脾气虚证大鼠与鱼藤酮损伤大鼠之间下丘脑cAMP/PKA信号通路变化的研究

目的:探讨脾气虚证大鼠与鱼藤酮损伤大鼠之间下丘脑c AMP/PKA信号通路变化。方法:30只SPF级雄性大鼠,随机分为正常组,脾气虚组,鱼藤酮高剂量组(2.0 m L/kg),中剂量组(1.5 m L/kg),低剂量组(1.0 m L/kg),每组6只。采用ELISA法检测各组大鼠下丘脑组织c AMP活性,Real Time PCR法和Westernblot法检测蛋白激酶(cyclic-AMP-dependent protein kinase,PKA)、糖原磷酸化酶(glyeogenphospholase,Gp)、磷酸化酶激酶(phosphorylase kinase,PHK)的mRNA及其表达量。结果:与正常组大鼠比较,脾气虚证组及鱼藤酮3组大鼠的下丘脑组织c AMP活性及PKA、Gp、PHK mRNA和蛋白的表达均有不同程度的减弱,鱼藤酮中剂量组的结果与脾气虚证组最为相似。结论:脾气虚证大鼠与鱼藤酮损伤大鼠之间下丘脑c AMP/PKA信号通路的变化存在相关性,其中c AMP-PKA信号通路可能参与调控。     

β-内啡肽过度释放参与脾气虚纳少和腹胀的形成

目的:研究β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)与脾气虚纳少和腹胀的关系。方法:20只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组和脾气虚模型组(模型组),每组10只;代谢笼检测大鼠24 h进食/水量,炭末法评估胃残留率和小肠推进率,ELISA法检测下丘脑、胃和小肠组织β-EP含量,免疫组化法检测下丘脑、胃和小肠组织中μ受体表达。结果:模型组大鼠的进食/水量显著下降,小肠推进率明显下降,下丘脑、胃和小肠组织中β-EP水平和μ受体表达显著增加。结论:β-EP过度释放参与了脾气虚纳少和腹胀的形成。     

电针“足三里”对脾气虚大鼠空肠组织胃生长激素释放激素/环磷酸腺苷/蛋白激酶A表达的影响

目的:观察电针"足三里"穴对脾气虚大鼠空肠组织胃生长激素释放激素(Ghrelin)/环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)信号通路的影响,探讨电针"足三里"穴改善脾气虚大鼠能量代谢的作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为空白组、脾气虚组、电针组和非经非穴组,每组10只。采用劳倦过度及饮食不节的复合因素复制大鼠脾气虚证候模型。电针组电针双侧"足三里"穴,非经非穴组电针双侧非经非穴点(髂嵴连线上方15mm,后正中线左右旁开20mm处),每日1次,每次20min,共治疗6d。HE染色法观察各组大鼠空肠组织病理形态学改变;ELISA法测定各组大鼠空肠组织中Ghrelin、三磷酸腺苷(ATP)、cAMP含量;Western blot法检测空肠组织PKA蛋白表达。结果:脾气虚组大鼠肠绒毛肿胀、缩短、增粗,顶端部分破损或断裂,经电针穴位治疗后其结构基本恢复正常。脾气虚组大鼠空肠组织中的Ghrelin、ATP、cAMP含量及PKA蛋白表达较空白组显著降低(P0.05),而电针组显著高于脾气虚组(P0.05),其中cAMP含量及PKA蛋白表达电针组显著高于非经非穴组(P0.05)。结论:电针"足三里"穴可通过改善脾气虚大鼠空肠组织病理形态学变化,增加脾气虚大鼠空肠组织中Ghrelin、ATP、cAMP含量,上调PKA表达,从而增强大鼠能量代谢,发挥其补益脾气的作用。     

