COMT基因多态性及血瘀质生物学基础对小鼠肺癌发生发展的影响研究

目的:探讨儿茶酚-O-甲基转移酶基因158号密码子(COMT rs4680)基因多态性及血瘀质生物学基础与小鼠肺癌发生发展的关系。方法:将80只C57BL/6小鼠随机分为2组,将其中一组构建血瘀质小鼠模型,模型成功后检测血瘀质小鼠与正常小鼠外周血中COMT rs4680单核苷酸多态性(SNP);在血瘀质模型小鼠及正常小鼠复制Lewis肺癌模型,观察并记录不同小鼠肿瘤直径长至1 cm所用的时间;当小鼠肿瘤直径长至1 cm后,取外周血及肿瘤组织,检测肿瘤组织COMT rs4680 SNP,并比较COMT基因型与1 cm成瘤时间的关系;对比分析血瘀质小鼠、正常小鼠、正常小鼠肿瘤组与血瘀质小鼠肿瘤组外周血中COMT蛋白表达情况。结果:血瘀质小鼠外周血COMT突变基因型G/A与A/A比例明显高于正常小鼠组,差异有统计学意义(P0.05);血瘀质小鼠肿瘤直径长至1 cm时间短于正常小鼠肿瘤组,差异有统计学意义(P0.05);A/A基因型小鼠肿瘤长至1 cm的时间明显短于G/G与G/A组小鼠,差异有统计学意义(P0.05);血瘀质小鼠肿瘤组外周血中COMT蛋白表达明显低于其他组。结论:COMT基因表达的下调以及血瘀质体质可能与肺癌的发生发展有关,且COMT rs4680单核苷酸G到A的突变也促进了肺癌的发生与发展。     

原发性胃癌患者舌苔变化与转化生长因子α基因单核苷酸多态性位点分布的相关性

目的探讨原发性胃癌患者舌苔形成的分子遗传学机制。方法以原发性胃癌为基础病种,基于387例原发性胃癌患者和392例正常对照人群进行临床对照研究,记录受试者苔色和苔质,苔色包括白苔、黄苔和其他,苔质包括薄苔、厚苔、剥苔。利用连接酶检测反应检测受试者外周静脉血转化生长因子-α(TGF-α)基因8个单核苷酸多态性(SNP)位点分布情况,分析苔色、苔质与TGF-α基因SNP位点的相关性。结果仅携带SNP rs11466285 TC/TT基因型的原发性胃癌患者和正常对照人群苔色分布差异无统计学意义(P=0.122),其他各基因型苔色和苔质在两组受试者的分布差异均有统计学意义(P0.01)。SNP rs503314 GG基因型、rs3732253 TC/TT基因型和rs538118、rs2166975显著影响苔色变化(P0.05),SNP rs503314 GC/CC基因型和rs538118显著影响苔质变化(P0.05)。结论原发性胃癌患者舌苔形成可能与TGF-α基因多态性相关。     

KCNJ11基因多态性与代谢综合征“痰证”病位、病性兼杂规律的相关性研究

目的探讨KCNJ11基因多态性位点rs5215与中国福建常住汉族人群代谢综合征(MS)痰证病位、病性兼杂规律的相关性。方法选取中国福建常住汉族人群MS痰证患者146例,MS非痰证患者50例,健康人150例,采用证素辨证法收集各证素分布情况、检测理化指标;采用SNPscanTM多重SNP分型技术方法,检测KCNJ11单核苷酸多态性(SNPs)位点rs5215的基因型频率、等位基因频率及其与理化指标、痰证病位、病性兼杂的相关性。结果 KCNJll多态性位点rs5215的3种基因型频率及等位基因频率在三组间的分布差异均无统计学意义(P0.05);痰证组TT基因型与CT基因型相比,TG显著升高,CC基因型与CT基因型相比,Cr显著升高,两者差异都有统计学意义(P0.05);病位证素脾在风险基因型CC上分布比例显著升高,差异有统计学意义(P0.01)。病性证素热在风险基因型CC上较非热高,差异有统计学意义(P0.05)。结论中国福建地区汉族人群KCNJ11基因多态性位点rs5215与MS痰证的形成无关,但可能与TG、Cr的代谢有关;该位点还可能与MS痰证的病位证素脾和病性兼杂热的形成有关。     

