龙牡桂枝汤及其拆方对注意缺陷多动障碍模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的:探讨龙牡桂枝汤及其拆方对注意缺陷多动障碍(ADHD)动物模型—自发性高血压大鼠(SHR)下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)的调节作用,阐释复方配伍的科学内涵。方法:幼年雄性SHR大鼠随机分为生理盐水组,盐酸哌甲酯组(2 mg·kg~(-1)),龙牡桂枝汤组(30 g·kg~(-1)),桂枝加龙骨牡蛎汤组(21 g·kg~(-1)),甘麦大枣汤组(9.24 g·kg~(-1)),石菖蒲-远志组(4.62 g·kg~(-1)),分别予相应药物灌胃14 d,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH),促肾上腺皮质激素(ACTH),皮质酮(CORT)的含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测下丘脑盐皮质激素受体(MR),糖皮质激素受体(GR),CRH及海马GR,MR mRNA的表达水平。结果:与生理盐水组比较,盐酸哌甲酯组、龙牡桂枝汤组大鼠血清CORT,ACTH,CRH水平,下丘脑GR,CRH及海马MR,GR mRNA的表达水平明显升高(P0.05,P0.01),其海马GR mRNA表达明显高于盐酸哌甲酯组(P0.01)。拆方研究显示:与生理盐水组比较,桂枝加龙骨牡蛎汤组和甘麦大枣汤组大鼠血清ACTH,CRH水平,下丘脑MR,GR,CRH及海马GR,MR mRNA的表达明显升高(P0.05,P0.01),桂枝加龙骨牡蛎汤组大鼠血清CORT水平明显升高(P0.01),石菖蒲-远志组大鼠血清ACTH水平明显升高(P0.05)。结论:龙牡桂枝汤治疗ADHD的作用机制与提高血清CORT,ACTH,CRH水平,增加下丘脑MR,GR,CRH及海马GR,MR mRNA的表达,从而调控HPA轴功能有关。各拆方药组对HPA轴功能的影响程度依次为桂枝加龙骨牡蛎汤甘麦大枣汤石菖蒲-远志。     

子午流注针法对心理应激大鼠HPA轴中枢调控的影响

目的观察子午流注针法对心理应激大鼠HPA轴中枢调控中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、血清皮质醇(CORT)及免疫因子白细胞介素1 (IL-1)的影响,探讨子午流注针法治疗心理应激的机制。方法 52只Wistar大鼠随机分为子午流注开穴组、针刺对照组、造模组、正常组,每组13只。采用旁观电击实验建立心理应激模型。子午流注开穴组以养子时刻开穴法定时开穴治疗,针刺对照组针刺取百会穴。放射免疫法分别检测血清CORT和ACTH含量、下丘脑中CRH含量、垂体中ACTH含量、肾上腺中CORT含量,免疫组化法、RT-PCR法分别检测下丘脑、垂体中IL-1及其mRNA表达水平。结果与正常组比较,造模组大鼠血清CORT和ACTH水平、下丘脑中CRH含量、垂体中ACTH含量、肾上腺中CORT含量显著升高(P0.01),下丘脑、垂体中IL-1及其mRNA表达水平显著升高(P0.01);与造模组比较,子午流注开穴组大鼠血清CORT和ACTH水平、下丘脑中CRH含量、垂体中ACTH含量、肾上腺中CORT含量显著降低(P0.01),下丘脑、垂体中IL-1及其mRNA表达水平显著降低(P0.01);与针刺对照组比较,子午流注开穴组大鼠血清CORT和ACTH水平、下丘脑中CRH含量、垂体中ACTH含量、肾上腺中CORT含量明显降低(P0.05),下丘脑、垂体中IL-1及其mRNA表达水平明显降低(P0.05)。结论子午流注开穴针法可以调控心理应激大鼠CRH、ACTH、CORT的异常分泌,促进处于异常状态的HPA轴向正常状态恢复,其作用机制可能与下调IL-1 mRNA,减少诱发ACTH的分泌,传递信号参与大脑中枢调控有关,从而改善机体出现应激状态。     