血管活性肠肽在脾气虚大鼠小肠运动中的作用

目的研究血管活性肠肽(VIP)在脾气虚状态下小肠运动中的作用。方法 16只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组和脾气虚模型组(模型组),每组8只;小肠推进率评估小肠运动能力,ELISA方法检测小肠组织VIP、环磷酸腺苷(c AMP)、蛋白激酶A(PKA)的含量,免疫组化技术观察小肠组织VIP受体表达。结果与对照组比,模型组大鼠的小肠推进率显著降低,VIP的含量显著升高,VIP受体的表达、c AMP和PKA含量均明显降低。结论脾气虚状态下,VIP过度释放与小肠运动减慢有关,但这种效应可能并不持久。     

安神定志灵对SHR大鼠突触体ATP、LDH及AC/cAMP/PKA信号通路的影响

目的研究安神定志灵对ADHD模型大鼠突触体ATP、LDH酶活性的影响及对AC/cAMP/PKA信号通路的调控作用。方法设WKY大鼠10只为正常对照组,SHR大鼠依据随机数字分为模型组,西药组,安神定志灵低、中、高剂量组,每组10只,分别灌胃给药4周。Percoll密度梯度离心法制备脑突触体,运用比色法检测突触体ATP酶、乳酸脱氢酶(LDH)活性,运用ELISA法检测突触体内腺苷酸环化酶(AC)、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)含有量。结果电镜观察结果显示,此次实验所提取突触体能够满足实验要求。相比正常组,模型组大鼠脑突触体内ATP酶活性降低,LDH酶活性有所升高(P0.05);经治疗4周后,与模型组相比,西药组及安神定志灵中剂量组ATP酶活性显著升高,LDH酶活性显著降低(P0.01),安神定志灵低剂量组ATP酶活性有所增高、LDH酶活性降低(P0.05)。相比正常组,模型组大鼠脑突触体内AC、cAMP、PKA含有量均低于正常组(P0.05);经治疗4周后,与模型组相比,西药组及安神定志灵中剂量大鼠脑突触体内AC、cAMP、PKA含有量均有所升高(P0.05),安神定志灵高剂量组大鼠脑突触体内AC、cAMP含有量升高(P0.05)。结论安神定志灵可调节模型大鼠突触体ATP酶、LDH酶活性,提高突触体内AC、cAMP、PKA含有量,提示安神定志灵可能通过降低D2RS(多巴胺D2受体短型)受体对AC/cAMP/PKA信号通路的抑制功能而发挥治疗作用。     

脾阳虚大鼠下丘脑和小肠缩胆囊素信号转导途径的变化研究

目的:通过检测下丘脑和小肠组织缩胆囊素(Cholecystokinin,CCK)信号转导途径的变化,研究脾阳虚的发生机制。方法:16只SD大鼠随机分为对照组和脾阳虚组(模型组),每组8只; ELISA法检测下丘脑和小肠组织CCK-8、环-磷酸腺苷(cycle monophosphate,c AMP)和蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)含量;免疫组化法检测下丘脑CCK2受体(CCK 2 receptor,CCK2R)和小肠CCK1R表达。结果:与对照组相比,下丘脑和小肠CCK-8水平明显升高,而下丘脑的CCKR2表达、c AMP和PKA水平以及小肠CCKR1表达和c AMP水平均显著下降,但小肠PKA水平没有明显变化。结论:脾阳虚的发生与下丘脑和小肠组织中CCK过度释放有关。     

基于cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路探讨柴胡加龙骨牡蛎汤抗抑郁的作用机制

目的：该研究基于环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路探究柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性不可预见性温和应激(CUMS)法制备的大鼠抑郁模型的干预作用。方法：随机数字表法将60只SD大鼠分为正常组、模型组、柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组和氟西汀组。除正常组外,其他各组进行49 d的CUMS制备大鼠抑郁模型。第29天开始给药,柴胡加龙骨牡蛎汤组低、中、高剂量组分别给予柴胡龙骨牡蛎汤颗粒剂2.89、5.78、11.56 g·kg^-1,氟西汀组给予盐酸氟西汀胶囊2.06 mg·kg^-1。旷场实验和强迫游泳实验观察大鼠行为学表现,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定大鼠海马组织5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、cAMP水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠海马组织PKA、CREB、BDNF mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马组织PKA、BDNF蛋白表达水平;免疫组化法(IHC)检测CREB定位表达;...     