MAP2K4、MAPK1基因多态性与缺血性中风不同证型患者及其血脂水平的关联分析

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶激酶4(MAP2K4)、丝裂原活蛋白激酶1(MAPK1)基因多态性与缺血性中风风痰瘀阻证、气虚血瘀证的易感性及血脂水平的关联。方法采用病例对照研究方法,纳入缺血性中风风痰瘀阻证311例、气虚血瘀证284例、正常对照者605例。采用Sequenom技术进行基因分型,运用实时荧光定量法PCR(RT-PCR)检测外周血MAP2K4、MAPK1的mRNA表达水平和血脂水平。采用非条件Logistic回归模型分析基因型与缺血性中风易感性的关联,采用线性回归分析各位点多态性与血脂水平的关联。结果 MAPK1基因rs9340多态性与男性缺血性中风风痰瘀阻证易感性显著关联(P=0.047),而MAPK1基因rs6928多态性、MAP2K4基因rs3826392多态性与缺血性中风风痰瘀阻证、气虚血瘀证的易感性无关联(P0.05)。携带rs6928 CC基因型的风痰瘀阻证患者的MAPK1 mRNA表达水平显著低于其他基因型携带者(P=0.006)。在缺血性中风气虚血瘀证中,MAPK1基因rs6928多态性与患者的甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)水平均有显著关联(P0.05),rs9340与患者TG水平的关联具有意义(P0.05),但未观察到MAP2K4基因rs3826392多态性与缺血性中风风痰瘀阻证、气虚血瘀证的血脂水平具有关联(P0.05)。结论 MAPK1基因rs9340多态性可能影响中国男性缺血性中风风痰瘀阻证的发生,MAPK1基因多态性影响缺血性中风气虚血瘀证的血脂代谢。     

上海地区人群HMOX1基因单核苷酸多态性与原发性高血压发病的关系及中医治疗方法研究

目的：探讨上海地区人群血红素加氧酶基因1（HM OX1）单核苷酸多态性（SNPs）与原发性高血压（EH）之间的关联,及其中医治疗方法。方法：采用标签单核普酸多态（TagSNP）方法,分析上海地区人群中 HM OXI基因3个标签SNP位点（rs8140669T/A、rs9607267T/C和rs2071749G/A多态）,采用聚合酶链式反应和限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）方法对SNPs位点进行基因分型,探讨该基因与EH发病的关系。同时给予原发性高血压患者中医治疗措施。结果：EH组患者中 HM OXI基因的 rs9607267位点CC基因型频率高于对照组,该位点个体高血压发病危险是同位点其它基因型个体的1．41倍（ P＜0．05）。数量性状分析结果表明：rs9607267位点CC基因型个体血压水平显著高于该位点其它基因型人群,校正其它影响因素后,rs9607267位点CC基因型个体与其它基因型个体比较,收缩压水平升高4．7mmHg ,舒张压水平升高2．8 mmHg。经过中医治疗后,85例治愈,13例显效,6例好转,2例无效,总有效率为98．1％。结论：上海地区人群中 HM OXI基因多态性及血压水平与EH发病相关联,中医疗法在原发性高血压治疗中具有显著性的效果,值得在临床治疗实践中推广和使用。     

GWAS识别的rs2107595多态性与缺血性中风气虚血瘀证的关联研究

[目的]探索rs2107595多态性与中国南方汉族人缺血性中风气虚血瘀证的发生及血脂水平的关联。[方法]选取缺血性中风气虚血瘀证患者284例、对照组605例,采用Sequenom基因分型技术对rs2107595多态性进行基因分型,运用PLINK统计软件分析基因型与缺血性中风气虚血瘀证的发生及其血脂水平间的遗传关联。[结果]rs2107595多态性与缺血性中风气虚血瘀证的发生无显著关联(均P0.05),而与缺血性中风气虚血瘀证患者血清总胆固醇的关联具有统计学意义(加性模型:P=0.035)。[结论]GWAS识别的遗传变异rs2107595多态性可能影响缺血性中风气虚血瘀证患者的血脂代谢。     