淫羊藿女贞子配伍调节哮喘大鼠NO/ET及HPA轴作用的研究

目的:观察淫羊藿女贞子配伍对哮喘大鼠模型NO/ET及下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的调节作用。方法:采用卵蛋白(OVA)致敏、激发复制大鼠慢性哮喘模型,以阿斯美胶囊为对照药,检测血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中内皮素(ET),NO,诱生型一氧化氮合酶(iNOS),原生型一氧化氮合酶(cNOS)的含量,血清皮质酮(CORT)、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)及下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)水平,肺组织糖皮质激素受体(GCR)蛋白表达。结果:淫羊藿女贞子能抑制BALF中ET,NO浓度的升高(P0.05);能明显下调血及BALF iNOS水平(P0.01或P0.05),升高血及BAFL中cNOS水平(P0.01或P0.05);明显升高血清CORT含量(P0.01);上调肺组织GCR的蛋白表达(P0.05)。结论:淫羊藿女贞子防治哮喘的作用与其对ET,NO(NOS),HPA轴调节作用有关。     

白芍提取物对嗅球损毁抑郁模型大鼠 行为学及下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的:研究白芍提取物对嗅球损毁抑郁模型大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的影响。方法:将嗅球损毁大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药氟西汀2.5 mg.kg-1组以及白芍提取物70,35,17.5 mg.kg-1组,采用敞箱法、跳台法观察嗅球损毁大鼠的行为变化,同时用放免法分析白芍提取物对嗅球损毁大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放素(CRH)、垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)和血清皮质酮(CORT)含量的影响。结果:大鼠嗅球损毁后敞箱行为出现明显变化,水平运动和垂直运动显著增加,白芍提取物中、高剂量组可显著降低大鼠水平运动和垂直运动的得分;跳台试验中,造模后大鼠训练期和测试期的错误次数显著增加,白芍提取物中、高剂量组能显著降低嗅球损毁大鼠训练期和测试期的触电次数;嗅球损毁大鼠下丘脑CRH,垂体ACTH,血清CORT含量明显增加,白芍提取物中、高剂量组能显著降低嗅球损毁大鼠CRH,ACTH,CORT的含量。结论:白芍提取物能明显改善嗅球损毁大鼠的行为活动,并且对嗅球损毁大鼠亢进的HPA轴功能的调整作用是白芍提取物治疗抑郁症的机制之一。     

补肾解郁清心方对围绝经期抑郁症模型大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的探讨补肾解郁清心方对围绝经期抑郁症模型大鼠行为学的影响和对下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)的调节作用.方法采用雌性SD大鼠双侧卵巢摘除.孤养与慢性轻度不可预见应激二步法制作围绝经期抑郁症动物模型.将40只大鼠分为正常对照组、模型组、西药组、中药组.西药组予百忧解(2.4 mg·kg-1)与苯甲酸雌二醇(0.1mg·kg),中药组予补肾解郁清心方(40g·kg-1,相当于临床成人剂量的10倍).对大鼠进行Open-field行为学评分,糖水消耗实验,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量.结果西药组和中药组Open-field水平积分、垂直积分及糖水消耗量均高于模型组(P＜0.01);西药组和中药组血清CRH,CORT含量均低于模型组(P＜0.05),ACTH含量有下降趋势.结论补肾解郁清心方能够改善围绝经期抑郁症模型大鼠行为,调节HPA轴功能.     

补肾、益气中药对哮喘模型大鼠神经内分泌免疫网络若干指标的影响

目的 观察补肾（淫羊藿）和益气（黄芪）中药对哮喘反复发作模型大鼠神经内分泌免疫（neuroendocrino-immune,NEI）网络相关指标变化的影响.方法 将健康清洁级雄性挪威（Brown Norway,BN）大鼠120只,分为11组,采用Realtime-PCR法检测下丘脑促肾上腺激素释放激素（CRH）mRNA的表达;放免法检测血浆中促肾上腺皮质激素（ACTH）的含量;酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清白细胞介素-4（IL-4）,IL-6,干扰素-γ（IFN-γ）和皮质酮（CORT）的含量;采用HE染色法观察肺组织病理变化.结果 与正常对照组比较,哮喘反复发作3周模型大鼠下丘脑CRHmRNA表达和血浆ACTH无明显变化,血清CORT水平升高显著,IFN-γ无明显变化,前炎症因子IL-6、IL-4有上升趋势;与哮喘对照组比较,复方中、高剂量组和淫羊藿低、中剂量组下丘脑CRH mRNA的表达明显升高,淫羊藿中剂量组大鼠血清IFN-γ的浓度升高.黄芪低剂量组大鼠血清CORT的浓度升高,黄芪高剂量组血清IL-4和IL-6的浓度降低.结论 哮喘反复发作3周大鼠存在NEI网络若干指标的紊乱;补肾和益气中药可以增强下丘脑-垂体-肾上腺皮质（hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA）轴的功能,还可以改变Th1和Th2型细胞因子的平衡,这些可能是其治疗哮喘反复发作的机制之一.     