脾阳虚大鼠胃失通降的观察及其发生机制的初步研究

目的主要通过研究胃窦平滑肌M2和M3型胆碱能受体(muscariniccholinergic receptor 2 and 3,M2R/M3R)表达,探讨脾阳虚胃失通降的可能发生机制。方法 16只SD大鼠随机分为正常组和脾阳虚组(模型组),每组8只;炭末推进法观察胃残留率;ELISA法检测胃窦平滑肌乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)、环-磷酸腺苷(cycle monophosphate,cAMP)和蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)含量;免疫组化法检测M2R和M3R表达。结果与正常组比较,模型组胃残留率和ACh水平上升,M2R和M3R表达及cAMP、PKA水平下降,均有统计学意义。结果胃窦平滑肌M2R和M3R表达下调所导致的胆碱能系统功能异常与脾阳虚胃失通降有关。     

通便汤对STC大鼠模型结肠组织中PKA/MPKA信号通路的影响

目的:探讨通便汤对慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)大鼠模型结肠组织中蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)/丝裂原活化激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响及相关机制。方法:80只SD大鼠随机分为正常组和造模组,正常组20只,造模组60只,雌雄各半;正常组给予普通饲料喂养,模型组给予混有复方苯乙哌啶的饲料,造模时间120 d后,随机选取雌雄对半大鼠正常组10只,造模组20只,测定大鼠24 h排便量、含水量及小肠炭末推进率,观察结肠留存粪便粒数,评价STC大鼠造模是否成功;停药1周后,将造模组40只大鼠随机分为模型组,通便汤组(33 g·kg-1),通便汤+H89组(PKA信号通路阻滞剂,5 mg·kg-1),通便汤+U0126组(MAPK信号通路阻滞剂,0. 1 mg·kg-1)各10只,雌雄各半,药物通便汤干预4周后,测定大鼠24 h排便量、含水量及小肠炭末推进率,观察结肠留存粪便粒数;采用免疫组化(IHC),蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定结肠内水通道蛋白3(AQP3),AQP4,PKA及MAPKs信号通路的蛋白及mRNA表达情况。结果:与正常组比较,造模组大鼠24 h排便量、粪便含水量、小肠炭末推进率及结肠存留粪便粒数均显著降低(P 0. 01);与模型组比较,通便汤组排便量、含水量及小肠炭末推进率均增加,结肠留存粪便粒数减少(P 0. 01),AQP3,AQP4显著降低(P 0. 01);与通便汤组比较,通便汤+H89组和通便汤+U0126组AQP3,AQP4,PKA蛋白与mRNA表达降低(P 0. 01);与通便汤+H89组比较,通便汤+U0126组排便量、含水量、小肠炭末推进率及结肠留存粪便粒数,AQP3,AQP4,PKA,MAPK蛋白表达量与mRNA含量无明显差异。结论:采用复方苯乙哌啶成功复制出慢性传输型便秘模型,通便汤可以抑制PKA和MAPK信号通路,从而下调AQP3,AQP4表达,增加肠道蠕动和肠道水分,有效治疗STC。     

补肾药对肾阳虚大鼠下丘脑组织蛋白激酶活性的影响

目的：研究蛋白激酶A和蛋白激酶C在肾阳虚发病中的作用及补肾药对其调整作用。方法：用长期大量糖皮质激素造成肾阳虚大鼠模型,用^32P—ATP参入反应底物中的摩尔数表示蛋白激酶的活性,用放免法测定cAMP,cGMP含量。结果：肾阳虚大鼠血浆中cAMP水平下降,cGMP水平升高,cAMP／cGMP比值降低,下丘脑组织中PKA和PKC活性在胞液和胞膜中的活性较正常组明显降低。补肾方药对PKA和PKC的活性均有不同程度的调整作用。结论：PKA和PKC可能参与了肾阳虚大鼠的发病机制,补肾方药可部分调整PKA和PKC的活性,从而改善肾阳虚症状。     

