王氏连朴饮对脾胃湿热证大鼠CRH、ACTH的影响

目的 观察王氏连朴饮对脾胃湿热证模型大鼠促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)的调控作用.方法 将40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、王氏连朴饮(高、中、低剂量)组.采用放射免疫法检测大鼠血浆CRH、ACTH的水平.结果 脾胃湿热证模型组大鼠血浆CRH、ACTH升高(P<0.05),王氏连朴饮治疗组各剂量对其均有降低作用,以中剂量组效果最好且有显著性差异(P<0.05).结论 脾胃湿热证大鼠神经内分泌亢进,而王氏连朴饮可能是通过调节神经一内分泌系统可以改善大鼠HPA轴功能状态.     

王氏连朴饮加味治疗脾胃湿热型慢性胃炎临床研究

笔者近2年来,用王氏连朴饮加减治疗脾胃湿热型浅表性胃炎,取得了显著疗效.现报道如下。     

王氏连朴饮对脾胃湿热证大鼠胃黏膜细胞凋亡调控基因蛋白的影响

目的：观察脾胃湿热证大鼠胃黏膜细胞凋亡指数（AI）及凋亡调控基因蛋白Bcl-2、P53变化规律,探讨王氏连朴饮治疗脾胃湿热证的作用机制。方法：采用TUNEL法检测胃黏膜组织AI及SABC法N步检测胃黏膜上皮细胞凋亡基因相关蛋白Bcl-2、P53。结果：模型组胃黏膜细胞促凋亡基因相关蛋白过度表达,明显高于正常组及王氏连朴饮各剂量组（P〈0．05）,正常组与王氏连朴饮各剂量组之间无显著性差异。结论：脾胃湿热证模型组大鼠AI升高,Bcl-2、P53表达增强。王氏连朴饮有抑制胃黏膜细胞凋亡调控基因蛋白Bcl-2及P53过度表达、修复胃黏膜的作用,从而调节细胞凋亡趋于正常。     

黄琴教授应用王氏连朴饮治疗疑难杂症验案举隅

黄琴教授长期致力于中医温病学的研究,临床经验丰富,形成了独特的诊疗风格。本文主要介绍黄琴教授应用王氏连朴饮灵活化裁,用于治疗某些杂症、顽症的临床经验,并加以浅析,以供同道参考。     

王氏连朴饮对脾胃湿热证大鼠血清IL-2、IL-6等的影响

目的：观察王氏连朴饮对脾胃湿热证模型大鼠免疫功能的调控作用。方法：将40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、王氏连朴饮高剂量组（连高组）、王氏连朴饮中剂量组（连中组）、王氏连朴饮低剂量组（连低组）,每组8只。用放免法检测血清中IL-2、IL-6的变化,计算大鼠胸腺指数、脾脏指数。结果：（1）血清IL-2、IL-6水平：与模型组比较,正常对照组、连中组均有显著性差异,连高组、连低组无显著性差异;连中组与正常对照组比较,无显著性差异。（2）胸腺指数、脾脏指数：与模型组比较,正常对照组、连中组均有显著性差异,连高组、连低组均无显著性差异;连中组与正常对照组比较,无显著性差异。结论：脾胃湿热证大鼠免疫功能低下,王氏连朴饮（特别是中等剂量）有恢复机体免疫功能的作用,这可能是王氏连朴饮清热祛湿发挥功效的机制之一。     

王氏连朴饮加味对脾胃湿热证大鼠抗氧化功能的影响

目的:观察王氏连朴饮加山楂、桃仁对脾胃湿热证模型大鼠红细胞氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、D-木糖含量的影响.方法:将32只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、王氏连朴饮治疗组、王氏连朴饮加山楂、桃仁治疗组各8只,采用内外因湿热证模型综合造模方法建立脾胃湿热证大鼠模型,共10 d造模成功后开始灌胃给药:正常对照组:灌服生理盐水1.3 mL (kg·d)-1)[2.6 mL·(只·d)-1];脾胃湿热证模型组:灌服生理盐水1.3 mL· (kg·d)-1[-2.6 mL·(只·d)-1];王氏连朴饮治疗组:灌服王氏连朴饮1.3 mL· (kg· d)-1[2.6mL·(只·d)-1];王氏连朴饮加山楂、桃仁治疗组:灌服王氏连朴饮加山楂、桃仁汤1.3 mL·(kg·d)-1[2.6 mL·(只·d)-1] 5d后处死大鼠,采用邻苯三酚自氧化法检测红细胞SOD含量,改良八木国夫法检测MDA含量,甲苯胺改良法检测GSH-Px含量,比色法检测D-木糖含量.结果:脾胃湿热证模型大鼠红细胞SOD显著降低,MDA明显升高(P＜0.01),血清GSH-Px及D-木糖显著降低(P＜0.01). 经王氏连朴饮加山楂、桃仁治疗后SOD含量升高正常,MDA含量恢复正常,GSH-Px及D-木糖含量恢复正常,与正常对照组比较无统计学意义(P＞0.05). 结论:王氏连朴饮加山楂、桃仁能有效改善脾胃湿热证大鼠诸症状,使降低的SOD、GSH-Px及D-木糖升高至正常.使升高的MDA降至正常 . 其作用机理可能是通过调节大鼠抗氧化功能而起效.     