恩施土家族人群血管内皮生长因子基因多态性和吸烟在2型糖尿病中交互作用研究

目的探讨恩施土家族人群血管内皮生长因子(VEGF)-460C/T多态性与2型糖尿病关联性及其与吸烟的交互作用。方法采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法分析120例土家族2型糖尿病患者和180例土家族正常人VEGF-460C/T基因型分布情况。非条件Logistic分析各基因型与2型糖尿病发病的易感性关系以及与吸烟的交互作用。结果 C基因携带者(CC型+CT型)患病风险是非C基因携带者(TT型)的1.65倍[OR=1.65,95%CI(1.45,4.32),P=0.005;校正OR=1.79,95%CI(1.51,5.11),P=0.000];非条件Logistic分析表明CC型+CT型吸烟个体2型糖尿病罹患风险是TT型非吸烟个体的3.73倍[OR=3.73,95%CI(2.92,6.54);RERI=2.38,95%CI(1.24,3.59);API=0.69,95%CI(0.34,0.98);S=1.44,95%CI(1.09,3.18)]。结论 VEGF-460C/T多态性增加恩施土家族个体2型糖尿病罹患风险,且在2型糖尿病发病中与吸烟存在协同效应。     

非小细胞肺癌不同病理分类与中医证候分布规律关系探讨

目的探讨中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者病理分类与中医证候的关系。方法采用前瞻性临床研究方法,根据预先设计的观察表和临床证候诊断标准,按八纲、气血及脏腑辨证的原则,对中晚期NSCLC患者进行详细的中医辨证分型,并进行统计学处理分析。结果NSCLC在腺癌、鳞癌中出现较多的证型有:气虚,分别为114例次(36.08%)、69例次(28.63%);血瘀,分别为80例次(25.32%)、54例次(22.41%);痰湿,分别为43例次(13.61%)、35例次(14.52%);阴虚,分别为30例次(9.49%)、31例次(12.86%)。这些证型出现的频度在鳞癌和腺癌之间无明显差异(P>0.05)。结论腺癌、鳞癌证候均以气虚、血瘀证候为主,气虚中尤以肺、脾气虚证最多。这些证型出现的频度在鳞癌和腺癌之间无明显差异。     

膝骨性关节炎患者低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因与中医体质相关性研究

目的:研究膝骨性关节炎(KOA)患者低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因rs3736228位点多态性与中医体质的相关性。方法:对KOA患者进行中医体质问卷调查,对平和质、阳虚质、阴虚质3种高发体质的KOA患者进行LRP5基因多态性检测,同时随机选取54例健康非血缘关系志愿者作为对照组。结果:本次研究共检测出LRP5基因rs3736228位点三种基因型,分别为CC、TT、CT。病例组与对照组比较,各基因型及等位基因差异无统计学意义(P0.05)。平和质病例组、阳虚质病例组、阴虚质病例组分别与对照组比较,各基因型与等位基因差异无统计学意义(P0.05)。结论:LRP5基因rs3736228位点多态性可能与KOA无相关性。     

ADAM33基因rs2280090、rs487377、rs2787094多态性与大鱼际掌纹特应征的相关性研究

目的:探讨ADAM33基因多态性与青岛地区汉族成人哮喘患者大鱼际掌纹特应征的相关性。方法:引入计算机识别系统,实现大鱼际掌纹特应征客观量化分级,采用SNa Pshot方法检测400例哮喘患者和200例正常对照的ADAM33基因rs2280090、rs487377、rs2787094共3个多态位点的基因型和等位基因频率。结果:相对于CC-CG基因型,rs2787094的GG基因型频率在掌纹阴性组为11.3%,在掌纹阳性组为18.9%,差异有统计学意义(OR=2.10,95%=1.26-3.50,P=0.003 8)。结论:ADAM33基因rs2787094多态性与哮喘患者的大鱼际掌纹特应征呈显著相关,而rs2280090、rs487377多态性和掌纹无相关性。     