补肾益气药调节哮喘大鼠下丘脑—垂体—肾上腺轴及白细胞介素-6功能紊乱的实验研究

目的 观察补肾益气药对支气管哮喘（以下简称哮喘）大鼠模型神经内分泌免疫（neuro endocrine immune,NEI）网络若干组分的影响。方法 取健康清洁级雄性挪威（Brown Norway,BN）大鼠40只,大鼠按随机数字表法分为对照组、哮喘模型组、复方低剂量组（0.25 g/mL）、复方中剂量组（0.5 g/mL）和复方高剂量组（0.75 g/mL）,以卵白蛋白（OVA）致敏并长期吸入激发制备大鼠反复发作哮喘模型。采用放射免疫法测定血浆中促肾上腺皮质激素（ACTH）含量;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测血清中白细胞介素-6（IL-6）、皮质酮（CORT）水平;采用实时定量 聚合酶链反应（Realtime PCR）法测定下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）mRNA 表达水平。结果 哮喘模型组病理学显示呈嗜酸性粒细胞性炎症。哮喘反复发作时,大鼠下丘脑—垂体—肾上腺（hypothalamic pituitary adrenal,HPA）轴多水平紊乱,补肾益气药可使ACTH、下丘脑CRHmRNA水平明显升高,与哮喘模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）;CORT有升高倾向;哮喘时IL-6升高,且与ACTH呈显著负相关（r=－0.325,P=0.043）,而用补肾益气药治疗后IL-6水平有所下降。结论 补肾益气药可以改善大鼠HPA 轴功能,这种作用不依赖IL 6,提示补肾益气药的上述作用靶点在神经内分泌轴,可能是下丘脑。     

4种中药复方对大鼠实验性急性应激行为及下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的:观察四逆散、半夏厚朴汤、甘麦大枣汤、桂枝甘草龙骨牡蛎汤4种中药复方对大鼠实验性急性应激行为及下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)的影响。方法:将大鼠分为7组:正常组、模型组、四逆散组、半夏厚朴汤组、甘麦大枣汤组、桂枝甘草龙骨牡蛎汤组,测试各组大鼠应激行为、放射免疫法测定大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)及血清皮质酮(CORT)。结果:四逆散减少旷场实验的爬格次数(P<0.01),降低CRH,CORT的含量(P<0.01,P<0.05);半夏厚朴汤延长尾悬挂试验静止时间(P<0.05),降低CRH含量(P<0.05);甘麦大枣汤延长尾悬挂试验静止时间(P<0.05),减少挣扎次数(P<0.01),降低CRH,ACTH,CORT的含量(P<0.01,P<0.05);桂枝甘草龙骨牡蛎汤减少旷场实验的爬格次数(P<0.01),延长尾悬挂试验静止时间(P<0.05),减少尾悬挂试验挣扎次数(P<0.01),降低CRH,ACTH,CORT的含量(P<0.01,P<0.05)。结论:4种中药复方分别通过理气、化痰、补气、温阳等作用于HPA轴不同环节,改变应激行为方式,从而增强机体应对急性应激的能力。     

四逆散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴作用的实验研究

目的研究调和肝脾之四逆散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的影响。方法实验设正常组、模型1组、模型2组、四逆散组。除正常组外其余各组用电刺激法制备慢性应激动物模型,并给予相应的处理。观察大鼠行为学指标的变化,测定血浆皮质酮（CORT）、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）和血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）的含量,同时检测大鼠下丘脑CRH mRNA和垂体ACTH mRNA含量变化。结果四逆散能改善大鼠行为表现,降低大鼠血浆ACTH、下丘脑CRH、血浆CORT的含量及下丘脑CRH mRNA和垂体ACTH mRNA的过度表达。结论四逆散可有效调整慢性应激大鼠HPA轴的异常。     