王氏连朴饮治验三则

王氏连朴饮出自王士雄《霍乱论》,以化湿清热泄浊立法,由厚朴、黄连、石菖蒲、半夏、淡豆豉、栀子、芦根组成。方中主药黄连苦寒以清热化湿,配伍厚朴、半夏以利气燥湿、和胃降逆,石菖蒲开郁泄浊,栀子、淡豆豉清宣郁热,芦根清利湿热。全方辛开苦降,寒温并用,湿热并治,共奏清轻疏利、宣化透湿之功。笔者临证多从湿热并重、郁阻中焦这一基本病机出发,用于多种杂病而获良效。兹举案例三则如下。     

王氏连朴饮对脾胃湿热证大鼠血清IL-1β与NO影响的实验研究

目的：观察王氏连朴饮对脾胃湿热证大鼠血清白细胞介素1（IL-1β）和一氧化氮（NO）含量的调节作用。方法：将30只大鼠随机分为正常对照组、脾胃湿热证模型组、治疗组三组,每组10只.除正常对照组外,其余各组均按“湿热环境＋高脂高糖饮食＋白酒”的内外因湿热证模型综合造模方法,建立脾胃湿热证大鼠模型。放免法检测IL-1β含量,硝酸还原酶法检测NO含量。结果：脾胃湿热证模型大鼠血清中1L-1β含量明显增高,NO含量显著降低（与正常对照组相比有显著性差异P〈0．01）,经治疗后大鼠血清中IL-1β含量、NO含量逐渐恢复正常,与正常对照组相比无显著性差异（P〈0．01）。结论：王氏连朴饮能有效改善大鼠脾胃湿热证诸症状,使增高的血清IL-1β含量恢复正常,使降低的血清NO含量恢复正常。提示其作用机制可能是：通过调节脾胃湿热证大鼠血清中NO的含量,恢复抗氧化功能,调节大鼠的免疫功能;通过调节脾胃湿热证大鼠血清中IL-1β的含量,减少致热源,减轻炎症反应,从而取得治疗脾胃湿热证的疗效。     

王氏连朴饮对脾胃湿热证模型大鼠胃黏膜P53、Bcl-2和COX-2蛋白表达的影响

目的 观察王氏连朴饮对脾胃湿热证模型大鼠胃黏膜增殖与凋亡相关P53、Bcl-2和COX-2蛋白表达的影响,探讨该方治疗脾胃湿热证获效的可能作用机制。方法 取SD大鼠50只,随机分为正常对照组,模型组,王氏连朴饮高、中、低剂量组（1.94,0.97,0.48 g·mL-1）,共5组,每组10只。除正常组饲以普通饲料外,其余4组均以湿热环境加高脂高糖饮食和白酒综合法复制脾胃湿热证模型,连续灌胃给药7 d,观察该方对模型大鼠胃黏膜P53、Bcl-2及COX-2蛋白表达的影响。结果 本实验P53、Bcl-2、COX-2基因蛋白表达定位于胞质,模型组大鼠表达明显升高,与正常对照组比较,有显著性差异（P＜ 0.01）。王氏连朴饮高、中、低剂量组P53、Bcl-2及COX-2蛋白表达有一定程度下调,与模型组比较,具有显著性差异（P＜ 0.01）,尤以中剂量组作用最明显。结论 王氏连朴饮可能通过下调脾胃湿热模型大鼠胃黏膜P53、Bcl-2及COX-2蛋白水平的表达,在一定程度上调节其胃黏膜细胞增殖与凋亡的失衡,进而达到对胃黏膜损伤的修复作用。     