肺癌患者中医体质及辨证分型与临床TNM分期及病理类型的相关性研究

目的:探讨肺癌患者中医体质及中医辨证分型与临床TNM分期及病理类型之间的关系,旨在为肺癌的中医药个体化治疗提供客观的理论依据。方法:收集本院门诊及住院部120例明确诊断、病理类型及临床分期的肺癌患者作为研究对象,采用标准化的9种中医体质分类量表对其进行肺癌中医体质问卷调查,调查研究所需资料,并录入Execl表,建立数据库。结果:肺癌患者不同临床TNM分期与中医体质具有显著的相关性(P0.05);其中TNMⅠ期、Ⅱ期痰湿质为主,其次为湿热质,TNMⅢ期、Ⅳ期以阴虚质为主,其次为阳虚质、气虚质及气郁质。肺癌患者不同临床TNM分期与中医辨证分型有显著的相关性(P0.05);其中TNMⅠ期以气虚痰湿证为主,占66.7%;Ⅱ期以气虚痰湿证为主,占50%;Ⅲ期以气阴两虚证为主,占37.3%;Ⅳ期以气阴两虚证为主,占53.4%。肺癌中医体质与病理类型之间无明显相关性(P0.05)。结论:肺癌患者中医体质与临床TNM分期有一定相关性,与病理类型无明显相关性;肺癌中医辨证分型与临床TNM分期具有相关性。     

激活蛋白-1基因多态性对中风风痰瘀阻证气虚血瘀证的关联研究

目的探讨激活蛋白-1(AP-1)基因多态性与中风风痰瘀阻证和气虚血瘀证的关联。方法共纳入风痰瘀阻证311例、气虚血瘀证284例、对照605例。运用Sequenom实验技术进行基因分型,实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定AP-1基因表达水平,采用ELISA法测定炎性细胞因子的血清含量,使用全自动生化分析仪测定血脂水平。结果在中风风痰瘀阻证中,AP-1基因rs2760501 GT基因型携带者的IL-6(P=0.047)、IL-8(P=0.028)、TNF-α(P=0.009)血清含量均显著高于TT基因型携带者,差异具有统计学意义。在隐形模型下,rs2760501多态性与气虚血瘀证患者HDL(Padj=0.012)、LDL(Padj=0.043)血清水平显著关联。结论 AP-1基因多态性可能影响中风风痰瘀阻证炎性反应及气虚血瘀证的脂质代谢。     

CYP2C9和VKORC1基因多态性对心房颤动患者华法林抗凝治疗的影响

目的分析CYP2C9和VKORC1基因多态性对心房颤动(房颤)患者华法林抗凝治疗的影响。方法随机选取222例持续性房颤患者,分别检测CYP2C9和VKORC1基因多态性rs12572351 G A,rs9332146 GA,rs4917639 G T,rs1057910 A C,rs1934967 G T,rs1934968 G A,rs9923231 C T,rs2359612 G A和rs10871454 C T位点。分析CYP2C9和VKORC1不同基因型患者的资料,对比不同基因型患者华法林起效剂量和起效时间。结果 CYP2C9 rs1057910 CA基因型患者年龄、血清肌酐(SCr)水平均显著高于AA基因型患者(P均0. 05),体质量指数(BMI)显著低于AA基因型患者(P 0. 05); VKORC1 rs9923231 CT和VKORC1 rs10871454 CT基因型患者年龄及SCr、脑钠肽(BNP)水平均显著高于TT基因型患者(P均0. 05),BMI显著低于TT基因型患者(P 0. 05)。CYP2C9rs1057910 CA基因型患者华法林起效剂量显著低于AA基因型患者(P 0. 05),VKORC1rs9923231和rs10871454 CT基因型患者华法林起效时间均显著短于TT基因型患者(P均0. 05)。结论 CYP2C9和VKORC1基因多态性检测结合患者临床情况可以为临床以基因类型指导华法林使用剂量提供参考依据,有助于华法林的合理应用,对华法林抗凝治疗的管理有一定的实用性。     