白术茯苓与白术茯苓汤对脾气虚腹泻大鼠模型胃肠形态及水液代谢的影响

目的:观察及比较白术、茯苓与白术茯苓汤对脾气虚腹泻大鼠模型胃肠形态及水液代谢的影响机理。方法:采用破气苦下饥饱失常法复制脾气虚腹泻模型。以白术、茯苓及白术茯苓汤灌胃给药,以光学显微镜进行组织形态学观察,以炭末推进法测定各组大鼠小肠推进率,以电解质分析仪测定血清电解质水平。结果:①病理观察:模型组动物胃肠胀气,胃肠壁均变薄,胃、小肠、大肠充血水肿。经治疗后不同程度的恢复。②小肠推进率:与空白组比较,模型组的小肠推进率显著降低(P0.05);与模型组比较,白术茯苓组和茯苓组的小肠推进率显著升高(P0.05)。③血清电解质水平:与空白组比较,模型组Na+、K+水平均显著降低(P0.05);与模型组比较,白术茯苓组Na+水平和白术组K+水平显著升高(P0.05)。结论:三组对脾气虚腹泻大鼠模型的胃肠形态及水液代谢皆有改善作用;白术茯苓配伍之白术茯苓汤多数指标优于单味药,与单味药比较呈现出协同增效的"相须相使"效应。     

壮医药线点灸对脾虚大鼠脑-肠轴β-内啡肽的影响

目的 :探讨壮医药线点灸对实验性脾虚大鼠下丘脑、胃、小肠、血浆 (脑 -肠轴 )β-EP含量的影响。方法 :采用耗气破气加饥饱失常法对 12 0只 Wistar大鼠进行脾虚造模 ,模型动物随机分为壮医药线点灸治疗组、空线点灸对照组、中药四君子汤治疗对照组和模型自然恢复组。并设立正常健康对照。治疗前后采用放射免疫分析法检测脑 -肠轴上述四个部位的 β-EP水平。结果 :脾虚大鼠血浆和下丘脑内 β-EP的含量显著低于同期正常对照组 ,而胃和小肠组织 β-EP水平则明显高于正常对照组 ,P<0 .0 1。壮医药线点灸治疗后血浆和下丘脑内β-EP含量上升 ,而胃和小肠组织内β-EP水平下降 ,治疗前后比较差异有显著性 ,P均 <0 .0 5。结论 :壮医药线点灸对脾虚大鼠脑 -肠轴紊乱的 β-EP水平有调整作用。     

抗痨药物导致胃肠道反应治疗经验

目的:从脾虚湿阻、中焦气机失畅的角度探讨抗痨药物导致的胃肠道反应的诊治要点以及中医药治疗本病的思路。方法:胃肠道反应是抗痨药物导致的常见副作用之一,文章从本病的病因、临床表现、发病特点、辨证要点以及疗效和预后出发,以益气健脾、化湿和胃为法,观察对腹胀、恶心呕吐、纳差乏力等胃肠道不适症状的疗效,确立本病以脾虚运化失常,胃失和降为其主要发病机理,从而提出有效的治疗方法。结果:以益气健脾、燥湿化痰中药治疗对于治疗抗结核药物导致的胃肠道反应具有良好的疗效。结论:本病以补气健脾、化湿和中为法治疗疗效肯定,且安全性良好,对于减轻患者的痛苦和顺利实施抗结核治疗都具有重要的临床意义。     

扶正肃肺合剂联合吉非替尼治疗肺脾气虚型肺腺癌36例临床观察

目的:观察扶正肃肺合剂联合分子靶向药吉非替尼治疗肺脾气虚型肺癌的临床疗效.方法:将72例肺脾气虚型肺癌患者随机分为对照组和治疗组,各36例.对照组采用口服靶向药物吉非替尼治疗,治疗组在对照组治疗基础上,予以扶正肃肺合剂治疗,两组均连续治疗4周后评价疗效.结果:在瘤体大小控制方面,治疗组总有效率为66.67％(24/36...     