王氏连朴饮新用治验乳癌化疗与靶向治疗不良反应1则及思考

目的梳理分析王氏连朴饮治验乳腺癌化疗和靶向治疗不良反应医案1例。方法回顾患者治疗的过程,分析导师的辨证思路。结果王氏连朴饮可以有效改善复发性乳腺癌化疗和靶向治疗后湿热中阻之内伤发热、口疮。结论王氏连朴饮辨证治疗乳腺癌化疗与靶向治疗不良反应有效,为临床古方新用提供借鉴。     

丹参对大鼠脓毒症急性肺损伤发生中TNF-α的影响及对肺的保护作用

目的:观察丹参注射液对脓毒症急性肺损伤发生中TNF-α的影响及其保护作用.方法:复制大鼠脓毒症模型造成急性肺损伤,动态观察肿瘤坏死因子(TNF-α)在脓毒症诱发急性肺损伤发生发展过程中的变化,同时观察丹参对此过程中的干预作用,检测各组动物动脉氧分压(PaO2)、肺系数(LI)、肺通透系数(LPI),并进行肺组织的病理学光镜检查.结果:丹参能显著降低脓毒症急性肺损伤动物外周血及肺组织TNF-α的表达,提高PaO2,降低LI、LPI,减轻肺损伤的程度.光镜见丹参干预组的肺充血较轻,炎细胞浸润较脓毒症急性肺损伤对照组明显减轻.结论:丹参能减少血浆及肺组织中TNFα的生成及含量,从而减轻其介导的肺组织损害,在一定程度上缓解ALI的发生、发展.     

麦门冬汤对放射性肺损伤大鼠肺组织TGF-β、TNF-α表达的影响

目的探讨麦门冬汤对放射性肺损伤大鼠肺组织TGF-β、TNF-α表达的影响。方法将72只健康成年清洁级雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组（A组）24只,单纯照射组（B组）24只,照射加中药组（C组）24只,A、B两组以蒸馏水2ml／200g体重灌胃一周后,C组以每日2ml／200g体重（1．6g／200g体重）灌胃服用中药一周,开始照射,照射期间,每周测体重一次,依照上述剂量,A、B组以蒸馏水、C组以中药继续灌胃至照射结束。分别在完成10次照射后（第5周）,以及在照射开始后的第12、26周,检测各组大鼠肺组织TGF-β、TNF-α表达。结果①TGF-β蛋白表达：B组大鼠TGF-β于照射第5周时出现表达达到高峰;在各时间点,A、C组大鼠TGF-β表达均低于B组（P〈0．01）;（2）TNF．Ⅱ表达：B组大鼠肺组织TNF-α的表达在第5周时达到高峰,C组在第5周时明显抑制了TNF-α表达,在第5周、12周、26周,C组大鼠TNF-α表达均明显低于B组（P〈0．01）。结论中药麦门冬汤具有较好的预防放射性肺损伤功效,其作用机制与阻抑肺组织TGF-β、TNF-α表达有关。     

中蒙医温病学王氏连朴饮加滑石、黄芩与菌达日-4味汤体外抗轮状病毒、抗腹泻实验

目的：明确王氏连朴饮加滑石、黄芩与菌达日一4味汤体外抗轮状病毒的机制及观察其抗番泻叶所致腹泻动物模型的效果,为临床应用提供科学依据。方法：实验-蒙药和中药对MA-104细胞（恒河猴胚胎肾细胞）的毒性作用,根据Takeuchi建立MTF（4,5二甲基噻唑-2,5-二苯基四唑溴化物）法检测药物的细胞毒性作用;药物对病毒感染的预防作用,用不同浓度的药物预先处理单层细胞2h后将100TCID。／0．1mL（TiSSHecu-tureinfectivedose,半数组织培养感染剂量）的病毒每孔加入0．1mL,吸附2h,弃病毒液,PBS（PhosphateBufferSa—line,磷酸盐缓冲液）洗涤2次,加细胞维持液培养,每天于倒置显微镜下观察细胞变化;药物对病毒的直接杀伤作用,将不同浓度的药物与100TCID50／0．1mL的病毒液等量混合作用2h,再将其感染单层细胞,吸附2h后,弃上清,加入细胞维持液继续培养,每天于倒置显微镜下观察细胞变化;药物对病毒穿入细胞后的抑制作用,先用100TCID50／0．1mL的病毒每孔0．1mL感染细胞,吸附2h后,吸去病毒,加入不同浓度的含药维持液,每天于倒置显微镜下观察细胞变化。实验二复制番泻叶所致泄泻的小鼠模型,比较蒙药、中药与阿托品对腹泻的影响,通过计数湿粪,观察药物对腹泻的抑制程度。结果：蒙药的TC50（半数细胞毒性浓度）为2．76mg／mL,中药的TC50为24．35mg／mL,蒙药对MA-104细胞毒性明显大于中药;中药抗轮状病毒的主要作用方式为抑制病毒生物合成,但在阻断病毒吸附以及直接杀伤方面效果较差;蒙药能明显抑制轮状病毒复制,表现在阻断病毒吸附、直接杀伤以及抑制病毒增殖方面都有较好的效果,但细胞毒性较大;中药低剂量组和蒙药高剂量组抗腹泻效果优于其他组。     