Toll样受体5基因遗传多态性与中风风痰瘀阻证显著关联的探讨

目的:探讨Toll样受体5(TLR5)遗传多态性与中风中医证型的相关性。方法:纳入中风风痰瘀阻证311例、中风气虚血瘀证284例,健康对照605例。运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测TLR5基因mRNA表达水平,使用Sequenom基因分型技术对TLR5基因多态性rs5744174位点进行基因分型。结果:中风风痰瘀阻证、气虚血瘀证患者的TLR5基因mRNA表达水平均显著地于对照组(P0.001),TLR5 rs5744174的基因型频率在中风风痰瘀阻证患者与对照组之间的分布差异具有统计学意义(P=0.015)。rs5744174多态性与中风风痰瘀阻证易感性显著关联(隐性模型:P=0.010)。结论:TLR5基因rs5744174多态性影响中风风痰瘀阻证发生。     

老年高血压病患者中医证型与IL-6基因rs1800796位点多态性的相关性研究

目的调查上海市老年高血压病患者证型分布规律并探讨中医证型与IL-6基因rs1800796位点多态性之间的相关性。方法 2013年3—12月收集上海市4个社区老年高血压病患者651例,并进行辨证分型,收集患者一般资料。采集患者血样,分析IL-6基因rs1800796位点基因多态性与中医证型相关性。结果 651例老年高血压患者证型分布依次为阴虚阳亢证(211/651,32.41%)、痰瘀互结证(156/651,23.97%)、肝火亢盛证(154/651,23.66%)、肾气亏虚证(130/651,19.97%)。不同证型间男女比例不同(P0.01),男性患者肝火亢盛证(87/285,30.53%)为主要证型,女性患者阴虚阳亢证(135/366,36.89%)为主要证型。老年高血压病患者IL-6基因rs1800796位点基因型分布依次为CC(329/651,50.54%), GC(280/651,43.01%),GG(42/651,6.45%)。不同证型之间IL-6基因rs1800796位点基因型分布差异有统计学意义(χ~2=18.457,P=0.005),痰瘀互结证GC型为主要基因型,其余证型CC型为主要基因型。结论老年高血压病IL-6基因rs1800796位点基因型与中医证型存在一定的关联性,IL-6基因rs1800796位点GC型有可能是老年高血压病痰瘀互结型的易感基因。     

痰湿质酒精性股骨头坏死CYP2C8基因rs17110453位点多态性研究

目的探讨酒精性股骨头坏死(AIONFH)高发中医体质类型痰湿质与CYP2C8基因多态性关系。方法选取2014年2月-2015年9月于甘肃省中医院门诊及住院部汉族非创伤性股骨头坏死(NONFH)患者152例,其中AIONFH患者50例作为病例组,同期纳入无血缘关系的健康志愿者45人作为对照组,建立所有患者及志愿者病例资料数据库。判定AIONFH患者中医体质类型,采用溶液型DNA提取试剂盒提取DNA,检测DNA浓度及纯度,采用普通PCR扩增出目的片段,凝胶电泳检测扩增的目的基因,并确认其片段长度,进行目的基因测序,结合凝胶电泳及基因测序结果进行统计分析,得出AIONFH痰湿质、非痰湿质患者与对照组的CYP2C8基因多态性与AIONFH发病关系。结果比较病例组与对照组的CYP2C8基因rs17110453位点多态性,2组各基因型间差异无统计学意义(χ~2=0.253,P0.05);2组等位基因差异无统计学意义(χ~2=0.077,P0.05);病例组CC基因型的发病风险是AA基因型的1.37倍(95%CI:0.339~5.540),两者比较差异无统计学意义(P0.05)。AIONFH痰湿质患者与非痰湿质、对照组的基因型及等位基因分布差异均无统计学意义(P0.05)。结论 CYP2C8基因rs17110453位点多态性A/C突变与痰湿质AIONFH的发病风险无明显联系,未发现CYP2C8基因rs17110453位点多态性与AIONFH明确关系。     

PPARγ基因多态性与湖北汉族人群妊娠糖尿病的相关性研究

目的研究PPARγ基因单核苷酸多态性(SNPs)与湖北汉族人群妊娠糖尿病(GDM)的关系。方法测定66例GDM孕妇(患者组)及69名正常健康孕妇(对照组)PPARγ基因Pro12Ala(rs1801282)SNP多态性,分析其与GDM的关系。基因分型采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)。结果患者组SNPs基因型及等位基因频率分布与对照组比较无显著性差异,患者组中rs1801282 AB+BB基因型总胆固醇(TC)、血糖和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著高于AA基因型(P均<0.01);rs12636454AA基因型三酰甘油水平高于AB+BB基因型,rs11128597AA基因型血糖水平高于AB+BB基因型(P均<0.01)。结论 PPARγ基因与湖北汉族人群GDM无直接相关,但可能参与GDM的血糖水平和脂质代谢的调节。     