从脾胃论治肺胀

肺胀是多种慢性肺系疾患反复发作，迁延不愈，导致肺气胀满，不能敛降的一种病证。临床表现为胸部膨满、胀闷如塞、喘咳上气、痰多、烦躁等。其病程缠绵，症状时轻时重，日久可见面色晦黯，唇甲青紫，心悸，脘腹胀满，肢体浮肿，甚或喘脱等危重症状。是常见病、多发病、危重病。通过学习四大经典并结合临床实践，认为肺胀临床表现每多虚实互见，寒热夹杂，主脏在肺，并与脾、肾、心密切相关，脾虚贯穿肺胀整个病程。临床常见外寒内饮、外寒内热、肺脾气虚、肺肾气阴两虚、肺心气阴两虚、阳虚水泛、痰蒙神窍7个证型。治疗主张祛邪顾脾胃、固本健脾胃、健脾以安肺、脾、肾、心。即从脾胃论治肺胀。     

补中益气汤调控JAK2/STAT3信号通路对气虚发热证大鼠肠道菌群、免疫功能及神经功能的影响

目的:分析补中益气汤调控Janus激酶2(JAK2)/信号传导与活化转录因子3(STAT3)/STAT3信号通路对气虚发热证大鼠肠道菌群、免疫功能及神经功能的影响。方法:将30只大鼠随机分为正常组、气虚发热模型组、补中益气汤组,每组10只。气虚发热模型组、补中益气汤组大鼠用于建立气虚发热模型,第18天开始,补中益气汤组给予补中益气汤灌胃治疗5 d,气虚发热模型组给予等体积蒸馏水。16SrRNA基因序列分析技术检测大鼠肠道菌群;ELISA法检测CD4⁺、CD8⁺、补体C3水平、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)水平;放免法测定乙酰胆碱(Ach)、环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平。结果:补中益气汤可改善气虚发热所致的疣微菌门、互养菌门菌落减少,螺旋体门、埃普西隆杆菌门菌落增多情况(P<0.05)。补中益气汤可改善气虚发热所致的血清CD4⁺、C3、IgM、IgG水平及淋巴细胞转化率降低,血清CD8^...     

加味逍遥散对HPRL大鼠多巴胺受体cAMP/PKA信号转导通路的研究

目的： 探讨以肝脾为核心,运用逍遥散加减方治疗实验性高催乳激素血症（HPRL）模型大鼠下丘脑多巴胺受体环磷酸腺苷（cAMP）/蛋白激酶A（PKA）信号转导通路机制的影响。 方法： 腹腔注射甲氧氯普胺,制作HPRL大鼠模型。随机分成6组：空白对照组、阴性对照组、阳性对照组（溴隐亭组）、逍遥散加减方高、中、低剂量组。给药30 d后,采用免疫组化法测定大鼠下丘脑PKA阳性表达的数量;采用酶联免疫的法测定大鼠血清cAMP的含量、采用免疫组化法及RT-PCR检测大鼠下丘脑多巴胺D1,D2受体。 结果： 与阴性对照组相比较,逍遥散加减各剂量组下丘脑PKA活性明显降低（P < 0.01）;下丘脑cAMP活性显著降低 （P < 0.01）、下丘脑多巴胺D1受体数量有增高趋势、D2受体数量显著增加（P < 0.01）。 结论： 逍遥散加减方对能通过多巴胺受体cAMP-PKA信号转导通路调节泌乳素水平。     

从痰与气的关系论肺胀治疗

痰是肺系疾病常见的致病因素。肺胀多为久患肺病之后期,肺气已虚,且累及脾肾,肺脾肾的虚损均影响津液的输布,致痰多为患,故气虚痰阻可贯穿于肺胀病程的始终,肺脾肾的虚损也成为气虚痰阻的根本原因。因此,肺胀的治疗以祛痰治气为本,而调理肺脾肾为治本之法。