清瘟败毒饮对内毒素性急性肺损伤大鼠血清细胞因子TNF-α、IL-8、IL-10表达的影响

目的:动态观察清瘟败毒饮对急性肺损伤(ALI)大鼠血清细胞因子TNF-α、IL-8、IL-10表达的影响。方法:144只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、清瘟败毒饮大、中、小剂量组和泼尼松治疗组(n=24),经喉无创气道内滴注内毒素(LPS)溶液(2mg/kg)建立急性肺损伤大鼠模型,分别于造模后24、48、72h处死大鼠取血,行肺泡灌洗液(BALF)白细胞计数和测定肺干/湿比,右肺中叶HE染色观察病理变化,ELISA法检测血清细胞因子TNF-α、IL-8、IL-10水平。结果:模型组BALF中白细胞总数和肺干/湿比显著升高(P<0.01);血清TNF-α、IL-8、IL-10水平明显升高(P<0.01),分别于24h、48h、72h达高峰期,为正常对照组3倍、3.1倍、2倍;肺组织破坏及炎性浸润明显。清瘟败毒饮治疗组BALF白细胞数、TNF-α、IL-8含量较模型组明显下降,IL-10含量显著升高(P<0.01～0.05);肺泡结构破坏和炎症细胞浸润情况明显改善;清瘟败毒饮大剂量组肺干湿比明显下降(P<0.01)。结论:清瘟败毒饮可调节ALI时促炎因子和抗炎因子比例失衡,缓解肺部炎症损伤,从而起到保护肺组织的作用。     

王氏连朴饮加滑石、黄芩;茵达日-4味汤对温病湿热模型、炎性反应因子IL-1β、IL-6、TNF-α的影响

目的:通过动物实验观察王氏连朴饮加滑石、黄芩;茵达日-4味汤对大鼠湿热模型、炎性反应因子血清白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α的作用影响。方法:建立大鼠湿热炎性反应模型,设空白组、模型组、对照药组、中药组、蒙药组分别采取不同处理方法观察记录各项指标,血清细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α检测采用酶联免疫吸附法(ELISA)。结果:中蒙医温病经典方在治疗大鼠湿热症状上具有可靠疗效,尤其在改善大鼠进食饮水减少,大便稀软,口角眼角分泌物增多等方面有显著成效。ELISA检测显示对照药组IL-1β、IL-6、TNF-α无意义,中药组TNF-α有统计学意义(P0.01),对IL-1β、IL-6无意义(P0.05),蒙药组TNF-α有统计学意义(P0.01)、IL-6有意统计学义(P0.05),对IL-1β无意义(P0.05)。结论:王氏连朴饮加滑石、黄芩;茵达日-4味汤在解除湿热症状上有切实可靠的作用,对腹腔炎性反应引起的发热及炎性反应,虽然细胞因子血清检测没有得出有力检验数据支持,但动物模型治疗后期各项体征监测都有好转。ELISA检测显示中药组TNF-α有统计学意义(P0.01);蒙药组TNF-α有统计学意义(P0.01)、IL-6有统计学意义(P0.05)。     

急性肺损伤大鼠肺组织TNF-α和IL-1β的表达及塞来昔布对其影响

目的初步探讨塞来昔布对急性肺损伤大鼠肺组织TNF-α和IL-1β表达的影响。方法将60只大鼠随机分为正常对照组、模型组、治疗组、药物对照组,每组15只,模型组和治疗组采用尾静脉注射LPS(5 mg/kg)建立急性肺损伤模型,后者在模型建立30 min后予塞来昔布灌胃,正常对照组和药物对照组在相同时间点分别予生理盐水和塞来昔布灌胃。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(western blot)方法分别检测4组大鼠肺组织COX-2蛋白及TNF-α、IL-1βmRNA和蛋白的表达。结果模型组和正常对照组COX-2蛋白及TNF-α、IL-1βmRNA和蛋白表达比较均有显著性差异(P均<0.05);治疗组TNF-α、IL-1βmRNA和蛋白表达明显降低,与模型组均有显著性差异(P均<0.05)。结论选择性COX-2抑制剂塞来昔布可使急性肺损伤大鼠炎症反应减轻。     