龙牡桂枝汤对慢性应激状态下ADHD大鼠学习记忆及海马-HPA轴的影响

目的：观察龙牡桂枝汤对慢性应激状态下注意缺陷多动障碍（ADHD）模型大鼠学习记忆能力和海马-下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的影响。方法：32只ADHD模型动物幼年自发性高血压大鼠（SHR）随机分为空白组、慢性应激组、盐酸哌甲酯组和龙牡桂枝汤组,各8只。采用Morris水迷宫实验评价大鼠学习记忆能力,ELISA法检测血清促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质酮（CORT）、促肾上腺皮质释放激素（CRH）水平,RTPCR法检测下丘脑CRH、促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)、促肾上腺皮质释放激素结合蛋白（CRH-BP）及垂体CRHR1、CRH-BP mRNA表达水平,免疫组化法检测海马糖皮质激素受体（GR）、盐皮质激素受体（MR）蛋白表达水平。结果：与空白组比较,慢性应激组寻找平台的潜伏期显著延长（P<0.01）,在目标象限停留时间及穿越平台数显著减少（P<0.05）,血清CORT、CRH、ACTH水平显著升高（P<0.01,P<0.05）,下丘脑CRH、CRHR1、CRH-BP mRNA及垂体CRHR1、CRH-BP mRNA表达升高（P<0.05...     

六味补气方对COPD模型大鼠Th1/Th2类细胞平衡调节作用的实验研究

目的:研究六味补气方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠气道炎症及免疫功能的影响及其作用机制。方法:将SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、桂龙咳喘宁组和六味补气方组,每组10只。除正常对照组外,其余各组采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入方法建立COPD实验动物模型,造模成功后,分别给予0.9%氯化钠溶液及相应药物灌胃,连续干预14 d。于造模第4周和药物干预结束后检测肺功能; 苏木精-伊红(HE)染色法光镜观察肺组织的病理学改变; 酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清及肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)水平,并分析辅助性T细胞Th₁/Th₂平衡状态。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠出现COPD症状和体征,肺功能降低,血清及BALF中IFN-γ水平明显下降,IL-4水平明显增加(均P<0.05),Th₁/Th₂平衡向Th₂方向移动; 与模型组相比,六味补气方组和桂龙咳喘宁组大鼠一般情况及肺功能均有不同程度改善,血清及BALF中IFN-γ水平明显增加,IL-4水平下降(均P<0.05); 与桂龙咳喘宁组相比,六味补气方组大鼠COPD症状体征减轻,血清及BALF中IFN-γ水平明显增加,IL-4水平下降(均P<0.05),Th₁/Th₂平衡向Th₁方向移动。结论:六味补气方可改善COPD模型大鼠肺功能,减轻气道炎症,其机制可能是通过调节Th₁/Th₂类细胞平衡,增加免疫功能实现的。     

蒙药槟榔十三味丸对抑郁模型大鼠神经-内分泌-免疫功能的影响

目的：探讨蒙药槟榔十三味丸对慢性应激抑郁模型大鼠神经-内分泌-免疫功能的影响及治疗抑郁症的机制。方法：将Wistar雄性大鼠,根据蔗糖水消耗量及体重随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组（3.3 mg·kg^-1）、槟榔十三味丸低、中、高剂量组（0.25,0.5,1 g·kg^-1）,每组10只。除正常对照组外,其余大鼠均采用慢性轻度不可预见性应激结合孤养方法制备抑郁模型,造模同时灌胃给药,每日1次,连续给药28 d。实验结束后,迅速断头取血,分离血清,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质酮（CORT）、三碘甲状腺原氨酸（T₃）、四碘甲状腺原氨酸（T₄）、促甲状腺激素（TSH）、白介素-2（IL-2）、白介素-6（IL-6）的含量,并取胸腺、脾脏,计算胸腺指数、脾脏指数。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠血清CRH,ACTH,CORT,T₃,IL-6含量明显升高（P<0.01）,TSH含量、脾脏指数明显降低（P<0.01）;与模型组比较,氟西汀组和槟榔十三味丸大鼠血清CRH,ACTH,CORT,T₃,IL-6含量明显降低（P<0.01或P<0.05）、TSH含量明显升高（P<0.05或P<0.01）,槟榔十三味丸组大鼠脾脏指数明显升高（P<0.01）,尤其槟榔十三味丸高剂量组作用显著。结论：槟榔十三味丸能调节抑郁模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴和下丘脑-垂体-甲状腺轴功能,以及免疫功能,这可能是该复方抗抑郁作用的机制之一。     