螺旋环螺旋结构域扩散激酶(CHUK)基因多态性影响缺血性中风痰瘀阻证血脂代谢

目的分析CHUK基因多态性与缺血性中风风痰瘀阻证及气虚血瘀证血脂水平的关联。方法共纳入341例风痰瘀阻证及284例气虚血瘀证缺血性中风病例。采用Sequenom Mass ARRAY i PLEX进行CHUK 3个位点(rs3808917,rs2230804,rs3808916)基因分型,运用HITACHI日立7600全自动生化分析仪测定血脂水平。结果在风痰瘀阻证患者中,TG(TG:F=3.125,P=0.045)、LDL-C(LDL-C:F=3.58,P=0.029)水平在不同rs3808917基因型携带者之间的分布差异均具有统计学意义。在气虚血瘀证患者中,TC、Tg,HDL-C、LDL-C水平在不同CHUK基因多态性基因型携带者之间、或在不同等位基因携带者之间的分布差异均无统计学意义(P0.050)。结论 CHUK基因遗传多态性可能影响缺血性中风痰瘀阻证的血脂代谢,但不影响气虚血瘀证的血脂水平。     

Pri-miR-378 rs1076064与肺癌铂类联合化疗毒副反应的相关性研究

目的 探讨pri-miR-378 rs1076064与肺癌铂类联合化疗毒副反应的相关性。方法 本研究共纳入467名接受至少两个周期铂类化疗的肺癌患者,使用飞行时间质谱对rs1076064进行基因分型,使用无条件逻辑回归分析评估化疗后毒性反应与其基因型的相关性。结果 研究发现,携带pri-miR-378 rs1076064 G等位基因的小细胞肺癌患者铂类联合化疗的总毒副反应风险增加(校正OR=2.744,95％CI=1.089~6.909,P=0.032);在分层分析中发现,pri-miR-378 rs1076064在依托泊苷联合铂类化疗(加性模型:校正OR=2.820,95％CI=1.119~7.103,P=0.028; 显性模型:校正OR=6.105,95％CI=1.108~33.650,P=0.038)、以顺铂为基础的化疗(加性模型:校正OR=1.931,95％CI=1.026~3.636,P=0.041)、男性人群(显性模型:校正OR=2.120,95％CI=1.115~4.029,P=0.022)和小细胞肺癌(加性模型:校正OR=2.637,95％CI=1.066~6.524,P=0.036;显性模型:校正OR=8.912,95％CI=1.051~75.56,P=0.045)人群中与铂类联合化疗后血液毒副反应显著相关;但未见与胃肠道毒副反应的相关性。结论 pri-miR-378 rs1076064有可能作为预测中国肺癌相关患者人群铂类化疗血液毒性的候选生物标志物。     

血瘀质非创伤性股骨头坏死基因多态性研究

目的研究非创伤性股骨头坏死(nontraumatic osteonecrosis of femoral head,NONFH)高发体质类型血瘀质与Apo A1位点多态性的相关性。方法选择93例NONFH患者作为病例组,随机选取无血缘关系健康志愿者83例作为对照组。对病例组进行中医体质问卷调查,将NONFH患者分为血瘀质32例、非血瘀质61例。受试者取血样2 m L,提取DNA进行PCR扩增,对PCR产物进行DNA测序,检测PAF-AH G994T、NOS1基因rs9658282位点多态性,进行统计学分析。结果 Apo A1基因-75G/A位点AA基因型(OR:2.578;95%CI:1.174-5.663;P=0.018)与A等位基因(OR:1.726;95%CI:1.121-2.658;P=0.013)可能是NONFH发病的危险因素之一。结论 Apo A1基因-75G/A可能与NONFH发病相关。Apo A1基因-75G/A位点基因多态性与血瘀质NONFH发病无相关性,Apo A1基因+83C/T位点基因多态性与血瘀质NONFH发病无相关性。