血必净注射液对急性胰腺炎大鼠肺损伤及肺组织TLR4、NF-κB、TNF-α表达的影响

目的观察血必净注射液对急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)伴发肺损伤大鼠的保护作用及对肺组织TLR4(Toll样受体4)、NF-κB(核因子-κB)、TNF-α(肿瘤坏死因子-α)表达水平的影响,探讨其潜在治疗机制。方法利用生物信息学方法分析AP肺损伤相关的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。大鼠随机分为假手术组、AP模型组、血必净注射液组,16只/组。采用胰腺被膜下注射5%牛磺胆酸钠制备AP大鼠模型并给予血必净注射液治疗。于造模后6、24 h分批取材,ELISA检测血清淀粉酶(AMY)活性及肺组织TLR4、NF-κB、TNF-α表达水平,观察肺脏及胰腺组织病理学改变。结果从GEO高通量芯片数据库中共筛选出54个DEGs,主要富集在Toll样受体、TNF-α、HIF-1(低氧诱导因子-1)等信号通路。造模后6 h及24 h时AP模型组血清AMY活性高于假手术组,血必净注射液组AMY活性较AP模型组下降但高于假手术组。组织病理学检测结果显示6 h及24 h AP模型组大鼠胰腺及肺组织出现出血、坏死、肿胀等病变,血必净...     

清瘟败毒饮影响急性肺损伤大鼠肺组织NF-κBp65表达的实验研究

目的:通过观察清瘟败毒饮对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织病理及核因子-κBp65(NF-κBp65)表达的影响,探讨清瘟败毒饮对ALI的治疗作用及干预机制。方法:选取健康雄性SD大鼠144只,随机分为6组,每组24只,分别为正常对照组,模型组,泼尼松组和清瘟败毒饮大、中、小剂量组。脂多糖溶液(2mg/kg)气管内滴注复制ALI大鼠模型,连续两天。各治疗组在第2次滴注完LPS溶液1h后,用生理盐水将相应的药物稀释至4mL灌胃,1天2次。各组分别于灌胃后24h、48h处死6只大鼠,于72h处死余下所有大鼠,并收集所需标本;通过镜下观察肺组织病理变化及采用W estern b lot方法检测肺组织中NF-κBp65的表达水平。结果:LPS致ALI大鼠肺组织肺泡结构破坏或实变,肺间质明显水肿,大量炎性细胞浸润,肺泡腔和肺间质内可见局灶性炎症细胞浸润和大量红细胞渗出,与同时相模型组比较,清瘟败毒饮大、中剂量组大鼠病理学炎症积分均降低非常显著(P<0.01),而小剂量组只有24h、48h有显著性降低或非常显著性降低(P<0.05或P<0.01);清瘟败毒饮各剂量治疗组中48h清瘟败毒饮大、中剂量组和72h各剂量组大鼠肺组织中NF-κBp65的表达均降低,与同时相模型组相比均有显著性差异或非常显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:清瘟败毒饮能减轻LPS致ALI大鼠肺组织的损伤程度,在一定程度上减少炎症细胞在肺部积聚、浸润、渗出,起到比较明确的肺保护作用;清瘟败毒饮能有效减少LPS致ALI大鼠肺组织中NF-κBp65的表达,通过抑制NF-κB的活化和炎性细胞因子的生成,对炎症反应起到抑制作用;在LPS致ALI早期使用清瘟败毒饮,可有效减轻肺组织的损伤程度,减轻肺部的炎症反应。     

王氏连朴饮通过降低大鼠TNF-α、IL-1β的分泌改善急性肺损伤的机制

急性肺损伤(ALI)是临床常见危急重症,而肠-肺轴在其失控的炎症反应中发挥着重要的病理生理作用,因此阻断肠-肺轴间炎症反应的级联效应就成为防治ALI的新靶点。基于文献及前期研究表明,王氏连朴饮能影响糖皮质激素(GCs)分泌而调节GCs效应,进而对炎症反应具有调控作用。而机体GCs效应的发挥必须通过糖皮质激素受体(GR)的介导,据此推测王氏连朴饮是通过调节GR表达而调控炎症反应,起到保护ALI肠-肺轴的作用。希望在此基础上进一步通过设计相关实验进行观察和验证,明确该方对急性肺损伤肠-肺轴的保护作用机制及肺病治肠的理论基础,为ALI炎症的控制及防治提供新的思路和方法,并揭示中医肺合大肠的现代医学原理。