。结论肉苁蓉多糖能改善6-HODA所致帕金森病SD大鼠模型临床症状,这种作用可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,抑制GSK-3β活性,进而发挥多巴胺神经保护作用。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探究小金丹对直肠癌细胞增殖、迁移和EMT的影响

目的 基于Wnt/β-连环蛋白(catenin)信号通路探究小金丹对直肠癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化(EMT)的影响。方法 直肠癌细胞HR-8348分为对照组、低剂量组(20 mg/L小金丹处理)、中剂量组(40 mg/L小金丹处理)、高剂量组(80 mg/L小金丹处理)、高剂量+LiCl组(80 mg/L小金丹和LiCl处理),Western印迹检测β-catenin、c-myc、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)2、上皮性钙黏附素(E-cadherin)、神经性钙黏附素(N-cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,噻唑蓝(MTT)检测增殖,碘化丙啶(PI)单染法检测周期,膜联蛋白(Annexin)V-FITC/PI双染法检测凋亡,Transwell小室检测迁移和侵袭。结果 与对照组比较,低、中、高剂量组β-catenin、c-myc、CyclinD1、CDK2、N-cadherin、MMP-9、Bcl-2蛋白表达量逐渐降低,细胞增殖活性、迁移数目、侵袭数目逐渐降低,G0/G1...     

基于血清胃功能3项及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白探索萎胃颗粒对胃癌前病变患者的作用

[目的]探讨基于Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白联合血清胃功能3项探索萎胃颗粒对胃癌前病变患者作用的影响。[方法]选取2018年1月~2019年6月于我院就诊并治疗的胃癌前病变患者120例为研究对象,按随机数表法将其分为观察组和对照组,每组各60例。对照组予以维酶素颗粒,观察组予以萎胃颗粒治疗,比较2组患者治疗疗效,治疗前后Wnt1、β-catenin及cyclin D1蛋白水平和血清胃功能情况。[结果]观察组患者治疗总有效率为85.00%显著高于对照组46.67%,差异有统计学意义(P<0.001)。2组患者治疗前、对照组患者治疗前后比较,各指标差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组患者PGⅠ及PGR、G-17显著高于治疗前及对照组治疗后,差异有统计学意义(P<0.05)。2组患者治疗前、对照组患者治疗前后比较,Wnt1、β-catenin及cyclin D1蛋白各指标差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组患者显著低于治疗前及对照组治疗后,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]萎胃颗粒治疗胃癌癌前病变可显著提高患者治疗疗效,其可能机制为通过调控Wntβ-catenin信号通路改善胃黏膜功能,对迟滞和降低胃癌发生风险有重要作用。     

基于SIRT3/β-catenin/PPARγ信号通路探讨丹皮酚对急性心肌梗死模型大鼠的治疗作用

目的 探讨丹皮酚对急性心肌梗死(AMI)模型大鼠的治疗作用及对沉默信息调节因子3(SIRT3)/β-连环蛋白(β-catenin)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)信号通路的影响。方法 将50只无特定病原体(SPF)级雄性AMI模型SD大鼠随机分为模型组、卡托普利组、丹皮酚低剂量组、丹皮酚中剂量组和丹皮酚高剂量组,每组10只;另将10只健康雄性SD大鼠作为对照组。除对照组外,其余各组均采用左冠状动脉前降支结扎法建立AMI模型。建模成功后,卡托普利组及丹皮酚各剂量组分别灌胃10 mg/kg的卡托普利和4 mg/kg、8 mg/kg、16 mg/kg的丹皮酚;对照组和模型组给予等体积生理盐水,连续2周,每日1次。末次给药后次日,超声心动图测定大鼠心脏功能;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理学变化;全自动生化分析仪检测血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白T(c Tn T)和心肌肌钙蛋白I(c Tn I)水平;酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF...     

基于Wnt/β-catenin信号探讨苗药五藤膏对膝骨关节炎模型兔软骨组织中β-catenin蛋白及MMP-13、c-myc mRNA表达的影响

目的 以经典Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路为靶向,观察苗药五藤膏贴敷对膝骨关节炎(KOA)模型兔软骨组织中β-catenin、基质金属蛋白酶(MMP)-13及原癌基因(c-myc)表达的影响.方法 将同一批4～5月龄96只健康家兔,随机分为空白组、模型组、巴布膏对照组,五藤膏低量组(约1 g),五藤...     

基于“咽胃相关”探析岭南慢性咽炎证候特征与胡玲教授辨治用药特色

胡玲教授师从于全国名老中医学术继承优秀指导老师、劳九芝堂中医世家第10代传人劳绍贤教授,其临床治疗慢性咽炎合并消化道疾病或不适症状之咽胃相关患者经验独到。该文对其岭南名医门诊534例慢性咽炎病例资料进行聚类统计分析,探索咽胃相关慢性咽炎患者岭南证候的分布特征及胡玲教授辨治用药特色。结果提示,岭南地区咽胃相关慢性咽炎患者以脾胃湿热、肝胃不和、脾虚夹痰证型为多见。胡玲教授临证治疗该病以化湿清热、疏肝和胃、凉血散瘀为主,善用岭南道地药材,用药平和,并注重顾护胃气津液。