大鼠哮喘模型中嗜酸性粒细胞和IL-10改变研究

目的探讨大鼠哮喘模型中白细胞介素-10(IL-10)、嗜酸性粒细胞(EOS)的变化及其在哮喘发病机制中的作用。方法30只SD大鼠随机分为正常对照组、3周哮喘组和4周哮喘组,用ELISA法测定各组大鼠外周血清IL-10,并计数外周血和肺泡灌洗液(BALF)中EOS。结果各哮喘组IL-10显著低于对照组(P均<0.05),且4周哮喘组IL-10显著高于3周哮喘组(P均<0.05);外周血EOS计数各哮喘组显著高于正常对照组(P均<0.05);在BALF中,各哮喘组显著高于正常对照组(P均<0.01),但2个哮喘组间无显著性差异。血清IL-10浓度与外周血和BALF中EOS绝对计数无显著相关性。结论大鼠哮喘模型中有血清IL-10下降现象,在4周后有升高趋势,但仍低于正常对照组,其升高趋势与EOS计数无线性相关,IL-10升高趋势与气道重塑可能相关。     

黄芪对哮喘大鼠神经内分泌免疫网络相关指标的影响

目的 观察益气药黄芪对支气管哮喘（以下简称哮喘）反复发作模型大鼠神经内分泌免疫（NEI）网络相关指标的影响。方法 取健康清洁级雄性挪威大鼠54只,分为正常组、模型组、黄芪低、中、高剂量组。除正常组外,其他4组均行哮喘造模,黄芪不同剂量组分别灌胃给予相应剂量的黄芪,模型组给予等量生理盐水。用Realtime—PCR法检测下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）mRNA的表达;放免法检测血浆中促肾上腺皮质激素（ACTH）的含量;酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清细胞因子（IL-4、IL-6、IFN-γ）和血清皮质酮（CORT）的含量;肺组织采用HE染色观察其病理变化。结果 各组大鼠下丘脑CRHmRNA表达和血清ACTH无明显变化,造模后各组大鼠血清CORT水平升高（P〈0．05）;黄芪低组大鼠血清CORT含量显著高于其他各组（P〈0．05或P〈0．01）;黄芪高组血清IL-4和IL-6含量显著下降（P〈0．01）,且有量效关系;IFN-γ各组间比较差异无显著性。各组大鼠肺组织病理变化比较差异无显著性。结论 哮喘大鼠存在NEI网络相关指标的紊乱;黄芪可以增强下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的功能,改善Th1和Th2型细胞因子的平衡,从而调节了NEI网络的紊乱。     

Shizhenqing granule stimulates the hypothalamic-pituitary-adrenal axis and reduces serum pro-inflammatory factors in a rat model with chronic eczema

ObjectiveIn this study, we examined the effects of Shizhenqing granule (SZQG) on hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis and serum inflammatory factors in a rat model of chronic eczema, in order to explore the mechanism of action of SZQG in treatment of this disease.MethodsSixty Sprague–Dawley male rats were randomly divided into six groups (with 10 rats per group): blank group; model group; positive control group (prednisone); and the low-, medium-, and high-dose SZQG groups. Except for the blank group, rats in all other groups were treated with 2,4-dinitrochlorobenzene to induce chronic eczema. These rats were administered prednisone or SZQG for 7 consecutive days after successful establishment of the chronic eczema model, and samples were collected 12 h after the last administration. The degree of skin lesions and the changes in serum levels of corticotropin-releasing hormone (CRH), adrenocorticotropic hormone (ACTH), cortisol (CORT), interleukin (IL)-4, interferon (IFN)-γ, IL-25, and IL-31 among the groups were compared.ResultsSZQG effectively increased the levels of CRH, ACTH, and CORT, which decreased in the serum of rats with chronic eczema, stimulated the function of the HPA axis, and promoted the expression of glucocorticoids. SZQG reduced the serum levels of inflammatory factors including IL-4, IL-25 and IL-31, which were overexpressed in rats with chronic eczema, and increased those of anti-inflammatory factor IFN-γ, thereby alleviating the inflammatory symptoms and itching, and ameliorating the clinical symptoms of chronic eczema.ConclusionSZQG effectively alleviates skin lesions in the chronic eczema rat model by stimulating the function of the HPA axis.